PLAQUETAS E INFLAMACIÓN Simposio: Endotelio, Plaquetas, Inflamación Disertante: Elisa Malaver. Laboratorio Trombosis I. Instituto de Medicina Experimental, Academia Nacional de Medicina Relaciones financieras: ANPCyT, CONICET Conflictos de interés: ninguno
TROMBOSIS Plaquetas INFLAMACIÓN
aii b b 3 PSGL-1 GPIb fibrinógeno CD40 E-sel ICAM-1 VCAM-1 P-sel α v β 3 Endotelio Inflamación
IL-8 IL-8 IL-8 MCP1 MCP1 MCP1 NAP-2 NAP-2 NAP-2 RANTES RANTES IL-1β IL-1β aii b b 3 PSGL-1 GPIb CD40L IL-1β CD40 E-sel ICAM-1 E-sel VCAM-1 P-sel α v β 3 Endotelio
IL-8 IL-8 IL-8 MCP1 MCP1 MCP1 NAP-2 NAP-2 NAP-2 RANTES RANTES IL-1β IL-1β aii b b 3 PSGL-1 GPIb CD40L IL-1β CD40 E-sel ICAM-1 E-sel VCAM-1 P-sel α v β 3 Endotelio
ROS ROS ROS LTs MCP1 MCP1 MCP1 MCP1 LTs LTs IL-8 IL-8 IL-8 IL-8 IL-8 MIP-1a MIP-1a MIP-1b MIP-1b PSGL-1 a M b 2 TXA 2 TXA 2 TXA 2 ROS ROS ROS PSGL-1 a M b 2 P-sel GPIb NAP-2 NAP-2 NAP-2 IL-1β IL-1β PF4 PF4 PF4 P-sel GPIb Endotelio
LTA 4 LTA 4 LTA 4 LTA 4 LTC 4 LTC 4 VEGF VEGF PAF PAF GPIb-V-IX vwf Permeabilidad vascular
Plaquetas INFLAMACIÓN AGUDA INFLAMACIÓN CRÓNICA
ATEROGÉNESIS LDL RANTES RANTES MCP1 MCP1 MCP1 IL-1β IL-1β IL-1β CD40L CD40 E-sel VCAM-1 VCAM-1 P-sel α v β 3 ox MCP1 MCP1 macrófago
CD40L CD40 E-sel VCAM-1 VCAM-1 P-sel α v β 3 MCP1 MCP1 LDL ox LDL ox macrófago
CD40 E-sel VCAM-1 VCAM-1 P-sel α v β 3 MCP1 MCP1 LDL ox LDL ox macrófago GM M-CSF GM M-CSF PF4 PF4 PF4
CD40 E-sel VCAM-1 VCAM-1 P-sel α v β 3 PF4 PF4 PF4 célula espumosa
Estría grasa
Inflamación Estría Grasa Ateroma
+ TGF-b Plaquetas colágeno, elastina Metaloproteasas Macrófago
ARTRITIS REUMATOIDEA IL-6 IL-8 Tomado de Science 327, 528 (2010)
sinoviocitos Respuesta inflamatoria IL-1a IL-1b IL-1a IL-1b IL-6 IL-8 Micropartículas plaquetarias Fluído sinovial IL-1a IL-1b IL-1a IL-1b IL-1a IL-1b IL-1a IL-1b IL-1a IL-1b IL-1a IL-1b IL-1a IL-1b IL-1a IL-1b IL-6 IL-8 IL-6 IL-8 IL-6 IL-8
? SEPSIS + Proceso inflamatorio + Eliminación de la infección
Las plaquetas expresan Receptores Tipo Toll (TLRs) neutrófilos TLRs macrófagos cél dendríticas Reconocimiento de dominios conservados en patógenos infecciosos TLR Detección de microorganismos infecciosos
Sepsis severa LPS TLR4 TLR4 LPS Bacteria TLR4 TLR4 TLR4 TLR4 LPS Bacteria NETs Capilares y sinusoides Clark et al. Nat Med 13, 463 (2007)
GPIb-V-IX GPIIbIIIa Plaquetas TLR4 P-sel CD40L Leucocitos Endotelio Microorganismos infecciosos
Factor de transcripción nuclear kb (NF-kB) Inflamación citoquinas quemoquinas moléculas de adhesión Diferenciación Sobrevida Proliferación
TNF-a IL-1 Quemoquinas Radicales libres IKKg IkB IKKa IKKb NF-kB
TNF-a IL-1 Quemoquinas Radicales libres Ubiq Ubiq Ubiq Ubiq Ubiq IkB Ubiq Ubiq Ubiq NF-kB Proteasoma moléculas de adhesión, citoquinas, quemoquinas, factores de crecimiento
célula endotelial NF-kB + Función proinflamatoria neutrófilo monocito macrófago
Factores de transcripción en plaquetas Receptores esteroideos Blood. 2000; 95: 2289 Receptores activados por proliferadores peroxisómicos (PPAR) g Blood. 2004; 104: 1361 Plaquetas PPAR b/d Faseb J. 2006; 20: 326 Receptor de glucocorticoides (GR) Blood. 2005; 106: 4167 Receptores X retinoide (RXR) Blood. 2007; 109: 3741
Receptores esteroideos + ACTIVACIÓN PLAQUETARIA PPAR g PPAR b/d GR RXR
TR TR IkB NFkB? Liu et al. Thromb Res. 2002, 106:199
Rol del NF-kB en la fisiología plaquetaria Las plaquetas expresan NF-kB Inmunofluorescencia Western Blot Malaver et al. J Thromb Haemost, 2009. 7:1333
La activación plaquetaria induce la fosforilación y degradación de IkB
La activación plaquetaria induce la unión de NF-kB a DNA * P<0.01 vs Unstimulated Ensayos de ELISA
BAY 11-7082 Plaquetas Ro 106-9920 Fosforilación de IkB Ubiquitinación de IkB
Los inhibidores de NF-kB BAY 11-7082 y Ro 106-9920 reducen la activación de la GPIIbIIIa * P<0.01 vs control # P<0.05 vs thrombin
Inhibición de la agregación plaquetaria y de la liberación de TXB 2 mediada por BAY 11-7082 y Ro 106-9920 * P<0.05 vs thrombin
BAY 11-7082 y Ro 106-9920 disminuyen la liberación de gránulos a y densos inducida por trombina * P<0.05 vs thrombin
BAY 11-7082 y Ro 106-9920 disminuyen la liberación de gránulos a y densos inducida por trombina * P<0.01 vs control # P<0.05 vs thrombin
BAY 11-7082 inhibe la agregación de plaquetas murinas ex vivo BAY 11-7082
NF-kB + + + FUNCIÓN PLAQUETARIA HEMOSTASIA INFLAMACIÓN
Inhibidores de NF-κB Reorganización del citoesqueleto Agregación plaquetaria Secreción de gránulos
NF-kB Blanco de drogas antiinflamatorias y antineoplásicas Inhibidores de NF-kB Función plaquetaria Antiinflamatorios Antiangiogénicos
Laboratorio Trombosis I: Lic. Julia Etulain Lic. María José Lapponi Lic. Albertina Romaniuk Dra. Soledad Negrotto Dra. Paola D Atri Dr. Roberto Pozner Dra. Mirta Schattner Instituto de Medicina Experimental Academia Nacional de Medicina