Actividad antibacteriana de ciruela spondias purperea y guayaba agria psidium friedrichsthalianum

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1 Actividad antibacteriana de ciruela spondias purperea y guayaba agria psidium friedrichsthalianum M.A. Judith Espinosa Moreno M.C. Dora Centurión Hidalgo IAA. Bellanira López López IAA. Josué Alejandro Vera Martínez Biol. Jaime Gabriel Cázares Camero Resumen Para el presente trabajo se tomaron como referencia las plantas con propiedades antimicrobianas con el objetivo de analizar la actividad antibacteriana de los extractos etanólicos y hexánicos de Guayaba agria (Psidium friedrichsthalianum) y Ciruela (Spondias purpurea). Tanto la hoja como la corteza, se colectaron, secaron y molieron. Se obtuvieron los extractos en etanol o hexano en agitación a temperatura ambiente por 24 h, filtrando y concentrando el sobrenadante en un rotavapor y secando en la estufa de vacío a 45 C por 48 h. Para la evaluación de la actividad antimicrobiana se utilizó un diseño completamente al azar con una distribución factorial de 2x2x2x3 con un total de 24 tratamientos, con tres repeticiones. En la determinación de la actividad antimicrobiana mediante el Método de Difusión en Agar sobre Staphylococcus aereus, Salmonella typhimurium y Bacillus cereus, se encontró que los extractos etanólico y hexánico de la corteza de P friedrichsthalianum no presentaron actividad antimicrobiana contra los tres microorganismos probados. No obstante, los extractos de las hojas de esta especie presentaron actividad antimicrobiana para dos de ellos: S. aereus y B. cereus. Se encontró que los extractos de hoja y corteza de S. purpurea, no presentaron actividad antimicrobiana contra los tres microorganismos. Introducción Alrededor de la medicina natural popular se desarrolla una intensa actividad socioeconómica, basada en el cultivo o recolección, procesamiento y comercialización de plantas consideradas de valor terapéutico. En varios sitios, principalmente en los mercados populares, se venden cantidades variables de plantas, prescritas por conocimiento ancestral. La gran riqueza y variedad de la flora medicinal y aromática, que la posición geográfica permite el cultivo de las Semana de Divulgación y Video Científico

2 especies autóctonas e introducidas (Fundación Alfonso Martín Escudero, 1999). Los microorganismos de importancia alimentaria son aquellos que están presentes de forma natural en el alimento, o que han sido aportados por contaminación, o que han sido añadidos intencionadamente durante algún momento de su historia, pero todos han encontrado en el producto condiciones favorables para su desarrollo (Bourgeois et al., 1994). Los antimicrobianos alimentarios son compuestos químicos, presentes en los alimentos, que retardan el crecimiento (bacteriostáticos) o causan la muerte de los microorganismos (bactericidas), aumentando así la resistencia a la alteración de la calidad o seguridad de los alimentos (Raybaudi-Massilia et al., 2006). Objetivo y meta Estudiar la actividad antimicrobiana de extractos crudos con etanol y hexano, de hoja y tallo, de Ciruela Spondias purperea y Guayaba agria Psidium friedrichsthalianum. Obtener al menos un extracto crudo con propiedad antibacteriana para una bacteria al término del trabajo. Materiales y Métodos El presente trabajo es parte del proyecto de investigación titulado Estudio de la actividad antimicrobiana de recursos fitogenéticos subexplotados en el estado de Tabasco, sobre microorganismos patógenos de incidencia alimentaria apoyado por PFICA con la clave: UJAT C Las partes de las plantas tales como hoja y corteza, de las especies Guayaba agria (P. friedrichsthalianum) y Ciruela (S. purpurea), fueron colectadas en el municipio de Tacotalpa, Tab. De cada especie se colectaron 2 Kg de muestra que se deshidrató y almacenó en frascos de vidrio color ámbar a 4 ºC, para su posterior estudio. Para la preparación de los extractos se pesaron 5 g de cada muestra molida y se extrajeron por separado con 200 ml de etanol al 95 % o hexano en matraces Erlenmeyer de 250 ml a temperatura ambiente y con agitación de 1000 rpm durante 24 horas, luego se filtraron al vacío cada una. Los filtrados obtenidos se sometieron a un proceso de concentración en un rotavapor a presión reducida por debajo de 45 C (Jiménez-Arellanes et al., 2003). Los microorganismos de ensayo seleccionados fueron Semana de Divulgación y Video Científico

3 Staphylococcus aereus ATCC 25923, Salmonella typhimurium ATCC y Bacillus cereus ATCC 11778, los cuales se obtuvieron en la Facultad de Química de la Universidad Nacional Autónoma de México. Para la evaluación de la actividad antimicrobiana se empleó la técnica de difusión en agar con discos de papel filtro. Para esta técnica se colocó en una caja Petri 20 ml de agar BHI y una vez solidificado se inoculó con 0.1 ml de una suspensión bacteriana equivalente al estándar N 5 de MacFarland (10 6 UFC/ml) distribuyéndolo uniformemente con un rastrillo de vidrio. Luego se colocaron en la superficie del agar inoculado los discos de papel filtro (0.6 mm de diámetro) previamente impregnados con los extractos (etanol al 95 % y hexano) y con los distintos controles positivo (ácido acético al 10%) y negativo (solución salina al 0.85%). Posteriormente, los medios de cultivos inoculados se incubaron a 37 C, realizándose las lecturas de los halos de inhibición a las 24 horas. El diámetro de la zona de inhibición producto de la acción antimicrobiana de los extractos se expresó en milímetros (mm). La prueba se consideró negativa cuando existía crecimiento microbiano alrededor del disco al igual que en los controles negativos. Se realizaron tres réplicas por tratamiento para cada microorganismo (Rangel et al., 2001). Se realizó un diseño completamente al azar con una distribución factorial de 2x2x2x3 (dos especies; dos partes utilizadas: hoja y corteza; 2 tipos de extracto: hexánico y etanólico; tres microorganismos) para un total de 24 tratamientos, con tres repeticiones. A los resultados obtenidos de cada parámetro se les calculó la varianza mediante el procedimiento ANOVA con una significancia α=0.05 % y las variables que presentaron diferencias se compararon utilizando una prueba de comparación de medias de Tukey por medio del programa estadístico SAS (2001). Resultados En la determinación de la actividad antimicrobiana mediante el Método de Difusión en Agar sobre los microorganismos Staphylococcus aereus ATCC 25923, Salmonella typhimurium ATCC y Bacillus cereus ATCC 11778, se encontró que los extractos de la corteza, tanto etanólico como hexánico, de P. friedrichsthalianum no presentaron actividad antimicrobiana contra los tres microorganismos probados. No obstante, los extractos de las hojas de esta especie presentaron actividad antimicrobiana para dos de los microorganismos: S. aereus y B. cereus. Cabe resaltar que no presentó actividad antimicrobiana contra S. typhimurium. El mayor diámetro de la zona de inhibición se presentó para B. cereus con el extracto de etanol ( Semana de Divulgación y Video Científico

4 1.10 mm) mientras que el extracto con hexano sólo presentó actividad antimicrobiana para B. cereus que tuvo un halo de inhibición de mm (Cuadro 1). Cuadro 1. Actividad antimicrobiana de extracto de hoja de guayaba agria Psidium friedrichsthalianum (diámetro de la zona de inhibición, mm). Microorganismo Etanol Hexano Salmonella typhimurium Bacillus cereus Staphylococcus aureus En el extracto de S. purpurea, se encontró que los extractos etanólico y hexánico (hoja y corteza) presentaron actividad antimicrobiana (Cuadro 2) contra los tres microorganismos (S. aereus, S. typhimurium y B. cereus). Cuadro 2. Concentración Mínima Inhibitoria de Ciruela Spondias purpurea (mg de extracto seco/ml de solución). Extracto S. typhimurium B. cereus S. aureus Hoja (Etanol) 120±0 3.85± ±8.66 Corteza (Etanol) 15±0 60±0 30±0 Hoja (Hexano) 120±45 15± ±62.8 Corteza (Hexano) 7.5± ± ±4.33 Discusión En un estudio sobre el efecto inhibitorio de extractos de hoja de Psidium guajava contra diversas bacterias por el método de difusión en disco, Qa dan et al. (2005) ensayaron diversas especies de Staphylococcus y encontraron que las zonas de inhibición fueron de mm y de mm para S. aureus y S. epidermidis, respectivamente. Al comparar estos resultados con los obtenidos con P. friedrichsthalianum, el halo de inhibición fue menor ( mm) para S. aureus y para B. cereus ( mm). Por otro lado, Martínez et al. (1997) encontraron que el extracto etanólico al 40 % de Psidium guajava presentó actividad antimicrobiana frente a S. aureus, Escherichia coli y Bacillus subtilis presentando halos de inhibición de crecimiento de 14, 16 y 12 mm, respectivamente. En el presente trabajo se Semana de Divulgación y Video Científico

5 encontró que la actividad antimicrobiana, por el método de difusión en disco, de Guayaba agria (P. friedrichsthalianum) fue de mm para S. aureus y mm para B. cereus. En el trabajo realizado por Argueta et al. (1997) con Spondias purpurea, de la familia Anacardiaceae, reportaron la evaluación de la actividad antimicrobiana in vitro de un extracto hidroalcohólico de las hojas, el cual solamente mostró actividad frente a las bacterias Gram positivas Bacillus subtilis y Staphylococcus aureus, habiendo dado resultado negativo frente a las bacterias Gram negativas y la levadura Candida albicans. El extracto etánolico de la hojas de Spondias purpurea presentó actividad antimicrobiana contra E. coli y S. typhi en un trabajo realizado por Ceres (1991) que estudió diversas plantas de uso medicinal en Guatemala. Lo que coincidió con los resultados obtenidos en el presente trabajo donde se encontró actividad positiva frente a S. typhimurium. Conclusión Los extractos de la corteza de P. friedrichsthalianum no presentaron actividad antimicrobiana contra los tres microorganismos probados. Los extractos de las hojas de P. friedrichsthalianum presentaron actividad antimicrobiana contra S. aereus y B. cereus. Ninguno de los extractos de S. purpurea presentaron actividad antimicrobiana contra los tres microorganismos prueba. Referencias Argueta, V. A., Cano, A., Rodarte, M Atlas de las Plantas Medicinales de la Medicina Tradicional Mexicana. Tomos I-III. Instituto Mexicano Indigenista, México. Bourgeois, C. M., Mescle, J. F. y Zucca, J Microbiología alimentaria. Volumen I. Aspectos microbiológicos de la seguridad y calidad alimentaria. Editorial Acribia, España. pp: Ceres, A Actividad antimicrobiana de plantas de uso medicinal en Guatemala. In: Proceedings of International Conference on Traditional Medicinal Plants. Part III: The use and promotion of traditional medicinal plants in the Latin American Region. Dar Es Salaam University Press - Ministry of Health - Tanzania, 1991, 16 pp. Semana de Divulgación y Video Científico

6 Fundación Alfonso Martín Escudero Las plantas de extractos. Grupo Mundi- Prensa, España. 539 pp. Jiménez-Arellanes, A., Meckes, M., Ramirez, R., Torres, J., Luna-Herrera, J Activity against multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis in Mexican plants used to treat respiratory diseases. Phytotherapy Research 17(8): Martínez, M. J., Molina, N., y Boucourt, E Evaluación de la actividad antimicrobiana del Psidium guajava L. (Guayaba). Rev Cubana de Plant Med 2(1): Qa dan, F., Thewaini, A-J., Ali, D. A., Afifi, R., Elkhawad, A. and Matalka, K. Z The Antimicrobial Activities of Psidum guajava and Juglans regia leaf extracts to acnedeveloping organisms. The American Journal of Chinese Medicine 33(2): Raybaudi-Massilia, M., Soliva, F. R. y Martín, B. O Uso de agentes antimicrobianos para la conservación de frutas frescas y frescas cortadas. Proyecto XI.22 Desarrollo de tecnología para la conservación de vegetales frescos cortados. I Simposio Ibero-Americano de Vegetales Frescos Cortados, San Pedro, SP, Brasil, Abril pp: Rangel, A. García, I., Velasco, J., Buitrago, D. y Velazco, E Actividad antimicrobiana de los extractos etanólico, acetónico y acuoso de Baccharis nitida (Ruiz et Pavon). Pers. Revista de la Facultad de Farmacia (42): SAS The SAS System, Version Eight for Windows. SAS Institute, Cary, NC, USA. Semana de Divulgación y Video Científico