El Laboratorio de Patología Molecular en un Servicio de Anatomía Patológica.

Transcripción

1 94 Reunión de la Asociación Territorial Valenciana de la Sociedad de Anatomía Patológica Hospital General Universitari D Elx 13 de Junio de 2008 El Laboratorio de Patología Molecular en un Servicio de Anatomía Patológica. Hospital Universitario La Fe Servicio de Anatomía Patológica Laboratorio de Patología Molecular Dr. Luis Rubio 1

2 Todo lo que siempre quiso saber de patología molecular y núnca se atrevió a preguntar Reunión Anual de la SEAP 2008 Madrid 7-8 Feb. 2

3 Líneas de actuación Lab. Patología Molecular 3

4 Líneas de actuación Lab. Patología Molecular Pruebas diagnósticas y generación de informes 3

5 Líneas de actuación Cartera de Servicios Lab. Patología Molecular Pruebas diagnósticas y generación de informes 3

6 Líneas de actuación Investigación Básica Traslacional Divulgación de hallazgos Científicos Cartera de Servicios Lab. Patología Molecular Desarrollo, puesta a punto y Validación de nuevas técnicas Formación Continuada Pruebas diagnósticas y generación de informes 3

7 Líneas de actuación Investigación Básica Traslacional Divulgación de hallazgos Científicos Cartera de Servicios Lab. Patología Molecular Desarrollo, puesta a punto y Validación de nuevas técnicas Formación Continuada Pruebas diagnósticas y generación de informes Control de Calidad Estandarización kits comerciales Certificaciónes ISO 9000 Acreditaciones (SEAP, Nordic) Automatización 3

8 Líneas de actuación Becarios de Investigación Estancias en el extranjero Tesis Doctorales Proyectos Colaborativos con otros Servicios Proyectos de Investigación financiados Investigación Básica Traslacional Divulgación de hallazgos Científicos Cartera de Servicios Lab. Patología Molecular Desarrollo, puesta a punto y Validación de nuevas técnicas Formación Continuada Pruebas diagnósticas y generación de informes Control de Calidad Estandarización kits comerciales Certificaciónes ISO 9000 Acreditaciones (SEAP, Nordic) Automatización 3

9 Líneas de actuación Becarios de Investigación Estancias en el extranjero Página WEB Tesis Doctorales Proyectos Colaborativos con otros Servicios Proyectos de Investigación financiados Escritura de trabajos Científicos Participación en Congresos (Comunicaciones orales, posters) Investigación Básica Traslacional Divulgación de hallazgos Científicos Cartera de Servicios Lab. Patología Molecular Desarrollo, puesta a punto y Validación de nuevas técnicas Formación Continuada Pruebas diagnósticas y generación de informes Control de Calidad Estandarización kits comerciales Certificaciónes ISO 9000 Acreditaciones (SEAP, Nordic) Automatización 3

10 Líneas de actuación Becarios de Investigación Estancias en el extranjero Página WEB Tesis Doctorales Proyectos Colaborativos con otros Servicios Proyectos de Investigación financiados Escritura de trabajos Científicos Participación en Congresos (Comunicaciones orales, posters) Investigación Básica Traslacional Divulgación de hallazgos Científicos Cartera de Servicios Control de Calidad Lab. Patología Molecular Desarrollo, puesta a punto y Validación de nuevas técnicas Estandarización kits comerciales Formación Continuada Residentes AP Pruebas diagnósticas y generación de informes Estudiantes de Medicina Profesorado (CEFIRE) Certificaciónes ISO 9000 Acreditaciones (SEAP, Nordic) Automatización Técnicos Superiores Anatomía Patológica 3

11 Expectativas creadas 1. El LPM debe ser una herramienta útil y flexible enfocada al DIAGNÓSTICO CLÍNICO. 2. Realizar TÉCNICAS MOLECULARES especiales de apoyo al diagnóstico morfológico. 3. Vertebración e integración de profesionales en GRUPOS de trabajo INTERDISCIPLINARES. 4. Potenciador de la INVESTIGACIÓN BÁSICA TRASLACIONAL. 5. El LPM se establece como un RETO DE FUTURO en un Servicio de Anatomía Patológica. 4

12 Líneas de trabajo en el LPM IHQ HIS / FISH PCR / PCR-Q 5

13 Líneas de trabajo principales Protocolo de monitorización de la infección BK/JC en el paciente trasplantado renal Estudio del oncogén HER2/neu 1.- Cytology: looking for decoy cells in the urine IHQ Negative Positive Continue with the screening 2.- Send urine sample for BK and JC viral quantitation by real-time PCR Clinical cut off points for BK: < 10 7 copies/ml 10 7 Negative Positive FISH Done (nothing) 3.- Send blood sample for BK/JC viral quantitation Amplificado No amplificado Negative Positive Trastuzumab Done (nothing) Clinical cut off points for BK: < 10 4 copies/ml 10 4 Polyomavirus-Associated Nephropathy in Renal Transplantation: Interdisciplinary Analyses and Recommendations. Transplantation 2005; 79: Monthly blood quantification until viremia resolved Wolff A, Hammond E, Schwart J et al. American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists Guideline Recommendations for Human Epidermal Growth Factor Receptor 2 Testing in Breast Cancer. J Clin Oncol 2007; 25:

14 Cartera de Servicios Técnicas PCR Técnicas FISH Técnicas IHQ PCR cualitativa CMV EBV JC Herpes (multiplex) TBC PCR cuantitativa BK Adenovirus HPV Tipaje Reord. Linfomas Amplificación HER2/neu Amplificación EGFR Delección p16 Amplific. / Delec. Topo II Transloc. IgH Transloc. Bcl-2 Transloc. c-myc Transloc. Ciclina D1 LSI Syt (sarc. Sinovial) LSI EWSR1 (sarc. Ewing) Urovysion Herceptest EGFR p16 Técnicas HIS Genpoint (HPV) PNA-Eber (EBV) 7

15 Estadística del LPM en 2007 Extracciones DNA (EZ1): 798 casos. (A partir de suero, orina y tejido parafinado) PCR Cuantitativa: 972 determinaciones. (detección del virus BK) PCR Cualitativa: 1141 determinaciones. (detección de los virus JC, EBV, CMV, TBC, HPV) Técnicas IHQ: 722 (se incluyen Her2/neu, EGFR, p16) Técnicas FISH: 532 (se incluyen Her2/neu, EGFR, Sarcomas, Linfomas) 8

16 Distribución del LPM. Zona de mezcla de ADN Preparación reactivos PCR Recepción y etiquetado de muestras Zona despacho / Informes Extracción de ADN Zona de trabajo común Almacenamiento de muestras 9

17 Distribución del LPM. Zona de mezcla de ADN Preparación reactivos PCR Recepción y etiquetado de muestras Zona despacho / Informes Extracción de ADN Zona de trabajo común Almacenamiento de muestras 9

18 Líneas de actuación Becarios de Investigación Estancias en el extranjero Página WEB Tesis Doctorales Proyectos Colaborativos con otros Servicios Proyectos de Investigación financiados Escritura de trabajos Científicos Participación en Congresos (Comunicaciones orales, posters) Investigación Básica Traslacional Divulgación de hallazgos Científicos Cartera de Servicios Control de Calidad Lab. Patología Molecular Desarrollo, puesta a punto y Validación de nuevas técnicas Estandarización kits comerciales Formación Continuada Residentes AP Pruebas diagnósticas y generación de informes Estudiantes de Medicina Profesorado (CEFIRE) Certificaciónes ISO 9000 Acreditaciones (SEAP, Nordic) Automatización Técnicos Superiores Anatomía Patológica 10

19 Formación Continuada -Visitas diarias de estudiantes de medicina. - Rotación de un residente del Servicio durante 1 mes a tiempo completo en el LPM (proyecto colaborativo). - Realización de prácticas de un estudiante de Técnico superior de Anatomía Patológica. - Estancias cortas en el LPM (de otras Universidades / Centros) 11

20 Formación Continuada -Coordinación del módulo M13 (Anatomía Patológica en el Trasplante de Órgano Sólido) correspondiente al Máster en Investigación en Trasplante de Órgano Sólido, organizado por la Organización Nacional de Trasplantes (ONT) y reconocido por la Universidad Autónoma de Madrid (UAM) que se celebra los días 30 de noviembre y 1 de diciembre de 2006 en el Centro de Investigación Príncipe Felipe (La Ciudad de las Artes y las Ciencias). -Formación continua en Cáncer de Mama. Curso Teórico-Práctico realizado en el Laboratorio de Patología Molecular del Hospital Universitario La Fe como centro de referencia nacional en el estudio del oncogén HER2/neu. Organizado por Roche-Farma S.A. y auspiciado por la Sociedad Española de Anatomía Patológica (SEAP), Abril de Curso Fundamentos y práctica de las técnicas de inmunohistoquímica, FISH y PCR en el Laboratorio de Patología dentro del programa de Formación de CEFIRE para profesorado de FP. Julio de Coordinación del III Curso de Biología Molecular para Técnicos Superiores de Anatomía Patológica realizado en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital Universitario La Fe (Lab. de Patología Molecular), Febrero de

21 Formación Continuada LABORATORIO DE PATOLOGÍA MOLECULAR Servicio de Anatomía Patológica y Unidad de Genética Hospital Universitario La Fe Richard Y Zhao Ph.D. Academic Title: Associate Professor Primary Appointment: Pathology Secondary Appointments: Microbiology and Immunology Additional Title(s): Head, Division of Molecular Pathology, Department of Pathology & Director, Molecular Diagnostics Laboratory, University of Maryland Medical Center (UMMC) Baltimore, MD, USA, rzhao@som.umaryland.edu Seminario: Perspective on Molecular Diagnostics: From Single Molecule Detection to Individualized Testing 13

22 Investigación Básica Traslacional 14

23 Investigación Básica Traslacional 15

24 Investigación Básica Traslacional Proyectos de Colaboración 2008 a. Investigación histomorfométrica de las alteraciones de la reserva folicular ovárica con traducción clínica en medicina reproductiva: síndrome de fallo ovárico oculto y enfermedad poliquística del ovario. b. Estudio cito-morfológico de la citología urinaria en pacientes trasplantados renales. c. Evaluación de factores moleculares (Timidilato sintetasa, p53, y Deleted in Colon Cancer gen) como predictores de respuesta histopatológica, de recaida local y de supervivencia global en pacientes con adenocarcinoma de recto resecable tratados con quimioterapia y radioterapia concomitantes preoperatorias. d. Estudio de marcadores pronósticos en tumores vesicales uroteliales papilares no invasivos de alto grado histológico. 16

25 Investigación Básica Traslacional Proyectos de Investigación financiados 2008 PROYECTOS FINANCIADOS EN RELACIÓN AL ESTUDIO DEL ONCOGÉN HER2/neu EN CÁNCER DE MAMA CONVENIO CON LA FUNDACIÓN PARA LA INVESTIGACIÓN DEL HOSPITAL UNIVERSITARIO LA FE 1 ) Proyecto: Estudio de la expresión y amplificación del oncogén Her2/neu en tumores mamarios (ref. 3/2005/0031). Promotor: Roche-Pharma. 2 ) Proyecto: Ensayo clínico fase II de Cisplatino, Gemcitabina y Trastuzumab (Herceptin) en el tratamiento de primera línea del cáncer urotelial de células transicionales avanzado con sobreexpresión de c-erbb-2. Promotor: Grupo ACROSS-Arco del Mediterraneo. 3) Proyecto: Estudio de las diferencias entre los cánceres de mama diagnosticados clínicamente y los detectados en programa de cribado Promotor: Roche-Pharma. SOLICITUD DE AYUDAS PARA EL DESARROLLO DE PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN EN MATERIA SANITARIA 1) Proyecto: Impacto de de la polisomia del cromosoma 17 sobre la inmunohistoquímica de Her2/neu en el cáncer de mama sin amplificación génica de Her2/neu Promotor: Generalitat Valenciana PROYECTOS FINANCIADOS EN RELACIÓN AL ESTUDIO DEL POLIOMAVIRUS TIPO BK (FIS C03/03 / PI / UV-AE / FMM ): 1) ESTRATEGIAS PARA OPTIMIZAR LOS RESULTADOS EN DONACIÓN Y TRASPLANTE Tiempo de ejecución: 3 años. Programa al que está adscrito y número de proyecto: Convocatoria Proyectos FIS 2005 (Instituto de Salud Carlos III) Ref. C03/03 2) INFECCIONES VIRALES EMERGENTES EN TRASPLANTADOS RENALES Estudio propuesto en el marco de la Red Temática de Investigación C03/03, de la incidencia y repercusión «real» de la nefropatía por poliomavirus BK (NBK), estableciendo su diagnóstico precoz y monitorización con herramientas moleculares. Tiempo de ejecución: 1 años. Programa al que está adscrito y número de proyecto: Convocatoria Proyectos FIS 2005 (Instituto de Salud Carlos III) Ref. PI ) ESTUDIO DE LA NEFROPATÍA TUBULOINTERSTICIAL POR VIRUS BK EN EL ESTADO ESPAÑOL Tiempo de ejecución:1 año Programa al que está adscrito y número de proyecto: Universitat de Valencia-Servicio de Investigación / Solicitud de ayudas para Acciones Especiales. 4) CONVENIO ENTRE LA FUNDACIÓN DE INVESTIGACIÓN MÉDICA MUTUA MADRILEÑA Y FUNDACIÓN PARA LA INVESTIGACIÓN DEL HOSPITAL UNIVERSITARIO LA FE. Objetivos: Estudio de la población de pacientes trasplantados renales en la Comunidad Valenciana, con la implicación en el proyecto de los tres Centros de Referencia de Valencia: H. U. La Fe, H. G. Pesset Aleixandre y H. G. de Alicante. Proyecto: Estudio en la población de pacientes trasplantados renales de la Comunidad Valenciana, Tiempo de ejecución: 3 años 5) EVALUACIÓN Y VALIDACIÓN DE UN ENSAYO MULTIPLEX REAL-TIME PCR PARA LA CUANTIFICACIÓN DE LOS POLIOMAVIRUS HUMANOS BK/JC Tiempo de ejecución:1 año Programa al que está adscrito y número de proyecto: Solicitud de ayudas para Proyectos de Investigación de la Generalitat Valenciana. 17

26 Investigación Básica Traslacional Marco de trabajo idóneo Patólogos Técnicos AP Biólogos LPM Estudiantes Residentes Oncólogos 18

27 Divulgación de hallazgos Científicos 19

28 Divulgación de hallazgos Científicos Área de Diagnóstico Área de Investigación 20

29 Gestión de la Calidad Diagnóstico morfológico / Inmunohistoquímico Diagnóstico molecular / PCR, PCR-Q Fiabilidad-reproducibilidad de los resultados debe ser total. 21

30 Gestión de la Calidad a) Referente a las técnicas: - Controles positivos y negativos apropiados (Extracciones ADN, PCR-Q ) - Kits comerciales con marcaje CE (válidos para el diagnóstico clínico) - Uso correcto de los materiales e instrumental (revisiones, calibraciones ) - Manuales de Calidad (Manejo de instrumentos, SOP ) - Trazabilidad de las muestras (Identificación desde la entrada hasta informe) - Cursar peticiones via informática (Cumplimentación de hoja de petición ) - Informes con lenguaje claro y preciso (explicación de la técnica, rangos, etc ) b) Referente a controles externos al Lab: - Sistemas de control de calidad (SEAP) - Acreditaciones (ISO 15189, INACEPS) - Certificaciones a nivel europeo (ISO 9001, TÜV ) c) Personal. - Reunión semanal de TODOS los miembros del Lab. para exponer problemas y soluciones (Lab. meeting) - Tablón informativo (noticias, seminarios, publicaciones, congresos ) - Hoja semanal de trabajo (planificación del trabajo ) - COMUNICACIÓN 22

31 Gestión de la Calidad Norma UNE-EN ISO Laboratorios Clínicos. Requisitos particulares para la Calidad y la Competencia. Asegurar la competencia técnica de los lab. Clínicos, así como la validez de sus resultados analíticos. a) Alcance: es definido y concreto. b) Contenido: Gestión + Aspectos técnicos. Responsable: ENAC ISO: Norma Internacional EN: Norma Europea UNE: Norma Española (+UNE) = UNE-EN ISO Información facilitada por la Srta. Rosana Martínez (Instrumentos Científicos S.A) 23

32 Gestión de la Calidad Norma UNE-EN ISO Laboratorios Clínicos. Requisitos particulares para la Calidad y la Competencia. No debe ser entendida como un fin, sino como una HERRAMIENTA ESTRATÉGICA GLOBAL de mejora y de GESTIÓN del LPM: a) Garantizando la validez técnica. b) Estableciendo las bases para la estandarización de todos los procesos. c) Aporta un valor añadido a los resultados del Lab. que repercute directamente en la confianza de los facultativos. d) Refuerza la imagen del Lab. (a nivel hospitalario) 24

33 Gestión de la Calidad Norma UNE-EN ISO Hospital Lab. Patólogo Responsable Alcance de la Acreditación UNE-EN ISO Tipo Muestra Ensayo Hospital Nuestra Señora de Gracia (Zaragoza) Hospital de Alcañiz (Teruel) Anatomía Patólógica Anatomía Patólógica Dr. Javier Mateos Dr. Alfonso Cay Toma Cérvico- Vaginal Cribado Oncológico por Microscopía Óptica Información facilitada por la Srta. Rosana Martínez (Instrumentos Científicos S.A) 25

34 Conclusiones 1. El LPM es una herramienta útil y flexible de APOYO AL DIAGNÓSTICO. 2. Da respuesta a las NECESIDADES del Servicio mediante la implementación de nuevas técnicas moleculares. 3. Favorece la creación de grupos interdisciplinares y la INVESTIGACIÓN BÁSICA TRASLACIONAL. 4. Es necesaria la GESTIÓN de la CALIDAD como fórmula organizativa y garantía de validez técnica. 5. El Servicio de Anatomía Patológica debe asumir el RETO DE FUTURO que supone la puesta en marcha de un LPM. 26

35 Dr. FJ. Vera-Sempere Vanesa Felipe-Ponce Carol Villalba Sentamans Mª C Rubio-Alcalá Dr. Luis Rubio rubio_lui@gva.es

36 "Me interesa el futuro porque es el sitio donde voy a pasar el resto de mi vida". Woody Allen

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