REDES TEMÁTICAS DE INVESTIGACIÓN COOPERATIVA SOLICITUD DE CONSTITUCIÓN Y FINANCIACIÓN DE REDES DE GRUPOS

Transcripción

1 Subdirección General de Investigación Sanitaria Fondo de Investigación Sanitaria REDES TEMÁTICAS DE INVESTIGACIÓN COOPERATIVA SOLICITUD DE CONSTITUCIÓN Y FINANCIACIÓN DE REDES DE GRUPOS Convocatoria del Ministerio de Sanidad y Consumo de («B.O.E.» de 3 de abril de 2002) Expediente Nº TÍTULO DEL PROYECTO CIENTÍFICO: ESTUDIO GENÉTICO, METABÓLICO, CLÍNICO, TERAPÉUTICO Y EPIDEMIOLÓGICO DE LAS HIPERLIPEMIAS HEREDITARIAS EN ESPAÑA. TEMÁTICA ESPECÍFICA DE INVESTIGACIÓN DE LA RED: HIPERLIPEMIAS GENÉTICAS RELACION DE CENTROS QUE COMPONEN LA RED Cumplimente el siguiente cuadro por cada uno de los centros que componen la red. Añada tantos cuadros de datos como sea preciso. DATOS DEL CENTRO Denominación: CLINICA MUESTRA SEÑORA DE LA CONCEPCION. FUNDACIÓN JIMÉNEZ DÍAZ Domicilio: AV. REYES CATOLICOS 2 Código del Centro Población PROVINCIA Código postal MADRID MADRID Dependencia: Teléfono: Código del Centro DATOS DEL CENTRO Denominación: INSTITUTO ARAGONES DE CIENCIAS DE LA SALUD Domicilio: ED. PIGNATELLI Pº Mª AGUSTIN 36 Población PROVINCIA Código postal ZARAGOZA ZARAGOZA Dependencia: DIPUTACIÓN GENERAL ARAGÓN Teléfono: Código del Centro DATOS DEL CENTRO Denominación: INST. CIENCIAS CARDIOVASCULARES CATALUÑA/INST. INVEST. CARDIOVASCULAR BARCELONA Domicilio: S. ANTONI Mº CLARET 167 Población PROVINCIA Código postal BARCELONA BARCELONA Dependencia: Teléfono: ILMO. SR. DIRECTOR DEL INSTITUTO DE SALUD CARLOS III

2 DATOS DEL CENTRO Denominación: Domicilio: HOSPITAL UNIVERSITARIO REINA SOFIA AVDA MENÉNDEZ PIDAL S/N Código del Centro Población PROVINCIA Código postal CÓRDOBA CÓRDOBA Dependencia: Teléfono: DATOS DEL CENTRO Denominación: Domicilio: C/ VILLARROEL 170 INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOMÉDICAS AUGUST PI I SUNYER Código del Centro Población PROVINCIA Código postal BARCELONA BARCELONA Dependencia: Teléfono: DATOS DEL CENTRO Denominación: Domicilio: CIUDAD SANITARIA Y UNIVERSITARIA DE BELLVITGE C/ FEIXA LLARGA S/N Código del Centro Población PROVINCIA Código postal L'HOSPITALET DE LLOBREGAT BARCELONA Dependencia: INSTITUTO CATALAN DE LA SALUD Teléfono: Código del Centro DATOS DEL CENTRO Denominación: FACULTAD DE FARMACIA, UNIVERSIDAD DE BARCELONA Domicilio: AVDA. DIAGONAL 643 Población PROVINCIA Código postal BARCELONA BARCELONA Dependencia: Teléfono: Código del Centro DATOS DEL CENTRO Denominación: HOSPITAL DE LA SANTA CREU I SANT PAU Domicilio: SANT ANTONI Mª CLARET 167 Población PROVINCIA Código postal BARCELONA BARCELONA Dependencia: Teléfono: Impreso normalizado de solicitud de constitución y financiación de Redes TIC de Centros: Relación de centros que componen la red Página 2 de 97

3 DATOS DEL CENTRO Denominación: HOSPITAL CLÍNICO UNIVERSITARIO DE VALENCIA Domicilio: AVDA. BLASCO IBAÑEZ 17 Código del Centro Población PROVINCIA Código postal VALENCIA VALENCIA Dependencia: Teléfono: DATOS DEL CENTRO Denominación: Domicilio: INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN CIENCIAS DE LA SALUD C/SANT JOAN S/N Código del Centro Población PROVINCIA Código postal REUS TARRAGONA Dependencia: Teléfono: DATOS DEL CENTRO Denominación: Domicilio: FACULTAD DE MEDICINA, UNIVERSIDAD DE CANTABRIA C/ CARDENAL H ORIA S/N Código del Centro Población PROVINCIA Código postal SANTANDER CANTABRIA Dependencia: Teléfono: Código del Centro DATOS DEL CENTRO Denominación: MEDPLANT GENETICS Domicilio: EL CARMEN 38 Población PROVINCIA Código postal BARACALDO VIZCAYA Dependencia: Teléfono: Código del Centro DATOS DEL CENTRO Denominación: HOSPITAL UNIVERSITARIO VIRGEN DEL ROCIO Domicilio: AVDA. MANUEL SIUROT S/N Población PROVINCIA Código postal SEVILLA SEVILLA Dependencia: Teléfono: Impreso normalizado de solicitud de constitución y financiación de Redes TIC de Centros: Relación de centros que componen la red Página 3 de 97

4 DATOS DEL CENTRO Denominación: HOSPITAL RAMON Y CAJAL Domicilio: CTRA DE COLMENAR, Km 9.1 Código del Centro Población PROVINCIA Código postal MADRID MADRID Dependencia: INSTITUTO MADRILEÑO DE LA SALUD Teléfono: Código del Centro DATOS DEL CENTRO Denominación: Domicilio: Población PROVINCIA Código postal Dependencia: Teléfono: Código del Centro DATOS DEL CENTRO Denominación: Domicilio: Población PROVINCIA Código postal Dependencia: Teléfono: Añadir cuadro de datos Eliminar cuadro de datos Impreso normalizado de solicitud de constitución y financiación de Redes TIC de Centros: Relación de centros que componen la red Página 4 de 97

5 Expediente Nº RTIC-G ESTRUCTURA ORGANIZATIVA DE LA RED TÍTULO DEL PROYECTO CIENTÍFICO: ESTUDIO GENÉTICO, METABÓLICO, CLÍNICO, TERAPÉUTICO Y EPIDEMIOLÓGICO DE LAS HIPERLIPEMIAS HEREDITARIAS EN ESPAÑA. La Red temática en Hiperlipemias Genéticas está constituida por 16 nodos, pertenecientes a 14 Centros del Sistema Sanitario Nacional y Universitario. Uno de los nodos es emergente y está tutelado por el Dr. Gomez Coronado (Hospital Ramón y Cajal). El total de nodos representan a 7 Comunidades Autónomas ( Andalucía, Aragón, Cantabria, Cataluña, Madrid, Valencia, País Vasco). La distribución de nodos por Comunidad Autónoma es la siguiente: Andalucía: 2 ; Aragón: 2; Cantabria: 1 ; Cataluña: 6; Madrid: 3 ( Un nodo emergente ) ; Valencia: 1; País Vasco: 1 Se dispone de un registro de filiación de los miembros de cada nodo integrante de la Red. En cada nodo hay un coordinador local que corresponde al Investigador Principal. En el apartado de Plan de Trabajo se detallan los 16 nodos y centros a los que pertenecen, así como el investigador responsable del grupo y el total de investigadores que componen cada uno de ellos. El Coodinador de la red es el Dr. Pedro Mata (Madrid), y el encargado del Programa de Docencia y Formación de la red es el Dr. Francisco Perez Jiménez (Córdoba). La Red cuenta con el apoyo de 72 clínicas de lípidos del Sistema Nacional de Salud, distribuídas por todo el territorio nacional, que siguen protocolos comunes de recogida de datos para el diagnóstico de las hiperlipemias genéticas (Se adjunta mapa con la relación de las Unidades). En 1999 se inició el Registro Nacional de Hipercolesterolemia Familiar, propiedad de la Fundación Hipercolesterolemia Familiar ( una institución benéfico-asistencial. El Presidente de la Fundación es el Dr. Pedro Mata, y varios miembros del comité científico forman parte de la red de nodos (Dra. Badimón, Dr. Mata, Dr. Pocovi, Dr. Perez Jiménez, Dra. Clotilde Vazquez). La red cuenta con una Base de Datos del Registro de pacientes centralizada en Madrid (coordinadores, Dr. Pedro Mata, Dr. Rodrigo Alonso), y de un banco de ADN y seroteca únicos centralizados en la Universidad de Zaragoza (Dr. Miguel Pocovi). Para el presente proyecto, tanto la base de datos como el banco de DNA seguirán en la misma localización, y se creará un laboratorio centralizado para los análisis bioquímicos en el Hospital Sant Pau de Barcelona (Dr.Blanco). Además, se creará un Registro Nacional para la Hiperlipemia Familiar Combinada con la misma estructura organizativa que el anterior registro. Para la consecución de los objetivos del Proyecto coordinado, el suministro de datos y de muestras biológicas se proporcionará a los diferentes nodos desde los distintos bancos de datos y muestras preservando la confidencialidad del paciente según la legislación vigente (Ver Antecedentes). Se trabajará de manera integrada y coordinada, utilizando criterios diagnósticas y metodología comúnes para toda la red. Para la consecución de los objetivos, pueden interactuar varios nodos en función de la complejidad metodológica. Estructura organizativa de la red página 5

6 Expediente Nº RTIC-G PLAN ESTRATÉGICO CONJUNTO CON PROYECTO CIENTÍFICO DE TRES AÑOS TÍTULO DEL PROYECTO CIENTÍFICO: ESTUDIO GENÉTICO, METABÓLICO, CLÍNICO, TERAPÉUTICO Y EPIDEMIOLÓGICO DE LAS HIPERLIPEMIAS HEREDITARIAS EN ESPAÑA. Se presenta un Proyecto científico único de 3 años de duración con el fin de profundizar en el estudio de las hiperlipemias hereditarias en España, desde el punto de vista genético, metabólico, clínico, terapéutico y epidemiológico (ver apartado Objetivos). Este proyecto se enmarca dentro de las prioridades del Sistema Nacional de Salud para la prevención de la enfermedad cardiovascular en estos pacientes. Su puesta en marcha tendrá un importante impacto social. Para llevar a cabo este Proyecto, se presenta una Red cooperativa y multidisciplinaria, participada por 16 grupos pertenecientes a Centros del Sistema Nacional de Salud, de Universidades, y con apoyo de organismos y empresas privadas farmacéuticas y de tecnología. Uno de los grupos es emergente y está tutelado por el Dr. Gomez Coronado, responsable del nodo 15, del mismo centro. Los distintos grupos que forman la red cuentan con suficiente experiencia en el diagnóstico, tratamiento e investigación en las hiperlipemias genéticas. Y algunos de sus miembros han participado previamente en proyectos coordinados con financiación pública en esta area. Los Centros de Investigación representan a 7 Comunidades Autónomas. Para la consecución de los objetivos propuestos, la Red cuenta con el apoyo de la Fundación Hipercolesterolemia Familiar, y las 72 Clínicas de Lípidos que colaboran en el Registro Nacional de Hipercolesterolemia Familiar, pertenecientes al Sistema Nacional de Salud, y representativas de todas las Comunidad Autónomas de España. Además, España a través de los datos del registro Español de HF colabora con el Programa Internacional MEDPED dependiente de la OMS. Los distintos grupos participarán de forma coordinada e integrada en función a su experiencia clínica, docente e investigadora con el fin de conseguir el adecuado desarrollo del Proyecto. La interacción intelectual queda reflejada en el apartado de Formación en Investigación que propone la red. Se incluye un programa de formación de tercer ciclo (desarrollo de curso de doctorado y tesis doctorales), y de formación continuada a los investigadores, fomentando el intercambio de investigadores entre los distintos grupos. Además, la red considera necesaria la realización de cursos de formación continuada para los miembros de la red de Clínicas de Lípidos que colaboran en el registro ya existente y a médicos del Sistema Nacional de Salud implicados en la detección de pacientes con hiperlipemias genéticas. En el Proyecto se incluye también, el desarrollo y evaluación de un programa de educación y difusión para la población afecta de hiperlipemia genética. La Red cuenta con los siguientes recursos que serán utilizados y compartidos por todos los grupos que lo requieran para la consecución de los objetivos: 1. Un Registro nacional de pacientes con Hipercolesterolemia Familiar formado por 2050 casos índice (un miembro por familia) incorporados en una Base de Datos protegida de acuerdo a la legislacion vigente con la aprobación de la Agencia Nacional de Protección de Datos. Este Registro fue creado en el año 1999 por la Fundación Hipercolesterolemia Familiar. El Presidente de la Fundación es el Dr. Pedro Mata, y miembros del Comité Científico participan en este Proyecto integrado (L Badimón, R Carmena, P Mata, F Perez-Jiménez, J Lopez- Miranda, M Pocovi, C Vazquez). Plan estratégico Página 6

7 2. Un banco de ADN, suero y plasma de los pacientes incluidos en el registro. Previamente a la obtención de la muestra se ha firmado un consentimiento informado. 3. Un registro de filiación de todo el personal que participa en el Proyecto (se adjunta a continuación). Este Proyecto ampliará el registro de pacientes con HF ya existente, que se enmarca dentro del estudio de la cohorte, y creara un nuevo registro para la HFC. Así mismo se creará un banco de ADN y de sueros para los pacientes con HFC. Las distintas actuaciones necesaria para el desarrollo y consecución del proyecto serán coordinadas por el Coordinador de la Red (Dr. Mata). Los responsables de los recursos disponibles y de los programas a desarrollar en el proyecto son: Base de datos y registros (Dr. Mata, Dr. Alonso) Banco de ADN y seroteca de pacientes con HF y HFC (Dr. M. Pocovi) Laboratorio centralizado análisis bioquímicos (Dr. F. Blanco) Metodología Estudio no invasivo Aterosclerosis preclínica (Dr. E. Ros) Banco de tejidos, tejido adiposo, etc. (Dr. J Ribalta, Dr. J Villar) Docencia y Formación (Dr. F. Perez Jimenez) Educación a Pacientes (Dra. J Panisello, Dra. Clotilde Vazquez) Todos los resultados serán incorporados en una base de datos única para su posterior análisis y podrán ser compartidos por todos los grupos que participan en el proyecto. Todos los nodos participarán en el proyecto de una forma coordinada e integrada, compartiendo la base de datos y bancos de muestras o tejidos que se desarrollen durante el proyecto. La interacción entre los grupos estará determinada en función de los objetivos y la experiencia de cada grupo (ver apartado de Plan de Trabajo). Con el fin de promover la interacción entre los grupos, se realizará al menos una reunión semestral, o cuando el desarrollo del proyecto lo precise. Plan estratégico Página 7

8 Expediente Nº RTIC-G MEMORIA DEL PROYECTO CIENTÍFICO TÍTULO DEL PROYECTO CIENTÍFICO: ESTUDIO GENÉTICO, METABÓLICO, CLÍNICO, TERAPÉUTICO Y EPIDEMIOLÓGICO DE LAS HIPERLIPEMIAS HEREDITARIAS EN ESPAÑA. RESUMEN (Objetivos y metodología del proyecto) Las hiperlipemias genéticas son un trastorno frecuente en la población general, caracterizadas por el desarrollo de enfermedad cardiovascular prematura. Objetivos: a) Estudio y seguimiento a largo plazo de una cohorte de hipercolesterolemia familiar(hf)con diagnóstico genético. Se determinará el riesgo y la supervivencia en función de las características clínicas y genéticas; b) Valorar la aterosclerosis preclínica; c)identificar mutaciones distintas a las del receptor LDL; d)analizar la interacción gen-gen, gen-factores ambientales y metabólicos;e) Crear un registro de pacientes con Hiperlipemia familiar combinada (HFC), y validar los criterios diagnósticos;f)determinar el riesgo cardiovascular de la HFC;g) identificar genes implicados en el desarrollo de HFC. Métodos: a) Se utilizarán los datos del registro español de HF y se incluirán en la cohorte familiares sanos y afectos de HF. Se cumplimentará un protocolo homogéneo y se extraeran muestras de ADN y suero para análisis bioquímicos. Los pacientes seguirán visitas cada 2 años. b)aterosclerosis preclínica: medida por ecografía carotídea; c) Bioquímica: perfil ipídico mediante métodos enzimáticos en autoanalizador y ultracentrifugación, apo B, tamaño de LDL; d)ácidos grasos: cromatografía de gases; e) análisis genéticos: biochips, PCR, SSCP, secuenciación y análisis de restricción, PCR larga, arrays de expresión génica; f) funcionalidad: citometría de flujo; g) homocisteína: HPLC; h) factores trombogénicos y LDLox: ELISA, EIA; i) cultivos celulares; j) análisis de expresión de proteínas: isoelectroenfoque y electroforesis. TITLE: GENETIC, METABOLIC, CLINICAL, THERAPEUTIC AND EPIDEMIOLOGYCAL STUDY ON HEREDITARY HYPERLIPIDAEMIA IN SPAIN. SUMMARY (Objectives and methodology) Genetics hyperlipidemia are very frequent in general population and they are characterized by premature cardiovascular disease. Objectives: a) To study and follow up of a large cohort of families with genetic diagnosis of Familial Hypercholesterolaemia (FH). Cardiovascular risk and survival will be determined; b)to evaluate subclinic atherosclerosis; c) To identify mutations in loci others than LDL-receptor gen. d)to evaluate the interactions among LDL-r mutations and other genetics, metabolic and enviromental factors. d) To establish a registry of patients with Familial Combined Hyperlipidaemia (FCH) and to validate the diagnosis criteria; e) to determine cardiovascular risk factors in FCH, and to identify gene involved in the developmente of FCH. Methods: a)from the database of the Spanish registry on FH, patients with genetic FH, and their first degree relatives (affected or not) wil be included in the cohort (around subjects). Homogeneous criteria will be used, and blood sample will be obtained for DNA isolation and biochemical analyses. Subjects will be followed each 2 years; b) subclinic atherosclerois will be measured by carotid ultrasound; c) biochemistry: lipid profile by enzimatic methods in autoanalyzer and ultracentrifugation, apo B, LDL size; d) fatty acids by gas chromatograpgy; e) genetic analysis: biochips, PCR, SSCP, sequentiation, restriction analysis, large PCR, gene expresion arrays; f) Function: flow citometry; g) homocysteine: HPLC; h) Trombogenic factors and oxidized LDL: ELISA, EIA; i) cells culture; j) protein expresion analysis: isoelectricfocusing, electrophoresis. Memoria del proyecto científico: Página 8

9 Expediente Nº RTIC-G MEMORIA DEL PROYECTO CIENTÍFICO TÍTULO DEL PROYECTO CIENTÍFICO: ESTUDIO GENÉTICO, METABÓLICO, CLÍNICO, TERAPÉUTICO Y EPIDEMIOLÓGICO DE LAS HIPERLIPEMIAS HEREDITARIAS EN ESPAÑA. Antecedentes Las hiperlipemias de base hereditaria son un trastorno frecuente, estimándose su prevalencia en un 2% de la población general. Esto significa que en España existen de a personas con una hiperlipeima genética. Este término engloba a la Hipercolesterolemia Familiar y otros tipos de Hipercolesterolemia Autosómica Dominante monogénica, y a la Hiperlipemia Familiar Combinada. HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAR (HF) E HIPERCOLESTEROLEMIAS AUTOSÓMICAS DOMINANTES (HAD) Características clínicas, bioquímicas y genéticas Las HAD son desórdenes del metabolismo lipídico, que se caracterizan por un aumento plasmático de lipoproteinas de baja densidad (LDL) y enfermedad coronaria prematura. Se calcula que la HAD acorta la esperanza de vida, en mas de 25 años, con respecto a la población general. Hace 38 años Goldstein y Brown observaron que las HAD eran consecuencia de defectos en el receptor de las lipoproteínas de baja densidad (r-ldl) y la denominaron hipercolesterolemia familiar (HF, MIM ) habiéndose descrito en la actualidad mas de 700 mutaciones en el gen del r-ldl asociadas a HAD (1). La HF es el trastorno hereditario monogénico más frecuente. Se transmite con carácter autosómico dominante, con una penetrancia de casi el 100%. La mutación se produce en el gen que codifica el receptor para las LDL, por lo cual hay una menor expresión de receptores funcionales para las LDL en el hígado. Esto produce un incremento en las concentraciones plasmáticas de estas lipoproteinas, y del colesterol total. En 1987 Innerarity y col (2) demostraron la heterogeneidad genética de la HAD observando que había pacientes con actividad normal del r-ldl y afinidad disminuida de su apolipoproteína B- 100, denominando a esta hiperlipidemia apo B100 defectuosa familiar (FDB, MIM ). La existencia de una mayor heterogeneidad en las HAD nunca ha sido formulada de forma precisa. Varios estudios han encontrado familias en las cuales el defecto responsable de la HAD no está localizado ni en el gen del r-ldl ni en el gen de la apob-100. En un estudio reciente se identificó un nuevo locus en el cromosoma 1, región p34.1-p32, implicado en la HAD. Se calcula que en dependencia de la población estudiada entre un 15 y un 20% de las HAD están localizados en loci sin identificar (3). Recientemente se ha publicado la base genética de la hipercolesterolemia autosómica recesiva (ARH) (4). Se trata de una enfermedad que cursa con hipercolesterolemia, a veces difícil de distinguir de la propia HF. La ARH es debida a mutaciones en el gen que codifica una proteína denominada por extensión ARH. La estructura de esta proteína se desconoce, pero un análisis detallado de su secuencia sugiere que el gen ARH podría codificar una proteína citoplasmática cuya principal característica es un dominio PTB de unión a fosfotirosina. PTB es un dominio característico de numerosas proteínas adaptadoras que interacciona con secuencias consenso NPXY, presentes en los dominios citoplasmáticos de receptores de la superficie celular, entre los que se encuentra el propio r-ldl, así como los receptores de insulina, EGF, TrkA etc. La proteína Memoria del proyecto científico: Antecedentes y estado actual del tema Página 9

10 Antecedentes ARH podría por tanto jugar un papel importante en la inducción de la expresión génica iniciada por la unión de apoe al r- LDL. Clínicamente, la HF se caracteriza por concentraciones muy elevadas de colesterol total y colesterol en LDL (c-ldl) presentes desde el nacimiento, que afecta al menos a la mitad de los miembros de una familia, tanto a varones como a mujeres. La exploración física puede mostrar depósitos de colesterol en los tendones (Xantomas) y en el ojo (Arco Corneal). Tiene un elevado riesgo de desarrollar enfermedad cardiovascular (ECV) prematura, especialmente coronaria. Se calcula que el 75% de los varones y el 50% de las mujeres con HF sin tratar, sufren un evento coronario antes de los 60 años. Por lo tanto, la HF acorta la esperanza de vida de 20 a 30 años respecto a la población general (5). Según los datos del Registro Español de HF, el 55% de los varones y el 22% de las mujeres con HF incluídos en el mismo, han desarrollado alguna manifestación de ECV antes de los 60 años (6) Diagnóstico de la HF La gran variabilidad interindividual de la HF hace que el diagnóstico basado en las concentraciones de colesterol total o c-ldl no permita realizar una identificación inequívoca de estos pacientes. Un estudio reciente ha demostrado que el error diagnóstico al utilizar las concentraciones de c-ldl es cercano al 30%, por lo que se sugiere que ante la sospecha clínica, hay que realizar un análisis genético (7). Los metodos de diagnóstico basados en el análisis del gen son los métodos recomendados por la OMS en el programa MedPed (Make Early Diagnosis to Prevent Early Deaths in MEDical PEDigrees) para la búsqueda de pacientes con HF (8). Sin embargo, estos métodos presentan también una serie de inconvenientes debido a : 1) la gran heterogeneidad de las mutaciones, ya que se conocen más de 700 distintas, y la mutación responsable de la HF en una determinada familia puede ser cualquiera de las descritas o alguna nueva autóctona de la zona, país o raza, y 2) el gran tamaño del gen (45 Kb), ya que la mutación puede estar localizada en cualquier sitio del mismo o ser cualquiera de los diferentes tipos. Gracias a los avances de la biología molecular hoy en día es posible abordar el diagnóstico de la HF mediante estas técnicas de polimorfismos de conformación de cadena sencilla (SSCP) o electroforesis en geles con gradiente desnaturalizante (DGGE) que permite detectar cambios pequeños en la secuencia del DNA, de hasta una base pero tienen el inconveniente que son muy laboriosas y difíciles de aplicar al diagnóstico rutinario. Por otra parte, estas técnica no permiten la detección de grandes deleciones o inserciones, determinación que requiere del uso de la técnica de Southern o la realización de PCR largas. Además las técnicas de SSCP o DGGE requieren de una secuenciación posterior para la caracterización de la mutación. En la actualidad se están desarrollando biochips, diseñados para detectar mutaciones de forma rápida y sencilla. Sin embargo, también para la fabricación de un biochip es necesario disponer de la información previa del número y características de las mutaciones que se quiere determinar así como de la tecnología y herramientas apropiadas. Hasta el momento no está disponible ningún biochip para el diagnóstico genético de la HF. Actualmente, el grupo proponente de este proyecto dispone desde 1999 de un Registro Español de HF (propiedad de la Fundación Hipercolesterolemia Familiar) en el cual participan hasta este momento 72 clínicas de lípidos del Sistema Nacional de Salud de todo el país. Este registro está aprobado y registrado en la Agencia Nacional de Protección de Datos Informáticos LORTAD (Nº de Registro: ). Hasta la fecha, se han recibido los datos clínicos y muestras biológicas de 2050 pacientes (un caso por familia) con diagnóstico clínico de HF y se ha procedido a la identificación de las mutaciones en el gen del r-ldl. En España, se han identificado 120 mutaciones distintas en el gen del r-ldl, una mutación en el gen de la apo B-100 (R3500Q) y otra Impreso normalizado de solicitud de constitución y financiación de Redes TIC de Centros: Plan estratégico Página 10 de 97

11 Antecedentes en el gen de apo E que están asociadas con HAD (9). Factores que influyen sobre el curso de la HF y son responsables de la gran variabilidad en las manifestaciones clínicas. 1.- Variabilidad fenotipica de la HF debida a la mutación del r-ldl Numerosos estudios han demostrado que la concentración de c-ldl per se es un factor determinante para el fenotipo de la HF. Se han observado diferencias significativas en cuanto a expresión fenotípica y respuesta a tratamiento hipolipemiante entre los sujetos afectados de HF con diferente tipo de mutación en el r-ldl (10). Un hecho importante a la hora de explicar la variabilidad fenotipica de la HF asi como la respuesta individual al tratamiento con inhibidores de la HMGCoA reductasa en la HF es la actividad residual de la proteina mutada del r-ldl. La mutaciones en el gen del r-ldl que dan lugar a la HF pueden afectar de distinta forma a la actividad del receptor. Estas mutaciones que causan HF se subdividen en 5 clases principales en dependencia que afecten a la síntesis de la proteína (Clase 1), al transporte del receptor desde el retículo endoplásmico hasta el aparato de Golgi (Clase 2), a la unión de la partículas lipoprotéicas (Clase 3), a la formación de la vesícula endocítica (Clase 4), o al reciclado del receptor (Clase 5) (1). Por lo tanto, no es de extrañar que en dependencia del tipo de mutación heredada se produzca una expresión fenotípica y un grado de respuesta al tratamiento hipolipemiante diferentes, que dependerá del efecto del alelo no defectuoso y de la actividad residual del alelo defectuoso. Por otra parte, el riesgo de ECV varia de forma considerable entre los diferentes tipos de mutación, siendo los portadores de alelos nulos los que presentan un mayor riesgo cardiovascular que determinados tipos de mutación de cambio de aminoácido o en pauta de lectura que poseen una importante actividad residual (10). Para el control de la hipercolesterolemia se persigue la estimulación de la actividad del r-ldl. Habitualmente esto se consigue administrando estatinas, inhibidores de la hidroximetilglutaril coenzima A reductasa. Como respuesta a la reducción en la cantidad de colesterol en el retículo endoplásmico que ello produce, se activa SREBP, el cual estimula la transcripción de, entre otros, el gen del receptor de LDL (11). En ciertos pacientes, por razones aún desconocidas la respuesta a las estatinas no es suficientemente eficaz (10). El incremento de la dosis de estos fármacos para mejorar la respuesta puede comprometer la disponibilidad de mevalonato que, como precursor de ubiquinona, dolicol, farnesol y geranilgeraniol, además de colesterol, es esencial para múltiples funciones celulares. Por ello, es importante profundizar en el conocimiento de otras vías de estimulación del receptor de LDL. 2.-Variabilidad debida a otros factores genéticos Aparte del c-ldl, se piensa que otros aspectos del metabolismo lipídico pueden ejercer un impacto importante sobre el fenotipo de la HF. El nivel de colesterol tranportado por las LDL depende además de la funcionalidad de proteinas tales como la apo B100, proteinas de transporte implicadas en la absorción intestinal y en la excreción hepática de colesterol en la bilis (ABCG5/ABCG8) y de la ARH, proteína estabilizadora del receptor LDL. La caracterización de identificación de los mecanismos de regulación del colesterol plasmático serían de gran utilidad para el diagnóstico y manejo clínico de pacientes con HAD. La concentración de colesterol en la población general es el resultado de complejas interacciones entre el ambiente y múltiples genes, y es probable que lo mismo ocurra en los sujetos con HF, aunque con menor intensidad dado el efecto importante del locus del r-ldl. Sin embargo, en cuanto al riesgo de ECV es probable que dado el elevado riesgo que poseen estos pacientes debido a su elevado c-ldl, el efecto adicional de otros genes pueda ser mucho mas pronunciado que el observado en la población general (10). Entre estos genes candidatos estan los implicados en el Impreso normalizado de solicitud de constitución y financiación de Redes TIC de Centros: Plan estratégico Página 11 de 97

12 Antecedentes metabolismo lipídico y energético ABPs (muscular, cardiaca, adipocítica e intestinal) CEPT, LCAT, MTP, Apolipoproteínas (AI-II, B, CI-IV, D, E), PON1 y PON2, PPARs (alfa y gamma), ABCs (A1, C6, G1, G5 y G8), UCPs. Por otra parte, el reciente progreso de la genómica funcional está permitiendo desentrañar las bases genéticas de enfermedades de etiología compleja. Este es muy probablemente el caso de la diferente expresión de la ECV en estos pacientes. Las técnicas genómicas de screening de amplio espectro, como son los microarrays de cdna, pueden permitir la identificación de genes implicados en el riesgo, la susceptibilidad y la patogenia de la ECV. Así mismo, estos estudios proporcionan la posibilidad de conocer cómo se asocian determinados patrones de expresión génica con el grado de respuesta al tratamiento. Actualmente se está proponiendo la utilización de muestras de sangre, dada su accesibilidad, para los estudios sistemáticos de genética funcional en diversas enfermedades humanas, entre ellas la HF. Expresión diferencial de proteínas en Hipercolesterolemias genéticas. La hipercolesterolemia modifica profundamente la biología de la pared vascular, y provoca alteraciones significativas en los niveles séricos de diferentes moléculas. La evolución y manifestaciones clínicas de la aterosclerosis son muy variadas tanto en la población general como entre los pacientes con hipercolesterolemia familiar y/o hipercolesterolemia familiar combinada en particular que presentan hipercolesterolémia y/o hipertrigliceridémia. Actualmente es ya evidente que más allá del postulado un gen=una proteína, defectos que afectan a un solo gen pueden traducirse en alteraciones de múltiples proteínas. La proteómica como ciencia emergente aporta un abordaje especialmente interesante en patologías multigénicas, como las enfermedades vasculares, en las que se produce una compleja interacción entre factores genéticos y ambientales. Actualmente sólo se conoce un reducido número de proteínas del plasma que además no caracterizan suficientemente la fisiopatología de los procesos asociados a la enfermedad ni tienen valor predictivo sobre su evolución 3.- Factores ambientales que influyen sobre la variabilidad El profundo trastorno metabólico existente en estos pacientes hace que la hipercolesterolemia sea su factor de riesgo fundamental. Por ello el tratamiento farmacológico hipolipemiante es hoy el eje principal de su manejo. Sin embargo, datos del Registro Español muestran que factores nutricionales, como es el sobrepeso, pueden ser claves como predictores de un mayor riesgo. Por ello la alimentación saludable puede ser un elemento clave en su manejo. Existen dos hechos fundamentales en torno al efecto preventivo de la dieta: la gran variabilidad de la respuesta individual y un nuevo paradigma, el que los nutrientes ejercen múltiples efectos biológicos, que van más allá de su beneficio sobre el colesterol. El primer aspecto se enmarca dentro de la variabilidad dependiente de la interacción genéticoambiental en la expresión del colesterol plasmático, escasamente conocido en los pacientes con HF. Uno de los factores genéticos, sobre el que se está centrando el interés, es el de las variantes en los genes de los transportadores ABCG5 y ABCG8. Ambos se han implicado en la absorción de los esteroles de la dieta y en la regulación del transporte lipídico intracelular(12, 13). Con respecto a los efectos pleiotrópicos de los nutrientes, es importante conocer si estos pacientes se benefician de una dieta sana (tipo mediterránea), no sólo por su efecto sobre el colesterol sino por su potencial efecto sobre otras variables predictivas, relacionadas con la dieta. Entre ellas se incluyen, el tamaño de la LDL, la oxidación de lipoproteinas, el metabolismo postprandial de triglicéridos y factores hemostáticos. Se han propuesto distintos factores adicionales que condicionan el riesgo cardiovascular, entre ellos la homocisteína (14). Así, el exceso de homocisteína es un factor de riesgo cardiovascular independiente y tiene un efecto sinérgico con otros factores aterogénicos. La homocisteína favorece Impreso normalizado de solicitud de constitución y financiación de Redes TIC de Centros: Plan estratégico Página 12 de 97

13 Antecedentes la lipoperoxidación y la trombosis e influye en los mecanismos que regulan la biosíntesis de colesterol. Las concentraciones homocisteína dependen de la ingesta de metionina, de la actividad de las enzimas que intervienen en su metabolismo y de las vitaminas que actúan como cofactores (ácido fólico, cobalamina y piridoxina). Se han identificado distintas variantes de los genes que codifican para estos enzimas relacionadas con concentraciones elevadas de homocisteína. Una de las más frecuentes es la mutación C677T del gen de la MTHFR, que se presenta con carácter homocigoto en un 13 % de la población general. HIPERLIPEMIA FAMILIAR COMBINADA (HFC) Características clínicas y bioquímicas La HFC es una enfermedad frecuente. Se calcula que la padece el 1-2% de la población y aunque no hay datos específicos sobre España, esto supondría en nuestro país entre y afectados. La HFC presenta una herencia compleja y practicamente desconocida y que confiere una gran riesgo aterotrombótico (alrededor de un 30% de pacientes con infarto agudo de miocardio la padecen) (15). El diagnóstico de la HFC también es complejo por cuanto el paciente puede presentar diversos fenotipos hiperlipémicos (IIa, IIB y IV) a lo largo del tiempo y se necesitan datos clínicos y bioquímicos no sólo del paciente sino de los familiares para establecer el diagnóstico (ya que uno de los criterios diagnósticos es la presencia en éstos de un fenotipo hiperlipémico diferente al del paciente). Aunque clasicamente se consideraba que la enfermedad no se manifiesta hasta los 20 años, hasta un 40% de los niños de estas familias presenta alteraciones lipídicas (16). Por otra parte, y también recientemente, diversos estudios han cuestionado la eficacia del uso de los criterios lipídicos clásicos (colesterol y triglicéridos) para distinguir entre afectos y no afectos en familias con HFC, ya que el error podría llegar a ser del 40% (15). Estos estudios han sugerido que se podría clasificar mejor a los sujetos afectos añadiendo a la determinación de triglicéridos, las de apob y el tamaño de las partículas de LDL (15,17). El tratamiento de la HFC también presenta dificultades derivadas del riesgo de tratar a la vez con fibratos y estatinas la hipertrigliceridemia y la hipercolesterolemia (respectivamente) o de ir variando estos fármacos en función del fenotipo hiperlipémico que en ese momento presente el paciente. Fisiopatología La característica fisiopatológica fundamental de la HFC es la sobreproducción de VLDL (15). Esta parece ser consecuencia de una sobreproducción de apob hepática como respuesta a una mayor llegadoa de ácidos grasos libres al hígado en ayunas (por falta de retención de los mismos a nivel de tejido adiposo) y/o en período postprandial (por defecto de captación de los mismos por el tejido adiposo) (18).Se han descrito como alteraciones frecuentes asocidas a la HFC el enlentecimiento del catabolismo de quilomicrones y la insulino-resistencia (19,20). Genética Los scans genómicos realizados en familias con la enfermedad de diferentes paises han dado resultados poco consistentes, con la excepción parcial de las señales que proceden del cromosoma 1q21-23 (21,22), en las cercanías de donde se encuentra el gen de la apolipoproteína A-II. Resulta especialmente relevante que el animal modificado genéticamente por sobreexpresar esta proteína presente las características propias de la HFC (23). En conjunto, estos estudios demuestran que esta enfermedad no es de herencia autosómica dominante, sino oligogénica. Es posible que los errores de diagnóstico bioquímico y clínico sean responsables en parte de los resultados modestos obtenidos en la búsqueda sistemática de los genes causantes de HFC. Impreso normalizado de solicitud de constitución y financiación de Redes TIC de Centros: Plan estratégico Página 13 de 97

14 Antecedentes Tratamiento de las Hiperlipemias Genéticas. El tratamiento modifica profundamente el fenotipo clínico de las hiperlipemias genéticas. La introducción de los inhibidores de la hidroxy metil glutaryl coenzimo A reductasa (estatinas) ha revolucionado el tratamiento de las hiperlipemias genéticas, especialmente de la HF. El impacto clínico de las estatinas fue confirmado en una cohorte de pacientes con HF. El riesgo relativo para la mortalidad coronaria disminuyó a partir de 1992, y fue especialmente manifiesto en el grupo de edad másjóven (de 20 a 59 años) (24).Además, el tratamiento con estatinas tiene otros efectos beneficiosos en la hipercolesterolemia familiar. Un estudio reciente ha demostrado un efecto beneficioso en el tratamiento con estatinas a largo plazo sobre la función endotelial de pacientes con HF (25). Estos hallazgos enfatizan la importancia del tratamiento con estatinas en los pacientes con hipercolesterolemia familiar. Sin embargo, la respuesta al tratamiento farmacológico no siempre es homogénea. Esto se puede deber en parte a las diferentes mutaciones en el gen del r- LDL, explicándo la disminución de la eficacia en los portadores de mutaciones más severas. Por tanto, se necesitan estudios amplios en los que se analice el efecto del tratamiento en función del defecto genético tanto a nivel individual como familiar. Impreso normalizado de solicitud de constitución y financiación de Redes TIC de Centros: Plan estratégico Página 14 de 97

15 Expediente Nº RTIC-G MEMORIA DEL PROYECTO CIENTÍFICO TÍTULO DEL PROYECTO CIENTÍFICO: ESTUDIO GENÉTICO, METABÓLICO, CLÍNICO, TERAPÉUTICO Y EPIDEMIOLÓGICO DE LAS HIPERLIPEMIAS HEREDITARIAS EN ESPAÑA. Bibliografía más relevante 1.- Goldstein, J. L., H. H. Hobbs, and M. S. Brown Familial hypercholesterolemia. In: The metabolic and molecular basis of inherited disease. C.R. Scriver, A.L. Beaudet, W.S. Sly, and D. Valle, editors. McGraw-Hill, New York. Vol. II, Chapter: 120: Se trata de un capítulo publicado uno de los libros de mayor prestigio sobre enfermedades hereditarias que abarca desde la fisiopatologia, genética, diagnóstico y tratamiento de la HF publicado por tres autores que son probablemente los que tengan un mayor conocimiento de la HF, dos de ellos Goldstein y Brown, fueron galardonados con el premio Nobel por sus trabajos sobre la HF. 2.- Innerarity TL, Weisgraber KH, Arnold KS. Mahley RW, Krauss RM, Vega GL, Grundy SM. Familial defective apolipoprotein B-100: low density lipoproteins with abnormal receptor binding. Proc Natl Acad Sci USA 1987; 84: Estos autores fueron los primeros en observar que determinado pacientes con hipercolesterolemias autosómicas dominantes tenian los r-ldl funcionales y que sus LDL tenían una capacidad disminuida de unión a lor r-ldl, lo cual era sugestivo de que exitía un defecto genetico no localizado en el locus del gen r-ldl 3.- Varret M, Rabès J.P, Saint-Jore B, Cenarro A, Marioni J.C, Civeira F, et al. A third major locus for autosomal hypercholesterolemia maps to 1p34.1-p32. Am J Hum Genet 1999; 64: En este artículo del que son autores tres miembros del equipo investigador del presente proyecto demostramos que aparte de la HF cuyo defecto se encuentra localizado en el gen del r-ldl, cromosoma 19, y de la apo B defectuosa familiar (defecto en el gen de la apo B, cromosoma 2), hay otros loci genéticos que están implicados en la expresión de hipercolesterolemias de transmisión autosómicas dominantes, uno de ellos esta situado en cromosoma 1 región p34.1-p Garcia CK, Wilund K, Arca M, Zuliani G, Fellin R, Maioli M, Calandra S,Bertolini S, Cossu F, Grishin N, Barnes R, Cohen JC, Hobbs HH. Autosomal recessive hypercholesterolemia caused by mutations in a putative LDL receptor adaptor protein. Science 2001;292: Mapeo del locus ARH y descripción de las principales mutaciones que generan hipercolesterolemia autosómica recesiva encontradas hasta la fecha. 5.- Familial Hypercholesterolemia (FH). Report of a World Health Organization Study Group. Human genetics Programme. Geneva, Alonso R, Castillo S, Civeira F, Puzo J, de la Cruz, Pocovi M, Mata M. Hipercolesterolemia familiar heterocigota en España. Estudio descriptivo de 819 Casos no relacionados. Med Clin (Barc) 2002; 118 : Memoria del proyecto científico: Bibliografía más relevante Página 15

16 Bibliografía más relevante Se trata de un articulo de publicado por miembros del Equipo Investigdor en donde se analizan las características clínicas de la HF en un amplio grupo de pacientes no relacionados correspondientes al Registro Español de HF. 7.- Umans-Eckenhausen MAW, Defesche JC, Sijbrands EJG, Scheerder RLJM, Kastelein JJP. Review of first 5 years of screening for familial hypercholesterolemia in the Netherlands. Lancet 2001; 357: En este artículo los utores cuesionan en base de sus resultados el error (diagnóstico equivocado) que se comete utilizando como criterio de diagnóstico de HF la determinación de CT o c-ldl en plasma incluso en familias en las que previamente se sabe que hay un paciente con HF por diagnóstico genético. 8.- WHO. Human Genetics Program. Familial Hypercholesterolaemia, a global perspective. Ginebra: WHO 1999 Se trata de un informe auspiciado por la Organización Mundial de la Salud dosnde se analiza la problematica de la HF en su programa MedPed (Make Early Diagnosis-Prevent Early Deaths in MEDical PEDigrees) abordando temas tan diversos que abarcan desde el diagnóstico a la calidad de vida de los pacientes con HF 9.- Mata P, Alonso R, Castillo S, Pocovi M, MedPed and the Spanish Familial Hypercholesterolemia Foundation. Atherosclerosis 2002; Suppl 3: 9-11 En este artículo se presentan las caracteristicas de la Red de unidades de lípidos, de la forma de funcionamiento de Grupo Español del estudio dela HF y los tipos de mutaciones encontradas. 10.-Jansen ACM, van Wissen S, Defesche, JC, Kastelein JJP. Phenotypic variability in familial hypercholesterolemia: an update. Curr Opin Lipidol 2002;13: Se trata de un articulo de revisión publicado recientemente donde se analizan la variabilidad del fenotipo de la HF y los posibles factores que intervienen Edwards PA, Tabor D, Kast HR, Venkateswaran A. Regulation of gene expression by SREBP and SCAP. Biochim Biophys Acta 2000; 1529: Este artículo discute como se regula la expresión por las proteinas que se unen a loselementos de respuesta a esteroles entre ellos el del promotor del gen del r-ldl 12- Berge KE, Tian H, Graf GA, Yu L, Grishin NV, Schultz J et al. Accumulation of dietary cholestgerol in sitosterolemia caused by mutations in adjacent ABC transporters. Science 2000; 290: Allayee H, Bryan A, Lusis AJ. An absorbing study of cholesterol. Science 2000; 290: Las dos referencias anteriores se corresponden al descubrimiento de los transportadores ABCG5 y Memoria del proyecto científico: Bibliografía más relevante Página 16

17 Bibliografía más relevante ABCG8 y su implicación en el transporte intestinal y hepático de esteroles. La segunda referencia es la editorial del citado articulo en la que se resalta la importancia de estos dos genes en la variabilidad del colesterol en la población y no solo en casos raros de sitosterolemia. 14.-Tonstad S, Refsum H, Ueland PM. Association between plasma total homocysteine and parental history of cardiovascular disease in children with familial hypercholesterolemia. Circulation 1997;96: Los autores observan que los niños conhf que tienen mas elevada la homocisteina plasmatica proceden de familias con una mayor agregación de enfermedad coronaria Veerkamp MJ, de Graaf J, Bredie SJH, Hendriks JCM, Demacker PNM, Stalenhoef AFH. Diagnosis of familial combined hyperlipidemia based on lipid phenotype expression in 32 families. Arteriosclerosis, Thrombosis and Vascular Biology 2002; 22: Los autores demuestran que tras una reevaluación de 32 familias con HFC, tras cinco años de un primer estudio, la clasificación en afectos y no afectos es menos consistente de lo esperado y deseable. El 26% de los considerados afectos no lo serían según el segundo análisis, mientras que un 14% de no afectos en elprimero pasarían a serlo en el segundo. Si a los criterios lipídicos utilizados (colesterol y triglicéridos mayores del percentil 90) se les añade la concentración de apob y el tamaño de partículas de LDL, la consistencia del diagnóstico HFC en el tiempo aumenta notablemente. 16.-Ribalta J, La Ville AE, Plana N, Masana L. Hiperlipemia familiar combinada: detección y caracterización del fenotipo hiperlipémico en niños y adolescentes. Medicina Clínica 1997; 109: Trabajo de miembros del grupo investigador que demuestra que, en contra de la opinión generalizada previa, el 43% de los hijos de familias con HFC presentan hiperlipemia antes de los 20 años. 17.-Sniderman AD, Castro Cabezas M, Ribalta J, Carmena R, de Bruin TWA, de Graaf J, Erkelens DW, Humphries SE, Masana L, Real JT, Talmud P, Taskinen MR. A proposal to redefine familial combined hyperlipidemia. European Journal of Clinical Investigation 2002; 32: Los autores reunidos en un simposium internacional sugieren la necesidad de redefinir la HFC como una enfermedad caracterizada fundamentalmente por el aumento de la concentración plasmática de triglicéridos y de apob Arner P. Is familial combined hyperlipidemia a genetic disorder of adipose tissue?. Current Opinion in Lipidology 1997; 8: Propuesta de que el defecto fisiopatológico fundamental de la HFC se encuentra a nivel del tejido adiposo, bien por deficiencia de captación de ácidos grasos libres por los adipocitos durante el período postprandial, bien por su deficiente retención en ayunas. En cualquiera de los casos, se originaría un aumento del flujo de ácidos grasos libres al hígado, que incrementa la síntesis y secreción de VLDL por este órgano. Memoria del proyecto científico: Bibliografía más relevante Página 17

18 Bibliografía más relevante 19.-Ascaso JF, Real JT, Merchante A, Rodrigo A, Carmena R. Lipoprotein phenotype and insulin resistance in familial combined hyperlipidemia. Metabolism 2000; 49: Demostración, por miembros del grupo investigador, que la insulino-resistencia acompaña a cualquiera de los tres fenotipos hiperlipémicos que puede presentar la HFC y que ello puede hacer aconsejable el tratamiento simultáneo de la misma con el de la hiperlipemia Meijssen S, Castro Cabezas M, Twickler TB, Jansen H, Erkelens DW. In vivo evidence of defective postprandial and postabsortive free fatty acid metabolism in familial combined hyperlipidemia. Journal of Lipid Research 2000; 41: Demostración de que existe un incremento notable de triglicéridos y ácidos grasos libres en el período postprandial de pacientes con HFC. Ello es una demostración de una de las hipótesis de Arner (ref. número 17) si bien el número de pacientes estudiado es pequeño Pajukanta P, Nuotio I, Terwilliger JD, Porkka KVK, Ylialo K, Pihlajamäki J, Suolalainen AJ, et al. Linkage of familial combined hyperlipidemia to chromosome 1q21-q23. Nature Genetics 1998; 18: Primera demostración en familias con HFC finlandesas (de una alta homogeneidad étnica y cultural) de que existe un locus en el cromosoma 1q21-q23 (cerca de donde se encuentra el gen de la apoa-ii) que se asocia con la enfermedad. Pese a ello, resulta evidente de que el LOD score obtenido demuestra que la HFC no es, como se pensaba, autosómica dominante sino oligogénica. 22.-Myers RH, Borecki IB, Arnett DK, Hunt SC, Province MA, Djousse L, Leppert MF. Replication of linkage of familial combined hyperlipidemia to chormosome 1q with additional heterogenous effect of apolipoprotein A-I/C-III/A-IV locus. Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology 2000; 20: Los resultados del estudio anterior se han reproducido en la mayoría de estudios efectuados en otros países como en USA (este estudio), China, Alemania y Reino Unido. 23.-Escolà-Gil JC, Julve J, Marzal-Casacuberta À, Ordóñez-Llanos J, González-Sastre F, Blanco- Vaca F. Expression of human apolipoprotein A-II in apolipoprotein E-deficient mice induces features of familial combined hyperlipidemia. Journal of Lipid Research 2000; 41: Demostración de que los ratones transgénicos de apoa-ii poseen todas las características Bioquímicas y fisiopatológicas para ser considerados un buen modelo animal de HFC Mortality in treated heterozygous familial hypercholesterolemia: implications for clinical management. Scientific Steering Committee on behalf of teh Simon Broome Register Group. Atherosclerosis 1999; 142: Memoria del proyecto científico: Bibliografía más relevante Página 18

19 Bibliografía más relevante 25.- Alonso R, Mata P, De Andrés R, et al. Sustained long-term improvement of arterial endothelial function in heterozygous familial hypercholesterolemia patients treated with simvastatin. Atherosclerosis 2001; 157: Por primera vez, el efecto de un tratamiento a largo plazo con estatinas es estudiado en pacientes con HF. No solo el efecto hipolipemiante explican el efecto beneficioso encontrado sobre la función endotelial. Memoria del proyecto científico: Bibliografía más relevante Página 19

20 Expediente Nº RTIC-G MEMORIA DEL PROYECTO CIENTÍFICO TÍTULO DEL PROYECTO CIENTÍFICO: ESTUDIO GENÉTICO, METABÓLICO, CLÍNICO, TERAPÉUTICO Y EPIDEMIOLÓGICO DE LAS HIPERLIPEMIAS HEREDITARIAS EN ESPAÑA. Hipótesis Memoria del proyecto científico: Hipótesis Página 20