ESCUELA DE SALUD GUÍA REALIZACIÓN DE CULTIVOS MICROBIOLÓGICOS DIRIGIDO A ALUMNOS DE: Técnico de laboratorio Clínico y Banco de Sangre Técnico de Enfermería Técnico de Radiodiagnóstico y Radioterapia Informática Biomédica PRE-REQUISITO: No tiene
INTRODUCCIÓN Los microorganismos, al igual que cualquier célula, necesitan de sustancias o nutrientes para poder vivir y multiplicarse. Cuando los requerimientos nutritivos son proporcionados por un organismo vivo, a este se le denomina huésped y si los obtiene de un medio artificial, a éste se le denomina MEDIO DE CULTIVO. Los requerimientos nutricionales varían de un microorganismo a otro y están determinados en parte por su constitución genética y en parte por factores ambientales. OBJETIVOS: Al finalizar el taller el alumno será capaz de: Estudiar la presencia de microorganismos en un nicho ecológico de gran relevancia en el área de la salud (causante de la transmisión de infecciones Intrahospitalarias). Este es la superficie de las manos, orificio nasal etc. nichos en los cuales se desarrollan una gran variedad de microorganismos tanto patógeno como de la flora normal. Valorar la importancia del lavado de manos en el quehacer del área de la salud. Realizar la técnica de siembra en estría o diseminación Identificar formas de crecimiento de las colonias de bacterias. REALIZADO POR: Tecnólogo Médico, Bioquímico de laboratorio clínico, Medico laboratorista. Biólogo DURACIÓN: 90 minutos NUMERO DE ALUMNOS POR DOCENTE Máximo 20 alumnos
MARCO TEÓRICO. La siembra microbiológica es un procedimiento mediante el cual se deposita (siembra) asépticamente un microorganismo en un medio de cultivo. En ellos los microorganismos se multiplicarán produciendo millones de descendientes que formarán unidades macróscopicamente visibles denominadas colonias.el material que contienen los microorganismos que se van a sembrar recibe el nombre de inóculo y este proceso se puede realizar mediante un filamento metálico, que recibe el nombre de asa de cultivo o mediante una pipeta pasteur Siembra por estrías o diseminación (Pentágono) consiste en pasar el asa de cultivo con el inoculo sobre la superficie de una placa Petri que contiene el medio de cultivo adecuado para la bacteria que se desea cultivar. Al pasar el asa, haciendo estrías unas separadas de otras, se logra que el inóculo se diluya progresivamente de forma tal que al final de las estrias se obtienen colonias aisladas. En medios sólidos el crecimiento bacteriano se evidencia por la formación de colonias, las cuales pueden presentar entre otras las siguientes características: Tamaño.- grandes o chicas. Forma.- circular, Irregular, Rizoide, filamentosa Superficie:-plana, meseta, convexa, umbilicada. Consistencia.- seca u opaca, húmeda o brillante, Butirosa (mantequilla) mucosa quebradiza, membranosa. Pigmento.-pueden o no presentar pigmento, el cual puede estar circunscrito a la colonia (endopigmento) o bien difundir al medio (exopigmento). Olor.- amoniacal, fecaloideo, dulzón etc. Hemólisis.- esta relacionado con la destrucción de los glóbulos rojos.
EJEMPLO DE HEMOLISIS
SIEMBRA EN PENTÁGONO EJEMPLO DE COLONIAS MUCOSAS
INSUMOS Y EQUIPOS NECESARIOS PARA EL TALLER Una placa PETRI Agar sangre por cada 4 alumnos ( se divide su uso) Pipetas pasteur taponadas estériles (2 por alumno). Pinzas metálicas Tórulas de algodón estériles (2 por alumno) Guantes (1 par por alumno) Asa de cultivo (10) Solución desinfectante para mesones. Papel Nova Jabón desinfectante Lápiz de marcar indeleble para vidrio (10 unidades) Sala de simulación: mecheros, lavamanos y basureros Cámara estufa a 37º grados C. Placas con siembras de manos limpias y sucias DESCRIPCIÓN DEL PROCEDIMIENTO Se procederá a distribuir a los alumnos en los siguientes grupos y en subgrupos de 4 alumnos: Grupo 1.- Manos sucias Grupo 2.- Manos limpias. Grupo 1.- Procederá a colocar los 2dedos sobre Placa de Agar sangre. Según instrucciones de su profesor Grupo 2.- Procederá a lavarse las manos según indicaciones del taller LAVADO DE MANOS y colocara los2dedos sobre la superficie de la placa de Agar Sangre. Según indicaciones de su profesor Todas las placas se deberán incubar durante 24 horas en una estufa de cultivo a 37º c. durante 24 horas ocuparan para este taller muestras que han sido preparados previamente en las mismas condiciones Los alumnos observaran sus placas en taller siguiente Se deberá analizar el desarrollo microbiano bajo el siguiente criterio:
1.- Examinar y distinguir los diferentes tipos de colonias. 2.- ANOTAR, forma, color etc. 3.- Hacer un frotis fijado de cada una de las colonias diferentes. Para su posterior tinción de Gram. BIBLIOGRAFÍA Biología, Elena Curtis cuarta edición, editorial medica panamericana. Procedimientos y técnicas de laboratorio, instituto de salud publica Microbiología médica, José Ángel García-Rodríguez y Juan J. Picasso. Enciclopedia Encarta 2004 METODOLOGÍA DE EVALUACIÓN: El taller será evaluado mediante la realización de un informe donde el alumno deberá describir los pasos a seguir detalladamente de una siembra en pentágono y de la aplicación de una pauta referente a lo observado
Nombre del alumno: Fecha: Puntaje: Nota: Realización de cultivos microbiológicos C MC NC 1.Cumple con una correcta presentación personal: -delantal -pelo tomado -uñas cortas y limpias 2. Sigue indicaciones del profesor 3. Distingue colonias 4. Realiza frotis 5. Ordena y limpia su unidad al finalizar el taller C: Competente MC: Medianamente Competente NC: No Competente