PROTOZOARIOS INTESTINALES PATÓGENOS

PROTOZOARIOS INTESTINALES PATÓGENOS

2 INTRODUCCIÓN Los protozoarios son organismos unicelulares Reino Protista, subreino Protozoa Eucariotas Pueden reproducirse asexuada o sexuadamente Movilidad variable dependiendo de sus órganos de locomoción La mayoría tienen nutrición de tipo heterótrofa (incapaces de transformar C inorgánico en C orgánico). Pueden vivir libremente o actuar como parásitos Pueden parasitar a distintos animales y a la especie humana.

3 EUCARIOTAS Con membrana nuclear Con nucleolo Membrana celular Con citoesqueleto Con organelos: mitocondrias, RE, Golgi, vacuolas y lisosomas Capaces de realizar endocitosis y exocitosis Con ribosomas compuestos por subunidades 40S y 60S

4 CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS RELEVANTES NÚCLEO CROMATINA central y periférica NUCLEOLOS MEMBRANA NUCLEAR CITOPLASMA (ecto y endoplasma) VACUOLAS RE, RIBOSOMAS, GOLGI MITOCONDRIAS LISOSOMAS (contienen proteasas) ELEMENTOS DE SOSTÉN (AXOSTILO) WFB (cuerpos formadores de pared) MEMBRANA PLASMÁTICA simple o rodeada de glicocálix

5 DISTINTAS ETAPAS BIOLÓGICAS TROFOZOÍTO: es la forma activa del protozoario, en la cual se alimenta, se reproduce, se moviliza y ejerce su acción patógena. QUISTE: es la forma de resistencia (a la desecación, a los cambios de temperatura, ph, humedad, concentración de oxígeno, etc) y de transmisión (etapa infectante), y también de multiplicación. OOQUISTE: proviene de la fusión de los GAMETOS, correspondiente a la etapa sexuada de reproducción, y aparece solo en algunas especies. También se denomina cigoto o cigote.

6 FORMAS DE REPRODUCCIÓN DE LOS PROTOZOARIOS ASEXUADA FISIÓN BINARIA DIVISIÓN MÚLTIPLE BROTAMIENTO EXTERNO o plasmotomía ENDODIOGENIA: formación de 2 células hijas por brotamiento interno ESQUIZOGONIA: división del núcleo celular en gran número de núcleos secundarios que se rodean de citoplasma. SEXUADA MEROGONIA: produce merozoítos y esquizontes ESPOROGONIA: produce esporozoítos GAMETOGONIA: produce gametos y un cigoto

7 FORMAS DE DESPLAZAMIENTO DE LOS PROTOZOARIOS SEUDÓPODOS: prolongaciones del citoplasma: LOBÓPODOS: digitiformes con ecto y endoplasma (ej. E.histolytica) FILÓPODOS: filamentosas, solo ectoplasma (ej. Acanthamoeba) FLAGELOS CILIAS COMPLEJO APICAL

8 TAXONOMÍA PARÁSITOS HUMANOS: 4 P HYLUM. ( CARACTERÍSTICAS N UCL EARES, DE RE P RO D UCCIÓN Y DE LO CO MOCIÓN) REINO PROTISTA SUB REINO PROTOZOA PHYLUM SARCOMASTIGOPHORA Sub Phylum Mastigophora Sub Phylum Sarcodina PHYLUM APICOMPLEXA (Levine 1970) Clase Sporozoa PHYLUM MICROSPORA Orden Microsporita PHYLUM CILIOPHORA Orden Trichostomatida

9 REINO PROTISTA SUB REINO PROTOZOA PHYLUM SARCOMASTIGOPHORA Sub Phylum Mastigophora Orden Tricomonadida Género Trichomonas -T.vaginalis Género Pentatrichomonas - P.hominis Orden Retortamonadida Género Chilomastix - Ch.mesnilii Género Retortamonas -R.intestinalis Orden Diplomonadida Género Giardia - G.lamblia (Stiles 1915) Sub Phylum Sarcodina Orden Amoebida Género Entamoeba - E.histolytica (Schaudinn 1903) Género Blastocystis - B.hominis (Zierdt, 1989)

10 REINO PROTISTA SUB REINO PROTOZOA PHYLUM APICOMPLEXA (Levine 1970) Clase Sporozoa. Sub Clase Coccidia Género Isospora - I.belli Género Cryptosporidium - C.parvum Género Cyclospora - C.cayetanensis

11 REINO PROTISTA SUB REINO PROTOZOA PHYLUM MICROSPORA Orden Microsporita Género Encephalitozoon - E.intestinalis Género Enterocytozoon - E.bieneusi PHYLUM CILIOPHORA Orden Trichostomatida Género Balantidium - B.coli (Malmsten 1857)

12 CLASIFICACIÓN DE PROTOZOOS DE INTERÉS MÉDICO SEGÚN LOCALIZACIÓN EN EL HUÉSPED TUBO DIGESTIVO Y VÍAS GÉNITOURINARIAS PATÓGENOS PRIMARIOS OPORTUNISTAS EMERGENTES PATOGENICIDAD DISCUTIDA Giardia lamblia (GIARDIASIS) Entamoeba histolytica (AMIBIASIS) Trichomonas vaginalis (TRICOMONIASIS) Isospora belli (ISOSPOROSIS) Cryptosporidium spp. (CRIPTOSPORIDIOSIS) Cyclospora cayetanensis (CICLOSPOROSIS) Enterocytozoon bieneusi (MICROSPORIDIOSIS) Encephalitozoon intestinalis (MICROSPORIDIOSIS) Entamoeba coli Endolimax nana Chilomastix mesnilii Iodamoeba bütschlii Blastocystis hominis Pentatrichomonas hominis

13 IMPORTANCIA DE LOS PROTOZOARIOS INTESTINALES Diarrea aguda Diarrea prolongada Diarrea crónica Diarrea con deshidratación Síndrome de malabsorción Síndrome disentérico

14 AGENTES ETIOLÓGICOS PROTOZOOS PATÓGENOS Giardia lamblia Entamoeba histolytica

Giardia lamblia ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 15

16 Giardia lamblia Flagelado intestinal con 2 formas evolutivas: Trofozoíto fijado al duodeno por discos suctorios Quiste resistente que se elimina al exterior Prevalencia: 10-20% población infantil, 3% población adulta. Epidemiología:cosmopolita Localización: epitelio de intestino delgado

17 Giardia lamblia Mecanismos de adhesión Lectinas (proteínas parasitarias que se unen a azúcares de la membrana superficial de los enterocitos) Vesículas periféricas con función de lisosomas Transmisión Quistes (ciclo fecal-oral) Interhumana - zoonosis?

18 Giardia lamblia

19 Giardia lamblia CICLO EVOLUTIVO

20 PATOGENIA DE LA GIARDIASIS Daño directo Factor mecánico (disco suctorio) Bloqueo o tapizado de la mucosa intestinal Competencia por nutrientes Factor químico (productos de excreción-secreción) Daño indirecto Factor enzimático (disacaridasas) Disminución de sales biliares Factores inmunológicos Mecanismos de defensa intestinal

21 MICROFOTOGRAFÍAS ELECTRÓNICAS Trofozoítos de Giardia lamblia tapizando enterocitos y con mayor aumento enfoque de disco suctorio

22 DIAGNÓSTICO DE GIARDIASIS Examen coproparasitario Directo, enriquecimiento y macroscópico Seriado: 3 muestras sucesivas Sondeo duodenal Biopsia de intestino delgado

23 BIOPSIA DUODENAL

24 DIAGNÓSTICO DE GIARDIASIS DETECCIÓN DE ANTÍGENOS EN HECES (Coproantígenos): EIA, inmunocromatografía, IFD ANALISIS DE ADN: PCR DETECCIÓN DE ANTICUERPOS: IFI, ID, EIA, IB

25 GIARDIASIS EN POBLACIÓN HOSPITALARIA Atención hospitalaria ambulatoria (CHPR) 1984: 21% (n=4152) 1986: 19% (n=4641) 1988: 18% (n=6433) 1990: 18% (n=5967) 1992: 18% (n=5646) 1994: 19% (n=5329) 1996: 16% (n=6763) 1998: 17% (n=4467) 2000: 11% (n=2986) 2002: 16% (n=3282) 2004: 17% (n=3675) Comunicación personal Dra.Zanetta

26 GIARDIASIS EN POBLACIÓN MUTUAL Atención mutual (MUCAM) 1er. semestre 99: 9% de giardiasis en 1352 coproparasitarios. Sanabria D y cols. Lab al Día. 1999 1er semestre 05: 5% giardiasis en 2136 coproparasitarios. Basmadjian Y y cols. XVII Congr Latinoameric de Parasitología. 2005

27 GIARDIASIS Y DIARREA Diarrea aguda infantil 1 caso de giardiasis en 153 niños hospitalizados por DAI Ferrari AM y cols. Arch Pediatr Urug.1983 Diarrea aguda de la comunidad 18% (13/72) niños con diarrea y 7% (3/44) niños sin diarrea Montano A y cols. Diarrea Aguda Uruguay. IDRC.1991

28 GIARDIASIS Y DIARREA Diarrea crónica 46% de 155 niños de 1-5 años, de bajo msec con diarrea crónica. 57% en el grupo de 1-3 años. Zanetta E y cols. VI Congreso FLAP. 1983 Diarrea persistente 3,5% (8/224) en niños hospitalizados. Torres ME y cols. Journ Clin Microbiol. 2001

% Parasitismo 20 29 Giardiasis 10 Giardiasis Casos Niños Nuevos Giardiasis Casos Niños Controlados 0 2006 2007 2008 Año Año Giardiasis Gráfico de tendencias comparativas Giardiasis. CEI 2006-2008. Montevideo, Uruguay. Giardiasis Casos Niños Nuevos Giardiasis Casos Niños Controlados 2006 12,6 8,4 3,9 2007 14,6 10,7 3,9 2008 12,9 8,5 4,4

30 GIARDIASIS RECURRENTES Portadores sanos o con diarrea. 6 controles (1/semestre): 14% (49/355) (+ en 3 o más de las muestras) Reinfección? Resistencia a la medicación? Giardiasis crónica? Zanetta E y cols. Giardiasis persistente. Chile 1995

31 GIARDIASIS EN ADULTOS Manipuladores de alimentos (H.Clínicas) 30% de individuos parasitados (34/110), 1 con giardiasis. Salvatella R y cols. Rev Urug Patol Clin 1996. Población de Hospital de adultos (H.Pasteur) 29% de muestras positivas en 230 estudios del primer semestre de 1999, diagnosticando 14 giardiasis (6%). Acuña AM y cols. Lab al Día 1999.

32 CLASIFICACIÓN DE Giardia lamblia Desde el punto de vista taxonómico G.lamblia se clasifica en 7 genotipos (A-G): Genotipos A y B son los que muestran mayor potencial zoonótico. Puesta a punto de estrategia de Biología Molecular para determinar Genotipos de G. lamblia circulantes en Uruguay:PCR RFLP a partir de la amplificación restricciòn de un fragmento del gen que codifica para una enzima (glutamatodeshidrogenasa) de este protozoo. 16 muestras de niños con giardiasis: 14 GA (13 AIII y 1 AI) 2 GB (BIII). Ureta A y cols. XX Congr.Lat Americ Microbiología,2010

Entamoeba histolytica ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA 33

34 Entamoeba histolytica Ameba con 2 formas evolutivas: Trofozoíto: vive en intestino grueso humano y puede invadir y atravesar mucosa intestinal Quiste: se elimina al exterior con las heces Prevalencia en Uruguay: 1-2% adultos y niños mayores de 5 años (95% portadores sanos u oligosintomáticos).

35 Entamoeba histolytica Localización: Intestino grueso Adhesión: Lectinas Invasión por E. histolytica: proteasas, erosión ulceración en botón de camisa complicaciones extraintestinales Transmisión: quistes en heces ciclo fecal-oral (manipuladores de alimentos)

36 Entamoeba histolytica - dispar

37 Entamoeba histolytica CICLO EVOLUTIVO

38 DIAGNÓSTICO DE AMIBIASIS Coproparasitario seriado: Observado por técnico entrenado Con técnicas de enriquecimiento Con control de calidad Rectosigmoidoscopía Serología en amibiasis tisular

39 DIFICULTADES EN EL DIAGNÓSTICO Imposible diferenciación morfológica entre las especies englobadas en el denominado complejo Entamoeba E.histolytica: puede causar enfermedad invasiva intestinal y extraintestinal E.dispar: no Interconversión entre ambas? Coexistencia de ambas especies en el huésped? DEBERÍA INFORMARSE COMO E.histolytica/dispar

40 DIAGNÓSTICO DE AMIBIASIS DETECCIÓN DE ANTICUERPOS: HAI, AL, IEF, CIE, IFI, FC, ELISA DETECCIÓN DE ANTÍGENOS EN HECES (Coproantígenos): ELISA, inmunocromatografía ANALISIS DE ADN: PCR

41 EXISTE AMEBIASIS EN URUGUAY? 0,1-1,5% en población de nivel socio económico deficitario, corresponden a Entamoeba histolytica-dispar Mayoría paucisintomáticos: Entamoeba dispar? Viajeros que provienen de zonas endémicas generalmente sintomáticos: Entamoeba histolytica?

42 CONTROL DE LAS PROTOZOOSIS INTESTINALES 1. Educación en salud 2. Saneamiento adecuado 3. Tratamiento de los casos diagnosticados

43 PROFILAXIS DE INFECCIONES POR PROTOZOOS INTESTINALES LAVADO DE MANOS Previo a la ingesta de alimentos Posterior al uso del baño Riguroso en relación con la preparación de alimentos LAVADO DE FRUTAS Y VERDURAS HIGIENE AMBIENTAL Limpieza minuciosa de mesadas y utensilios de cocina Desinfección de baños y área de cambio de pañales Lavado de pisos y áreas de juego Higiene de juguetes

44 MUCHAS GRACIAS