Genética de bacteriófagos

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Transcripción:

Genética de bacteriófagos

Bacteriofago T4 virulento

Ciclo lítico de los fagos (fagos virulentos)

Bacteriófago λ (temperado) lítica lisogénica

Integración del bacteriófago

Recombinación genética en fagos

Placas de lisis de los recombinantes

Virus de Eucariontes (Retrovirus)

Virus de la Influenza

Genética bacteriana E. coli

Selección de mutantes en bacterias Prototrófico : Son bacterias silvestres que pueden crecer en medios mínimos (sales inorgánicas, fuente de carbono glucosa- y agua). A partir de estas sustancias mínimas las bacterias pueden construir todas las macromoléculas necesarias para vivir. Auxotrófico : Las bacterias son generalmente mutantes y no pueden crecer al menos que se adicionen al medio nutrientes específicos ( Adenina, biotina, metionina, etc.) Resistencia o susceptibilidad a antibióticos

Plásmidos Varian en tamaño. En general se replican de manera autónoma. Tienen un origen de replicación y controlan su número de copias.

Tipos de plásmidos Plásmidos de fertilidad (F): los cuales contienen información que les permite conjugarse. Plásmidos de resistencia (R ): los cuales contienen genes que pueden constituir resistencia contra antibióticos o venenos. Históricamente conocidos como Factores R. Col-plásmidos: los cuales contienen genes que codifican (determinan la producción de) colinas y proteínas que pueden matar a otra bacteria.

Vías de intercambio de genes entre bacterias

Transformación bacteriana Incorporación e integración de un ADN extraño al cromosoma bacteriano

Transducción generalizada

Transducción especializada

Conjugación bacteriana E. coli F + (Factor de fertilidad) Pili F - F + Plásmido F *Plásmido F codifica alrededor de 100 genes

Descubrimiento del fenómeno de conjugación

Las células tienen que estar en contacto para modificarse No hubo modificación genética

Plásmido F

Cepas de alta frecuencia de recombinación (Hfr) Las células Hfr producen hasta 1000 veces más recombinantes Al conjugarse con una célula F- no producían células F+ El plásmido F tiene secuencias de inserción

Dos eventos de recombinación

La transferencia de ADN no es recíproca La bacteria donadora es la que contribuye con un fracción de material genético a la bacteria receptora El fragmento de DNA donado es llamado exogenota y el genoma receptor el endogenota Una bacteria que contiene el exogenota y el endogenota se conoce como merocigoto ó diploide parcial a + b + a - b - Exogenota Endogenota

Factores F con genes bacterianos

Factor F

Mapeo por conjugación interrumpida

Mapeo de genes bacterianos usando conjugación Hfr str s azi r gal + lac + ton + str r azi s gal - lac - ton -

Una mutante de E. coli no puede sintetizar triptofano (trp-). Para determinar la localización del gene en el cromosoma, se realizan experimentos de conjugación interrumpida con 4 diferentes Hfr s que contienen los alelos dominantes de los respectivos genes, mientras que la cepa F- tiene los recesivos. HfrA man+ (1) trp+(9) aro+(17) gal+(20) lac+ (29) thr+ (37) Hfr B trp+ (6) man (14) his (22) tyr (34) met (42) arg (48) HfrC thr (3) ilv+ (20) xyl+ (25) arg+ (33) met+ (39) tyr+ (47) HfrD met+ (2) arg+ (8) xyl+ (16) ilv+ (21) thr+ (38) lac+ (46) Construye la secuencia de genes en el cromosoma, considerando la thr como tiempo 0 thr 0/100

Elementos genéticos transponibles Los elementos de secuencias de inserción (IS) son segmentos de DNA que pueden moverse de una posición cromosómica a otra del mismo cromosoma o diferente. Cuando los IS aparecen en medio de los genes, pueden interrumpir la secuencia codificante e inactivar la expresión del gen. Fueron descubiertos por primera vez en E.coli en el operon gal y son los transposones más simples. Tienen entre 700 y 1500 pb; son frecuentes en bacteriófagos y plásmidos Transposasa

Secuencias de inserción (IS) Transposones en procariontes

Transposones simples y compuestos

Plásmidos R con el mapa de transposones

Mecanismo de transposición

Dos formas de transposición

Transposones de eucariontes Retrotransposones Transposones de ADN

Transposones en humano