Detección n de arroz MG no autorizado en productos de arroz procedentes de China

Tamaño: px

Comenzar la demostración a partir de la página:

Download "Detección n de arroz MG no autorizado en productos de arroz procedentes de China"

Catalina Rosa Medina Redondo
hace 6 años
Vistas:

1 CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN Detección n de arroz MG no autorizado en productos de arroz procedentes de China Silvia Gil Alcalde Servicio de Biotecnología Jornadas de Referencia Análisis de Alimentos. Majadahonda de junio

2 Decisión 2011/884/UE Métodos propuestos (Puesta a punto) Estudio CNA

3 ESTUDIO SOBRE PRODUCTOS DE ARROZ PROCEDENTES DE CHINA : PLANTEAMIENTO Adquirir muestras de arroz y/o productos de arroz procedentes dechina y otros países asiáticos: -Productos adquiridos en supermercados -Productos adquiridos en centros de distribución de productos asiáticos Realizar el estudio comparativo de los métodos propuestos en Decisión. Comprobación screening: Promotor 35S y Tnos - SYBR Green - TaqMan Duplex Búsqueda del gen CryIAb/Ac: SYBR Green Muestras positivas: Comprobación de construcciones específicas: Pubi-cry/ 35S-hpt/ Cpti-nos

4 MUESTRAS Distintos tipos de muestras fijándonos en el anexo de la decisión

5 TIPO DE PRODUCTOS UTILIZADOS SOPA NOODLES HARINA DE ARROZ PASTA DE ARROZ PAPEL DE ARROZ ARROZ EN LÁMINA ARROZ VERMICELLI FIDEOS DE ARROZ RICE STICK GALLETAS DE ARROZ 0 OTROS NºMUESTRAS TOTALES: 35

6 PROCEDENCIA

7 COMPOSICIÓN DE LAS MUESTRAS COMPOSICIÓN Nº MUESTRAS Arroz único ingrediente 26 Soja 5 Otros 4

8 EXTRACCIÓN Método CTAB MODIFICACIONES: + Agua + Buffer extracción Partir de mayor cantidad de muestra (>100mg) Volumen elución 50 µl(más concentrado)

9 Rendimiento de la extracción GRUPO CONCENTRACIÓN (ng/µl) PUREZA (A260/A280) Arroz (granel) 44,81 1,91 Sopas 26,54 1,90 Harina y pasta de arroz 17,63 1,85 Papel de arroz 51,4 1,85 Arroz en lámina 29,9 2 Arroz vermicelli 40,4 1,8 Rice stick 35,65 1,97 Galletas de arroz 38,52 1,88 Fideos arroz 44,44 1,97 Otros 41,94 1,84

10 RESULTADOS TOTALES INICIALES Nº muestras 35 NEGATIVAS 20 POSITIVAS 8 DUDOSAS 7

11 RESULTADOS DE 35S- tnos Nº MUESTRAS SYBR Green TAQMAN 35S tnos 35S tnos 21** ND ND ND ND 8 * ND + ND 2 + ND ND ND * Una de las muestra contenia soja RR ** 3 resultaron positivas para Cry1Ab

12 MUESTRAS POSITIVAS EN SCREENING: ASEGURAR RESULTADO -Contaminación por organismos (virus o bacterias) -Existencia de otras variedades vegetales Negativas Negativas Una muestra positiva a RR

13 RESULTADOS DE CRYIAb/Ac Dificultades en la interpretación de resultados: Ct aproximadamente ciclo 36 Tm dentro del rango de T de los controles (Rango muy amplio de Temperaturas 2 controles Bt11 y MON810) Picos más pequeños 35S/NOS/CryIAb Algunas muestras únicamente resultado de CryIAb/Ac No existe criterio para el punto de corte CryIAb MUESTRAS 4 3

14 CryIAb: Muestras con Ct ~ 36 y Tm similar a los controles pero señal muy pequeña Señal de los controles Bt11 y MON810 Señal de las muestras Ct y Ct Dificultad en la interpretación de las señales detectadas (Tm y valor de Ct)

15 77,7 ºC 82,4 ºC Tm: 79,2ºC Bt11 y 80,9 ºC MON810 Rango aceptado: 77,7-82,4 º C

16 IDENTIFICACIÓN: BÚSQUEDA DE CONSTRUCCIONES ESPECÍFICAS Pubi-cry Cpti-nos 35S-hpt De las 7 muestras positivas en screening, sólo 3 dieron resultados positivo * A testingcascadeforthedetectionofgeneticallymodifiedrice by real-time PCR in foodandits applicationfordetectionofanunauthorizedrice linesimilar tokefeng6 Ralf Reiting, Lutz Grohmann, Dietrich Mäde(2010)

17 RESULTADOS POSITIVAS 35S -NOS -CryIAb/Ac Pubi-cry- Cpti-nos - 35S-hpt 3 35S -NOS -CryIAb/Ac 4 DUDOSAS CryIAb/Ac 3 35S 4

18 RESULTADOS FINALES 23% 67% Nº muestras 35 NEGATIVAS 21 POSITIVAS 3* DUDOSAS 7 10% De las 7 positivas 4 son la misma muestra y 2 son misma muestra y marca

19 ALERTAS Fuente: RASSF (10/05/2013)

20 CONCLUSIONES CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN 1.-Se han detectado secuencias transgénicas que indicarían la presencia de arroz MG no autorizado, en 7 de las 35 muestras analizadas 2.-De las siete muestras con resultados positivos, 4 correspondían al mismo tipo de producto, sopas china de distintos sabores, y 2 a galletas de arroz de la misma marca comercial. 3.-Siete de las muestras analizadas, se han considerado dudosas, en 4 de ellas se ha detectado únicamente secuencias de CryIAb/Ac y en 3 secuencias correspondientes al promotor 35S. 4.-Ninguna de las muestras en las que se ha detectado la presencia de secuencias transgénicas, contenían elementos naturales como virus (CaMV) o Agrobacterium. 5.-Se ha considerado que la presencia de secuencias transgénicas 35S y T-nos en una de las muestras era debida a la presencia de soja RR entre sus ingredientes. 6.-Los estudios llevados a cabo, ponen de manifiesto la dificultad en la interpretación de resultados del método SYBR Green para la detección de CryIAb/Ac

21 Centro Nacional de Alimentación MUCHAS GRACIAS Servicio de Biotecnología Mª Isabel Prieto Santos Silvia Gil Alcalde Josefina Gangoso Herreras Mª Luisa Salvador Pulgar Esther Rico Cañada ada Miriam Gómez G Martín Mª del Camino Martín n Forero Mercedes Fernández ndez de la Puebla Mª Isabel Rodríguez PérezP

Documentos relacionados

Presencia de sojas modificadas geneticamente en productos del mercado

Presencia de sojas modificadas geneticamente en productos del mercado Josefina Gangoso Herreras Servicio de Biotecnología Ampliación n alcance acreditación Nuevas autorizaciones sojas MG Centro Nacional