Int. Cl. 6 : C07H 5/ kfecha de presentación: k Solicitante/s: ROTTA RESEARCH B.V. Amsterdam (Swiss Branch) Via Motta, 26 Lugano, CH

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1 k 19 OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS ESPAÑA 11 k Número de publicación: k Número de solicitud: k Int. Cl. 6 : C07H /06 A61K 31/70 k 12 SOLICITUD DE PATENTE A1 22 kfecha de presentación: k Solicitante/s: ROTTA RESEARCH B.V. Amsterdam (Swiss Branch) Via Motta, 26 Lugano, CH k Prioridad: CH 24/96 43 kfecha de publicación de la solicitud: k Inventor/es: De Wan, Maura y Volpi, Giuseppe k 43 Fecha de publicación del folleto de la solicitud: k 74 Agente: Ruiz Tomé, Francisco Fernando k 4 Título: Método para preparar sales mixtas de glucosamina. ES A1 k 7 Resumen: Método para preparar sales mixtas de glucosamina. Un método para preparar una forma cristalina terapéuticamente activa de sulfato de glucosamina que es estable a temperatura y humedad ambientes, y corresponde a la fórmula empírica (I), en la cual M representa un metal seleccionado entre el grupo que consiste en Na, K, Ca o Mg, x=1siy=2,y x=2siy=1, en la que se hacen reaccionar hidrocloruro de glucosamina y un sulfato de metal seleccionado entre Na, K, Ca y Mg en la relación estequiométrica definida por la fórmula (I), en un disolvente acuoso, y la forma cristalina estable es precipitada mediante la adición de un agente precipitante líquido miscible con agua. Venta de fascículos: Oficina Española de Patentes y Marcas. C/Panamá, Madrid

2 DESCRIPCION Método para preparar sales mixtas de glucosamina. La presente invención se refiere a un método nuevo y ventajoso para sintetizar sales mixtas de glucosamina, incluidas en su fórmula, glucosamina protonada y un ion de metal alcalino o alcalino-térreo tal como sodio, potasio, calcio o magnesio como cationes y cloruros y sulfatos como iones negativos. La fórmula empírica mínima de las sales anteriormente mencionadas se puede representar como sigue: 1 en la cual: M representa Na, K, Ca o Mg, y x = 1 si y = 2, x = 2 si y = Estas sales mixtas están en forma cristalina con puntos de fusión por encima de 0 C y son estables a temperatura y humedad ambientes. El sulfato de glucosamina es una sustancia bien conocida que es extremadamente importante en el tratamiento de enfermedades reumáticas y artríticas tanto agudas como crónicas y artrosis y, de hecho, en todos los estados patológicos que se originan a partir de disfunciones metabólicas que afectan al tejido óseo y de las articulaciones. La síntesis de sulfato de glucosamina se describió por Breuer en 1898 (Chem. Ber. 31, 2197) y un método industrial constituye el objeto del documento GB , de la patente de EE.UU y de la patente suiza Sin embargo, esta sustancia tiene algunas desventajas, tales como el hecho de que es altamente higroscópica, y la facilidad con la que el grupo amino se oxida cuando no está completamente salificado, lo que los hace prácticamente imposible de usar en la preparación de formas farmacéuticas para uso en terapia humana. Por lo tanto, las formas orales tales como los comprimidos, cápsulas y polvos requieren la presencia de antioxidantes en sus formulaciones, pero estas no resuelven el problema de la higroscopicidad; por tanto, es necesario preparar estas formas en entornos con una humedad relativa no mayor de %, con resultados todavía insatisfactorios, y la inestabilidad de estas formas a lo largo del tiempo las hace prácticamente imposibles de usar. Consideraciones similares se pueden aplicar a las formas rectales (supositorios) que se degradan muy rápidamente, incluso si se mantienen en entornos secos y refrigerados. Las formas inyectables son suficientemente estables para fines prácticos, sin embargo se encuentran dificultades para su preparación. No es posible preparar formas liofilizadas porque, invariablemente, se obtienen productos que tienen la apariencia y consistencia de aceites viscosos y, como tales, son prácticamente inutilizables. Los problemas del sulfato de glucosamina, que son tales que impiden su uso práctico para el tratamiento en el hombre, fueron superados por la invención de la glucosamina-sp y de su método de preparación descritos en la patente de EE.UU La glucosamina-sp es una sal mixta en cuya fórmula la glucosamina protonada y el ion Na + aparecen como cationes y los iones cloruro y sulfato como aniones, según la siguiente fórmula empírica: 2

3 1 2 3 Esta es una sustancia cristalina no higroscópica con un punto de fusión por encima de 0 C, que es estable en condiciones normales de temperatura y humedad relativa. Tiene también propiedades farmacológicas prácticamente iguales a las del sulfato de glucosamina, con la ventaja de ser fácilmente utilizable en la preparación de formas farmacéuticas orales y parenterales para uso en terapia humana. El método de preparación de la glucosamina-sp descrito en la patente de EE.UU consiste esencialmente en disolver sulfato de glucosamina y cloruro de sodio en agua destilada y separar la glucosamina-sp mediante la adición de agentes precipitantes líquidos solubles en agua en los que el sulfato de glucosamina tiene una solubilidad no mayor que 0,1 % (peso/volumen). La acetona, etanol, acetonitrilo, tetrahidrofurano y dioxano se mencionan como agentes precipitantes en los ejemplos. Además de ello, en la patente, las relaciones volumétricas entre el disolvente y los agentes precipitantes, así como los demás parámetros de la reacción tales como temperaturas, tiempos de contacto y velocidades de agitación, están estrictamente fijados. El sulfato de glucosamina que se usa como el producto de partida en la síntesis de la glucosamina-sp se produce a su vez a partir de hidrocloruro de glucosamina, según la patente suiza 2.861, mediante una síntesis que consiste esencialmente en dos etapas que se pueden resumir como sigue: 1. Liberacióndelaformaalfadelaglucosaminadesusalconácido clorhídrico en un medio alcohólico acuoso, en presencia de trietilamina. 2. Salificación de la forma alfa de la glucosa-mina con la cantidad estequiométrica de ácido sulfúrico en un medio de éter etílico para producir sulfato de glucosamina. Por lo tanto, el procedimiento completo que conduce a la síntesis de glucosamina-sp, descrito en la patente de EE.UU a partir de hidrocloruro de glucosamina se puede representar esquemáticamente mediante las 3 etapas siguientes: 4 0 3

4 La presente solicitud de patente describe un nuevo método para sintetizar sales mixtas de glucosamina, entre las cuales está incluida también la glucosamina-sp. Tiene la ventaja de producir esta sustancia y sus análogos, en cuya fórmula molecular pueden aparecer alternativamente como cationes no solamente sodio, sino otros elementos de metales alcalinos y elementos alcalino-térreos tales como K, Ca y Mg, en una etapa única a partir de hidrocloruro de glucosamina. Este método evita las etapas de liberar la glucosamina básica a partir de su hidrocloruro en la posterior salificación con ácido sulfúrico, haciendo innecesario el laborioso método de preparar sulfato de glucosamina que se usa como el producto de partida en la síntesis de glucosamina-sp. En el método de la presente invención, como se define mediante las reivindicaciones anejas, en lugar de sulfato de glucosamina y cloruro de sodio, los productos de partida son hidrocloruro de glucosamina y el sulfato del metal que va a ser insertado en la composición de la sal mixta. Cuando se hacen reaccionar en las relaciones estequiométricas correctas y en condiciones de reacción similares a las descritas en la patente de EE.UU , estos dan lugar directamente a un producto que corresponde directamente a glucosamina-sp, en el caso de una combinación dehidrocloruro de glucosamina y sulfato de sodio, o un análogo del mismo en el caso de una combinación de hidrocloruro de glucosamina y el sulfato de otros de los metales alcalinos o alcalino-térreos ya mencionados. El progreso tecnológico asociado con el método de la presente invención es muy claro teniendo en consideración las ventajas que ofrece en comparación con el actual estado de la técnica. Estas ventajas se pueden resumir como sigue: 1. Al contrario que el sulfato de glucosamina, el hidrocloruro de glucosamina es una sustancia estable y, por lo tanto, no requiere precauciones particulares en lo que se refiere a su almacenamiento, en términos tanto de tiempo como de temperatura y humedad. 2. Los costes son inferiores en términos de disolventes y reactivos (la síntesis parte directamente de hidrocloruro de glucosamina sin necesidad de sintetizar sulfato de glucosamina a partir de hidrocloruro de glucosamina, en un círculo vicioso). 3. Los costes de energía son inferiores (nuevamente por las razones dadas en el apartado n 2). 4. Hay un desgaste menor de la instalación (nuevamente por las razones dadas en el apartado n 2).. Se requiere menos mano de obra (el procedimiento tiene lugar en una única etapa en lugar de en tres etapas). 6. Se obtiene un rendimiento prácticamente cuantitativo. El método preferido de preparación según la presente invención comprende esencialmente las etapas de disolver el sulfato preseleccionado, con agitación, en una cantidad de agua destilada variable entre 4, y 6, (preferentemente ) veces el peso del sulfato, a una temperatura no superior al punto de ebullición del agua, reducir seguidamente la temperatura de forma que no sobrepase C (preferentemente 0 C), añadir la cantidad estequiométrica de hidrocloruro de glucosamina, nuevamente con agitación, mantener la temperatura constante hasta que se haya disuelto completamente y, nuevamente con agitación y manteniendo constante la temperatura, precipitar la sal mixta de glucosamina mediante la adición de un agente precipitante liquido que sea miscible con agua y en el que la sal mixta de glucosamina tenga una solubilidad no mayor que 0,1 % (p/v). 4

5 1 2 Por ejemplo, se pueden usar acetona, etanol, acetonitrilo, tetrahidrofurano y dioxano como agentes precipitantes añadidos en volúmenes -7 (preferentemente 6) veces mayores que el volumen de agua destilada usada para disolver las sales de partida. El agente precipitante se añade ventajosamente durante un período de 2, a 3, (preferentemente 3) horas, después de lo cual la suspensión resultante de la sal mixta se mantiene, con agitación lenta, durante un período adicional que varía en el intervalo entre 12 y 14 (preferentemente 18) horas a una temperatura entre 2 y 3 C (preferentemente C) para permitir tanto una precipitación completa como el correcto crecimiento de cristales. Cuando haya transcurrido el período de tiempo necesario, la masa de la reacción se enfría a una temperatura entre 0 y C (preferentemente C)ylasalmixtaasí obtenida se separa por filtración y seguidamente es secada en una estufa de aire forzado a una temperatura entre 4 y 6 C (preferentemente C) durante un período variable entre 12 y 24 (preferentemente 18) horas. Ejemplo 1: Preparación de glucosamina-sp con el uso de acetona como el agente precipitante Se introdujeron 7 ml de agua destilada en un matraz de cuatro bocas con una capacidad utilizable de 70 ml, con un agitador de paletas, termómetro y condensador y la temperatura se llevó a70 Cpor medio de un baño de calentamiento eléctrico. Se añadieron con agitación moderada (170 +/- revoluciones por minuto) 14,21 g (0,1 moles - P.M. 1,06) de sulfato de sodio previamente secado hasta un peso constante en una estufa a 70 C,ylamasasemantuvoa70 C con agitación hasta que se completó la disolución, lo que se consiguió en aproximadamente minutos. Tras completar la disolución, la temperatura se redujo a 0 Cyseañadieron 43,13 g (0,2 moles - P.M. 21,64) de hidrocloruro de glucosamina, siendo mantenida la temperatura constante y manteniéndose la agitación a 170 +/- revoluciones por minuto. En esta etapa, una temperatura mayor que Cpodría conducir a un amarilleo de la masa de la reacción, con una reducción tanto del rendimiento como de la pureza de la sal mixta final. En las condiciones recomendadas, la disolución completa se consiguió en aproximadamente 4 minutos, después de lo cual la temperatura se llevó a C y seguidamente se llevó a cabo la precipitación A temperaturas por debajo de 0 C se llevó a cabo una precipitación demasiado rápida, con la formación de aglomeraciones cristalinas que incorporan disolvente e impurezas., mientras que por encima de C puede ocurrir un amarilleo indeseable de la suspensión. La precipitación se efectuó coneluso de cc de acetona, que se hizo gotear en un período aproximado de 3 horas (con menos de 2, horas la precipitación es demasiado rápido, y con más de 3, horas no hay ventajas prácticas) y con agitación a 1 +/- revoluciones por minuto, que aseguró el correcto equilibrio entre la homogeneización de las fases y la formación de la cantidad óptima de semillas de cristalización. Tras completar la adición del agente precipitante, la separación estuvo completa y el precipitado se acondicionó reduciendo la temperatura a C y reduciendo la velocidad de agitación a 0 +/- revoluciones por minuto, durante un período de 18 horas. En estas condiciones, se produjo un producto de elevada pureza, ya que la temperatura de C favorece la expulsión de cualesquiera impurezas y la reorganización de los cristales en la etapa de acondicionamientocon laabsorción de cualesquiera iones que permanezcan en solución, mientras que la agitación suave posibilidad que la totalidad de la masa precipitada se mantenga constantemente en contacto con la solución sin alteración de la uniformidad de la masa cristalina. El tiempo anteriormente indicado es el requerido para permitir que se complete el procedimiento anteriormente descrito. Después de 18 horas, la temperatura se redujo a Cpormediodeunbaño de agua con hielo y la masa cristalina obtenida se separó por filtraciónconunfiltrobuchner. Después de que la torta de filtración húmeda se comprimid bien con el fin de eliminar tanto disolvente como fuera posible, se transfirió al interior de una estufa de aire forzado y se secó a C durante 18 horas.

6 Se obtuvieron,1 g (rendimiento 96,1 %) de cristales color blanco cremoso con un sabor amargo. Las características analíticas químicas y físicas de la glucosamina-sp obtenida como se describe en el Ejemplo 1 se pueden superponer perfectamente con las descritas en la patente de EE.UU Estas características son: Microanálisis para C 12 H 28 Cl 2 N 2 Na 2 SO 14 : Título de glucosamina: Título de sulfatos: Título de cloruros: Título de sodio: Apariencia, color, olor: % teórico % encontrado Carbono 2,14 2,23 Hidrógeno 4,92 4,86 Nitrógeno 4,88 4,97 97, - 2,% (título potenciométrico con NaOH en un medio acuoso). 97, - 2, % (título complejo métrico con EDTA en un medio básico de NH 3 después de precipitación con BaCl 2 ). 97, - 2, % (título argentométrico). 97, - 2, % (en absorción atómica). Polvo cristalino de color crema pálido, inodoro y con un sabor fuertemente amargo. Solubilidad (2 C-p/v): Muy soluble (aprox. %): Agua Ligeramente soluble (aprox. 1 %): Metanol Muy ligeramente soluble (aprox. 0,03 %): Etanol Prácticamente insoluble (< 0,01 %): Acetona, acetonitrilo, tetrahidrofurano, dioxano. Insoluble: Benceno, cloroformo, tetracloruro de carbono, cloruro de metileno, ligroína, éter etílico. ph: El ph de una solución acuosa saturada de glucosamina-sp a Ces3+/-0,2. Coeficiente de partición: El coeficiente de partición de glucosamina-sp determinado a2 Centampón de fosfato (ph 6,8)/n-octanol tiene un valor prácticamente infinito. Punto de fusión: >0 C (con descomposición parcial por encima de 0 C). Rotación específica: 2 +/- 0,2 (en equilibrio en solución acuosa al %). Una investigación con rayos Roentgen llevada a cabo tanto sobre muestras de glucosamina-sp preparada según el método descrito en la presente solicitud de patente como sobre muestras preparadas según la patente de EE.UU mostró que no hubo diferencias entre las dos sustancias desde un punto de vista cristalográfico. De hecho, tras un examen, los valores angulares y las secuencias de intensidad de los modelos de difracción (Debye) de los polvos de las muestras de los dos tipos se pudieron superponer y, por lo tanto, fueron indistinguibles. Ejemplo 2: Preparación de glucosamina-sp con el uso de etanol como el agente precipitante Se siguió elmétodo descrito en el Ejemplo 1 con el uso de etanol absoluto en lugar de acetona. Se obtuvieron 4,3 g (94,7 %) de glucosamina-sp que tenía las mismas características descritas en el Ejemplo 1. 6

7 Ejemplo 3: Preparación de glucosamina-sp con el uso de acetonitrilo como el agente precipitante Se siguió elmétodo descrito en el Ejemplo 1, con el uso de acetonitrilo en lugar de acetona. Se obtuvieron,3 g (96, %) de glucosamina-sp que tenía las mismas características descritas en el Ejemplo 1. Ejemplo 4: 1 Preparación de glucosamina-sp con el uso de tetrahidrofurano, como el agente precipitante Se siguió el método descrito en el Ejemplo 1, con el uso de tetrahidrofurano, en lugar de acetona. Se obtuvieron 3,7 g (93,7 %) de glucosamina-sp que tenía las mismas características descritas en el Ejemplo 1. Ejemplo : Preparación de alucosamina-sp con el uso de dioxano como el agente precipitante Se siguió el método descrito en el Ejemplo 1, con el uso de dioxano en lugar de acetona. Se obtuvieron 3,4 g (93,1 %) de glucosamina-sp que tenía las mismas características descritas en el Ejemplo 1. Ejemplo 6: 2 Preparación de la sal mixta partiendo de hidrocloruro de glucosamina y sulfato de potasio Se siguió exactamente el mismo método descrito en el Ejemplo 1, siendo sustituido en sulfato de potasio con 17,43 g (0,1 moles - P.M. 174,3) de sulfato de potasio. Se obtuvieron 8,9 g (rendimiento 97,3 %) de cristales blancos cremosos con un sabor amargo y que tenían las siguientes características químicas y físicas: Microanálisis para C 12 H 28 Cl 2 N 2 K 2 SO 14 : 3 % teórico % encontrado Carbono 23,80 23,94 Hidrógeno 4,66 4, Nitrógeno 4,63 4, Título de glucosamina: Título de sulfatos: Título de cloruros: Título de potasio: Apariencia, color, olor: Solubilidad (2 C-p/v): Muy soluble (aprox. %): Ligeramente soluble (aprox. 1 %): Muy ligeramente soluble (aprox. 0,03 %): Prácticamente insoluble (<0,01 %): Insoluble: 97, - 2,% (titulo potenciométrico con NaOH en un medio acuoso). 97, - 2, % (título complejométrico con EDTA en un medio básico de NH 3 después de precipitación con BaCl 2 ). 97, - 2, % (título argentométrico). 97, - 2, % (en absorción atómica). Polvo cristalino de color crema pálido, inodoro y con un sabor fuertemente amargo. Agua Metanol Etanol Acetona, acetonitrilo, tetrahidrofurano, dioxano. Benceno, cloroformo, tetracloruro de carbono, cloruro de metileno, ligroína, éter etílico. 7

8 Ejemplo 7: ph: El ph de una solución acuosa saturada de la sal mixta a Ces 3 +/- 0,2. Coeficiente de partición: El coeficiente de partición de la sal mixta determinado a 2 C en tampón de fosfato (ph 6,8)/n-octanol tiene un valor prácticamente infinito. Punto de fusión: >0 C (con descomposición parcial por encima de 0 C). Rotación específica: 49 +/- 0,2 (en equilibrio en solución acuosa al %). Preparación de la sal mixta a partir de hidrocloruro de glucosamina y sulfato de calcio dihidrato 1 Se siguió exactamente el mismo método descrito en el Ejemplo 1, siendo sustituido el sulfato de sodio con 1,42 g de sulfato de calcio dihidrato (0,1 moles - P.M. 14,16). Se obtuvieron,6 g (rendimiento 98 %) de cristales blancos-cremosos que tenían las siguientes características analíticas químicas y físicas: Microanálisis para C 12 H 28 Cl 2 N 2 CaSO 14 : Título de glucosamina: Título de sulfatos: Título de cloruros: Título de calcio: Apariencia, color, olor: % teórico % encontrado Carbono 2, 2, Hidrógeno 4,97,07 Nitrógeno 4,94 4,87 97, - 2,% (título potenciométrico con NaOH en un medio acuoso). 97, - 2,% (título complejométrico con EDTA en un medio básico de NH, después de precipitación con BaCl 2 ). 97, - 2, % (título argentométrico). 97, - 2, % (en absorción atómica). Polvo cristalino de color crema pálido, inodoro y con un sabor fuertemente amargo. Solubilidad (2 C-p/v): Muy soluble (aprox. %): Agua Ligeramente soluble (aprox. 1 %): Metanol Muy ligeramente soluble (aprox. 0,03 %): Etanol Prácticamente insoluble (<0,01 %): Acetona, acetonitrilo, tetrahidrofurano, dioxano. Insoluble: Benceno, cloroformo, tetracloruro de carbono, cloruro de metileno, ligroína, éter etílico. ph: El ph de una solución acuosa saturada de glucosamina-sp a C es 3 +/- 0,2. Coeficiente de partición: El coeficiente de partición de glucosamina-sp determinado a 2 C en tampón de fosfato (ph 6,8)/n-octanol tiene un valor prácticamente infinito. Punto de fusión: >0 C (con descomposición parcial por encima de 0 C). Rotación específica: 2 +/- 0,2 (en equilibrio en solución acuosa al %). 8

9 Ejemplo 8: Preparación de la sal mixta a partir de hidrocloruro de glucosataina y sulfato de magnesio heptahidrato Se siguió exactamente el mismo método descrito en el Ejemplo 1, siendo sustituido el sulfato de sodio con 24,6 g (0,1 moles - P.M. 246,49) de sulfato de magnesio heptahidrato. Se obtuvieron 2,2 g (94,6 %) de cristales blancos cremosos de sabor amargo y que tenían las siguientes características químicas y físicas: Microanálisis para C 12 H 28 Cl 2 N 2 MgSO 14 : Título de glucosamina: Título de sulfatos: Título de cloruros: Título de magnesio: Apariencia, color, olor: Solubilidad (2 C-p/v): Muy soluble (aprox. %): Ligeramente soluble (aprox. 1 %): Muy ligeramente soluble (aprox. 0,03 %): Prácticamente insoluble (<0,01 %): Insoluble: ph: % teórico % encontrado Carbono 26,12 26,27 Hidrógeno,11,01 Nitrógeno,08,14 97, - 2,% (título potenciométrico con NaOH en un medio acuoso). 97, - 2,% (título complejo métrico con EDTA en un medio básico de NH 3 después de precipitación con BaCl 2 ). 97, - 2, % (titulo argentométrico). 97, - 2, % (en absorción atómica). Polvo cristalino de color crema pálido, inodoro y con un sabor fuertemente amargo. Agua Metanol Etanol Acetona, acetonitrilo, tetrahidrofurano, dioxano. Benceno, cloroformo, tetracloruro de carbono, cloruro de metileno, ligroína, éter etílico. El ph de una solución acuosa saturada de la sal mixta a Ces 3 +/- 0,2. Coeficiente de partición: El coeficiente de partición de la sal mixta determinado a 2 C en tampón de fosfato (ph 6,8)/n-octanol tiene un valor prácticamente infinito. Punto de fusión: >0 C (con descomposición parcial por encima de 0 C). Rotación específica: 4 +/- 0,2 (en equilibrio en solución acuosa al %). Desde un punto de vista de la estabilidad, las sales mixtas de la presente invención, como la glucosamina-sp descrita en la patente de EE.UU , se encontró también que eran resistentes a la temperatura y la humedad y, por tanto, fáciles de mantener y perfectamente utilizables en técnicas farmacéuticas. De hecho, después de 12 meses a 2 C, y % de humedad relativa, la conservación era perfecta (véanse las Tablas 1 y 2) y ensayos adicionales mostraron que solamente bajo condiciones extremadamente severas, es decir, C y 8 % de humedad relativa, fue posible, después de 12 meses, observar un ligero oscurecimiento del color y una ligera reducción del título de glucosamina (aproximadamente 3-4 %) que seguidamente permaneció constante bajo las mismas condiciones de conservación para los siguientes 12 meses (véanse las Tablas 3 y 4). 9

10 TABLA 1 Comparación de la estabilidad de glucosamina-sp preparada según la invención y preparada según la patente de EE.UU a 2 C y % de humedad relativa (R.H.). 1 Tiempo Glucosamina-SP Glucosamina-SP (meses) (invención) US Apariencia Título ( %) Apariencia Título ( %) 0 ajustada ( ) 99,6 ajustada( ) 0,2 3 inalterada 0,2 inalterada 0,4 6 inalterada 0,0 inalterada 99,7 9 inalterada 99,6 inalterada 99,9 12 inalterada 0,4 inalterada 0,3 TABLA 2 Estabilidad de las demás sales mixtas de glucosamina a 2 Cy%R.H. Tiempo Sal mixta de hidrocloruro de glucosamina con 2 (meses) Sulfato de potasio Sulfato de calcio Sulfato de magnesio Apariencia Título ( %) Apariencia Título ( %) Apariencia Título ( %) ajustada ( ) 0,2 ajustada (*) 99,6 ajustada (*) 0, 3 inalterada 0,3 inalterada 99,8 inalterada 0,1 6 inalterada 99,8 inalterada 0,1 inalterada 99,8 9 inalterada 99,6 inalterada 99,7 inalterada 0,3 12 inalterada 0,3 inalterada 0,0 inalterada 0,6 TABLA 3 Comparación de la estabilidad de glucosamina-sp preparada según la invención y preparada según la patente de EE-UU a Cy8%R.H. Tiempo Glucosamina-SP Glucosamina-SP (meses) (invención) US Apariencia Título ( %) Apariencia Título ( %) 0 ajustada ( ) 99,6 ajustada( ) 0,2 3 inalterada 99,8 inalterada 99,7 6 inalterada 0,3 inalterada 99,9 9 inalterada 0,2 inalterada 0,1 12 lig. Amarilleo 96,8 lig. amarilleo 96,4 18 inalterada 97,1 inalterada 96,3 24 inalterada 96,6 inalterada 96,9

11 TABLA 4 Estabilidad de las demás sales mixtas de glucosamina a Cy8%R.H. Tiempo Sal mixta de hidrocloruro de glucosamina con (meses) Sulfato de potasio Sulfato de calcio Sulfato de magnesio 1 Apariencia Título ( %) Apariencia Título ( %) Apariencia Título ( %) 0 ajustada ( ) 0,1 ajustada (*) 99,6 ajustada (*) 0, 3 inalterada 0,3 inalterada 99,4 inalterada 0,6 6 inalterada 99,8 inalterada 0,0 inalterada 0,1 9 inalterada 0,0 inalterada 99,6 inalterada 0,2 12 lig. amari- 9,7 lig. amari- 94,9 lig amari- 97,4 18 lleo 96,2 lleo 94,7 lleo 97,7 24 inalterada 9, inalterada 94,8 inalterada 97,3 inalterada inalterada inalterada ( ): Polvo cristalino de color crema pálido

12 REIVINDICACIONES 1. Un método para preparar una forma cristalina terapéuticamente activa de sulfato de glucosamina que es estable a temperatura y humedad ambientes, y corresponde a la fórmula empírica: 1 en la cual M representa un metal seleccionado entre el grupo que consiste en Na, K, Ca o Mg, x=1siy=2,y x=2siy=1, caracterizado porque se hacen reaccionar hidrocloruro de glucosamina y un sulfato de un metal seleccionado entre Na, K, Ca y Mg en la relación estequiométrica definida por la fórmula (I), en un disolvente acuoso, y la forma cristalina estable es precipitada mediante la adición de un agente precipitante líquido miscible con agua. 2. Un método según la reivindicación 1, que comprende las etapas de: a) disolver el sulfato anteriormente definido, con agitación en una cantidad de 4, a 6, partes en peso de agua destilada por parte en peso de sulfato, b) disolver la cantidad estequiométrica de hidrocloruro de glucosamina en la solución así obtenida,a una temperatura no mayor que C, con agitación, c) precipitar la forma cristalina estable mediante la adición de un agente precipitante líquido que sea miscible con agua y en el que la forma cristalina tenga una solubilidad no mayor que 0,1 % (p/v), con agitación, d) completar la precipitación reduciendo la temperatura de la mezcla, y e) recuperar la forma cristalina precipitada. 3. Un método según las reivindicaciones 1 y 2, en el que el agente precipitante líquido se selecciona entre el grupo que consiste en acetona, etanol, acetonitrilo, tetrahidrofurano y dioxano. 4. Un método según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que el agente precipitante líquido se añade en una proporción de a 7 partes en volumen con relación al volumen de disolvente acuoso, durante un período de 2, a 3, horas.. Un método según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la forma cristalina estable recuperada es secada a una temperatura de 4 a 6 C. 6. Una forma cristalina terapéuticamente activa de sulfato de glucosamina que es estable a temperatura y humedad ambientes y corresponde a la fórmula empírica (I), que se puede obtener por medio de un método según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a. 12

13 OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS ESPAÑA k 11 ES k 21 N. solicitud: k 22 Fecha de presentación de la solicitud: k 32 Fecha de prioridad: INFORME SOBRE EL ESTADO DE LA TECNICA k 1 Int. Cl. 6 : C07H /06, A61K 31/70 DOCUMENTOS RELEVANTES Categoría Documentos citados Reivindicaciones afectadas A EP A (ORION-YHTYMÄ OY FERMION) , 1- reivindicaciones 3-6. X Página 3, líneas 1-39; reivindicacionea A US A (SENIN PAOLO y col.) , todo el documento. 1- X Reivindicación 1. 6 A FR 4929 A (ROTTA RESEARCH LAB.) , reivindicación X A EP 4400 A (HEALTH MAINTENANCE PROGRAMS) , 1-6 reivindicación 1. A GB 6331 A (ROTTA RESEARCH LAB.) , todo el documento. 1-6 Categoría de los documentos citados X: de particular relevancia Y: de particular relevancia combinado con otro/s de la misma categoría A: refleja el estado de la técnica O: referido a divulgación no escrita P: publicado entre la fecha de prioridad y la de presentación de la solicitud E: documento anterior, pero publicado después de la fecha de presentación de la solicitud El presente informe ha sido realizado para todas las reivindicaciones para las reivindicaciones n : Fecha de realización del informe Examinador Página E. Albarrán Gómez 1/1