Laboratorio Integrado de Citogenética
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- María Luisa Sandoval Quintero
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1 Laboratorio Integrado de Citogenética 2016/2017 Código: Créditos ECTS: 9 Titulación Tipo Curso Semestre Citogenética y Biología de la Reproducción OT 0 2 Contacto Uso de idiomas Nombre: Immaculada Ponsa Arjona Lengua vehicular mayoritaria: catalán (cat) Correo electrónico: Imma.Ponsa@uab.cat Equipo docente Joaquim Martí Clúa Francisca García Haro Vicenç Català Cahís Ana Martinez Marchal Daniel Yero Corona Covadonga Vara Ana Sierra Martin Maria Angels Rigola Tor Mónica Roldán Molina Ignasi Roig Navarro Martí de Cabo Jaume Prerequisitos No hay prerequisitos para cursar este módulo diferentes de los necesarios para acceder a este máster. Objetivos y contextualización El módulo "Laboratori Integrat de Citogenètica" es un módulo práctico obligatorio de la especialidad de Citogenética. El objetivo principal es proporcionar a los estudiantes las herramientas básicas para aplicar las técnicas de citogenética que se utilizan en los laboratorios de diagnóstico genético y en los laboratorios de investigación. Los objetivos formativos de este módulo son: 1- Adquirir la habilidad de trabajar en condiciones estériles para establecer un cultivo celular a partir del cual se obtendrán células en diferentes estadios mitóticos. 2- Identificar diferentes tipos de contaminación presente en cultivos celulares. 3- Obtener cortes histológicos y aplicar diferentes tinciones. 1
2 4- Aprender a utilizar diferentes tipos de microscopios: de campo claro, de fluorescencia y de rastreo láser confocal. 5- Identificar los cromosomas humanos según el patrón de bandas G y hacer el cariotipo. Detectar las alteraciones de este patrón de bandas. 6- Detectar proteínas y secuencias de DNA mediante técnicas de inmunocitofluorescencia y hibridación in situ fluorescente (FISH), respectivamente. 7- Identificar genes afectados en una región del genoma, buscar su secuencia y fabricar una sonda de DNA marcada con un fluorocromo para aplicar las técnicas de FISH. Competencias Aplicar el método científico y el razonamiento crítico en la resolución de problemas. Aplicar los conocimientos teóricos a la práctica tanto en un entorno de investigación como en el ámbito clínico-asistencial. Demostrar capacidad de trabajo en equipo y de interacción con profesionales de otras especialidades. Diseñar experimentos, analizar datos e interpretar los resultados. Diseñar y ejecutar protocolos de análisis en el ámbito del Máster. Poseer y comprender conocimientos que aporten una base u oportunidad de ser originales en el desarrollo y/o aplicación de ideas, a menudo en un contexto de investigación. Que los estudiantes posean las habilidades de aprendizaje que les permitan continuar estudiando de un modo que habrá de ser en gran medida autodirigido o autónomo. Que los estudiantes sean capaces de integrar conocimientos y enfrentarse a la complejidad de formular juicios a partir de una información que, siendo incompleta o limitada, incluya reflexiones sobre las responsabilidades sociales y éticas vinculadas a la aplicación de sus conocimientos y juicios. Que los estudiantes sepan aplicar los conocimientos adquiridos y su capacidad de resolución de problemas en entornos nuevos o poco conocidos dentro de contextos más amplios (o multidisciplinares) relacionados con su área de estudio. Que los estudiantes sepan comunicar sus conclusiones y los conocimientos y razones últimas que las sustentan a públicos especializados y no especializados de un modo claro y sin ambigüedades. Utilizar la capacidad creativa, organizativa y analítica en la toma de decisiones. Utilizar y gestionar información bibliográfica o recursos informáticos en el ámbito del máster, en las lenguas propias y en inglés. Resultados de aprendizaje Aplicar el método científico y el razonamiento crítico en la resolución de problemas. Aplicar las técnicas de citogenética molecular en diferentes tipos celulares. Aplicar las técnicas de histología en diferentes tejidos del organismo. Aplicar las técnicas de inmunocitofluorescencia en diferentes tipos celulares. Aplicar los conocimientos teóricos a la práctica tanto en un entorno de investigación como en el ámbito clínico-asistencial. Demostrar capacidad de trabajo en equipo y de interacción con profesionales de otras especialidades. Demostrar la capacidad de trabajar en condiciones de esterilidad en el laboratorio de cultivo. Diseñar experimentos, analizar datos e interpretar los resultados. Poseer y comprender conocimientos que aporten una base u oportunidad de ser originales en el desarrollo y/o aplicación de ideas, a menudo en un contexto de investigación. Que los estudiantes posean las habilidades de aprendizaje que les permitan continuar estudiando de un modo que habrá de ser en gran medida autodirigido o autónomo. Que los estudiantes sean capaces de integrar conocimientos y enfrentarse a la complejidad de formular juicios a partir de una información que, siendo incompleta o limitada, incluya reflexiones sobre las responsabilidades sociales y éticas vinculadas a la aplicación de sus conocimientos y juicios. 2
3 Que los estudiantes sepan aplicar los conocimientos adquiridos y su capacidad de resolución de problemas en entornos nuevos o poco conocidos dentro de contextos más amplios (o multidisciplinares) relacionados con su área de estudio. Que los estudiantes sepan comunicar sus conclusiones y los conocimientos y razones últimas que las sustentan a públicos especializados y no especializados de un modo claro y sin ambigüedades. Reconocer las diferentes acciones que se pueden realizar en un microscopio láser confocal. Relacionar la información obtenida de las diferentes bases de datos on-line, sobre la secuencia y localización genómica. Utilizar la capacidad creativa, organizativa y analítica en la toma de decisiones. Utilizar y gestionar información bibliográfica o recursos informáticos en el ámbito del máster, en las lenguas propias y en inglés. Contenido Tema 1. Aplicación de herramientas bioinformáticas Búsquedas avançadas en los navegadores del genoma humano. Búsqueda de secuencias associadas a enfermedades genéticas. Identificación de genes afectados. Búsqueda de BACs. Resolución de casos clínicos. Tema 2. Cultivo celular Cultivo in vitro de una línea celular. Extracción y fijación celular. Control de contaminación. Tema 3. Técnicas de análisis y identificación cromosómica Bandas G: cariotipo normal y alterado. Hibridación in situ fluorescente (FISH): cultivo de BACs, marcaje de la sonda e hibridación. Inmunocitofluorescencia. Tema 4. Actualización en técnicas histológicas La técnica histológica: confección de bloques de parafina con distintas orientaciones de la muestra. Obtención de cortes con micrótomo. Tinciones topográficas. Métodos inmunocitoquímicos. Aplicación de la citometría de flujo en experimentación. Observación microscópica y digitalización de imágenes. Procesamiento de imágenes mediante Photoshop. Tema 5. Microscopía de rastreo láser confocal Fundamentos de la microscopía de fluorescencia y confocal. Preparación de las muestras. Captación de la imagen en el microscopio confocal. Procesamiento de las series de imágenes. Metodología El Módulo "Laboratori integrat de citogenètica" es básicamente práctico. Contará con la realización de prácticas en el laboratorio, en el aula de bioinformática y en el Servei de Microscòpia de la UAB. Actividades Título Horas ECTS Resultados de aprendizaje Tipo: Dirigidas Actualización en técnicas histológicas 20 0,8 1, 5, 3, 6, 8 Aplicación de herramientas bioinformáticas 4 0,16 1, 5, 8, 12, 10, 15, 17 Cultivo cel lular 5 0,2 1, 5, 6, 7, 8 3
4 Microscopia de rastreo láser confocal 10 0,4 5, 6, 8, 14 Técnicas de análisis y identificación cromosómica 24 0,96 1, 5, 2, 4, 6, 8, 12, 17 Tipo: Supervisadas Preparación de la composición fotográfica 5 0,2 12, 10, 17 Preparación de los informes de prácticas 15 0,6 5, 6, 16, 12, 13, 11, 10, 9 Preparación de los problemas y casos prácticos 10 0,4 1, 5, 6, 8, 16, 12, 13, 11, 10, 9, 17 Tutorias personalizadas 30 1,2 12, 13, 11, 10 Tipo: Autónomas Elaboración de los informes de los resultados de las prácticas 20 0,8 6, 8, 16, 13, 11, 10, 9, 17 Estudio 70 2,8 16, 12, 13, 11, 10, 9, 17 Resolución de casos prácticos o problemas 12 0,48 1, 5, 6, 7, 8, 16, 12, 13, 11, 10, 9, 17 Evaluación Para superar el módulo será necesario obtener una puntuación mínima de 5 puntos de un máximo de 10. Un estudiante obtendrá la calificación de "No evaluable" si el número de actividades de evaluación ha sido inferior al 50% de las actividades programadas por la asignatura. La nota final es la suma ponderada de la nota de cada actividad de evaluación. El peso de cada actividad de evaluación está relacionada con el tiempo dedicado a dicha actividad. En cada una de las actividades, la asistencia y la participación activa representa un 10% de la nota. Las actividades de evaluación programadas son: 1. Aplicación de herramientas bioinformáticas (6% de la nota del módulo) - Resolución de unos ejercicios o problemas utilizando herramientas bioinformáticas. 2. Cultivo celular, hibridación in situ fluorescente e inmunocitofluorescencia (38% de la nota del módulo) - Entrega de un informe con los resultados obtenidos mediante la aplicación de estas técnicas. 3. Cariotipo (8% de la nota del módulo) - El sistema de evaluación se organiza en dos apartados: 1) resolución de cariotipos normales y alterados con el programa "Human Karyolab" (40%), resolución y entrega de cariotipos con anomalías, indicando la fórmula, características clínicas de la anomalía y riesgo de tener descendencia afectada (60%). 4. Actualización en técnicas histológicas (32% de la nota del módulo) - El sistema de evaluación se organiza en tres apartados: 1) aprovechamiento de las sesiones prácticas (20%), 2) entrega individual de un informe y cuestionario (40 %) y 3) realización de una composición fotográfica utilizando el programa Photoshop (40%). 5. Microscopía de rastreo láser confocal (16% de la nota del módulo) - El sistema de evaluación se organiza en tres apartados: 1) aprovechamiento de las sesiones prácticas (10%), 2) resolución de un caso práctico (40%) y realización de un examen escrito (50%). Actividades de evaluación Título Peso Horas ECTS Resultados de aprendizaje Actualización en técnicas histológicas 32% 0 0 1, 3, 6, 12, 10, 17 4
5 Aplicación de técnicas bioinformáticas 6% 0 0 1, 8, 12, 13, 10, 15, 17 Cariotipo 8% 0 0 5, 12, 13, 11, 10, 17 Cultivo celular, hibridación in situ fluorescente e inmunocitofluorescencia 38% 0 0 1, 5, 2, 4, 6, 7, 8, 16, 12, 13, 11, 10, 15, 9, 17 Microscopia de rastreo láser confocal 16% 0 0 1, 5, 6, 12, 13, 11, 10, 14, 17 Bibliografía Libros Webs Animal Cell Culture Methods. Methods in Cell Biology.J.P. Mather and D. Barnes Eds. Academic Press Cell and Tissue Culture: Laboratory procedures in biotechnology.a. Doyle and J.B. Griffiths Eds. JohnWiley & Sons Ltd Culture of animal cells. A manual of basic technique (6th ed.) RI Freshney. Wiley-Liss, 2010 Cytogenetic and genome research. RH Martin. Karger,2002 Chromosome Abnormalities and genetic counseling (3rd ed). RJ McKinlay & GR Sutherland, Oxford University Prees, 2004 ISCN An International System for Human Cytogenomic Nomenclature (2016). McGowan-Jordan J, Simons A, Schmid M, editors. Karger Theory and Practice of Histological Techniques (sixth edition). John D. Bancroft, Churchill Livingstone. Elsevier Mammals Project - Cytogenetic Resources Discover Life - Ensembl - GeneReviews - Genetics Home Reference - Genome 10K Project - Online Mendelian Inheritance in Man (OMIM) - Orphanet - PubMed - The National Center for Biotechnology Information - TIMETREE - UCSC Genome Bioinformatics Site - University of Wisconsin - La bibliografía específica correspondiente a los diversos contenidos del módulo podrá ser solicitada a los profesores responsables de impartir cada una de las partes. 5
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