DETERMINACIÓN DE HIDROCARBUROS ALIFÁTICOS SATURADOS EN ALIMENTOS
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- José Ángel José Antonio Ojeda Alarcón
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1 CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN Jornadas de Referencia sobre Micotoxinas e Hidrocarburos Aromáticos Policíclicos (6 de Junio de 2013) DETERMINACIÓN DE HIDROCARBUROS ALIFÁTICOS SATURADOS EN ALIMENTOS (ACEITES COMESTIBLES DE ORIGEN VEGETAL) María José Nogueiras UNIDAD DE TOXINAS Y HAPS Centro Nacional de Alimentación Agencia Española de Seguridad Alimentaria y Nutrición Majadahonda, Madrid
2 ÍNDICE INTRODUCCIÓN ANTECEDENTES HISTÓRICOS ESTIMACIÓN DEL RIESGO MEDIDAS ADOPTADAS EJERCICIOS COLABORATIVOS METODO MODIFICADO VENTAJAS VALIDACIÓN ESTUDIOS PROSPECCIÓN
3 HIDROCARBUROS ALIFATICOS SATURADOS DE ORIGEN NATURAL Número impar de átomos de carbono
4 HIDROCARBUROS ALIFATICOS SATURADOS DE ORIGEN NATURAL
5 ANTECEDENTES HISTÓRICOS 23 Abril 2008 Elevados niveles de aceite mineral en aceite de girasol importado de Ucrania Hasta 7000 mg/kg en aceite crudo y 1200 mg/kg en aceite refinado de girasol
6 CARACTERIZACIÓN DEL RIESGO CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN ANTECEDENTES HISTÓRICOS Aceites minerales de alta viscosidad EFECTOS SOBRE: - SISTEMA HEMATOLÓGICO - SISTEMA HEPÁTICO - SISTEMA CARDIACO INGESTA DIARIA ADMISIBLE (IDA) 20 mg/kg peso y día
7 ANTECEDENTES HISTÓRICOS
8 ESTIMACIÓN DEL RIESGO Comisión europea 10 junio de 2008 DECISIÓN 2008/433/EC 20 junio de 2008 Comité permanente para la Cadena Alimentaria y la Salud Animal NIVELES MAXIMOS NORMAS TOMA MUESTRAS REQUISITOS MÉTODOS ANALÍTICOS
9 REQUISITOS MÉTODOS ANALÍTICOS -Etapa fraccionamiento (columnas óxido de aluminio ó silicagel) %Rc 80% -CG/FID ó CG/EM -Lc < 25 mg/kg (siempre > 50 mg/kg!)
10 LOS ACEITES MINERALES
11 LOS ACEITES MINERALES
12 2º ESTUDIO DE INTERCOMPARACIÓN PARA LA DETERMINACIÓN DE HIDROCARBUROS ALIFÁTICOS EXÓGENOS EN ACEITES DE GIRASOL POR CROMATOGRAFÍA DE GASES CON DETECTOR DE IONIZACIÓN DE LLAMA INFORME DE RESULTADOS (Provisional) 26 de Septiembre de 2008
13 LABORATORIOS PARTICIPANTES Instituto de la Grasa de Sevilla (CSIC) Laboratorio Arbitral Agroalimentario Centro de Investigación y Control de la Calidad Laboratorio Central del SOIVRE Laboratorio del SOIVRE en Sevilla Laboratorio Central de Aduanas Centro Nacional de Alimentación (AESAN)
14 Aceite refinado de girasol comercial MUESTRAS Aceite refinado de girasol comercial adicionado con 300 ppm de parafina (nivel A) Aceite refinado de girasol comercial adicionado con 50 ppm de parafina (nivel B) Aceite refinado de girasol contaminado
15 RESUMEN CARACTERÍSTICAS DEL PROTOCOLO ANALÍTICO CON Ag NO 3 (MÉTODO 2) INCLUYENDO LABORATORIOS CON CUANTIFICACIÓN POR CURVA DE CALIBRACIÓN Fecha del estudio Muestra Blanca Agosto Septiembre, 2008 Muestra adicionada a nivel bajo Agosto Septiembre, 2008 Muestra adicionada a nivel medio Agosto Septiembre, 2008 Muestra contaminada a nivel alto Agosto Septiembre, 2008 Laboratorios participantes Nº de resultados aceptables Valor medio, mg/kg 19,7 264,8 60,7 2535,6 HORRATr 0,91 0,29 0,77 0,44 Reproducibilidad 38,1 9,1 16,1 16,1 (Dev. Std. rel.), % Nivel de adición, mg/kg Recuperación ,7 82,0 --- HORRAT R 3,69 1,32 1,86 3,28
16 PROFICIENCY TEST ON THE DETERMINATION OF MINERAL OIL IN SUNFLOWER OIL OBJETIVO Directorate General Health and Consumers (DG SANCO) Institute for Reference Materials and Mesurements (IRMM) Escrutinio sobre la capacidad de los laboratorios oficiales y de control de industrias de determinar aceite mineral en aceite de girasol
17 PROFICIENCY TEST ON THE DETERMINATION OF MINERAL OIL IN SUNFLOWER OIL CONTENIDO DEL EJERCICIO 3 MUESTRAS: -Aceite de girasol crudo naturalmente contaminado -Aceite de girasol refinado naturalmente contaminado -Aceite de girasol adicionado con aceite mineral 62 LABORATORIOS DE LA EU, SUIZA Y UCRANIA MÉTODOS VALIDADOS INTERNAMENTE
18 PROFICIENCY TEST ON THE DETERMINATION OF MINERAL OIL IN SUNFLOWER OIL RESULTADOS - Aceite crudo de girasol naturalmente contaminado Z-score -0,7
19 PROFICIENCY TEST ON THE DETERMINATION OF MINERAL OIL IN SUNFLOWER OIL RESULTADOS - Aceite refinado de girasol naturalmente contaminado Z-score -0,5
20 PROFICIENCY TEST ON THE DETERMINATION OF MINERAL OIL IN SUNFLOWER OIL RESULTADOS Aceite de girasol adicionado con aceite mineral Z-score -0,9
21 ESTUDIO DE PROSPECCIÓN ACEITE DE GIRASOL COMUNIDADES AUTÓNOMAS 158 MUESTRAS ACEITE DE GIRASOL RESULTADOS CUANTIFICANDO CON CURVA DE N-EICOSANO 22 MUESTRAS UCM > 50 mg/kg (13,9%) 4 MUESTRAS UCM > 300 mg/kg (2,53%)
22 PROCEDIMIENTO ANALÍTICO Preparación gel de sílice argentada Preparación columnas Fraccionamiento aceite Evaporación sequedad Redisolución Cuantificación y tratamiento datos Inyección CG/EM
23 PROCEDIMIENTO ANALÍTICO VENTAJAS FRENTE A PROTOCOLO CONVENCIONAL 1.- MENOR VOLUMEN DE DISOLVENTES ~ 150 ml ~ 20 ml
24 PROCEDIMIENTO ANALÍTICO VENTAJAS FRENTE A PROTOCOLO CONVENCIONAL 2.- MENOR TIEMPO DE ANÁLISIS Fraccionamiento simultáneo de hasta 12 muestras
25 PROCEDIMIENTO ANALÍTICO VENTAJAS FRENTE A PROTOCOLO CONVENCIONAL 2.- MENOR TIEMPO DE ANÁLISIS Evaporación simultánea de todos los extractos
26 Área Árae 1. N-DECANO (C10) CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN IDENTIFICACIÓN DE LOS PICOS CROMATOGRÁFICOS: min Patrón n-decano Tiempo 15 (min) TETRAPENTACONTANO (C54) 500 Patrón n-tetrapentacontano 400 Integración entre t R C10 y C min Tiempo 15 (min)
27 Área CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN IDENTIFICACIÓN DE LOS PICOS CROMATOGRÁFICOS: 2.- N-EICOSANO (C20) Patrón interno Curvas calibración Control % Rc 80% Patrón n-eicosano 10.0 min Tiempo 15 (min)
28 Área CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN IDENTIFICACIÓN DE LOS PICOS CROMATOGRÁFICOS: 3.PICO ANCHO DE15 min UCM (Unresolved Complex Mixture) mezcla compleja de hidrocarburos de origen mineral Tiempo (min) 30
29 PROCEDIMIENTO ANALÍTICO CUANTIFICACIÓN 1.- Area de los hidrocarburos totales Ht + C20
30 PROCEDIMIENTO ANALÍTICO CUANTIFICACIÓN 2.- Area de los hidrocarburos normales N + C20
31 VALIDACIÓN INTERNA ACEITE DE GIRASOL EXACTITUD/ RECUPERACIÓN Nivel 26 mg/kg :96,0% (cv R = 7,5 %, n= 6) = Límite de cuantificación Nivel 52 mg/kg :96,0% (cv R = 6,1%, n= 6) Nivel 747 mg/kg :81,0% (cv R = 1,2 %, n= 6) REPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD INTERNA cv <10% en todos los niveles CURVAS CALIBRACIÓN C20: Intervalo: 20,0 mg/kg-900 mg/kg Coeficiente de correlación (r 2 ):0,9999 Linealidad %
32 VALIDACIÓN INTERNA ACEITE DE GIRASOL
33 VALIDACIÓN INTERNA ACEITE DE OLIVA EXACTITUD/ RECUPERACIÓN Nivel 26,0 mg/kg :95,90% (cv R = 3,79 %, n= 6) = Límite de cuantificación Nivel 53,95 mg/kg :85,75% (cv R = 4,17 %, n= 6) Nivel 429,48 mg/kg :86,05 % (cv R = 5,67%, n= 6) REPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD INTERNA cv <10% en todos los niveles CURVAS CALIBRACIÓN C20: Intervalo: 20,0 mg/kg-900 mg/kg Coeficiente de correlación (r 2 ):0,9999 Linealidad %
34 VALIDACIÓN INTERNA ACEITE DE OLIVA C20
35 VALIDACIÓN INTERNA ACEITE DE ORUJO DE OLIVA EXACTITUD/ RECUPERACIÓN Nivel 60,0 mg/kg :90,2% (cv R = 6,1%, n=5) Nivel 440,6 mg/kg :93,4% (cv R = 6,1%, n=6) Nivel 771,0 mg/kg :80,6% (cv R = 1,2%, n=5) REPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD INTERNA cv <10% en todos los niveles CURVAS CALIBRACIÓN C20: Intervalo: 20,0 mg/kg-900 mg/kg Coeficiente de correlación (r 2 ):0,9990 Linealidad %
36 VALIDACIÓN INTERNA ACEITE DE ORUJO DE OLIVA
37 mg/kg CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN ESTUDIO PROSPECCIÓN- Aceite de oliva Limite cuantificación muestras analizadas 29 muestras < Lc (25,5 mg/kg) 2 muestras < Ld (1,48 mg/kg) 5 muestras > 50 mg/kg)
38 mg/kg CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN ESTUDIO PROSPECCIÓN- Aceite de cobertura de girasol Conservas en aceite de girasol: Atún Pulpo Sardinillas Caballa Lc muestras < Lc (25,95 mg/kg)
39 MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCIÓN
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