LABORATORIO DE CALIDAD DE SEMILLAS INSTRUCTIVO INT/S/006

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1 Hoja 1 de 12 LABORATORIO DE CALIDAD INSTRUCTIVO INSTRUCTIVO DE DE SEMILLAS ELABORADO REVISADO REVISADO APROBADO Responsable Técnico Director de Diagnóstico Responsable Calidad Coordinador General de Laboratorios Fecha:

2 Hoja 2 de 12 HISTÓRICO DE MODIFICACIONES REV. Nº PASA A REV. Nº FECHA HOJA/S CONTENIDO MODIFICADO NA 1 31/07//2014 Todas Instructivo Nuevo /08/15 2,4,5,6,7,8 Histórico de modificaciones 1. Objeto 2. Alcance 3.1 Documentos utilizados en la elaboración 3.2 Documentos y Registros a utilizar conjuntamente con el INT 4. General 4.1 Definiciones 4.2 Abreviaturas 5. Descripción Despacho de la muestra remitida 5.4 Identificación 5.6. Conservación y almacenamiento de muestras 6. Anexos

3 Hoja 3 de 12 ÍNDICE 1. OBJETO 4 2. ALCANCE 4 3. REFERENCIAS Documentos utilizados en la elaboración Documentos y Registros a utilizar conjuntamente con el INT 4 4. GENERAL Definiciones Abreviaturas Abreviaturas 5 5.DESCRIPPCIÓN Métodos para la toma de muestras Intensidad de muestreo Tamaño mínimo de la muestra Toma de muestras primarias Obtención de la muestra compuesta Obtención de la muestra a remitir Despacho de la muestra remitida Identificación Tipo de muestreo Conservación y almacenamiento de muestras 8 6. ANEXOS 8

4 Hoja 4 de OBJETO Poner a conocimiento de los usuarios internos y externos, los procedimientos específicos a seguir para la toma de muestras de semillas para el análisis de calidad, con la finalidad de verificar si cumple con los estándares de calidad establecidos. 2. ALCANCE El presente documento es aplicable a todas las empresas, personas naturales y jurídicas dedicadas a la importación, exportación, producción, distribución y funcionarios oficiales relacionados con esta actividad, que necesiten realizar una toma de muestras; en almacenes, en lotes, plantas de procesamiento, a granel y otros lugares de almacenamiento. 3. REFERENCIAS 3.1. Documentos utilizados en la elaboración PGC/LA/01 Procedimiento General de Calidad de Gestión de la Documentación International Seed Testing Association 1999 MGC/S/01 Manual de Calidad 3.2. Documentos y Registros a utilizar conjuntamente con el INT 4. GENERAL Histórico de modificaciones. PGT/LA/06 Recepción e Ingreso de Muestras PG/LA/03-FO11 Orden de trabajo Laboratorio de Semillas El muestreo se basa en el principio estadístico de la aleatorización y representatividad de la muestra tomada. La calidad y otras características de la semilla contenida en una muestra de semillas tomada en varios puntos de un lote comercial, mediante procedimientos aleatorios y validados, es representativa de la población total de semillas que conforma el lote muestreado Definiciones Lote: Cantidad específica de semilla identificable físicamente respecto al cual se puede emitir resultados de ensayo. Muestra primaria, simple o elemental: Pequeña porción de semilla tomada en algún punto del lote. Muestra compuesta o global: Es la formada mediante la combinación y mezcla de las muestras primarias tomadas del lote. Muestra remitida o enviada: Es la muestra compuesta, o global, que se remite a los laboratorios para realizar los ensayo correspondientes - Generalmente es de tamaño superior al necesario para realizar los ensayo, en cuyo caso debe reducirse al tamaño especificado para cada cultivo de acuerdo con las normas del ISTA.

5 Hoja 5 de 12 Muestra de trabajo: Es una muestra tomada de la muestra remitida y reducida en el laboratorio para ser utilizada en los ensayos respectivos Abreviaturas RT: Responsable Técnico A: Analista NA: No aplica 5. DESCRIPCIÓN 5.1 Muestreo El muestreo para la realización de los análisis, debe ser ejecutado por una persona calificada, el lote de semilla debe ser arreglado de manera que cada envase individual o parte del lote sea accesible fácilmente. Cuando no sea posible aplicar las directrices para muestreo aquí señaladas, se puede implementar un método alternativo de presentación del lote y muestreo. El usuario (importador, exportador, distribuidor, productor, distribuidor) debe proveer al muestreador con toda la información necesaria acerca del procesamiento y homogeneidad del lote de semilla. Cuando se tenga evidencia física o documental de la heterogeneidad del lote, el muestreo no debe realizarse, ya que se afectará la muestra METODOS PARA LA TOMA DE MUESTRAS Intensidad de muestreo Para lotes de semillas en sacos (u otros envases de similar capacidad y medida) la intensidad de muestra se hará de acuerdo al procedimiento indicado en la tabla 1 del ANEXO 2. Cuando se muestrea semilla en otro tipo de envases o en la planta de procesamiento al momento del llenado de los envases, se deben cumplir los requisitos de las tablas 2 y 3. ANEXO 3 y TAMAÑO MÍNIMO DE LA MUESTRA. Los pesos mínimos para las muestras remitidas son: Para determinación de humedad: 100 g para especies que requieren molido y 50 g para las otras especies. Para verificación de especies y cultivar: lo que se prescribe en el capítulo 8 de las reglas ISTA (International Rules for Seed Testing, 1999). Para los otros ensayos, el peso prescrito en la columna 3 de la tabla 2A de las reglas ISTA (International Seed Testing Association, 1999), (Anexo 2) en caso que no se requiera la determinación de otras especies por número.

6 Hoja 6 de Toma de las muestras primarias Muestras primarias de tamaño similares deben ser tomadas de cada envase o de cada sitio muestreado en el contenedor cuando la semilla está a granel. Cuando el lote de semilla esta en envases (incluyendo sacos), los envases a muestrear deben ser seleccionados al azar abarcando todo el lote y las muestras primarias deben ser tomadas en diferentes posiciones en el fondo, medio y tope del envase. Cuando el lote de semilla está a granel o en contenedores grandes, las muestras primarias deben ser tomadas al azar en diferentes profundidades y posiciones. En el caso de semillas brosozas las cuales no fluyen fácilmente, la muestra primaria debe ser tomada a mano. Para la semilla a ser empacada en envases pequeños o a prueba de agua (latas o bolsas plastificadas o aluminizadas) el muestreo debería realizarse antes del envasado. Si esto no es posible, un número suficiente de envases deben ser abiertos o punzados para la extracción de las muestras primarias. El envase muestreado debe ser cerrado o el contenido puede ser transferido a otro envase Obtención de la muestra compuesta Si las muestras primarias tienen similar apariencia estas deben combinarse para formar la muestra compuesta Obtención de la muestra a remitir La muestra a remitir debe ser obtenida por reducción de la muestra compuesta hasta un tamaño apropiado. Si se hace muy difícil combinar y reducir la muestra en las condiciones del galpón de almacenamiento, la muestra compuesta entera debe ser remitida al laboratorio para su reducción. Si al mezclar las muestras primarias la muestra compuesta es del tamaño apropiado, estas serán tomadas como la muestra remitida sin necesidad de reducción Despacho de la muestra remitida Cada muestra remitida debe ser marcada de manera que se exprese la conexión entre el lote y la muestra. La codificación e identificación de la muestra para los laboratorios Regionales y de Diagnóstico rápido se realizará de acuerdo a lo establecido en el procedimiento General Técnico PGT/LA/06 Recepción e Ingreso de muestras.

7 Hoja 7 de IDENTIFICACIÓN Todas las muestras tomadas tendrán adjunto la orden de trabajo, para ser recibidas en el laboratorio y la etiqueta de identificación, de acuerdo al modelo establecido en el procedimiento PGT/LA/006 Recepción, Ingreso y entrega de muestras TIPO DE MUESTREO Muestreo manual En ciertos casos, algunas especies, especialmente las brozosas, no deslizantes, deben ser muestreadas manualmente. Con este método es difícil muestrear a profundidades mayores de 400 mm, lo cual dificulta obtener muestras de las capas inferiores de los sacos o latas. En estos casos el técnico debe tener la precaución de pedir al usuario que algunos sacos sean vaciados parcialmente para facilitar el muestreo y luego sean llenados nuevamente Muestreo en el laboratorio Para obtener la muestra de trabajo el analista debe prever tomar una cantidad ligeramente mayor a la requerida. El proceso se inicia con la homogenización de las muestras el cual puede hacerse a través de los métodos descritos a continuación: Método de división mecánica Este método es aplicable a casi todas las semillas excepto aquellas extremadamente brozosas. El aparato usado para tal fin divide la muestra en dos partes iguales. La muestra remitida puede ser homogenizada pasándola por el divisor, recombinando las dos partes y pasando la muestra completa por segunda vez y las veces que sean necesarias. La muestra es reducida pasando las semillas por el divisor repetidamente y descartando una de las mitades en cada ocasión. Este proceso de partición continua hasta que la muestra de trabajo sea de un tamaño aproximado al necesario. La división puede realizarse con los siguientes equipos: - Divisor de suelo. Es construido con los mismos principios que el anterior pero más sencillo. Los canales están distribuidos en hileras en vez de círculo. El divisor de suelo se compone de la tolva y sus canales o ductos, un marco que soporta la tolva, dos recipientes recolectores, y otro recipiente alimentador. Este divisor posee 18 canales de 12.7 mm de ancho distribuidos en posiciones opuestas. Las dimensiones máximas son 355,6 mm largo; 254 mm de ancho y

8 Hoja 8 de ,4 mm de alto. Para usar este divisor la semilla se distribuye en el recipiente alimentador y es vaciada uniformemente a lo largo de toda la tolva. Este divisor es recomendado para semillas grandes y especies brozosas, aunque se pueden encontrar modelos para semillas pequeñas. Divisor centrífugo (tipo Gamet). Este divisor usa la fuerza centrifuga para mezclar y separar la semilla sobre la superficie divisora. Las semillas fluyen por una tolva hasta llegar a un cangilón giratorio de caucho, poco profundo. Por efecto de la rotación de éste cangilón, propulsado por un motor eléctrico, las semillas son lanzadas al exterior cayendo luego por la fuerza centrífuga. La superficie circular que las recibe está dividida en dos partes iguales, de forma que las dos mitades de semillas se desplazan hacia salidas diferentes cayendo en los recipientes colectores. El pase por el homogenizador se realiza tres veces para cada muestra. Al final del análisis se envasa parte de la muestra encajas Petri, debidamente identificadas. Esta muestra se archiva y se tiene almacenada en condiciones apropiadas por espacio de seis meses, en previsión de algún nuevo ensayo que requiera la muestra CONSERVACION Y ENVIO DE MUESTRAS AL LABORATORIO El analista debe reconocer la importancia de analizar las muestras tan pronto sea posible después de recibidas. Por ejemplo, el contenido de humedad puede incrementar o disminuir considerablemente durante el almacenamiento dependiendo de las condiciones de humedad y temperatura del laboratorio. El almacenamiento puede también modificar los parámetros fisiológicos de la semilla, lo cual en algunos casos puede ser importante determinar y reportar. El almacenamiento después de los análisis es por períodos largos y deberán hacerse en condiciones adecuadas, con temperatura y humedad relativa controladas. Asegurándose que la semilla tendrá protección contra insectos y roedores. El laboratorio no puede ser responsable por el deterioro que le ocurra a la muestra de semilla durante el almacenamiento. 6. ANEXOS

9 Hoja 9 de 12 Anexo 1. TABLA 1. INTENSIDAD DE MUESTREO PARA SEMILLAS ENVASADAS EN SACOS O BOLSAS DE 5 A 100 Kg NÚMERO DE SACOS Hasta 4 sacos De 5 a 8 sacos De 9 a 15 sacos De 16 a 30 sacos De 31 a 59 sacos: De 60 ó más sacos: NÙMERO DE MUESTRAS PRIMARIAS A TOMAR Se toman tres (3) muestras primarias por cada saco Se toman dos (2) muestras primarias de cada saco Se toman una (1) muestra primaria de cada saco Se toman 15 muestras primarias en total Se toman 20 muestras primarias en total Se toman 30 muestras primarias en total

10 Hoja 10 de 12 Anexo 2. TABLA 2. INTENSIDAD DE MUESTREO PARA SEMILLAS ENVASADAS EN ENVASES DE MÁS DE 100 kilos TAMAÑO DEL LOTE NUMERO DE MUESTRAS PRIMARIAS A TOMAR Hasta 500 kg Al menos 5 muestras primarias kg Una muestra primaria por cada 300 kg, pero no menos de Kg Una muestra primaria por cada 500 kg, pero no menos de 10 más de Kg Una muestra primaria por cada 700 kg, pero no menos de 40

11 Hoja 11 de 12 Anexo 3. TABLAS 3. LISTA DE PESOS DE REFERENCIA DE MUESTRAS A ENVIAR AL LABORATORIO NOMBRE COMUN NOMBRE CIENTIFICO PESO MUESTRA DE ENVÍO A LABORATORIO(g) Acelga Beta vulgaris L. 500 Agrotis Agrostis stolonifera 25 Ají pimentón Capsicum spp. 150 Alcachofa Cynara cardunculus 900 Algodón Gossypium sp Alfalfa Medicago sativa L. 50 Ami Ammi majus 25 Apio Apium graveolens 25 Aquilegia Aquilegia sp. 10 Arroz Oryza sativa L. 400 Arveja Pisum sativum L Aster Aster sp. 10 Avena Avena sativa L Ballica Lolium spp. 60 Berenjena Solanum melongena L. 150 Braquiaria Brachiaria sp. 500 Brócoli B.oleracea var.italica 100 Bupleurum Bupleurum sp. 20 Calabaza Cucurbita moschata 350 Campanula Campanula sp. 2 Cartamo Carthamus sp. 500 Cebolla Allium cepa L. 80 Cebollín francés,ciboulette Allium schoenoprasum L. 30 Cebollin iinglés, bunching Allium fistulosum L. 50 Ciclamen Cyclamen sp. 10 Clavel Dianthus caryophylus 20 Clavel Chino Dianthus chinensis 10 Cilantro Coriandrum sativum L. 400 Coliflor B.oleracea var. botrytis 100 Coleus Coleus sp. 20 Comino Cuminum cyminum L. 60 Delfinio Delphinium 16 Espárrago Asparagus officinalis L Espinaca Spinacia oleracea L. 250 Festuca Festuca spp. 60 Frejol Phaseolus vulgaris L Frejol adzuki mungo,lima Phaseolus spp Gazania Gazania sp. 10 Godetia Clarckia amoena 10 Haba Vicia faba 1000 Hierba de San Juan Hypericum perforatum 5

12 Hoja 12 de 12 Ilusión Gypsophila spp 10 Lechuga Lactuca sativa L. 30 Lino Linum usitatissimum L. 150 Maíz mays L Girasol /maravilla Helianthus annuus L Melón Cucumis melo L. 150 Molucela Molucella sp. 10 Moztasa Sinapis alba 70 Nabo Brassica rapa L. 70 Panicum Panicum maximun, P. miliaceum 150 Pasto bermuda Cynodon dactylon 25 Pasto ovillo Dactylis glomerata L. 30 Pepino Cucumis sativus L. 150 Perejil Petroselinum crispum 40 Petunia Petunia x hybrida 5 Pimienta Brassica juncea L. 40 Pimienta Brassica nigra L. 40 Pino Pinus radiata 160 Poroto Soya Glycine max (L) Rabanito Raphanus sativus L. 300 Remolacha Beta vulgaris var. sacharifera L. 500 Repollo B.oleracea var. capitata 100 Repollo bruselas B.oleracea var. gemnifera 100 Salvia Salvia spp. 80 Sandía Citrullus lanatus 1000 Sorgo Sorghum spp. (excepto.halepense) 900 Snapdragon Anthirhinum sp. 0,5 Statice Limonium sinuatum 1 10 Tabaco Nicotiana tabacum L. 25 Tomate Lycopersicon esculentum 15 Trachelium Trachelium sp. 10 Trébol blanco Trifolium repens L. 25 Trébol encarnado Trifolium incarnatum L. 80 Trébol híbrido Trifolium hybridum L. 25 Trébol rosado Trifolium pratense 50 Trébol subterráneo Trifolium subterraneum L. 250 Vicia Vicia Vicia spp Zanahoria Daucus carota 30 Zapallo Cucurbita maxima 1000 Zapallo Italiano Cucurbita pepo L 1000