I.E.S. Rayuela - Departamento de Biología y Geología Práctica nº1 de Anatomía Aplicada Microscopio y observación de células Las células suelen ser de tamaño muy pequeño de modo que permanecen invisibles de modo individual al ojo humano. Para observarlas se recurre a aparatos de aumento como el microscopio óptico. Un problema adicional que presenta su observación es su transparencia, lo que no permite diferenciar sus orgánulos. Para ello, en microscopía se recurre a diversos tintes que se fijan a determinados orgánulos permitiendo así su observación. Objetivos Conocimiento y uso del microscopio óptico Utilización y conocimiento de las técnicas de tinción. Observación de células Material - Microscopio. - Portaobjetos - Cubreobjetos -Tijeras - Pinzas - Mechero de gas - Pinturas de colores - Papel de filtro - Bulbo de cebolla - Colorantes: Verde de Metilo y Azul de Metileno. Desarrollo Esta práctica consta de tres partes: 1 Conocimiento del microscopio óptico 2 - Observación de células de la epidermis de cebolla 3 - Observación de células de la mucosa bucal humana. 1 - Estudio del microscopio El microscopio es un instrumento óptico que permite observar objetos aumentados. Se pueden distinguir en él una parte mecánica, una parte óptica y una fuente de iluminación. Parte mecánica Comprende el conjunto de piezas que sirven para sostener y manejar los elementos de la parte óptica, las preparaciones y la fuente de iluminación. Pie o base: Pieza que apoya sobre la mesa de trabajo sobre la que descansan las demás piezas Brazo : Pieza que une el pié con el resto de elmantos mecánicos del microscopio. Platina: Superficie plana para depositar las preparaciones a observar. Se encuentra perforada en el centro para permitir la entrada de luz. Lleva unas pinzas para sujetar las preparaciones. Tubo ocular o cañón: Cilindro hueco que sujeta el ocular. Es móvil para que las preparaciones puedan ser vistas por varios observadores sin mover el pie. Tornillo macrométrico: Cilindro giratorio que permite mover verticalmente la platina para conseguir el enfoque de las preparaciones. Tornillo micrométrico: Cuilindro menor que permite el enfoqu fino. Revolver: Pieza que contiene los oculares. El él se encuentran atornilladas las lentes de diferentes aumentos. Permite un giro para utilizar los distintos objetivos. Parte óptica Conjunto de lentes que permiten el aumento de las imágenes Ocular: Situado al final del tubo. Por el se observa la preparación Objetivos: Montados en el revólver. Recogen la luz procedente de la preparación. Fuente de iluminación Interruptor : Permite el encendido de la lámpara de iluminación.
Lámpara : Fuente de luz situada bajo la platina Diafragma: Dispositivo situado entre la platina y la lámpara que regula el paso de luz Preparación microscópica Los objetos a observar el el microscopio han de ser atravesados por la luz para que ésta llegue al ocular y verlos. Por ello han de ser transparentes o, al menos, traslúcidos, y estar montados en una lámina de vidrio transparente de 75x25 mm llamada portaobjetos o porta. En la mayoría de las ocasiones el material a observar se cubre con una lámina de vidrio muy fino de uno 20x20 mm llamado cubreobjetos o cubre. Cuando los materiales a observar son muy transparentes o sus partes ofrecen poco contraste se tiñen con colorantes de microscopía específicos para cada objeto a teñir. En las tinciones es muy importante controlar las concentraciones de los tintes y los tiempos de tinción. Manejo del microscopio El microscopio ha de tratarse con cuidado evitando forzar las piezas. Debe estar situado firmemente sobre el pie evitando que pueda moverse. Para realiza una observación al microscopio se han de seguir los siguientes pasos: 1. Colocar el microscopio, conectarlo y encender la fuente de alimentación 2. Colocar la preparación en la platina. 3. Colocar el objetivo de menor aumento (el más corto) 4. Enfocar la preparación mirando por el ocular utilizando el tornillo macrométrico 5. Cuando se vea la preparación enfocada regular con el el diafragma la cantidad de luz adecuada y localizar zonas interesantes a observar. 6. Ajustar con el tornillo micrométrico. 7. Si es necesario un mayor aumento cambiar el siguiente objetivo y repetir el enfoque y la regulación de la iluminación. 2 - Epidermis de cebolla Cortar en secciones el bulbo y arranca con las pinzas la epidermis que recubre las hojas. Cortar el epitelio en trozos pequeños (no mayores de 1cm 2 ) y colocarlos sobre el portaobjetos. Extenderlos completamente con las pinzas con ayuda de una gota de agua. Verter con el cuentagotas el colorante Verde de Metilo Extenderlo de modo que impregne completamente toda la epidermis. Dejar actuar durante 5 minutos. Lavar con agua con un cuentagotas hasta que no destiña, poniendo cuidado para no perder la preparación. Colocar un cubreobjetos procurando no atrapar burbujas de aire. Secar el exceso de agua del portaobjetos colocando un paplel de filtro por los lados. Observar la preparación al microscopio. 3 - Mucosa bucal humana Límpiase cuidadosamente las manos con lavavajillas. Con la uña raspar con energía la cara interna de la mejilla varias veces. El raspando no debe ser tan intenso que produzca una hemorragia. Depositar el producto mucoide blanquecino obtenido sobre un portaobjetos. Extender uniformemente el producto obtenido deslizándolo con el borde de otro portaobjetos. Calentar suavemente la preparación al mechero hasta que quede completamente seca pero sin llegar a quemarla. Verter unas gotas del colorante Azul de Metileno por la preparación. Dejar actuar durante 2 minutos. Lavar abundantemente con agua hasta que no destiña. Colocar un cubreobjetos.- Secar el exceso de agua con un papel de filtro. Observar al microscopio.
Departamento de Biología y Geología Hoja de Prácticas Práctica nº1 de Anatomía Aplicada : Observación de células y tejidos Nombre y apellidos Curso Fecha Pon nombre a las diferentes partes del microscopio Haz dibujos esquemáticos claros y detallados de las operaciones realizadas en las preparaciones de - Células de la cebolla - Células de la epidermis humana Dibuja con detalle las células de cebolla, de la mucosa bucal observadas Señala sobre los dibujos los orgánulos observados. (son pocos) Los dibujos deben ser claros y de tamaño grande para que se aprecien todas las estructuras observadas Se colorearán como aparecen en la preparación Se anotará el número de aumentos con los que se ha observado la preparación Ejercicio 1 : Partes del microscopio
Ejercicio 3 : Preparación y observación de células de la Epidermis de cebolla Dibujo esquemático de la preparación: Dibujo de las células observadas Detalle una de las células observadas Ejercicio 3 : Preparación y observación de células de la Mucosa bucal Dibujo esquemático de la preparación: Dibujo de las células observadas Detalle una de las células observadas