TRABAJO PRÁCTICO Nº 5 ESTUDIO DE ANEMIAS Dra. Ana Cecilia Haro - 2017 -
EVALUACIÓN CLÍNICA: Cuándo fue el último análisis sin anemia? ESTUDIO DE LAS ANEMIAS Origen étnico Antecedentes personales y heredofamiliares de: anemia, esplenectomía, ictericia, enf. asociadas. Tratamiento previo con hierro, ácido fólico, vitamina B12. ESTUDIOS DE LABORATORIO: 1) Hemograma. Buena observación del frotis. 2) Reticulocitos 3) Estudio del metabolismo del hierro 4) Determinaciones especiales: - Electroforesis de Hb - ROE
Toma de muestra Con EDTA Extendido Suero Con Heparina Hgma Reticulocitos Electroforesis de Hb Fe TIBC % Saturación ROE
RETICULOCITOS 3 gotas de sangre entera + Incubar 37 ºC 3 gotas de Azul Brillante de Cresilo 15 minutos Extendido Reticulocitos % = Nº Reticulocitos Contados x 100 Nº Hematíes observados Ret. corregidos Reticulocitos Contados % x Hto pac. = Hto. Promedio Normal
RETICULOCITOS
Estudio del Metabolismo del hierro Determinación de la concentración de hierro sérico Método Colorimétrico Fe 3+ Fe 3+ TF Buffer ph 3,7 Reductor TF + Fe 2+ Fe 2+ Fe 2+ + PBTS Complejo Fe 2+ coloreado
Fase Preanalítica Fase Analítica Muestra Limpieza del material Procesamiento Blanco Standard Desconocido H 2 O 500 ul ----- ----- Standard ---- 500 ul ----- Muestra ---- ---- 500 ul Buffer/Reductor 2 ml 2 ml 2 ml Mezclar y leer a 560 nm PBTS 1 gota 1 gota 1 gota Mezclar y leer a 560 nm contra agua destilada VR: 60 160 ug/dl
TIBC (Método colorimétrico) Fe 3+ Fe 3+ Fe 3+ Fe 3+ TF Fe 3+ TF Fe 3+ + Fe 3+ Fe 3+ Fe 3+ Fe 3+ Fe 3+ Fe 3+ Fe 3+ ph>7,2 TF Fe 3+ Fe 3+ Fe 3+ Fe 3+ Fe 3+ Fe 3+ Fe 3+ TF TF TF TF Fe 3+ TF Fe 3+ Fe 3+ TF Fe 3+ Fe 3+ + Agente quelante r.p.m. VR: 250 400 ug/dl TRANSFERRINA
% de Saturación de la Transferrina % Saturación = Fe sérico ug/dl Transferrina ug/dl x 100 VR: 20 55 % INTERPRETACIÓN Anemia ferropénica A.T.C. Talasemia Anemia Sideroblástica Fe sérico N o TIBC N o N N % Saturación N o
RESISTENCIA OSMÓTICA ERITROCITARIA Medida de la capacidad de una población de hematíes para resistir el efecto hipotónico del medio. Técnica simplificada 1 2 3 4 5 6 7 8 Mayor Menor Concentración de NaCl Cantidad de H 2 O dest. Menor Mayor
Lectura de la prueba 1 2 3 4 5 6 7 8 0 % Hemólisis > Medio menos hipotónico 100 % Hemólisis Concentración de NaCl < Medio más hipotónico
ROE Normal ROE Alterada
GRÁFICA % Hemólisis 100 90 80 Esferocitosis Hereditaria 70 60 b a 50 40 30 20 10 c Talasemia 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 Conc. NaCl Curvas Normales
ELECTROFORESIS DE HEMOGLOBINA Electroforesis de hemoglobina a ph alcalino Electroforesis de hemoglobina a ph ácido Muestra: sangre entera (EDTA, heparina). También pueden usarse los glóbulos rojos liberados del coágulo de sangre. Las muestras deben ser lavadas 3 veces en solución salina isotónica. Hemolizado: se puede usar una solución lisante (EDTA, KCN y agua) o lisar por congelamiento y descongelamiento en el freezer. Siempre procesar, simultáneamente, una muestra control. Medir y equiparar las concentraciones de Hb del control y muestras problema.
PATRÓN ELECTROFORÉTICO A PH ALCALINO - + NORMAL b-talasemia MENOR RASGO FALCIFORME ENFERMEDAD SC SANGRE NORMAL DE CORDÓN RASGO C CONTROL º CA 1 A 2 S F A J C E-O D G º: Indica el origen
PATRÓN ELECTROFORÉTICO A PH ÁCIDO + - NORMAL RASGO FALCIFORME RASGO D ENFERMEDAD SC ENFERMEDAD SE SANGRE NORMAL DE CORDÓN RASGO C CONTROL C S º A F D-O E-G º: Indica el origen
ELECTROFORESIS DE HB A PH ALCALINO 1 Anemia drepanocítica-hb S homocigota 2 Control Normal 3 A F A 2 b-talasemia menor b-talasemia Control Normal A F A 2 b-talasemia menor (Hb A2 aumentada) b-talasemia homocigota (Hb F únicamente, Hb A y Hb A2 ausentes)
ELECTROFORESIS DE HB A PH ALCALINO Hemoglobinopatía S-C Normal Hemoglobinopatía S heterocigota
Hb disminuida > 3 Regenerativas IPR < 1 Arregenerativas A. Posthemorrágicas Agudas Intracorpusculares A. Hemolíticas Extracorpusculares HPN (Ham) D-A-D (A.Ferropénica) Fe-Tf-Ferritina N/A D-D ó N-A (ATC) P. Especiales (ROE, Elect. Hb) Inmunes PCD No Inmunes D (A.Sideroblástica- R. de Perls) VCM A (A.Megaloblástica) N (A.Aplásica, por ocupación)
RBC: 2.94 M/µL HGB: 10.2 g/dl HCT: 31.8 % MCV: 108 fl MCH: 34.7 pg MCHC: 32.1 g/dl RDW: 22.8 % Anemia Megaloblástica
Anemia Ferropénica RBC: 1.66 M/µL HGB: 3.0 g/dl HCT: 11.0 % MCV: 63 fl MCH: 18.1 pg MCHC: 28.0 g/dl RDW: 20.0 % RBC 50 100 150 200
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