Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

Transcripción

1 Consenso Internacional sobre Nomenclatura Estandarizada de Patrones de Células HEp-2 de los Anticuerpos (ICAP) y Consenso sobre nomenclatura en España (SEQC/SEI-GEAI) Ángela Carrasco Sayalero F.E.A. en Inmunología Servicio de Inmunología, Hospital Ramón y Cajal Málaga 2017

2 SE DENOMINAN AC NATURALES A LOS AC QUE ESTAN PRESENTES EN EL SUERO DE INDIVIDUOS SANOS EN AUSENCIA DE INMUNIZACION DELIBERDA DE CUALQUIER ANTIGENO, UNA GRAN MAYORIA DE AC NATURALES REACCIONA CON UNO O MAS AUTO-ANTIGENOS Y SON DENOMINADOS AUTOANTICUERPOS NAURALES ESTA DEMOSTRADO QUE LOS AUTOANTICUERPOS REACTIVOS DE CELULAS «B» Y CELULAS «T» ESTAN PRESENTES EN INDIVIDUOS SANO Y VIRTUALMENETE EN TODOS LOS VERTEBRADOS

3 ANA/Hep2 Hep2 son líneas de células tumorales epiteliales obtenidas de carcinoma de laringe humana, que se utilizan como sustrato antigénico estandarizado para la determinación de los anticuerpos antinucleares ANA grupo heterogéneo de Auto-ac dirigidos frente antígenos localizados en el núcleo celular y citoplasma que se detecta en pacientes con diferentes EAS y especialmente las enfermedades del tejido conectivo (CTD) como prueba diagnostica

4 microfilamentos mitocondria núcleo membrana plasmática Centriolo Ribosomas ret. endoplásmico liso nucleolo membrana nuclear cromatina ret. endoplásmico rugoso ANTI-CELL PATTERNS (AC) Golgi Lisosomas

5 ANA EN LA PRÁCTICA CLÍNICA EMTC LES Infecciones APS Ancianos SSc CREST ANA SS + Procesos inflamatorios

6 ANA/IFI ANA mediante IFI es obligado en el diagnóstico de CTD según el Colegio Americano de Reumatología ANA mediante IFI es un marcador de inflamación inespecífico La IFI exige un tratamiento de la muestra individualizado e interpretación de resultado por expertos. La detección de ANA mediante IFI en HEp-2 es necesario ESTANDARIZAR

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8 Wiik AS. Proposal of partipants in the CANTOR project 2000 Taxonomía y clasificación de 29 patrones IFI diferentes. Programa de «sofftware» DOORS. Lecturas de imagines digitalizadas de patrones Hep2 en un monitor LCD. Respaldado por proyecto CANTOR (UE) ( junio1998-julio2000) Consenso entre centros de expertos de inmunología clínica. Colaborar y lograr una versión para evaluar cualitativa y cuantitativamente el reconocimiento de imágenes.

9 The first Brazilian consensus for standardization of ANA in HEp-2 cells Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina Laboratorial (2001) 38: Consenso Brasileiro para pesquisa de autoanticorpos em células HEp-2 Rev Bras Reumatol (2009) 49: Padrões de PAAC-IFI em HEp-2, descrição, principais autoanticorpos associados e associações clínicas mais frequentes Patrones/ Descripcion/ Relevancia clinica

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11 First Argentine consensus for standardization of antinuclear antibodies by indirect immunofluorescence-hep-2. Acta Bioquím Clín Latinoam (2012) Padrões de PAAC-IFI em HEp-2, descrição, principais autoanticorpos associados e associações clínicas mais frequentes. Consideraciones metodológicas para la calidad de los IFI, Recomendaciones técnicas, Patrón obligatorio

12 Brazilian guidelines for autoantibodies on HEp-2 cells. Rev Bras Reumatol (2014) 54:44 50.

13 ICAP (Consenso internacional en patrones de anticuerpos antinucleares) GRUPO DE TRABAJO PARA LLEGAR A UN CONSENSO SOBRE PATRONES MORFOLOGICOS OBSERVADOS EN LA IFI DE Hep2 SE ESTABLECIO EN EL 12 SIMPOSIUM IWAA ( interantional workshop autoantibodies and autoimmunity) BRASIL 2014 SE INSPIRO EN EL SISTEMA DE ESTRANDARIZACION DE PATRONES ANAs, CON 10 AÑOS DE HISOTIRA FORMADO POR MIEMBROS DE ASC ( comité de estandarización de anticuerpos ) IUIS (subcomité de la unión internacional de las sociedades de inmunología) y QAS (control de estandarización y calidad ) ICAP ACTUA COMO SUBCOMITE DE ASC NIVEL DE MIEMBROS APORTAR IDEAS Y CONTRASTAR INICIATIVAS DE LA ICAP CORREGIR ERRORES PONTECIALES Y PROMOCIONAR LA IMPLANTAICON DE LA CLAISFICACION ICAP ESTAR AL IDA DE LAS ACTIVIDADES DE ICAP Y DESCARGARSE POSTER Y ARCHIVOS DE LA WEB DE ICAP MIEMBROS PLENOS: COMITÉ EJECUTIVO DE ICAP MIMBROS ASOICADOS : DESIGNACION DEL COMITÉ EJECUTIVO PARA CONSTRUIR MANTNER Y AVANZAR EN EL ICAP MIEMBROS AFILIADOS : USUARIOS DE ICAP REGISTRADOS QAS ( COMITÉ DE CONTROL DE ESTANDARIZACION Y CALIDAD) MANTENER EL APOYO AL SUBCOMITE EXISTENTE HACER PUBLICO LAS ACITVIDADES DE ESTNDARIZACION A TRAVES DE LA ORGANIZACIÓN DE SIMPOSIUM EN IUIS CONTRIBUIR CON ARTICULOS DE REVISON GENERAL EN LA REVISTA «FRONTIERS IN INMUNOLOGY» BUSQUEDA DE INVERSORES PARA INCREMENTAR ACTIVIDADES 2019 IUIS BEIJING ( CHINA) EN EL 17º CONGRESO INTERANCIONAL DE INMUNOLOGIA

14 El 1º ICAP Se crea el comité internacional de estandarización de patronas ANAs con una pagina web titulada ANApatterns.org con imágenes de patrones e información relacionada con cada patrón de ANA

15 Nivel competente: Deben ser reconocidos fácilmente. Clínicamente relevantes. Nivel experto: Difíciles de reconocer Nivel de experiencia considerable.

16 Marcadores diagnósticos : E. Neurológicas, Miositis inflamatorias, E. Neuromusculares Estandarización de Test de Anticuerpos ; IAS, ICAP Valor de los Ac. a nivel de Predicción, Pronostico y Prevención

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19 3º ICAP, oct del 2016, 13 IWAA EN Kyoto (Japan) PROMOCIONAR EL USO DEL GLOSARIO ANA-PATTERNES UTILIZAR NIVELES DE COMPETENTE Y EXPERTO EN LOS LABORATORIOS EN FUNCION DE SU COMPLEJIDAD AUMENTAR TRADUCCIONES A TURCO, JAPONES Y ALEMAN EN LA WEB PROMOBER LA INCLUSION DE NUEVAS IMÁGENES NUEVOS SUSTRATOS PARA HEP2 ( INDUSTRIA) EDUCACION ON-LINE CON DIFERENTES NIVELES DE MODULOS CONSENSO EN INFORMES DE ANA

20 AC-1 GLOSSARIO PATRONES ANA-HEp2 ICAP 2016 Wiik AS (CANTOR project, 2000) NUCLEARES Nuclear homogéneo Nuclear homogeneous Fluorescencia homogénea y regular a través de todo el nucleoplasma, los nucléolos pueden o no fluorecer dependiendo del sustrato celular. Las células en mitosis (metáfase, anáfase y telófase) tienen la cromatina intensamente fluorescente de manera homogénea. 2.1 Nuclear homogéneo Fluorescencia difusa uniforme cubriendo la totalidad del nucleoplasma. Se asocia con distintos anticuerpos, principalmente dirigidos contra componentes cromosómicos (DNA, histonas, ). Marcaje nucleolar homogéneo. En metafase y telofase, puede observarse marcaje homogéneo o periférico de la AC-2 AC-3 dsadn, histonas, nucleosomas LES, lúpus inducido por medicamentos, artritis idiopática juvenil. Nuclear granular fino denso Nuclear dense fine speckled Patrón granular distribuido por todo el núcleo de las células en interfase, con heterogeneidad en tamaño, brillo y distribución de los gránulos. A lo largo del núcleo en interfase, hay algunas zonas más densas y más débiles de los gránulos (rasgo muy característico). La placa metafásica muestra un fuerte patrón granular destacándose algunas manchas DFS70/LEDGF Raro en SSj, ES y LES Centrómero Centromere Granular grueso discreto (40-80/célula) dispersos en los núcleos de las células en interfase y alineados en la masa de la cromatina en las células mitóticas. Por ejemplo anti-cenp-b CENP-A/B (C) ES cutánea limitada, CBP Patrón nuclear homogéneo con nucléolos negativos. Patrón nuclear homogéneo con marcaje nucleolar homogéneo Patrón centromérico NUEVO Puntos discretos bastante uniformes localizados en todo el núcleo (de 40 a 60 puntos por núcleo). Las células en telofase y metafase siempre muestran estos puntos en el cinetocoro de los cromosomas, y pueden reconocer varias proteínas centroméricas (CENP-A, B, C, D, E). Centrómero

21 DFS 70/LEDGFp75 Clinica Técnica % Cistitis Intersticial IFI WB 9 Dermatitis atópica IFI WB ELISA Dermetitis atópica con cataratas IFI WB ELISA 100 Alopecia Areata IFI WB ELISA 19,8 Vogt-Koyanagi- Harada Proteína relacionada con la respuesta al Stress Radiación UV Peróxido de Hidrogeno Alcohol.. SIDA, Cáncer, inflamación.. Anti DFS 70 en diferentes grupos de pacientes ELISA 66,7 Behcet ELISA 34,4 Asma IFI WB 16 ANA + IFI 7,8-38 Robert L.Ochs et al. Clin Exp Med (2016) 16:

22 Autoimmun Highlights (2016)

23 4ªICAP, Sep , 13º Simposio de Autoanticuerpos Dresden ( Alemania) ESTABLECER GUIA DE RECOMENDACIONES Y UTILIDAD CLINICA DE AC-1 a AC-14 P. Nuclear y AC-15 a AC-23 P. Citoplasmático ESTABLECESR 2 NUEVOS PATRONES AC- 0 NEGATIVO y AC- 29 DNA-TOPOISOMERASAS, DESCRIPCION Y RELEVANCIA CLINICA DESARROLLAR CONSENSO DE INFORMES ANA CON PATOLOGIA

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25 AC-0 SE CONSIDERA NEGATIVO CUANDO NO EXIXSTE ESTRUCTURAS CELULARES CLARAMENTE DEFINIDAS Y DELIMITADAS (SUBJETIVO Y SEMICUANTITATIVO) IMPORTANTE EL TIPO DE SUSTRATO UTILIZADO POR LOS DISTINTOS LABORATORIOS FABRICANTES Y LOTES, DILUCION DE SUERO, CONJUGADO, Y CARACTERISTICAS DE MICOROSCOPIO Y CAMARA

26 AC-29 Sinónimo : Scl-70-like Antígeno asociado: DNA topoisomerasa I Descripción subcelular: Patrón Topo I-like, ( se observan 5 regiones subcelulares) 1.Punto fino prominente tipo AC Cromatina en células mitóticas. 3. NORs. 4. Citoplasma debil en C.interfase y mitóticas. 5. Nucleolar en células en interfase. Diagnostico Afectación cutánea asociada o difusa Esclerosis Sistémica 30% LES Autoimmun Rev.2013;12:340-54

27 EASI Actividades European Autoimmunity Standardisation Initiative (2002) OPTIMIZAR LA COMUNICACION ENTRE CLINICOS Y ESPECIALISTAS DE LABORATORIO PREGUNTAS Y RECOMENDACIO EN DE EASI PRACTICA CLINICA DE LOS CUESTIONARIOS DE ANA, RF, ACPA CONSENSO INTERANCIONAL DEL TEST DE ANCA PROYECTOS LOCALES DE LOS 15 GRUPOS QUE FORMAN PARTE DE EASI APOYO EN LA CERTIFICACION DE LABORATORIO ARMONIZAR & ESTANDARIZAR EN EL PROCESO DE PREPARCION DE ESTANDARES PARA MAXIMIZAR LAS COMPATIBILIDADES DE LOS RESULTADOS Y TENDER A LA UNIFORMIDAD DE RESULTAODS ARMONIZAR Y AJUSTAR DIFERENCIAS ENTRE METODOS DE MEDIDA Y PROCEDIMIENTOS, HACERLOS MAS UNIFORMES Y COMPATIBLES (RECOMENDACIONES Y/O GUIAS )

28 LOS RESULTADOS HAN SIDO POSIBLE ARMONIZARSE POR RECOMENDACIONES Y CONSENSO

29 OPTIMIZAR COMUNICACIÓN : SIMPOSIUM DRESDEN EN AUTOANTICUERPOS CONGRESO INTERANCIONAL DE AUTOINMUNIDAD LIBROS : GUIA PRACTICA DEENFERMEDADES AUTOINMNES (INGLES 2012/ ALEMAN 2014/ RUSO 2017)

30 GEAI Grupo español de enfermedades autoinmunes Constituye una red de cooperación entre especialistas implicados en el diagnóstico y tratamiento de las enfermedades autoinmunes. Coordina iniciativas y realiza proyectos comunes destinados a expandir el conocimiento de estas enfermedades y mejorar la calidad de la atención a los pacientes.

31 ACTIVIDADES DE GEAI TRABAJOS MULTICENTRICOS COMITES DE EXPERTOS ( EAS, TRATAMIENTO CON INMUNOGLOBULINAS,MIOSISTIS) TALLERES NACIONALES (Patologías Autoinmunes e Imágenes por IFI) CURSOS DE FORMACION, MESAS REDONDAS FORO DE DEBATES Y DUDAS DIRECTORIO DE LABORATOIRIOS DE REFERENCIA PARA DETERMINACIONES POCO FRECUENTES ESTUDIOS EUROPEOS( EASI) Método y valoración clínica para informar los ANA, ENA, anti-ds DNA (según informe Delphi) Determinación, Interpretación, Especificidad de Auto-Ac Estudio de ANCAs (MPO,PR3) REFERENTE EN GUIAS CLINICAS EDICION Monografías Casos clínicos en autoinmunidad

32 CONCLUSIONES Promover el uso del «Consenso Internacional sobre nomenclatura estandarizada de Patrones de células Hep2» Utilizar los algoritmos de consenso internacionales para el diagnóstico de enfermedades autoinmunes Establecer objetivos para armonizar y consensuar guías que compartan criterios internacionales