INSTRUCTIVO TÉCNICO PARA EL ANÁLISIS DE GERMINACIÓN EN SEMILLAS Tabla de Contenidos Contenido Página 1 OBJETIVOS Y ALCANCE...2 2 REFERENCIAS Y DOCUMENTOS RELACIONADOS...2 3 DEFINICIONES Y ABREVIATURAS...2 4 REQUISITOS...3 4.1 Requisitos de infraestructura, equipos, materiales, instrumentales y reactivos..3 4.2 Requisitos de personal...4 4.3 Requisitos Específicos....4 4.4 Medios de verificación de requisitos...4 5 ANÁLISIS/ENSAYO...5 5.1 Captación y envío de la muestra...5 5.2 Recepción y manejo de la muestra/contramuestra...5 5.3 Metodología...6 5.4 Cálculo y Expresión de Resultados...6 6 REGISTRO Y ENVÍO DE LOS RESULTADOS...6 7 ANEXOS...8 7.1 Listado de identificación de analistas vinculados al análisis...8 Código: IT-LAB-13-v03 Pág. 1 de 8
1 OBJETIVOS Y ALCANCE El objetivo de este instructivo es entregar los requisitos específicos para la acreditación de laboratorios por parte del SAG para la realización del análisis de germinación en, acreditación que se entrega además por especie. Del mismo modo, en este documento se entregan las directrices para la realización del análisis mencionado y para la emisión del Informe de Resultados por parte de laboratorios acreditados. Esta acreditación faculta al laboratorio acreditado a realizar el análisis de germinación en, a corrientes destinadas al comercio interno. 2 REFERENCIAS Y DOCUMENTOS RELACIONADOS D.L. N 1764 de 1977, que Fija normas para la investigación y comercio de. D.S. N 188 de 1978, que Aprueba Reglamento General del Decreto Ley N 1764 de 1977, para las de cultivo. International Rules for Seed Testing, ISTA, versión vigente. ISTA Handbook on Seedling Evaluation, versión vigente 3 DEFINICIONES Y ABREVIATURAS Germinación ISTA Plántulas Normales Plántulas Anormales Semillas Latentes o Frescas Semillas Duras Semillas Muertas Como propósito para los análisis, corresponde a la emergencia y desarrollo de la plántula, período en el cual el aspecto y desarrollo de estructuras esenciales, indican si es o no posible que se desarrolle en el futuro en una planta satisfactoria, bajo condiciones favorables en el suelo. Abreviatura de International Seed Testing Association. Son aquellas que al final del período de análisis presentan el potencial para continuar desarrollándose en plantas satisfactorias, cuando crecen en suelos de buena calidad y bajo condiciones favorables de humedad, temperatura y luz. Son aquellas que no muestran potencial de desarrollo como plantas satisfactorias cuando crecen en suelos de buena calidad y bajo condiciones favorables de humedad, temperatura y luz. Semillas que no germinaron durante el análisis, pero que se mantienen firmes y tienen potencial de desarrollarse en plantas normales. Semillas que al final del período del análisis permanecen duras porque no absorbieron agua. Semillas que al final del período de análisis no son ni duras ni frescas y que no han desarrollado ninguna parte de una plántula. Código: IT-LAB-13-v03 Pág. 2 de 8
4 REQUISITOS 4.1 Requisitos de infraestructura, equipos, materiales y reactivos. i) Infraestructura: Deben existir áreas separadas para actividades incompatibles y de un tamaño adecuado al personal que trabaja en los análisis y a la carga de trabajo. El Laboratorio debe tener un área limpia y seca, lo suficientemente amplia para la necesidad de los análisis que corresponden; sin exposición a corrientes de aire, con buena iluminación (del orden de 1000 lux), debe poseer mesón de trabajo, con cubierta resistente y fácil de limpiar. Debe haber instalaciones protegidas de condiciones excesivas de temperatura, vapor, vibraciones, interferencias, etc. que puedan afectar adversamente los resultados. Deben tener fuentes de energía necesaria para los análisis. Deben existir instalaciones para almacenar las muestras hasta un año después del análisis y en condiciones de temperatura, humedad y limpieza, que permitan la integridad de las muestras. ii) Equipos, materiales y reactivos El Laboratorio debe contar con equipamiento, materiales y reactivos acorde al tipo de especie para la(s) cual(es) se declara competencia; para ello debe considerar lo que se indica a continuación (pudiendo agregar o reducir elementos): Equipos Balanza de precisión Lámpara lupa Calculadora de sobremesa Cabinas o salas de germinación con temperaturas estables y controladas, que permitan obtener a nivel de substrato temperaturas de 15ºC, 20ºC, 25ºC o alterna de 20-30ºC, según la o las especies que acredite Cámaras o salas de frío Estufa de esterilización o secado Sembrador al vacío Contador de granos Tablas sembradoras Materiales, instrumentales y reactivos Pinzas Bisturí Agujas de disección Contenedores Código: IT-LAB-13-v03 Pág. 3 de 8
Vidrios de reloj Bandejas de aluminio Respiradores con filtro y/o mascarillas para polvos tóxicos Guantes de procedimiento Substratos para la siembra: papel filtro liso especial para germinación, papel filtro plisado especial para germinación y arena Tipo de agua para regar el substrato: agua destilada para papel filtro liso y plisado y agua corriente para la arena Reactivos para ruptura de latencia: Nitrato de Potasio y Ácido Giberélico (AG3) Contenedores para sembrar: bandejas de plástico grande con tapa y bandeja de plástico chica con tapa. 4.2 Requisitos de personal i) Según lo dispuesto en el numeral 4.2 del Reglamento Específico para la acreditación de laboratorios de análisis/ensayos, el Laboratorio debe contar con un responsable técnico, quien será la contraparte del SAG, en temas técnicos asociados a su actividad como laboratorio acreditado, y deberá cumplir con el perfil establecido en dicho Reglamento. ii) Contar con analistas que deben cumplir el siguiente perfil: Poseer título técnico de una carrera relacionada con el área biológica o científica, o en su defecto, contar con experiencia demostrable en el análisis al cual el Laboratorio postula la acreditación, de al menos dos (2) años. Sus funciones serán realizar los análisis de acuerdo a las reglas de la ISTA y mantener los equipos funcionando bien y calibrados, cuando corresponda. En caso que los analistas posean título técnico de una carrera relacionada con el área biológica o científica, deberán tener además, experiencia demostrable en este análisis de al menos un año. Estar capacitados y entrenados en análisis de germinación de. Tener formación en Fisiología y Morfología de. 4.3 Requisitos Específicos. No aplica. 4.4 Medios de verificación de requisitos. De acuerdo a lo dispuesto en el Reglamento Específico para la acreditación de laboratorios de análisis/ensayos, los interesados en acreditarse deben presentar junto a su solicitud de acreditación, lo siguiente: i) El formulario anexo para análisis en corrientes, debidamente llenado y firmado por el postulante o su representante legal si se trata de personas jurídicas, el cual se encuentra disponible en el sitio Web del SAG, www.sag.gob.cl. Código: IT-LAB-13-v03 Pág. 4 de 8
ii) iii) iv) Los antecedentes generales del laboratorio que se establecen en el numeral 6.1 del Reglamento Específico para la acreditación de laboratorios de análisis/ensayos. Listado de identificación de los analistas, indicando nombre completo, número de cédula de identidad y firma, según formato establecido en el numeral 7.1 de este Instructivo. Certificado de título (en original o fotocopia legalizada) si procede, y documento(s) que demuestre(n) la experiencia de los analistas en el análisis al cual el Laboratorio postula la acreditación. v) Documentos que demuestren la capacitación de los analistas. vi) Croquis del área destinada a análisis de germinación de, con la ubicación de sus equipos vii) Lista de equipos destinados al análisis de germinación de, incluyendo su plan de mantención y calibración. viii) Registro de control de las condiciones de temperatura para las cámaras de germinación y de frío. Sin perjuicio de lo anterior, el cumplimiento de los requisitos descritos tanto en el Reglamento Específico de Acreditación como en este Instructivo, serán confirmados por el Servicio en la visita de verificación o por los medios que considere idóneos para tal efecto. Con este fin, el SAG podrá someter a uno o más analistas identificados por el postulante, a una evaluación teórica y/o práctica. 5 ANÁLISIS/ENSAYO 5.1 Captación y envío de la muestra. La toma de muestra debe ser representativa del lote al que pertenecen, por lo tanto la metodología de muestreo a seguir, está referenciada en las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA. En estas mismas reglas está establecido el peso mínimo que debe tener la muestra que se recibe en el Laboratorio según el análisis que se solicita y según la especie que se trate y las condiciones para su envío al Laboratorio. 5.2 Recepción y manejo de la muestra/contramuestra La recepción y manipulación de la muestra debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 2 de las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA (versión vigente). Es recomendable que las muestras sean recepcionadas en el laboratorio acreditado dentro de las 72 horas desde su toma. Las muestras deben recibir antes, durante y después de su análisis un manejo tal que permita mantener su integridad y su identificación. Las muestras deben almacenarse por el período de un año después de su análisis, en condiciones adecuadas para mantenerlas en buenas condiciones. Código: IT-LAB-13-v03 Pág. 5 de 8
Con el objeto de mantener la confiabilidad y objetividad en los análisis, las muestras deben ser identificadas con un número o código único dado por el Laboratorio al momento de su recepción e ingreso y sólo después ingresar al laboratorio para su análisis correspondiente, sólo manteniendo esta identificación. Las muestras para el análisis de germinación deben obtenerse a partir de la fracción de semilla pura del análisis de Pureza o bien de la separación de semilla pura desde la muestra de envío recibida. 5.3 Metodología. El análisis debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 5 de las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA (versión vigente) y en el Manual de Evaluación de Plantas de la ISTA (versión vigente). Debe incluir los siguientes procesos: Obtención de la muestra de trabajo (400 de la fracción de semilla pura). Determinación del método y sustrato a usar, según la especie y de acuerdo a la Tabla 5A de las Reglas Internacionales de Análisis de ISTA. Evaluación de la Germinación según Capítulo 5 de las Reglas Internacionales de Análisis de ISTA y el Manual de Evaluación de Plántulas de ISTA. Anotación de los resultados de las 4 réplicas, considerando las Tablas de Tolerancias respectivas del Capítulo 16 de las Reglas ISTA.. 5.4 Cálculo y Expresión de Resultados Debe ser realizado de acuerdo a lo indicado en el Capítulo 5 de las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA (versión vigente). Procesos a seguir: - Cálculo del porcentaje de: plántulas normales - Redondeo de cifras. plántulas anormales latentes duras muertas - Revisión de los resultados frente a las Tablas de Tolerancias respectivas. 6 REGISTRO Y ENVÍO DE LOS RESULTADOS El Laboratorio deberá establecer un formato de Informe de Resultados que debe ser visado o aprobado por el Servicio de manera previa a su puesta en uso. El formato del Informe de Análisis debe elaborarse de manera tal que incluya todas las observaciones y reglas especificadas para cada análisis en las Reglas Internacionales de Análisis de la ISTA y debe contener la siguiente información general: Código: IT-LAB-13-v03 Pág. 6 de 8
- Remitente - Especie y Variedad - Categoría de la muestra - Identificación del Lote - Peso del lote (opcional) - Número de envases (opcional) - Tipo de envase (opcional) - Fecha ingreso de la muestra al Laboratorio - Fecha de término del análisis - Identificación de la muestra otorgado en el Laboratorio al momento de su ingreso - Resultado del o de los análisis o % Plántulas Normales o % Plántulas Anormales o % Semillas Latentes o % Semillas Duras o % Semillas Muertas o % Germinación Total o % Mínimo Legal aceptado para la especie en análisis. - Observaciones del análisis, como las condiciones en que se realizó y otras. - Fecha del Informe - Firma del Responsable Técnico del Laboratorio. El traspaso de los datos al Certificado o Informe de Análisis correspondiente debe ser supervisado por el Responsable Técnico del Laboratorio. El Laboratorio Acreditado deberá cada tres meses enviar un listado de los Informes de Análisis emitidos al Laboratorio Oficial de Análisis de Semillas de Lo Aguirre, indicando el número del certificado emitido, la fecha de emisión, el remitente y la especie. El Laboratorio Acreditado debe tener registros o fichas de resultados para cada análisis que realice, en el que identifique el tipo de muestra y la especie que se trata, los resultados obtenidos, la metodología y condiciones de análisis usada, fecha del análisis y firma del analista que realizó el análisis y de su supervisor. Código: IT-LAB-13-v03 Pág. 7 de 8
7 ANEXOS 7.1 Listado de identificación de analistas vinculados al análisis Nombre Completo Nº Cédula de Identidad Firma Firma del Postulante o su Representante Legal Código: IT-LAB-13-v03 Pág. 8 de 8