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1 DESARROLLO DE NUEVOS MÉTODOS ECOLÓGICOS DE CONTROL DE PLAGAS AGROFORESTALES DE LA COMUNITAT VALENCIANA MEDIANTE EL USO DE SEMIOQUÍMICOS Y SU POSIBLE COMBINACIÓN CON AGENTES DE CONTROL MICROBIOLÓGICOS NATURALES Búsqueda de semioquímicos Sandra Vacas González Centro de Ecología Química Agrícola Instituto Agroforestal del Mediterráneo Universitat Politècnica de València

2 Semioquímicos de insectos conceptos generales Semioquímico: sustancias que utilizan los seres vivos para comunicarse con su entorno

3 Semioquímicos de insectos conceptos generales Aislamiento de nuevas feromonas

4 1. Identificación de la feromona sexual del cotonet de les Valls y aplicación para la detección y el seguimiento de plagas Aireación de individuos Captación dinámica en Porapak Q Extractos pentano de las aireaciones GC/MS Comparación muestras de hembras vírgenes con muestras de inmaduros o hembras grávidas

5 1. Identificación de la feromona sexual del cotonet de les Valls y aplicación para la detección y el seguimiento de plagas Aireación de individuos Resultados Aromas del sustrato de cría: limones Aromas de insectos

6 1. Identificación de la feromona sexual del cotonet de les Valls y aplicación para la detección y el seguimiento de plagas Aislamiento de componentes feromonales Fraccionamiento por columna de gravedad con gradiente de disolventes Fracciones más ricas en componentes feromonales Aislamiento de sustancias por cromatografía de gases preparativa

7 1. Identificación de la feromona sexual del cotonet de les Valls y aplicación para la detección y el seguimiento de plagas Elucidación estructural resonancia magnética nuclear (RMN) Proximamente: Síntesis química Ensayos de actividad

8 2. Estudio del perfil de volátiles de individuos de Tomicus destruens Aireación de individuos Estático - SPME Individuos jóvenes y maduros No se detectan compuestos específicos Algunos compuestos varían en abundancia

9 2. Estudio del perfil de volátiles de individuos de Tomicus destruens Aireación de individuos Dinámico captación en Porapak Ensayos biológicos

10 Síntesis en laboratorio de la feromona sexual descrita Componentes feromonales descritos (Z,Z)-6,9-tricosadieno (Z,Z)-6,9-pentacosadieno Sustancias de escasa volatilidad Atracción a larga distancia?

11 Evaluación de atrayentes existentes y experimentales Parcela almendro ecológico (var. Largueta y var. Asperilla), Venta del Moro Colocación: 2 bloques de 6 trampas, el (1) emisor tipo rubber septum cargado con 10 mg de la feromona sexual descrita en bibliografía (2) emisor tipo rubber septum cargado con 10 mg de la feromona sexual descrita, altamente purificada (3) emisor tipo rubber septum con 10 mg de la mezcla feromonal purificada y un emisor tipo vial de kairomona, cargado con aromas de almendro (4) emisor tipo vial cargado con una mezcla de miel (10%), etanol (10%) y agua, junto un emisor tipo vial de kairomona de volátiles de almendro (5) emisor tipo vial cargado con una mezcla de miel (10%), etanol (10%), acetato amónico (2%) y agua, junto un emisor tipo vial de kairomona de volátiles de almendro (6) lámina impregnada con 7 mg de la mezcla feromonal purificada, para favorecer la emisión de los componentes

12 No se obtuvieron capturas con ninguno de los atrayentes ensayados llegamos tarde? Recogida de almendras a principios de Septiembre 2017 para disponer de adultos en laboratorio y ensayar antes de la emergencia en campo acelerar la diapausa

13 Hemos sometido a las almendras a las condiciones de temperatura necesarias para completar el ciclo biológico 4 semanas a 16-20ºC (hasta ) 10 semanas a 4-6ºC (hasta ) 2-3 semanas a 16-20ºC comienza la emergencia (4-1-18)

14 Estudio del perfil de volátiles - Aireación de individuos SPME Porapak No se detectan compuestos volátiles específicos

15 Extracción de individuos con disolvente Maceración durante 20 h Disolvente: hexano Se detectan los compuestos descritos como feromona sexual extr 19h, 16-Jan :58: extr_hexano_x17mv Scan EI e6 % extr_hexano_x17fv Scan EI e5 % Time Los compuestos feromonales son poco volátiles (moléculas pesadas) y quizá actúen solo a corta distancia Necesidad de unirlo a kairomona?

16 Aireación de material vegetal - SPME Flores, hojas, frutos cuajados 1,4-dimetoxibenceno benzaldehído acetato de 3-hexenilo butirato de 3-hexenilo

17 Ensayos biológicos de comportamiento (1) Túnel de viento (40 x 40 x 200 cm)

18 Ensayos biológicos de comportamiento (2) Olfatómetros 2 diámetros Jaula de malla metálica

19 Electroantenografía Entrada de la sustancia volátil - Referencia: acetato de etilo - Componentes feromonales - Aromas de material vegetal

20 Ensayos de campo Feromona Feromona + kairomona Distintos diseños de trampa

21 DESARROLLO DE NUEVOS MÉTODOS ECOLÓGICOS DE CONTROL DE PLAGAS AGROFORESTALES DE LA COMUNITAT VALENCIANA MEDIANTE EL USO DE SEMIOQUÍMICOS Y SU POSIBLE COMBINACIÓN CON AGENTES DE CONTROL MICROBIOLÓGICOS NATURALES Gracias por su atención Sandra Vacas González

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