MATERIALES Y MÉTODOS

CAPÍTULO V MATERIALES Y MÉTODOS 5.1. EXPERIMENTACIÓN 5.1.1. GENERALIDADES Se realizará un estudio prospectivo de tipo cohorte y analítico sobre la eficacia de diversos aglutinantes y su influencia en la disolución de las tabletas de 250 mg. Se utilizará el método de análisis descrito en la Farmacopea de los Estados Unidos USP, edición XXIV, para disolución (11). 5.1.2. UNIVERSO Está comprendido por todas las tabletas de de 250 mg con un rango de peso de 465 mg +/- 5 % fabricadas en Laboratorios Kronos, en el período de Octubre 2000 a Febrero 2001. 5.1.3. MUESTRA Estará constituida por las tabletas de lotes pilotos de 250 mg con rango de peso de 465 mg +/- 5 % elaboradas con cada uno de los aglutinantes ensayados que intervienen en la formulación. 29

5.1.4. CRITERIO DE INCLUSIÓN Se incluirán todas las muestras de tabletas de de 250 mg con un rango de peso de 465 mg +/- 5 % fabricadas por granulación húmeda con los diversos aglutinantes y tomadas de los lotes pilotos de dicha fabricación. 5.2. VARIABLES 5.2.1.-VARIABLES DE ESTUDIO 5.2.1.1.-VARIABLES CUALITATIVAS Color Forma Partículas extrañas Presencia del principio activo 5.2.1.2. VARIABLES CUANTITATIVAS CONTINUAS Peso promedio Dureza Espesor Diámetro Friabilidad Uniformidad de dosis por variación de peso. Porcentaje de disolución Tiempo de desintegración Contenido del principio activo 30

5.3. DEFINICIONES DE LAS VARIABLES A continuación se definirán algunas variables de las mencionadas anteriormente, cuyo conocimiento será de interés, puesto que van a tener influencia con respecto al estudio a realizarse. Las otras no se definirán ya que son de conocimiento general. 5.3.1. PARTÍCULAS EXTRAÑAS Todas aquellas partículas que no correspondan a la tableta. 5.3.2. PRESENCIA DEL PRINCIPIO ACTIVO Mediante análisis cualitativos se determina la presencia del principio activo en la tableta. 5.3.3. TIEMPO DE DESINTEGRACIÓN Es el tiempo en que se tardan las tabletas en romperse en partículas finas. 5.3.4. CONTENIDO DE PRINCIPIO ACTIVO La cantidad de principio activo presente en un determinado fármaco, se determina por diversos métodos de análisis cuantitativos. 5.3.5. DUREZA Se utiliza medidor de dureza de comprimido (durómetro), el cual va a determinar la presión que se ejerce a lo largo de un diámetro, ésto se mide 31

en el momento de la aparición de la primera grieta o rotura. Se expresa en Kgf. 5.3.6. PORCENTAJE DE DISOLUCIÓN Determinación cuantitativa del principio activo que se halla en solución en un tiempo determinado bajo condiciones adecuadas de análisis. SITUACIÓN NUMEROS PROBADOS CRITERIO DE ACEPTACIÓN S1 6 Cada unidad es no menos que Q +5. S2 6 Promedio de 12 unidades (S1 + S2) es igual o mayor que Q, y ninguna unidad es menor que Q 15. S3 12 Promedio de 24 unidades (S1 + S2 + S3) es igual o mayor que Q, no más que 2 unidades son menos que Q 15 %, y ninguna unidad es menos que Q 25 % (9). Tabla N 5.1: TABLA DE ACEPTABILIDAD DE DISOLUCIÓN INTERPRETACIÓN: A menos que la monografía del producto correspondiente indique una especificación especial, realizar la prueba con 6 muestras y ninguno de los resultados individuales deberá ser menor de Q + 5 %. Si esto no se cumple, repetir la prueba con 6 muestras adicionales y el promedio de los 12 resultados debe ser igual o mayor de Q y ninguno de los resultados individuales será menor de Q 15 %. Si esto no se cumple, probar 12 muestras más y el promedio de las 24 determinaciones debe ser 32

igual o mayor que Q, no más de dos de las muestras tendrán resultado menor de Q 15 % y ninguna determinación será menor de Q 25 %. En donde Q es la cantidad de ingrediente activo disuelto, indicado para cada producto en su monografía, expresado en por ciento de la cantidad indicada en el marbete; 5, 15, y 25 %, son los porcentajes de la cantidad de principio activo indicada en el marbete (4). 5.3.7. FRIABILIDAD Calidad de friable. Se usa friabilador de Roche, el cual sirve para determinar el desgaste por rodamiento y sacudida haciendo posible cálculos sobre su abrasión. Mediante diferencia de peso se calcula el desgaste del comprimido expresado en porcentaje. 5.3.8. UNIFORMIDAD DE DOSIS Se puede determinar por los métodos de variación de masa o el de uniformidad de contenido. Los requisitos de variación de masa o de uniformidad de contenido deben aplicarse en caso que el producto a analizar contenga 50 mg o más del principio activo, incluyendo los productos en los cuales el principio activo constituye el 50 % o más de la masa total del preparado farmacéutico. Para tabletas se utiliza el método por variación de masa, el cual consiste en hallar el peso promedio de 10 tabletas, con el resultado de la valoración del principio activo, se calcula el contenido del ingrediente activo de cada una de las 10 tabletas, suponiendo que el ingrediente activo está distribuido homogéneamente. 33

Los requisitos para uniformidad de dosis se cumplen si la cantidad del principio activo en cada una de las 10 unidades de dosis determinada según el método de variación de masa, está dentro del rango de 85-115 % de la cantidad teórica indicada en el marbete y la desviación estándar relativa (DER) es menor o igual al 6 %. 5.3.9. PESO PROMEDIO La USP establece tolerancias para el peso medio de las tabletas comprimidas no revestidas. Se pesan 20 tabletas y se calcula el peso medio. La variación respecto del valor medio en el peso de no más de 2 tabletas no puede sobrepasar en un porcentaje mayor que el que se indica en la tabla y ninguna tableta debe de diferir en más del doble de ese porcentaje (6). PESO MEDIO DIFERENCIA 130 mg o menos +/- 10 % 130 324 mg +/- 7.5 % Más 324 mg +/- 5 % Tabla N 5.2: VALORES DE VARIACIÓN PERMISIBLE EN COMPRIMIDOS 5.4. MATERIALES 5.4.1. MATERIA PRIMAS Y REACTIVOS 5.4.1.1. MATERIAS PRIMAS 1) base (principio activo) 34

2) (relleno) 3) Estearato de Magnesio (lubricante) 4) Color amarillo # 5, CAS number [1934-21-0], (colorante) 5) Carboximetilcelulosa sódica ( aglutinante) 6) Almidón de maíz (aglutinante) 7) Polivinilpirrolidona (aglutinante) 8) Celulosa microcistalina (aglutinante) 5.4.1.2. REACTIVOS a. Reactivo para prueba de disolución de tabletas: Acido Clorhídrico 0.1 N b. Reactivos para identificación de tabletas: Acido Clorhídrico concentrado Solución de Nitrito de sodio Acido Sulfámico Solución 2-naftol Polvo de Zinc Hidróxido de sodio 5 M c. Reactivos para contenido de tabletas: Acetona Anhídrido acético Solución verde brillante 1 % (P/V) en ácido acético glacial Acido perclórico 35

5.5. EQUIPOS Y MATERIAL DE LABORATORIO 5.5.1. EQUIPOS DE PRODUCCIÓN Y MATERIAL DE LABORATORIO 1. Balanzas: a. Balanza de precisión, marca Cas BW-15 b. Balanza analítica, marca Mettler 2. Tableteadora Manesty de 16 troqueles, troquel # 11, tipo: plano 3. Mezcladora vertical, capacidad 15 kilos 4. Granulador en húmedo, marca Chuang Yung Co. Ltda. 5. Granulador oscilante, marca Stokes 6. Recipientes de acero inoxidable 7. Estufa, marca Stokes 8. Mallas # 8, # 10, # 12, y # 16 9. Durómetro, marca Shieuniger-2E 5.5.2. EQUIPOS DE CONTROL Y MATERIAL DE LABORATORIO 1. Aparato desintegrador, marca Erweka Apparatebau-G.m.b.H 2. Aparato N 1 de Disolución, marca Distek INC. Model 2000 3. Friabilador de Roche 4. Durómetro, marca Shieuniger-2E 5. Espectrofotómetro, marca Espectronic 6. Balanza analítica, marca Mettler H35Ar 7. Calibrador: Vernier 8. Pipetas volumétricas 9. Pipetas graduadas 10. Fiolas 250 ml 11. Matraces aforados de 100 ml 36

12. Embudos 13. Crisol de Gooch para filtración con filtro de vidrio sinterizado 14. Fiola con tubuladura lateral 15. Mortero 16. Bureta 17. Vasos de precipitación 18. Termómetro 19. Probeta 20. Espátula, reverbero, soporte, papel filtro 21. Equipo de ultrasonido 5.5.2.1. APARATO N 1 PARA DISOLUCIÓN 5.5.2.1.1. DESCRIPCIÓN 1. Consta de un vaso cilíndrico o de otro material inérte y transparente de fondo esférico (alto: 160 mm a 175 mm; diámetro interno: 98 mm a 106 mm). 2. El vaso tiene una capacidad de 1000 ml con una tapa, la cual debe estar ajustada para retardar la evaporación y permite la inserción de un termómetro, así como para la toma de muestra. 3. El vaso firmemente ajustado debe de estar parcialmente sumergido en un baño de agua, el cual debe tener un ligero movimiento constante y mantener la temperatura del medio de disolución (37 o +/- 0.5 o C). 4. El aparato tiene un eje transmisor, el cual debe tener un diámetro de 6.3 mm a 6.5 mm o 9.4 mm a 10.1 mm, es de acero inoxidable tipo 316 y gira suavemente sin bambolco. 37

5. El eje transmisor debe estar colocado en el centro del vaso, de tal manera que no quede a mas de 2 mm de cualquier punto del eje vertical del vaso. 6. El aparato posee un regulador de velocidad de rotación, el cual debe de mantener constante la velocidad, de acuerdo a lo indicado para cada producto (generalmente entre 25 rpm y 150 rpm) con una variación de +/- 4 %. 7. La canastilla del aparato consta de dos partes: a. La parte superior que está unida al eje transmisor del movimiento y es de acero inoxidable tipo 316 con un orificio de 2 mm de diámetro. b. En la parte inferior se ajusta por medio de tres grapas para permitir que se coloque la muestra en el interior de la canastilla y la sostenga firmemente, para que gire en forma concéntrica al eje del vaso durante la rotación. 8. La parte inferior es de acero inoxidable tipo 316, soldado formando un cilíndro de 36.8 mm +/- 3 mm de alto por 22.2 mm +/- 1 mm de diámetro externo, con un borde angosto de hoja de metal alrededor de la tapa de 5.1 mm +/- 0.5 mm de ancho, generalmente de malla # 40. 9. La distancia entre el fondo del vaso y la canasta debe mantenerse constante a 25 mm +/- 2mm durante la prueba, (figura N 5.2). 10. Es conveniente usar en algunos casos una canastilla con recubrimiento de oro de 2.5 um de espesor. A continuación, se esquemetiza la descripción del aparato N 1 para disolución: 38

DESCRIPCIÓN APARATO N 1 DE DISOLUCIÓN 1 Vaso de vidrio u otro material inérte y trasparente. Cilíndrico y de fondo esférico (alto: 160 a 175 mm, diámetro interno: 98 a 106 mm). Capacidad 1000 ml con tapa semiajustada. Vaso sumergido en baño de agua. Movimiento ligero constante, debe mantener temperatura medio disolución (37 0 C +/- 0.5 o C). 2 Eje transmisor: diámetro: 6.3 a 6.5 mm o 9.4 a 10.1 mm. Gira suavemente. Acero inoxidable tipo 316. Colocado en centro de vaso a no más de 2 mm de cualquier punto vertical al vaso. 3 Regulador velocidad de rotación. Velocidad de rotación, debe ser constante. Generalmente entre 25 rpm y 150 rpm +/- 4 %. 4 Canastilla: Consta de 2 partes. Acero inoxidable tipo 316. Parte superior unida eje transmisor. Orificio de 2 mm diámetro. Parte inferior se ajusta a 3 grapas para permitir colocar muestra en interior de canastilla en forma firme y que gire concéntricamente. Está soldado formando cilíndro de : 36.8 mm +/- 3 mm por 22.2 +/- 1 mm de diámetro externo. Borde angosto de hoja de metal, alrededor tapa de 5.1 mm +/- 0.5 mm de ancho. Malla # 40. Distancia entre fondo vaso y canastilla, debe ser constante: 25 mm +/- 2 mm, durante la prueba. Esquema N 5.1: APARATO N 1 DE DISOLUCIÓN (CANASTILLA O CESTO) 39

Figura N 5.1: APARATO N 1 DE DISOLUCIÓN, CANASTILLA O CESTA (VISTA FRONTAL) 40

Figura N 5.2: APARATO N 1 DE DISOLUCIÓN, CANASTILLA O CESTA (VISTA AMPLIADA) 41

5.5.2.1.2. PRUEBAS DE ACEPTABILIDAD DEL APARATO 1. La prueba de aceptabilidad del aparato deberá realizarse cada 6 meses. Los procedimientos de inspección y de alineamiento deberán se hechos en igual tiempo. Antes de cada corrida, el nivel de la cabeza deberá ser chequeado y los vasos puestos en sus lugares y centrados con respecto a los haces verticales, si algunos de los chequeos no están de acuerdo a las especificaciones, el aparato entero deberá ser realineado. 2. Registro de Calibración: Un formato debe ser mantenido con un registro de cada calibración, en este son registrados la inspección y alineamiento, los cálculos y resultados de pruebas de aceptabilidad, la firma y fecha de ejecución del análisis y la fecha de recalibración y expiración. 3. Las pruebas son corridas en 6 tabletas del tipo no desintegrante (Acido Salicílico 300 mg) y 6 tabletas del tipo desintegrante (Prednisona 10 mg), una tableta en cada canasta. El aparato puede ser usado sólo si cumple el criterio permitido con las tabletas de calibración. 5.5.2.1.3. CALIBRACIÓN 5.5.2.1.3.1. GENERALIDADES Una vez comprobadas todas las medidas y especificaciones dadas en la descripción se debe verificar la calibración del equipo. 42

Se utilizan tabletas de referencia tipo desintegrante y tabletas de referencia tipo no desintegrante, de acuerdo a las condiciones específicas de operación. 5.5.2.1.3.2. TÉCNICA PASO N 1 MATERIAL 1. Tabletas de Acido salicílico 300 mg lote N (tipo no desintegrante). 2. Medio de Disolución: 900 ml de Buffer de Fosfato 0.05 m, ph 7.4 (desgasificado). Buffer de Fosfato: Pesar 6.8 g de Fosfato de potasio monobásico y diluir con agua a 250 ml. Transferir los 250 ml de la solución de fosfato a un matraz de 100 ml y añada 195.5 ml de Na OH 0.2 M. Envasar a volumen con agua. ESPECIFICACIONES: 23-29 rpm VELOCIDAD DE ROTACIÓN: 100 rpm ( 6 tabletas) TIEMPO: 30 minutos TÉCNICA Pesar previamente las 6 tabletas por separado, luego colocar una tableta en cada canasta, una vez concluido el tiempo, filtrar una parte, tomar una alicuota de 15 ml del filtrado y llevar a un matraz de 50 ml y aforar con Buffer ph 7.4 43

PREPARACIÓN DEL ESTÁNDAR: Pesar 50 mg de Acido Salicílico y llevar a un matraz de 100 ml, agregar 1 ml de alcohol para disolver y aforar con Buffer ph 7.4 Tomar una alicuota de 5 ml y llevar a un matraz de 100 ml, aforar con Buffer ph 7.4, leer a 296 nm, usando Buffer ph 7.4 como blanco. CÁLCULOS Ab. M 0.025 900 Ab. St 15 PPT 50 100 (V.1) Ab.M = absorvancia de la muestra. Ab.St = absorvancia del estándar. PPT = peso promedio de la tableta. PASO N 2 MATERIAL 1. Tabletas de Prendnisona 10 mg lote M, tipo desintegrante. 2. Medio de disolución: 500 ml de agua desgasificada. ESPECIFICACIONES: 64 88 rpm VELOCIDAD DE ROTACIÓN: 100 rpm ( 6 Tabletas) TIEMPO: 30 minutos 44

TÉCNICA Coloque una tableta en cada canasta, una vez concluido el tiempo, tomar una alícuota con una pipeta y filtrar, tomar 5 ml de este filtrado y llevar a un matraz de 10 ml. Aforar con agua. PREPARACIÓN DEL ESTÁNDAR: Pesar 25 mg del estándar Prednisona y llevar a un matraz volumétrico de 500 ml, agregar 15 ml de alcohol para disolver. Tomar una alícuota de 20 ml y llevar a un matraz volumétrico de 100 ml. Aforar con agua. Leer estándar y muestra a 242 nm, usando agua como blanco. CÁLCULOS Ab. M Ab. St 2 25 10 5 ( V.2) Ab.M = Absorvancia de la muestra. Ab.St = Absorvancia del estándar. 5.5.2.1.3.3. ESPECIFICACIONES Los resultados de los análisis tanto para tabletas desintegrantes como para no desintegrantes deben de estar dentro de los valores establecidos por las respectivas hojas de certificación de las tabletas. 45

5.5.2.1.3.4. RECOMENDACIONES ESPECIALES 1. Debe de utilizarse el disolvente indicado en la monografía del producto. 2. Si el medio de disolución es una solución reguladora, ajustar a +/- 0.05 unidades del ph especificado en la monografía correspondiente. 3. Evitar la presencia de gases disueltos en el medio de disolución. 4. Ninguna parte del equipo, incluyendo el medio ambiente cercano a éste, debe contribuir significativamente con movimiento, agitación o vibración ajena a la que produce la rotación del agitador. La vibración excesiva puede introducir un alto error en los resultados analíticos (4). 5.6. MÉTODOS 5.6.1. PROCEDIMIENTO DE TRABAJO Se fabricarán 3 lotes pilotos de tabletas de 250 mg con cada uno de los aglutinantes que se van a utilizar para el ensayo. El tamaño de cada lote será de 5000 tabletas, aproximadamente 2.3 Kg. Se utilizará como método de fabricación de tabletas la vía húmeda, en la que intervienen las soluciones aglutinantes. A continuación se presentan las formulaciones que corresponden al peso de una tableta de de 250 mg. Las cantidades pertenecientes a los lotes de dichas formulaciones para 5000 tabletas, aproximadamente 2.3 Kg. (anexos: sección reportes de producción, literales D, I, N, S.). 46

Se realizaron los respectivos controles en proceso (anexos: sección reportes de producción, literales C, F, G, H, K, L, M,O, P,Q, R, T). 5.6.2. FÓRMULAS PATRÓN DE METRONIDAZOL TABLETAS 250 mg 5.6.2.1. Con aglutinante: Almidón de maíz al 5 % FÓRMULA A1 Aglutinante: Almidón de Maíz 5 % INGREDIENTES 1 TABLETA PORCENTAJE 250 mg 53,76 % 130,44 mg 28,05 % Almidón de Maíz 79,05 mg 17,00 % Estearato de Magnesio 5 mg 1,08 % Color amarillo # 5 [1934-21-0] 0,51 mg 0,11 % Total 465 mg 100,00 % Tabla N 5.3: FÓRMULA PATRÓN A.1 FORMULA A.1 Almidón de Maíz Estearato de Magnesio 1,08% Almidón de Maíz 17,00% Color Amarillo # 5 0,11% Estearato de Magnesio Color Amarillo # 5 28,05% 53,76% Gráfico N 5.3: COMPOSICIÓN PORCENTUAL DE LA FÓRMULA A.1 47

5.6.2.2.- Con aglutinante: Almidón de Maíz al 10 % FÓRMULA A2 Aglutinante: Almidón de Maíz al 10 % INGREDIENTES 1 TABLETA PORCENTAJE 250 mg 53,76 % 107,19 mg 23,05 % Almidón de Maíz 102,3 mg 22,00 % Estearato de Magnesio 5 mg 1,08 % Color amarillo # 5 [1934-21-0] 0,51 mg 0,11 % Total 465 mg 100,00 % Tabla N 5.4: FÓRMULA PATRÓN A.2 FORMULA A.2 Almidón de Maíz 22,00% Estearato de Magnesio 1,08% Color Amarillo # 5 0,11% Almidón de Maíz Estearato de Magnesio Color Amarillo # 5 23,05% 53,76% Gráfico N 5.4: COMPOSICIÓN PORCENTUAL DE LA FÓRMULA A.2 48

5.6.2.3.- Con aglutinante: Almidón de Maíz al 15 % FÓRMULA A3 Aglutinante: Almidón de Maíz al 15 % INGREDIENTES 1 TABLETA PORCENTAJE 250 mg 53,76 % 83,94 mg 18,05 % Almidón de Maíz 125,55 mg 27,00 % Estearato de Magnesio 5 mg 1,08 % Color amarillo # 5 [1934-21-0] 0,51 mg 0,11 % Total 465 mg 100,00 % Tabla N 5.5: FÓRMULA PATRÓN A.3 FORMULA A.3 Estearato de Magnesio Almidón de Maíz 1,08% 27,00% Color Amarillo # 5 0,11% Almidón de Maíz Estearato de Magnesio Color Amarillo # 5 18,05% 53,76% Gráfico N 5.5: COMPOSICIÓN PORCENTUAL DE LA FÓRMULA A.3 49

5.6.2.4.- Con aglutinante: Almidón de Maíz al 20 % FÓRMULA A4 Aglutinante: Almidón de Maíz al 20 % INGREDIENTES 1 TABLETA PORCENTAJE 250 mg 53,76 % 60,69 mg 13,05 % Almidón de Maíz 148,8 mg 32,00 % Estearato de Magnesio 5 mg 1,08 % Color amarillo # 5 [1934-21-0] 0,51 mg 0,11 % Total 465 mg 100,00 % Tabla N 5.6: FÓRMULA PATRÓN A.4 FORMULA A.4 Estearato de Magnesio Almidón de Maíz 1,08% Color Amarillo # 5 32,00% 0,11% Almidón de Maíz Estearato de Magnesio Color Amarillo # 5 13,05% 53,76% Gráfico N 5.6: COMPOSICIÓN PORCENTUAL DE LA FÓRMULA A.4 50

5.6.2.5.- Con aglutinante: Carboximetilcelulosa sódica al 1% FÓRMULA B1 Aglutinante: Carboximetilcelulosa sódica 1% INGREDIENTES 1 TABLETA PORCENTAJE 250 mg 53,76 % 149,04 mg 32,05 % Almidón de Maíz 55,8 mg 12,00 % C.M.C.Na 1 % 4,65 mg 1,00 % Estearato de Magnesio 5 mg 1,08 % Color amarillo # 5 [1934-21-0] 0,51 mg 0,11 % Total 465 mg 100,00 % Tabla N 5.7: FÓRMULA PATRÓN B.1 FÓRMULA B.1 Almidón de Maíz Carboximetilcelulosa sódica 1 % Estearato de Magnesio Color Amarillo # 5 Carboximetilcelulosa sódica 1,00% Almidón de Maíz 12,00% 32,05% Estearato de Magnesio 1,08% 53,76% Color Amarillo # 5 0,11% Gráfico N 5.7: COMPOSICIÓN PORCENTUAL DE LA FÓRMULA B.1 51

5.6.2.6.- Con aglutinante: Carboximetilcelulosa sódica al 2 % FÓRMULA B2 Aglutinante: Carboximetilcelulosa sódica 2% INGREDIENTES 1 TABLETA PORCENTAJE 250 mg 53,76 % 144,39 mg 31,05 % Almidón de Maíz 55,8 mg 12,00 % C.M.C.Na 2 % 9,3 mg 2,00 % Estearato de Magnesio 5 mg 1,08 % Color amarillo # 5 [1934-21-0] 0,51 mg 0,11 % Total 465 mg 100,00 % Tabla N 5.8: FÓRMULA PATRÓN B.2 FÓRMULA B.2 Almidón de Maíz Carboximetilcelulosa sódica 2% Estearato de Magnesio Color Amarillo # 5 Almidón de Maíz 12,00% Carboximetilcelulosa sódica 2,00% 31,05% Estearato de Magnesio 1,08% Color Amarillo # 5 53,76% 0,11% Gráfico N 5.8: COMPOSICIÓN PORCENTUAL DE LA FÓRMULA B.2 52

5.6.2.7.- Con aglutinante: Carboximetilcelulosa sódica al 3 % FÓRMULA B3 Aglutinante: Carboximetilcelulosa sódica 3% INGREDIENTES 1 TABLETA PORCENTAJE 250 mg 53,76 % 139,74 mg 30,05 % Almidón de Maíz 55,8 mg 12,00 % C.M.C.Na 3 % 13,95 mg 3,00 % Estearato de Magnesio 5 mg 1,08 % Color amarillo # 5 [1934-21-0] 0,51 mg 0,11 % Total 465 mg 100,00 % Tabla N 5.9: FÓRMULA PATRÓN B.3 FÓRMULA B.3 Almidón de Maíz Carboximetilcelulosa sódica Almidón de Maíz 3,00% 12,00% Color Amarillo # 5 0,11% Estearato de Magnesio 1,08% Carboximetilcelulosa sódica 3% Estearato de Magnesio Color Amarillo # 5 30,05% 53,76% Gráfico N 5.9: COMPOSICIÓN PORCENTUAL DE LA FÓRMULA B.3 53

5.6.2.8.- Con aglutinante: Carboximetilcelulosa sódica al 5 % FÓRMULA B4 Aglutinante: Carboximetilcelulosa sódica 5% INGREDIENTES 1 TABLETA PORCENTAJE 250 mg 53,76 % 130,44 mg 28,05 % Almidón de Maíz 55,8 mg 12,00 % C.M.C.Na 5 % 23,25 mg 5,00 % Estearato de Magnesio 5 mg 1,08 % Color amarillo # 5 [1934-21-0] 0,51 mg 0,11 % Total 465 mg 100,00 % Tabla N 5.10: FÓRMULA PATRÓN B.4 FÓRMULA B.4 Almidón de Maíz Carboximetilcelulosa sódica 5 % Estearato de Magnesio Color Amarillo # 5 Carboximetilcelulosa sódica Almidón de Maíz 5,00% 12,00% 28,05% Estearato de Magnesio 1,08% Color Amarillo # 5 0,11% 53,76% Gráfico N 5.10: COMPOSICIÓN PORCENTUAL DE LA FÓRMULA B.4 54

5.6.2.9.- Con aglutinante: Povidona al 1 % FÓRMULA C1 Aglutinante: Povidona 1% INGREDIENTES 1 TABLETA PORCENTAJE 250 mg 53,7635 % 149,04 mg 32,0517 % Almidón de Maíz 55,8 mg 12 % P.V.P. 1 % 4,65 mg 1 % Estearato de Magnesio 5 mg 1,0752 % Color amarillo # 5 [1934-21-0] 0,51 mg 0,1096 % Total 465 mg 100 % Tabla N 5.11: FÓRMULA PATRÓN C.1 FÓRMULA C.1 Almidón de Maíz Almidón de Maíz 12,00% Povidona 1,00% Estearato de Magnesio 1,08% Color Amarillo # 5 0,11% Povidona 1 % Estearato de Magnesio Color Amarillo # 5 32,05% 53,76% Gráfico N 5.11: COMPOSICIÓN PORCENTUAL DE LA FÓRMULA C.1 55

5.6.2.10.- Con aglutinante: Povidona al 2 % FÓRMULA C2 Aglutinante: Povidona 2% INGREDIENTES 1 TABLETA PORCENTAJE 250 mg 53,76 % 144,39 mg 31,05 % Almidón de Maíz 55,8 mg 12,00 % P.V.P. 2 % 9,3 mg 2,00 % Estearato de Magnesio 5 mg 1,08 % Color amarillo # 5 [1934-21-0] 0,51 mg 0,11 % Total 465 mg 100,00 % Tabla N 5.12: FÓRMULA PATRÓN C.2 FÓRMULA C.2 Almidón de Maíz 12,00% Povidona 2,00% Estearato de Magnesio 1,08% Color Amarillo # 5 0,11% Almidón de Maíz Povidona 2 % Estearato de Magnesio Color Amarillo # 5 31,05% 53,76% Gráfico N 5.12: COMPOSICIÓN PORCENTUAL DE LA FÓRMULA C.2 56

5.6.2.11.- Con aglutinante: Povidona al 3 % FÓRMULA C3 Aglutinante: Povidona 3% INGREDIENTES 1 TABLETA PORCENTAJE 250 mg 53,76 % 139,74 mg 30,05 % Almidón de Maíz 55,8 mg 12,00 % Povidona 3 % 13,95 mg 3,00 % Estearato de Magnesio 5 mg 1,08 % Color amarillo # 5 [1934-21-0] 0,51 mg 0,11 % Total 465 mg 100,00 % Tabla N 5.13: FÓRMULA PATRÓN C.3 FÓRMULA C.3 Almidón de Maíz Almidón de Maíz 12,00% Povidona 3,00% Estearato de Magnesio 1,08% Color Amarillo # 5 0,11% Povidona 3 % Estearato de Magnesio Color Amarillo # 5 30,05% 53,76% Gráfico N 5.13: COMPOSICIÓN PORCENTUAL DE LA FÓRMULA C.3 57

5.6.2.12.- Con aglutinante: Povidona al 5 % FÓRMULA C4 Aglutinante: Povidona 5% INGREDIENTES 1 TABLETA PORCENTAJE 250 mg 53,76 % 130,44 mg 28,05 % Almidón de Maíz 55,8 mg 12,00 % P.V.P 5 % 23,25 mg 5,00 % Estearato de Magnesio 5 mg 1,08 % Color amarillo # 5 [1934-21-0] 0,51 mg 0,11 % Total 465 mg 100,00 % Tabla N 5.14: FÓRMULA PATRÓN C.4 FÓRMULA C.4 Almidón de Maíz Almidón de Maíz 12,00% Povidona 5,00% Estearato de Magnesio 1,08% Color Amarillo # 5 0,11% Povidona 5 % Estearato de Magnesio Color Amarillo # 5 28,05% 53,76% Gráfico N 5.14: COMPOSICIÓN PORCENTUAL DE LA FÓRMULA C.4 58

5.6.1.13.- Con aglutinante: Avicel PH-101 al 20 % FÓRMULA D Aglutinante: Avicel PH-101 al 20 % INGREDIENTES 1 TABLETA PORCENTAJE 250 mg 53,76 % 60,69 mg 13,05 % Almidón de Maíz 55,8 mg 12,00 % Avicel PH-101 93 mg 20,00 % Estearato de Magnesio 5 mg 1,08 % Color amarillo # 5 [1934-21-0] 0,51 mg 0,11 % Total 465 mg 100,00 % Tabla N 5.15: FÓRMULA PATRÓN D Almidón de Maíz Avicel PH-101 Estearato de Magnesio Color Amarillo # 5 FÓRMULA D Avicel PH-101 20,00% Almidón de Maíz 12,00% 13,05% Estearato de Magnesio 1,08% Color Amarillo # 5 0,11% 53,76% Gráfico N 5.15: COMPOSICIÓN PORCENTUAL DE LA FÓRMULA D 59

No se realizaron tabletas de con Avicel PH-101 a una concentración del 20 %, debido a que las concentraciones en las que se usa como aglutinante es del 20-90 % (11), y si se usaba en concentraciones mayores al 20 %, las cantidades de los otros ingredientes que componen la fórmula de se verían alterados, pues éstos, también poseen sus debidos requisitos a cumplir en dicha fórmula. 5.6.3. PRODUCCIÓN 5.6.3.1. MÉTODOS DE MANUFACTURA 5.6.3.1.1. Granulación húmeda simple 5.6.3.1.2. Granulación húmeda doble 5.6.3.1.1. La granulación húmeda simple, se realiza de la siguiente manera (anexo A: sección métodos): Preparar todo el material a utilizar Pesar los ingredientes, por separado Tamizar Mezclar los ingredientes Preparar de la solución aglutinante o granuladora Añadir solución aglutinante Tamizar de los materiales húmedos, se lleva al granulador en húmedo Desecar los gránulos en estufa Romper los gránulos en el granulador oscilante, para así reducir su tamaño a una forma apropiada para luego ser comprimidos Lubricar Comprimir 60

Luego de fabricadas las tabletas, se tomarán muestras representativas de 100 tabletas de cada uno de los lotes para los respectivos análisis Almacenar Empacar Las buenas prácticas de manufactura se emplearán durante todo el proceso de elaboración (anexo C: sección métodos). A continuación se esquematiza el proceso y cada uno de los pasos se encuentran representados en las respectivas figuras. 61

GRANULACIÓN HÚMEDA SIMPLE 1 PESAR Y TAMIZAR 2 MEZCLAR LOS INGREDIENTES 3 PREPARAR SOLUCIÓN AGLUTINANTE 4 HUMECTAR Y AMASAR 5 GRANULAR EN HÚMEDO 6 SECAR EN ESTUFA 7 ROMPER EL GRANULADO 8 LUBRICAR 9 COMPRESIÓN 10 LLEVAR MUESTRAS PARA CONTROL DE CALIDAD 11 EMPACAR Esquema N 5.2: GRANULACIÓN HÚMEDA SIMPLE 62

1 Figura N 1: PESAR LOS INGREDIENTES Figura N 2 : TAMIZAR LOS INGREDIENTES 63

2 Figura N 3 : MEZCLAR LOS INGREDIENTES 3 Figura N 4 : PREPARAR SOLUCIÓN AGLUTINANTE 64

4 Figura N 5 : HUMECTAR Figura N 6 : AMASAR 65

5 Figura N 7 : GRANULAR (GRANULADOR EN HÚMEDO) 6 Figura N 8 : SECAR GRÁNULOS EN ESTUFA 66

7 Figura N 9 : ROMPER EL GRANULADO Figura N 10 :ROMPER EL GRANULADO (VISTA AMPLIADA) 67

8 Figura N 11 : LUBRICAR 9 Figura N 12 : COMPRESIÓN 68

10 Figura N 13 : LLEVAR MUESTRAS A CONTROL DE CALIDAD Figura N 14 : MUESTRAS CON ALMIDÓN DE MAÍZ 69

Figura N 15 : MUESTRAS CON CARBOXIMETILCELULOSA SÓDICA Figura N 16 : MUESTRAS CON POVIDONA 70

Figura N 17 : MUESTRAS CON AVICEL PH-101 Figura N 18 : CONTROL DE CALIDAD 71

11 Figura N 19 : EMPACAR Figura N 20 : TABLETAS EMPACADAS 72

5.6.3.1.2. La granulación húmeda doble, se realiza de la siguiente manera (anexob: sección métodos): Preparar todo el material a utilizar Pesar los ingredientes, por separado Tamizar Mezclar los ingredientes Preparar de la solución aglutinante o granuladora Añadir solución aglutinante Tamizar los materiales húmedos, se lleva al granulador en húmedo. Desecar los gránulos en estufa Romper los gránulos en el granulador oscilante, para así reducir su tamaño Añadir nuevamente solución aglutinante Tamizar los materiales húmedos, se lleva al granulador en húmedo Desecar los gránulos en estufa Romper los gránulos en el granulador oscilante, para así reducir su tamaño para poder comprimir Lubricar Comprimir Luego de fabricadas las tabletas, se tomarán muestras representativas de 100 tabletas de cada uno de los lotes para los respectivos análisis Almacenar Empacar Las buenas prácticas de manufactura se emplearán durante todo el proceso de elaboración (anexo C: sección métodos). 73

GRANULACIÓN HÚMEDA DOBLE 1 PESAR Y TAMIZAR 2 MEZCLAR LOS INGREDIENTES 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 PREPARAR SOLUCIÓN AGLUTINANTE HUMECTAR Y AMASAR GRANULAR EN HÚMEDO SECAR EN ESTUFA ROMPER EL GRANULADO PREPARAR SOLUCIÓN AGLUTINANTE HUMECTAR Y AMASAR GRANULAR EN HÚMEDO SECAR EN ESTUFA ROMPER EL GRANULADO 13 LUBRICAR 14 COMPRESIÓN 15 16 17 LLEVAR MUESTRAS PARA CONTROL DE CALIDAD ALMACENAR EMPACAR ESQUEMA N 5.3: GRANULACIÓN HÚMEDA DOBLE 74

5.6.4. CONTROLES Los parámetros físicos a realizar son: peso promedio, dureza, diámetro, espesor y friabilidad, los cuales se hallan definidos en sus respectivas variables. Se determinará el tiempo de desintegración para lo cual se usaran 6 tabletas para el ensayo. Se procederá a realizar la prueba de disolución, usando aparato debidamente calibrado, el número de tabletas que se requieren para este ensayo son 6, según técnica descrita por la Farmacopea de los Estados Unidos USP, edición XXIV (11). Se determinará la presencia del principio activo en la tableta y se valorará además su contenido, las técnicas a seguir se hallan descritas en la Farmacopea Británica (BP), (14). Se determinará además, la uniformidad de dosis por variación de peso, según Farmacopea de los Estados Unidos Mejicanos (6). 5.6.5. MÉTODOS DE ANÁLISIS 5.6.5.1. IDENTIFICACIÓN METRONIDAZOL, IDENTIFICACIÓN C Calentar una cantidad de polvo de la tableta conteniendo 10 mg de en un baño de agua con 10 mg de polvo de zinc, 1 ml de agua y 0.25 ml de ácido clorhídrico por 5 minutos, enfrie en hielo, adicionar 0.5 ml de solución de Nitrito de sodio y remueva el exceso de nitrito con ácido 75

sulfámico. Adicionar 0.5 ml de 2-naftol y 2 ml de hidróxido de sodio 5 M. Se produce un color rojo-naranja (14). 5.8.5.2.- CONTENIDO DE METRONIDAZOL Pesar el polvo de 20 tabletas. Transferir una cantidad de polvo equivalente a 0.2 g de a un crisol de Gooch (para filtración con disco de vidrio sinterizado) y extraer con 6 porciones de 10 ml de acetona caliente. Enfriar, agregar al extracto combinado 50 ml de anhídrido acético y 0.1 ml de una solución de verde brillante 1 % (peso/volumen) en ácido acético glacial anhidro y titular con ácido perclórico VS 0.1 M hasta un punto final amarillo verdoso. Repetir la operación con un blanco. La diferencia entre las titulaciones representa la cantidad de ácido perclórico requerido. Cada ml de ácido perclórico VS 0.1 M equivale a 0.01712 g de (14). 5.6.5.3.-UNIFORMIDAD DE DOSIS POR VARIACIÓN DE PESO Pesar individualmente 10 tabletas y calcular el peso promedio con el resultado de la valoración del principio activo obtenido como se indica en el ensayo, calcular el contenido del principio activo a cada una de las 10 tabletas, asumiendo que el principio activo esté distribuido homogéneamente. Los criterios para esta prueba están detallados en la definición de su respectiva variable, expuesta anteriormente, numeral 5.3.8 76

5.6.5.4. DISOLUCIÓN Las especificaciones para disolución de tabletas de, son las siguientes: Q = 85 % + 5 % = 90 % Medio: Acido Clorhídrico 0.1 N Aparato 1: 100 rpm Tiempo: 60 minutos PREPARACIÓN ESTÁNDAR: Pesar 110 mg de estándar de de referencia y llevar a un matraz volumétrico de 100 ml, disolver con ácido clorhídrico 0.1 N. Tomar una alícuota de 1 ml y llevar a un matraz volumétrico de 100 ml, enrasar con ClH 0.1 N. La concentración final es de 0.011 mg/ml. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA: Se procede a realizar lo siguiente: 1. Colocar en cada vaso del aparato, un volumen de 900 ml de ClH 0.1 N, usado como medio de disolución para tabletas de, según especificaciones. 77

2. Calentar y permitir que la temperatura del medio de disolución se equilibre a 37 o C. Controlar la temperatura con ayuda de un termómetro. 3. Colocar las tabletas de, una en cada canastilla. Las tabletas se colocan e las canastillas secas, antes de iniciar la operación, para evitar que se humedezcan. 4. Operar el aparato inmediatamente a la velocidad y tiempo indicados (velocidad a 100 rpm por una hora). 5. Cuando transcurra el tiempo establecido, aún cuando las canastillas estén en movimiento, tomar porciones necesarias una de cada vaso para la determinación. Las porciones se toman de la zona intermedia entre la superficie del medio de disolución y la parte superior de la canastilla y a no menos de 10 mm de la pared del vaso. 6. Dichas porciones que son 6, se filtran en sus respectivas fiolas las cuales se hallan con embudos y papel filtro. 7. Luego, tomar alícuotas de 4 ml de cada una de las porciones filtradas con ayuda de pipetas volumétricas y llevar a matraces volumétricos de 100 ml con ClH 0.1 N. La concentración final es de 0.011 mg/ml. 250 mg 900 ml 4 ml 100 ml 78

PROCEDIMIENTO 1. Obtener la absorbancia de la solución estándar a una longitud de onda de máxima absorbancia de 278 nm 2. Obtener la absorbancia de las diluciones de la muestra a una longitud de onda igual a la de la solución estándar. 3. Emplear celdas de 1 cm y ClH 0.1 N como blanco de ajuste. 4. La cantidad de disuelta, se determina a partir de las absorbancias de la muestra obtenidas a 278 nm y comparadas con la absorbancia de la solución estándar. Los criterios de aceptabilidad para disolución se hallan descritos anteriormente en su respectiva variable, numeral 5.3.6, tabla N 5.1 5.7. OBTENCIÓN DE DATOS PRIMARIOS Se confeccionará hojas de datos primarios donde se recolectarán los datos obtenidos de la medición de cada una de las variables empleadas en el estudio, como se indica en los anexos posteriores sección hojas de producción (anexos: E-H, J-M, O-R y anexo T) y en las tablas de resultados que van desde la N 6.1 hasta la N 6.14 5.8. PROCESAMIENTO DE LA INFORMACIÓN Para el procesamiento de la información se confeccionará una base de datos estructurada con la hoja de cálculo de excel, versión windows 2000. Se utilizará para la presentación de la información tablas de contingencia. 79