VIII.-Capítulo 10. Estrategias para el control de insectos. plagas.

Transcripción

1 VIII.-Capítulo 10 Estrategias para el control de insectos plaga Ferrero, Adriana A.; Descamps, Lilian; Reviriego, María 1. Introducción La categorización de un organismo como peste o plaga está determinada por el hombre, es decir, tiene carácter antropocéntrico, considerándose éste como el factor principal en el sistema. Así, insectos que se alimentan de plantas y granos, que actúan como vectores de agentes patógenos en los vegetales o que alteran la salud humana son considerados plagas. La población humana está sumergida en un mar de insectos. Si se considera su número solamente, la tasa estimada de insectos en relación con los humanos en nuestro planeta es de 200 millones a 1, existiendo alrededor de 160 millones de insectos por hectárea. Basados en su biomasa y abundancia, los insectos son los organismos más exitosos en la tierra, siendo el 1% de ellos los que caen en la categoría de plagas. Se supone que las formas más primitivas de insectos conocidas eran consumidores de detritus. El hábito de alimentarse de plantas parece, en algunos casos, haber evolucionado independientemente. Los insectos han atravesado un largo y variado período de coevolución y coadaptación con sus plantas huéspedes estableciendo modelos de asociación con distintas estrategias en el ciclo biológico y en los mecanismos alimentarios necesarios para la explotación de éstas. La producción primaria neta de las especies de plantas vasculares, que habitan las zonas secas de la superficie de la tierra, ha sido estimada en unas 115 x10 9 toneladas por año. Esto representa un recurso potencialmente disponible para ser explotado por los insectos fitófagos. El impacto de los insectos sobre las cosechas es conocido desde los tiempos bíblicos, cuando las plagas de langostas se extendieron por el territorio egipcio. Sin embargo, el estudio global de la interacción y del impacto de los insectos sobre la vegetación natural se ha desarrollado en los últimos cien años. En la actualidad, los insectos plaga y los organismos patógenos (hongos, bacterias y virus) son responsables del 14 % de las pérdidas en cosechas en el mundo (Fig. 1). Las actividades agrícolas incrementan las oportunidades para el surgimiento de las plagas a través del desarrollo de monocultivos, del cultivo en áreas donde no existen enemigos naturales de la plaga, del uso de fertilizantes y herbicidas, del desarrollo del cultivo en un área nueva permitiendo así que las especies nativas de insectos se alimenten de éste y se conviertan en plagas, de la eliminación de los enemigos naturales de la plaga por cambios en el manejo del cultivo y del uso continuo del mismo producto químico, generando adaptación a éste y posibilitando la aparición de resistencia. En los agroecosistemas modernos la evidencia experimental sugiere que la biodiversidad puede ser utilizada para mejo- Figura 1: Principales destinos de la agricultura mundial. El hombre debe competir por las cosechas con insectos plaga, malezas y enfermedades que reducen el rendimiento de los cultivos. Gentileza del Prof. Germán Spangenberg. Biotecnología y Mejoramiento Vegetal 335

2 rar el manejo de las plagas. Varios estudios muestran que es posible estabilizar las comunidades de insectos en un agroecosistema constituyendo arquitecturas vegetales que soporten a las poblaciones de enemigos naturales y/o inhiban el ataque de las plagas. Es difícil imaginar una tecnología que produzca la cantidad necesaria de alimento para la humanidad y el mantenimiento adecuado de la salud pública sin recurrir al uso de plaguicidas, adquiriendo particular relevancia dentro de este grupo los insecticidas destinados a combatir y/o reducir una población de insectos plaga. 2 Insecticidas El uso de insecticidas en el mundo es muy generalizado. Su aplicación para mantener a los cultivos libres de insectos representa cuantiosas inversiones económicas (Fig.2). Las pérdidas en cosechas debidas a los insectos sumado al costo de los herbicidas representan una inversión mundial de unos 3 billones de dólares anuales. El método más preciso de clasificación de los insecticidas es de acuerdo con su composición química. Los grupos más importantes son los organoclorados, organofosforados, carbamatos y piretroides. Los organoclorados constituyen el grupo más antiguo y más utilizado de insecticidas Figura 2: Uso de insecticidas en los principales cultivos agrícolas y el monto de las inversiones realizadas. orgánicos. Estos contienen cloro, hidrógeno y carbono en su molécula y, ocasionalmente, oxígeno y azufre. Aunque son muy efectivos, estables y persistentes, se acumulan en grasas y dan origen al conocido fenómeno de biomagnificación. Sus efectos sobre la vida silvestre, el medio ambiente y la salud humana están muy bien documentados en el libro La primavera silenciosa, escrito en el año 1962 por la bióloga Raquel Carlson. A partir de 1950/1960 los organoclorados fueron reemplazados por los organofosforados y los carbamatos. Los organofosforados se desarrollaron en Alemania durante la Segunda Guerra Mundial; químicamente derivan del ácido fosfórico, son menos estables en presencia de la luz y se descomponen rápidamente en compuestos no tóxicos. La ruptura de estos compuestos se produce en horas o días en comparación con los organoclorados, que demoran meses o años. Los carbamatos son insecticidas de amplio espectro muy utilizados en la agricultura, desarrollados por la corporación Geigy. Son derivados del ácido carbámico y similares en la persistencia en el ambiente a los organofosforados. Entre 1970 y 1980 siguieron los insecticidas piretroides, derivados del ácido crisantémico. Su fotodegradación es rápida y en la actualidad son los más utilizados por ser más seguros para la vida silvestre y el ambiente. Como grupo, los compuestos sintéticos mencionados son los más potentes para el control de las plagas. Debido a su amplio espectro de acción en la naturaleza, pueden resultar perjudiciales al hombre tanto en los agroecosistemas como en los ecosistemas naturales, no sólo destruyendo a la plaga sino también a otros insectos que actúan como enemigos naturales o favoreciendo el resurgimiento de plagas secundarias. A menudo, algunas de las causas de estos efectos indeseables están relacionadas con la elección del producto, la dosis y el modo en que éstos se aplican. 336 FERRERO, Adriana A.; DESCAMPS, Lilian; REVIRIEGO, María

3 Continuamente se buscan compuestos más selectivos, más específicos y con blancos para accionar específicos de los insectos. Muchos insecticidas convencionales afectan el sistema nervioso del insecto, que tiene funciones similares a las del hombre o al de otros animales. Esto hace que el interés en ellos se reduzca por los potenciales riesgos para la salud humana y animal. En las últimas tres décadas se han logrado avances tecnológicos significativos que han permitido descubrir, identificar y sintetizar químicos específicos que regulan o median el crecimiento, comportamiento y desarrollo del insecto. En este grupo se encuentran los llamados reguladores del crecimiento, que se caracterizan por causar muerte prematura y metamorfosis anormales. Dado su modo de acción su uso es seguro. Otro grupo de insecticidas son los naturales, que pueden ser aceites minerales obtenidos del refinamiento del petróleo o botánicos. Los aceites refinados de petróleo presentan ventajas como bajo costo, buena cobertura de las superficies a tratar y facilidad en su formulación. Se los ha utilizado como coadyuvantes de otros insecticidas y son seguros para el ambiente. Sin embargo, son inestables en almacenaje, inefectivos contra ciertas plagas y algunos insectos presentan resistencia a los mismos. Los insecticidas botánicos son derivados de las plantas o de parte de ellas y han sido utilizados durante mucho tiempo antes que cualquier otro insecticida. Las plantas producen una diversidad de compuestos, sin un rol aparente en los procesos fisiológicos básicos de las mismas, y a los que se conoce con el nombre de metabolitos secundarios. Un considerable número de ellos son tóxicos para los insectos ocasionándoles lesiones o la muerte, dependiendo de las circunstancias y de la cantidad ingerida. Los más conocidos son los alcaloides. Además de éstos, existen análogos químicos de las hormonas de los insectos, que pueden actuar interrumpiendo su ciclo biológico. También existen proteínas, dentro de las cuales están incluidas enzimas tales como quitinasas, lectinas e inhibidores de enzimas digestivas, con la misma función. Actualmente es posible introducir en plantas genes que confieren resistencia a insectos para reducir su susceptibilidad a los mismos. Estos genes pueden tener diversos orígenes y constituyen una herramienta importante en el desarrollo de variedades resistentes. Su importancia radica en su efectividad, selectividad contra la plaga, baja estabilidad relativa y compatibilidad con otras tácticas. Además, las variedades resistentes pueden ser introducidas fácilmente y en forma económica resultando en ganancias en corto tiempo. Sin embargo, el tiempo requerido para su desarrollo, los problemas de biotipos y que, a veces, las características agronómicas de un cultivar puedan ser beneficiosas para otra plaga son algunas de sus desventajas. Las barreras químicas de las plantas pueden ser interpretadas como un mecanismo de defensa contra los insectos que se alimentan de ellas y que la planta ha adquirido por selección natural. Sin embargo, es difícil demostrar esta afirmación. Los metabolitos secundarios tienen funciones alternativas, muchos son considerados como agentes antimicrobianos que protegen las plantas de posibles enfermedades. De todas maneras existen ejemplos que demuestran que durante la alimentación de los insectos con una planta puede inducirse en la misma un incremento en la concentración de algunos metabolitos secundarios, que serán efectivos contra sucesivos ataques. La relación entre el estímulo químico de la planta y la respuesta del insecto es una forma de comunicación química entre estos organismos. Esta comunicación se realiza mediante compuestos conocidos como semioquímicos, que suelen llamarse agentes antiinsectos y que pertenecen al grupo de los biorracionales. Los semioquímicos incluyen a las feromonas, sustancias producidas por insectos que permiten la comunicación entre individuos de la misma especie y a los aleloquímicos, que permiten la comunicación entre individuos de diferentes especies. Es necesario destacar que en la última década se han investigado intensamente las posibilidades de aplicar comercialmente las feromonas con fines de control. En la práctica sólo el 5% de las mismas se ha logrado sintetizar. Hasta el momento no se encuentran en la bibliografía casos instalados de resistencia a feromonas, pero poco uso se ha hecho de ellas. Los aleloquímicos pueden subdividirse en Biotecnología y Mejoramiento Vegetal 337

4 allomonas y kairomonas. Las allomonas cumplen función defensiva, produciendo respuestas negativas en los insectos y reduciendo el contacto y la utilización de la planta. Entre ellas se encuentran los repelentes y los compuestos que alteran la oviposición y la alimentación. Las kairomonas provocan respuestas positivas en el insecto favoreciendo la localización del huesped, la oviposición y la alimentación. Estas incluyen atractantes, excitantes y estimulantes. El estudio de la interacción entre la plaga y los compuestos presentes en las plantas ofrecen un potencial importante para mejorar, en el futuro, el control de las plagas en muchos cultivos. Dentro del grupo de los biorracionales también resultan de interés los productos de fermentación bacteriana y las proteínas cristalinas. Entre los primeros se encuentran las avermectinas, que son una mezcla de productos naturales producidos por un actinomicete del suelo, Streptomyces avermectilis. Este moderno insecticida y también acaricida debe su mecanismo de acción a la actividad como agonista del ácido gama amino butírico (GABA), que es una neurohormona del sistema nervioso de los invertebrados. Las avermectinas actuarían en los mismos receptores específicos para GABA provocando la parálisis y muerte del insecto. Entre los segundos se encuentran las endotoxinas de Bacillus thuringiensis, también conocidas como Bt. Los productos basados en Bacillus thuringiensis (Bt) son los más difundidos entre los llamados «insecticidas biológicos» porque poseen bajo riesgo ambiental y humano. No obstante, su aplicación ha sido muy restringida. En la actualidad, debido a los avances logrados en su formulación y a la biotecnología se han descubierto cepas de Bt. con mayor potencia y espectro de acción. Las Bt son bacterias Gram positivas que producen, durante la esporulación, una inclusión cristalina parasporal proteica. Esta inclusión es disuelta por ingestión en el intestino medio de los insectos, donde se libera la llamada delta endotoxina. Los cristales de las diferentes cepas de Bt contienen más de un tipo de proteína con poder insecticida. Son bioactivas frente a lepidópteros, dípteros o coleópteros. La estructura de las delta endotoxinas varía según el gen que las codifica. Se identificaron y clasificaron numerosos genes que las codifican, que son de dos tipos, denominados cry (por cristal), y cyt (toxinas citolíticas). Ya hay más de 100 genes identificados pertenecientes a estas familias. El modelo actualmente vigente para el mecanismo de acción sugiere que por unión de la toxina a su receptor específico se induce la formación de poros en la membrana celular que generan un desbalance iónico que conduce finalmente a la muerte del insecto. Una nueva clase de insecticidas que surgieron a partir de las bacterias mencionadas es la que corresponde a la llamada clase VIP (vegetative insecticidal protein). Estas moléculas se sintetizan durante el ciclo vegetativo de las bacterias y actúan como exotoxina que al ser ingerida por la plaga, cesa la alimentación y muere rápidamente. Gracias a los avances de la tecnología del ADN recombinante se pudieron aislar los genes de las deltas endotoxinas de Bacillus thuringiensis y expresarlos en plantas y bacterias del suelo. Esta biotecnología condujo a nuevas formas de liberación de las toxinas para controlar insectos plaga. Los genes Bt que más comúnmente se utilizan, en la actualidad en algodón tienen dos orígenes, uno es el CryAc utilizado por Monsanto en sus variedades Bollgard y el otro es un gen híbrido que fue desarrollado por el sector público (Academia de Ciencias Agrarias de China, CAAS). Se trata de un gen Cry1Ab/Cry1Ac. Existe otro gen CpTi («cowpea trypsyn gene») que se emplea unido a Bt en alguna variedades chinas. Otro gen dual es el CryAc/ Cry1F. La utilización de dos genes simultáneamente es una importante herramienta para demorar el comienzo de la resistencia. Las dos toxinas juntas resultan en un control redundante que conferiría una resistencia más duradera e incrementa el espectro de insectos que permite controlar. En la actualidad se han informado especies de insectos que atacan al algodón, de los cuáles 10 producen pérdidas importantes desde el punto de vista económico, la mayoría de los cuales son lepidópteros. Cabe mencionar que las toxinas expresadas en la plantas Bt son idénticas o similares a las encontradas en la naturaleza y a las que se encuentran en el microorganismo que se 338 FERRERO, Adriana A.; DESCAMPS, Lilian; REVIRIEGO, María

5 utiliza en las aplicaciones convencionales de Bt. Esta toxina es inocua para insectos que naturalmente no son sensibles al Bt, para aves, peces y mamíferos, entre los que se incluye el hombre. En cuanto a la evaluación del impacto ambiental ver IX.2 y 3. El cultivo a gran escala de variedades Bt, comenzó en 1996 y se incrementó rápidamente, alcanzando los 14 millones de has. en el En el 2001 variedades comerciales de maíz, algodón y papa fueron plantadas en 5 millones de hectáreas en EE.UU., Argentina, Canadá, China, Australia, Sudáfrica, México, España, Francia, Portugal, Rumania y Ucrania En el 2003 el maíz Bt ocupó el segundo lugar en importancia en el mundo, con una superficie de 12,3 millones de has, lo que equivale al 13 % del área total de cultivos transgénicos (67,7 millones de has). Los países que lo han adoptado son Estados Unidos, Canadá, Argentina, Sudafrica, España, Filipinas, Honduras, Uruguay y Alemania. En un año la superficie sembrada aumentó de 9,9 millones de has a 12,3 millones. El maíz tolerante a herbicidas e insectos (eventos combinados por cruzamiento convencional) con 3,2 millones de has representa el 5 % de la superficie y el algodon Bt tiene una superficie equivalente. El algodón tolerante a herbicidas e insectos ocupa 2,6 millones de has (4%) Este tipo de biotecnología tiene mucha importancia en los países en vías de desarrollo. Los beneficios que otorgan estos productos son la reducción en el uso de insecticidas convencionales, en algunos casos de más del 50 %, el incremento del valor del cultivo, mejor control natural de la plaga, protección de los enemigos naturales, reducción en la contaminación ambiental y posibilidad de combinar esta tecnología con otras tácticas para el control de la plaga. También se han registrado incrementos en el rendimiento y menores costos de producción, ya que el gen se expresa en todos los estadios de crecimiento y en todos los órganos de la planta, evitando tener que aplicar insecticida en tiempos determinados; no existe riesgo de lavado por la lluvia ni pérdida de actividad debida a la luz del sol, como sucede cuando se aplican las formulaciones derivadas del microorganismo directamente. (Fig.3 y 4). Figura 3: Cañas de maíz convencional (arriba) y protegido de insectos (abajo) con el gen cry1ab específico para el barrenador del tallo, Diatraea saccharalis. (Gentileza Monsanto Argentina). Figura 4: Ensayo experimental de soja tolerante a insectos lepidópteros. En primer plano, variedad convencional (Gentileza Monsanto Argentina). Como un efecto indirecto de la protección contra insectos del maiz Bt, se ha podido determinar una reducción en la presencia de fumonisinas (micotoxinas producidas por diferentes especies de Fusarium sp). Estas micotoxinas son toxicas y cancerigenas para un número de especies animales y se han relacionado con los altos indices de cancer esofágico observados en agricultores de Africa y China. Los niveles de reducción de fumonisinas en maices protegidos del daño de los insectos (que constituyen vías de entrada del hongo), varían entre 3 y 8 veces en diferentes países y años. Otra ventaja es el ahorro en consumo de agua que implica la menor utilización de insecticidas, que, como se sabe es uno de los recursos más limitantes del planeta (ver VIII.12). El volumen de agua utilizada en una Biotecnología y Mejoramiento Vegetal 339

6 simple aplicación de insecticida es de 40 a 80 litros por ha. El ahorro en consumo de agua debido a la utilización de tecnologías como Bt puede estimarse de la siguiente manera: durante 2001, 81 millones de kg de insecticidas fueron aplicados en el cultivo de algodón en el mundo, a un promedio de 0,45 kg/ha/ aplicación en el Esto representa 180 millones de has. fumigadas, lo que es consistente con un promedio global de 5,5 aplicaciones sobre 33,5 millones de has. La cantidad de agua utilizada para aplicar 81 millones de kg de insecticida es de 12,6 billones de litros. El ahorro en consumo de agua con esta tecnología podría ser del 50%, es decir 6.3 billones de litros anuales. También significa una reducción de 5,6 millones de litros de combustible y de un millón de kg de deshechos industriales generados en la fabricación de insecticidas convencionales. Dados los recientes avances en biotecnología, se podría esperar que las plantas transgénicas resistentes jueguen a futuro un importante rol en el control de insectos plaga. Hasta donde se conoce, no ha evolucionado una plaga que exprese a campo resistencia a los cultivos Bt. No obstante, el Bt aplicado como «spray» ha generado moderados a elevados niveles de resistencia en poblaciones de polilla de las coles y en algunos ensayos se observó resistencia a plantas Bt en experimentación, como por ejemplo a plantas transgénicas de bróccoli. Existen al menos 7 cepas resistentes de 3 insectos plaga que sobreviven sobre cultivos Bt. A fin de contrarrestar la aparición de resistencia se desarrolló la estrategia de refugio, basada en la teoría desarrollada en docenas de publicaciones durante los últimos 25 años y en la limitada experiencia de trabajos experimentales a pequeña escala. Se trata de plantar refugios de plantas no Bt en áreas próximas a los cultivos Bt para permitir la supervivencia de los insectos susceptibles. De manera ideal, la resistencia es conferida por alelos raros, recesivos y los adultos más resistentes de los cultivos Bt se aparearán con los adultos susceptibles de los refugios. Si esto es así, la teoría predice que la aparición de resistencia se verá demorada sustancialmente. Aunque no existen informes detallados acerca de las evaluaciones a gran escala de esta estrategia de refugio, los experimentos muestran que pueden ocurrir algunas violaciones a algunas de las asunciones clave (baja frecuencia de alelos de resistencia y herencia recesiva de la resistencia a Bt) en algunos sistemas. De esta manera, dado el difundido uso de los cultivos Bt contra varios insectos plaga, la resistencia podría evolucionar rápidamente en algunas situaciones a pesar de la presencia de refugios. Contrariamente a esto, no se han documentado hasta la fecha incrementos en la frecuencia de resistencia a las toxinas Bt en poblaciones de insectos a campo a causa de la exposición a cultivos comerciales que expresan Bt. Los factores clave para la demora en la aparición de resistencia son probablemente: los refugios, las bajas frecuencias iniciales de los genes de resistencia, la herencia recesiva de la misma, los costos asociados con el desarrollo de la resistencia, que reducen la aptitud de los individuos resistentes en relación a los individuos susceptibles sobre los cultivos Bt y las desventajas sufridas por las cepas resistentes sobre los huéspedes Bt en relación a su desempeño sobre cultivos no Bt. La importancia relativa de estos factores varía entre los sistemas de las plagas y los cultivos Bt. Una lección que nos brindan estos pocos años de cultivos Bt es que debemos ser cautelosos y reconocer que la habilidad para predecir tasas de evolución de la resistencia en el campo es limitada. El éxito de los cultivos Bt hasta la fecha excede las expectativas de muchos, pero no previene los problemas de resistencia en el futuro. El monitoreo constante y las estrategias biotecnológicas en continuo desarrollo serán fundamentales para conservar este recurso de control biológico Insecticidas naturales vs insecticidas sintéticos La pregunta que nos deberíamos hacer es: son los insecticidas naturales más seguros que los sintéticos? Los científicos responden que puede ser que sean, dependiendo del insecticida natural o sintético que se esté comparando. Cuando se evalúa el riesgo o la seguridad de cualquier plaguicida se debe recordar que 1) la toxicidad es una función de 340 FERRERO, Adriana A.; DESCAMPS, Lilian; REVIRIEGO, María

7 la estructura química y no de su origen, 2) la seguridad de un plaguicida depende del tiempo y frecuencia con que el individuo estuvo expuesto y de la dosis de exposición y que 3) la percepción del riesgo a veces no es coincidente con el riesgo real o actual de un plaguicida. En algunas plagas, no se puede detener la aparición de resistencia a insecticidas convencionales, biopesticidas o nuevos cultivos transgénicos. La resistencia en insectos es un caso de toxicidad selectiva intraespecie. Según una definición, el fenómeno de resistencia consiste en la habilidad desarrollada en una cepa de insectos para tolerar dosis de tóxicos que serían letales para la mayoría de los individuos de una población normal de la misma especie, siendo esta habilidad de carácter genético y heredable. Los insecticidas crean una presión de selección que elimina progresivamente los individuos sensibles dejando un nicho vacío que pasan a ocupar los individuos resistentes. La resistencia es un caso de evolución preadaptativa. Los insecticidas naturales y/o sintéticos no inducen sino que seleccionan cepas resistentes. El mecanismo más común por el cual una cepa resulta resistente a un insecticida es por la modificación de la toxicocinética o toxicodinámica. La toxicocinética de los insecticidas naturales o sintéticos tienen que ver con las etapas de penetración, distribución, acumulación, biotransformación y excreción en el insecto. La llegada al sitio de acción se denomina toxicodinámica y tiene que ver con la reacción fundamental del insecticida o su metabolito activado con una enzima o receptor vital. Estas etapas dependen críticamente de las propiedades fisicoquímicas de los compuestos antiinsectos. 3. Consideraciones finales Sin duda, varias tácticas pueden ser implementadas para evitar la pérdida de las cosechas por acción de los insectos plaga. Así programas de Manejo Integrado de la Plaga (MIP) deben ser desarrollados para cada cultivo y en cada región, manteniendo la población de la plaga debajo del nivel de daño económico. Se debe entender al MIP como una filosofía y una metodología que enfatizan la necesidad de utilizar estrategias de manejo de la plaga para minimizar el resurgimiento de la misma. A pesar de todo, los insecticidas han sido y probablemente continuarán siendo los métodos más efectivos para controlar el desarrollo de las plagas. Decía el Dr. Edgardo Wood, en una conferencia relacionada con la resistencia a insecticidas: «El hombre contemporáneo debería comprender que las tácticas químicas eficaces para controlar las plagas como asimismo los blancos sensibles y viables deben protegerse como patrimonio de la humanidad, porque de la irracionalidad en el uso de la química contra la naturaleza podrá sobrevenir una crisis debida a resistencia generalizada en la que no contaremos con moléculas naturales o sintéticas efectivas ni con blancos viables. Entretanto la esperanza radica en el conocimiento cada vez mayor del problema y su potencialidad para ser cuidadosos en el aporte y utilización de las soluciones. El primer gran paso ya está dado: el no desconocer el fenómeno.» 4. Lecturas Recomendadas ALTIERI. M.A Biodiversity and Pest Management in Agroecosystems. Ed:TheHaworth Press, Inc. New York, London, Norwood (Australia). 185 pp. ANÓNIMO World Health Expert Committee on Insecticide, 7 th Report, Who Technical Report Series Nª 125. BENEDICT, J.H Strategies for Controlling Insect, Mite and Nematode Pests. In: Plants, Genes and Crop Biotechnology. Chrispeels, M.J. y Sadava, D.E. Ed. Jones y Bartlett Publishers, Sudbury, Massachusets. 562pp. CASIDA, J.E. Y QUISTAD, G.G Golden age of insecticide research: past, present or future?. Ann. Rev. Entomol. 43: COATS, J. R Risks from Natural versus Synthetic Insecticides. Ann. Rev. Entomol: 39: DE BACH, PAUL Control Biológico de las Plagas de Insectos y Malas Hierbas. Ed: Lycsa Impresores. México. 949 pp. FRANCO, O.L.; RODRIGUES MELO, F.; MATTAR DA SILVA, M.C. y GROSSI DE SÁ, M. F Resistência de Plantas a Insetos. Biotecnologia, Ciencia y Desenvolvimiento: ELLIS, T. R.; STOCKHOFF, L.S.; SCHNEPF, H.E.; SCHWAB, G.E.; KNUTH, N.; RUSSELL, J.; CARDINEAU, G.A. y NARVA, K. E Novel Bacillus thuringiensis binary insecticidal Biotecnología y Mejoramiento Vegetal 341

8 cristal proteins active on western Rootworm, Diabotrica virgifera virgifera LeConte. Appl. Envirom. Microbiol. 68 (3): HODKINSON, I.D. y HUGHES, M.K La Fitofagia en los Insectos. Ed: Oikos-tau. Barcelona. España. 99 pp. MUNKVOLD, HELLMICH y RICE (1999). Comparison of fumonisin concentrations in kernels of transgenic Maize Bt hybrids and non transgenic hybrids. Plant Disease 83 (2): PEDIGO, L. P Entomology and Pest Management. Ed. Prentice Hall, New Jersey. 679 pp. «RESISTENCIA A INSECTICIDAS: UN PROBLEMA ECOTOXICOLÓGICO» Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad Nacional de la Pampa. 83 pp. TABASHNIK, B.E.; CARRIERE, Y.; DENNEHY, J.T.; MORIN, S.; SISTERSON, M..S.; ROUSH, R.T.; SHELTON, A.M. y ZHOU ZHAO, J Insecticde Resitance to transgencic Bt Crops. Lesson from the laboratory and field. Journal of Economic Entomology. EC Version FERRERO, Adriana A.; DESCAMPS, Lilian; REVIRIEGO, María