PARP-1 Poli(ADP-ribosa) polimerasa (PARP-1) y desarrollo tumoral N DNA binding domain Zn fingers Javier Oliver IPBLN, CSIC Granada NLS Automodification domain Catalytic domain 859 908 A B C D E F 1 F I F II 372 524 656 active site 1014 C 214 202 VKSEG KRK G DEVDG VDEVA KKKSKK EKDKDSKLEKALKA 240 CASPASE-3
Esquema del Mecanismo de reconocimiento de lesiones en el ADN por PARP-1 PARP DAMAGE RECOGNITION MODIFICATION OF PARP-1 1 AND BER PROTEINS PARP ACTIVATION AND AUTOMODIFICATION PARP PARP POLYMER DEGRADATION BY PARG PARP-1 S S OTHER ACTIONS(CHROMATIN REMODELLING, TRANSCRIPTION, ETC) DNA DAMAGE REPAIR BRAIN ISCHEMIA/ICTUS Eliasson et al., Nat Med.. 1997,1089-95. 95. TYPE I DIABETES Masutani et al, PNAS.. 1999, 9, 96(5):2301-4. REUMATHOID ARTHRITIS Szabo et al, PNAS,, 1998 Neoplasic and inflammatory diseases which benefit from PARP inhibition SEPTIC SHOCK Oliver et al., EMBO J, 1999; Petrelli et el., J Clin Invest.. 2004 114(8):1072-81. 81. ANTINEOPLASIC Bryant et al., Nature.. 2005 434, 913-7. Farmer et al., Nature 2005 434, 917 921. 921. Fong et al., N Engl J Med.. 2009 Jul 9;361(2):123-34 34
LA INHIBICIÓN N DE PARP INDUCE LA MUERTE DE CÉLULAS C DE CÁNCER C DE MAMA Y OVARIO PORTADORAS DE MUTACIONES EN BRCA1 Y 2, DEFICIENTES EN RECOMBINACIÓN N HOMÓLOGA Bryant et al., Nature.. 2005 434, 913-7. Farmer et al., Nature 2005 434, 917 921. 921.
PARP-1 JUEGA UN PAPEL ACTIVO EN DISTINTOS PROCESOS DE MUERTE CELULAR La inhibición/ausencia de PARP-1 limita la autofagia tras la privación de nutriente y a la célula a apoptosis STARVATION Glucose Amino acids GROWTH FACTOR Energy stress PI3K AMPK Aminoacids suficiency AKT LC3 INACTIVE mtorc1 ACTIVE AIF AIF-DEPENDENT CELL DEATH POLY(ADP-RIBOSE) MITOCHONDRIA AIF NUCLEUS AUTOPHAGY? ATP depletion Fusion with lysosome LC3 Autophagosome Degradation Mitochondrial disfucntion ROS production ROS INDUCED DNA DAMAGE APOPTOTIC CELL DEATH O- PARP1 O- O- NAD+ DEPLETION PARP1 PARP1 OVERACTIVATION PARP INHIBITION Muñoz-Gámez, et al. Autophgy 2009 Rodriguez-Vargas et al, Cell Research, 2012
LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN DE NUESTRO LABORATORIO REGULACIÓN DE LA RESPUESTA A HIPOXIA Y LA ANGIOGÉNESIS POR INHIBIDORES DE PARP Ariannys González Flores Andreína Peralta Leal Juan Martí Colaboraciones: Edurne Berra (CIC Biogune, Bilbao); Juan Carlos Rodríguez-Manzaneque, GENYO, Granada) FUNCIÓN DE PARP-1 EN EL AVANCE METASTÁSICO Y LA TRANSICIÓN EPITELIO-MESÉQUIMA Maribel Rodríguez Lara Jara Majuelos Colaboraciones: Antonio García de Herreros, IMIM-UPF, Barcelona; John Collard, The Netherlands Cancer Institute; Françoise Dantzer, CNRS, Estrasburgo, Francia). POLI(ADP-RIBOSILACIÓN) Y AUTOFAGIA José Manuel Rodríguez Jara Majuelos Santigo Serrano Colaboraciones: Abelardo López Rivas, CABIMER, CSIC, Sevilla; Marja Jäättela, University of Copenhagen; Otras Colaboraciones: Prof. Mariano Ruiz de Almodóvar, Dept. Radiología y Medicina Física, UGR; Profs. Raimundo García del Moral y Francisco O Valle, Dept de Patología, UGR.
La inhibición de PARP reduce la carcinogénesis epidérmica, la angiogénesis y la activación de HIF Genetic elimination or inhibition of PARP-1 confers resistence to the development of epidermal liver tumors. DMBA+ TPA DMBA+TPA +DPQ In parp-1 deficient/inhibitor-treated tumors there is a reduced vascularisation and a reduction in the pro-angiogenic transcription factor HIF Martín-Oliva, Oncogene 2004 Martín-Oliva et al, Cancer Research 2006 Quiles-Perez et al., Hepatology 2010 Martinez-Romero, J. Appl. Physiol, 2012 TUMOUR VOLUME (mm 3 ) 2500 2000 1500 1000 500 0 week 1º 2º 3º 4º 5º 6º 7º Martín-Oliva Cancer Res 2006 B TUMOUR VOLUME (mm 3) 4000 3000 2000 1000 0 DPQ * CONTROL DPQ CONTROL Quiles-Perez et al., Hepatology 2010
La inhibición de PARP protege de la metástasis pulmonar indicida por células de melanoma Peralta-leal et al., enviado photons/second 1.0 10 3 vehicle DPQ 1.0 10 2 1.0 10 1 ** *** ** Control DPQ 0d 1.0 10 0 0 2 7 11 14 21 time (days) Control PJ-34 Vimentin Vimentin 2 dpi 7 dpi 11 dpi num ber of foci/lung 35 30 25 20 15 10 5 0 vehicle *** DPQ metastatic foci Snail E-cadherin β-actin Snail1 E-cadherin 14 dpi 21 dpi Rodriguez et al., Oncogene 2011
Synthetic lethality (BRCA2 and BRCA2 tumor mutants). La inhibición de PARP reduce el avance tumoral actuando sobre múltiples proteínas diana TUMOR SUPPRESSOR INACTIVATION ONCOGENE ACTIVATION INTRATUMORAL HYPOXIA PARP INHIBITORS HIF-α NF-KB ACTIVATION HIF-a TRANSCRIPTIONAL ACTIVITY ANGIOGENESIS ECM REMODELLING CELL MIGRATION CELL PROLIFERATION EMT INVASIVE CANCER PHENOTYPE
PARP-1 GROUP IPBLN CSIC, GRANADA, SPAIN MARIBEL RODRÍGUEZ LARA LAURA LÓPEZ JAVIER OLIVER ANDREÍNA PERALTA LEAL JOSÉ MANUEL RODRIGUEZ VARGAS ARIANNYS GONZÁLEZ JARA MAJUELOS
QUE PUEDO APORTAR A RIBECANCER? I) Capital humano altamente cualificado y motivado en el estudio de la biología tumoral II) La larga experiencia de nuestro grupo en técnicas de biología celular, molecular y modelos animales de cáncer: Estudios de muerte celular a través de necrosis, apoptosis y autofagia Silenciamiento génico estable mediante shrna y lentivirus Estudios de interacción de proteínas, Proteómica acoplada a fluorescencia (DIGE) Estudios de reparación del genoma (comet assay, formación de foci, recombinación homóloga) Modelos murinos para el estudio de la metástasis por bioluminiscencia, incluido modelo ortotópico para el estudio del glioblastoma multiforme III) Posibilidad de contacto con grupos tanto españoles como de fuera de España para establecer colaboraciones.
QUÉ ESPERO DE RIBECÁNCER? I) Establecer contactos con grupos que tengan experiencia en el estudio experimental de la metástasis. II) Posibilidad de acceso a muestras tumorales de melanoma y glioblastoma para estudios de patología molecular II) Aumentar la posibilidad de contacto con compañías farmacéuticas III) Que sirva como puente para otras fuentes de financiación IV) Posibilidad de financiación de personal.