ANEXOS A LA SOLICITUD DE DEPÓSITO DE LA LÍNEA CELULAR [TSD]FiPS-4F-3-1 EN EL BANCO NACIONAL DE LÍNEAS CELULARES.
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- Juan José Vázquez Gómez
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1 ANEXOS A LA SOLICITUD DE DEPÓSITO DE LA LÍNEA CELULAR [TSD]FiPS-4F-3-1 EN EL BANCO NACIONAL DE LÍNEAS CELULARES. Página 1 de 21
2 ANEXOS Anexo 1: Resultado Test de micoplasma (PCR) [TSD]FiPS-4F-3-1 Anexo 2: Fenotipo. Marcadores de pluripotencia [TSD]FiPS-4F-3-1 Anexo 3: Cariotipo [TSD]FiPS-4F-3-1 Anexo 4: Diferenciación in vitro [TSD]FiPS-4F-3-1 Anexo 5: Diferenciación in vivo [TSD]FiPS-4F-3-1 Anexo 6: Genotipación de los fibroblastos originales Coriell; GM00527 y [TSD]FiPS-4F-3-1 Página 2 de 21
3 Anexo 1 Resultado Test de micoplasma (PCR) Página 3 de 21
![K -Resultado test micoplasma [TSD]FiPS-4F-3-1](/docs-images/84/89088789/images/4-1.jpg "pase 7 y pase12 postcre: Negativo Página 4 de")
4 K -Resultado test micoplasma [TSD]FiPS-4F-3-1 pase 7 y pase12 postcre: Negativo Página 4 de 21
5 Anexo 2 Fenotipo. Marcadores de pluripotencia [TSD]FiPS-4F-3-1 Página 5 de 21
6 Actividad fosfatasa alcalina de la línea de células pluripotentes [TSD]FiPS-4F-3-1 Página 6 de 21
![[TSD]FiPS-4F-3-1 para Nanog y TRA1-81](/docs-images/84/89088789/images/7-2.jpg "Oct-4 SSEA-3 Inmuno-reactividad de la")
![[TSD]FiPS-4F-3-1 para Oct-4 Página 7](/docs-images/84/89088789/images/7-3.jpg "de 21")
7 Nanog TRA1-81 Inmuno-reactividad de la línea de células madre pluripotentes [TSD]FiPS-4F-3-1 para Nanog y TRA1-81 Oct-4 SSEA-3 Inmuno-reactividad de la línea de células madre pluripotentes [TSD]FiPS-4F-3-1 para Oct-4 Página 7 de 21
8 Sox2 SSEA-4 Tra1-60 Inmuno-reactividad de la línea de células madre pluripotentes [TSD]FiPS-4F-3-1 para Sox-2, SSEA-4 y TRA1-60 Página 8 de 21
9 Anexo 3 Cariotipo [TSD]FiPS-4F-3-1 Página 9 de 21
10 Nombre muestra: TS FiPS-4F-3-1 Fecha: Barcelona, 21/11/2013 ESTUDIO CITOGENÉTICO El resultado obtenido en el estudio citogenético realizado en la muestra TS FiPS-4F-3-1 es: -Resultado citogenético: 46, XY Se han estudiado un total de 20 metafases procedentes de cultivos celulares de la muestra. Observaciones: El resultado citogenético no excluye la presencia de anomalías no detectables debido a limitaciones propias de la técnica, como pueden ser: mosaicos de baja frecuencia y alteraciones estructurales de medida pequeña (microdeleciones y microduplicaciones). Los estudios citogenéticos tienen una fiabilidad superior al 99%. Dra. Cristina Gómez Santos Página 10 de 21
11 Página 11 de 21
12 Anexo 4 Diferenciación in vitro [TSD]FiPS-4F-3-1 Página 12 de 21
13 ASMA AAS Diferenciación in vitro a mesodermo: Células positivas para ASMA y AAS Tuj1 Diferenciación in vitro a ectodermo: Células positivas para Tuj1 Página 13 de 21
14 AFP FOXA2 Diferenciación in vitro a endodermo: Células positivas para AFP y FOXA2 Página 14 de 21
15 Anexo 5 Diferenciación in vivo [TSD]FiPS-4F-3-1 Página 15 de 21
16 SMA Diferenciación in vivo a mesodermo: Células positivas para SMA CHD Sox9 Diferenciación in vivo a mesodermo: Células positivas para CHD (chondroitin sulfate) y Sox9 Página 16 de 21
17 TUJ-1 GFAP Diferenciación in vivo a ectodermo: Células positivas para TUJ1 y GFAP. AFP FOXA2 Diferenciación in vivo a endodermo: Células positivas para AFPy FOXA2 Página 17 de 21
18 Anexo 6 Genotipación de los fibroblastos originales Coriell; GM00527 y [TSD]FiPS-4F-3-1 Página 18 de 21
19 TAY SACHS FIBROBLASTS GENOTYPING Sample: Fibroblast TSD, Coriell GM00527 HEXA gene Exon 11 WT GCAAAAAGCCATCTCCTCAGCTTTGTGTCCTTACTGCCATTTGACCTTTTATAACAGAT TCAGCCAGACACAATCATACAGGTGTGGCGAGAGGATATTCCAGTGAACTATATGAAG GAGCTGGAACTGGTCACCAAGGCCGGCTTCCGGGCCCTTCTCTCTGCCCCCTGGTACCT GAACCGTATATCCTATGGCCCTGACTGGAAGGATTTCTACGTAGTGGAACCCCTGGCAT TTGAAGGTGAAAGCAGAGAGCTCTCCTTGCTAACCAAAGGAGGCTGGGTTGGGGCACA GGATGGGAGGCAGGAAGGTCTGGGCCAGACATTTCCAGTTAGTAAATGAAACAACTTA GCTGGGGTGAGGGCCACATGGGAGGGATTAGGAGGTACAAATCCGCAAAAACGGTG HEXA gene Exon 11 TSD GCAAAAAGCCATCTCCTCAGCTTTGTGTCCTTACTGCCATTTGACCTTTTATAACAGAT TCAGCCAGACACAATCATACAGGTGTGGCGAGAGGATATTCCAGTGAACTATATGAAG GAGCTGGAACTGGTCACCAAGGCCGGCTTCCGGGCCCTTCTCTCTGCCCCCTGG/CTACC TGAACCGTATATCCTATGGCCCTGACTGGAAGGATTTCTACGTAGTGGAACCCCTGGCA TTTGAAGG/ATGAAAGCAGAGAGCTCTCCTTGCTAACCAAAGGAGGCTGGGTTGGGGC ACAGGATGGGAGGCAGGAAGGTCTGGGCCAGACATTTCCAGTTAGTAAATGAAACAAC TTAGCTGGGGTGAGGGCCACATGGGAGGGATTAGGAGGTACAAATCCGCAAAAACGGT G Mutation 1: c.1260g>c Mutation 2: c G>A Result: Reverse sequencing. 2 heterozygotic mutations. Página 19 de 21
20 GENOTYPING [TSD]-FiPS-4F-3-1 Página 20 de 21
21 c.1260 G>C IVS11+1 G>A C C C C T G C T A C C T G T T G A A G A T G A A A G Result: Compound heterozygote mutation c.1260g> C corresponding to aminoacidic change p.trp420cys. And other allele mutation c G> A corresponding to splicing IVS11 +1 G> A Página 21 de 21
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Pablo Menendez (Instituto Josep Carreras-Barcelona) y Plácido Navas (CABD-UPO-Sevilla)
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Investigador principal: Martín Muñoz López, Pablo Menéndez y José Luis García Pérez. Principal Investigator:
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Investigador principal: Juan Carlos Izpisúa Belmonte, Trond Aasen, Alessandra Giorgetti Principal Investigator:
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