U-2. LIMPIEZA, DESINFECCION Y ESTERILIZACION DE MATERIAL DE LABORATORIO U-2. LIMPIEZA, DESINFECCION Y ESTERILIZACION DE MATERIAL DE LABORATORIO Limpieza: Eliminación física de material orgánico o partículas de los objetos. La limpieza no mata microorganismos, sino eliminarlos de los objetos. Desinfección: Procedimiento por el cual se destruyen gérmenes patógenos que se encuentran en piel, mucosas, ambiente etc La desinfección de la materia viva se llama antisepsia. Esterilización: Procedimiento por el cual se destruye formas de vida microbiana incluso sus formas resistentes, como las esporas. 2.1- TIPOS DE LIMPIEZA Limpieza a mano por frotación: Arrastre mecánico de la suciedad con un cepillo, escobilla, esponja, agua y detergente y posterior enjuagado con agua y/o destilada. Limpieza a mano por inmersión: Colocar el material en una solución de limpieza durante 20 o 30 min. sacar y aclarar con agua y/o destilada. Limpieza a máquina: Existen laboratorios con maquinaria específica para lavado de material. Limpieza de Trazas: Se emplean ácidos o bases para la limpieza. Así las Trazas orgánicas (suero, sangre ) se usan lejías o disolventes orgánicos y a continuación en
una solución de HC1 1N y aclarado con agua destilada. Limpieza de vidrio: Antes de empezar a limpiarlo: En caso de material corrosivo, Vaciarlo y enjuagarlo para evitar salpicaduras En caso de contaminación biológica, debe desinfectarse antes de proceder a la limpieza mediante inmersión en agua con lejía 20 30 min. Casos Especiales: Material con orgánicos resistentes: Se sumergen 24h en mezcla crómica, se enjuaga y se limpia. Material con restos de tipo lipófilo: Eliminarlos con papel y someterlo a la acción de un disolvente orgánico, y después lavar con agua caliente y detergente. Material con manchas de colorante: Se limpia con clorhídico 1N o mezcla crómica diluida y se enjuaga con agua destilada. Material con restos de agar solidificado: Se licua previamente, se introduce al baño maría a 60º-70ºC no verter en desagües. Portaobjetos: Limpiar de forma habitual, aclarar con agua destilada y se introduce en una solución de alcohol etílico o alcohol etílico-éter etílico 1:1 para desengrasarlos. Secar con paño o en estufa a 70ºC. Pipetas: se enjuagan bajo el chorro y se colocan dentro de un lavador de pipetas, de no tener se meten en una probeta grande con agua y jabón con la protección de proteger el fondo con algodón. De no ser suficiente, sumergir en mezcla crómica durante 24h y enjuagar con agua destilada. Pipetas cuenta glóbulos: Enjuagar con agua destilada y acetona, por último, se puede aspirar con un secador. Cámara cuenta glóbulos: Se sumergen en agua
destilada tibia y detergente con lejía diluida al 1/50, se enjuaga con agua destilada se seca con secador o estufa y se les pasa un papel empapado con alcohol-éter. Limpieza de material diverso, aparatos y superficies Material de plástico: Generalmente desechable, limpiar igual que el vidrio pero teniendo en cuenta que puede ser sensible a disolventes, ácidos y mezclas crómicas. Material óptico: Las lentes se limpian con cuidado con papel para lentes, no usar otros materiales por riesgo de rayar, una vez por semana pasar un papel de lente empapado en xilol. Material eléctrico: Desenchufar, con un paño húmedo o con agua jabonosa o un algodón humedecido en alcohol. Superficies: Deberán estar cubiertas con papel de filtro que actúa como aislante biológico. Se limpiaran con un paño empapado en una solución de lejía diluida. 3.- DESINFECCION Y ESTIRILIZACION Microorganismo o gérmenes: Organismos muy pequeños visibles sólo con la ayuda de un microscopio. (Bacterias, virus, hongos y parásitos) Microorganismo patógeno: El que cuando está en el organismo causa una enfermedad o infección. Se dice Infectante si se halla sobre otro material. Microorganismos saprófitos: Son aquellos que se albergan en el organismo, sin producir enfermedad. Desinfección: Técnica de saneamiento, utilizando diversos medios cuya misión es la destrucción de gérmenes patógenos causantes de enfermedades. Esterilización: Técnica de saneamiento que destruye gérmenes
patógenos, saprófitos y esporas, es decir, todo microorganismo vivo que se encuentre en el objeto. Material séptico: Material contaminado con gérmenes patógenos y saprofitos Material aséptico: Material estéril libre de todo germen. Antisepsia: Cuando la desinfección es sobre tejidos vivos. 3.2.- METODOS DE DESINFECCIÓN. 3.2.1.- Métodos físicos Ebullición o hervido: Sumergir el material en agua a 100ºC durante 30 min. Elimina la mayoría de los patógenos pero no elimina esporas. Rayos ultravioletas: Impiden la reproducción de gérmenes patógenos. Se usan en la reducción de microorganismos en zonas estériles para envases y campanas de flujo laminar (Zonas de Microbiología y preparación IV y nutrición parenteral) 3.2.2.- Métodos químicos. Desinfectantes de alto nivel: Elimina la mayoría de gérmenes incluidos virus y esporas. Desinfectantes de grado medio: Igual que el anterior pero no elimina virus ni esporas. Desinfectantes de bajo poder: Solo elimina gérmenes patógenos. La mayoría de los desinfectantes son productos de síntesis y deben tener estas propiedades: Poder germicida lo mas alto posible y de amplio espectro a bajas concentraciones No ser toxico para el hombre, animales y plantas, ni corrosivo para el material. Poseer alto poder de penetración, soluble al agua y
fluidos celulares. Económico y de fácil adquisición. Inerte al material a tratar Estabilidad y homogeneidad de composición y difusión. 3.2.3.- Desinfectantes de uso frecuente: Alcohol etílico de 70º y de isopropílico: nivel medio (piel, instrumentos y superficies) Peróxido de Hidrógeno o agua oxigenada: según concentración puede ser de nivel bajo (3%) o nivel alto (30%) o antiséptico. Glutaraldehído al 2%: Desinfectante de alto nivel Compuestos clorados: Al disolverse en agua liberan cloro y tiene acción desinfectante. De nivel medio. Derivados del amonio cuaternario: De bajo nivel, detergentes para limpiar y se suelen emplear con otros desinfectantes. Tienen un efecto antiséptico sobre la piel. Compuestos Fenólicos: Efectivos a bajas concentraciones contra formas vegetativas de bacterias pero no contra esporas. 3.2.4.- Métodos de desinfección. Inmersión: Sumergir los materiales en desinfectante Loción: Empapar bayetas, esponjas o fregonas y frotar con ellas. Pulverización: Proyectar finas gotas sobre superficies. 3.3.- Métodos de esterilización. Físicos: Térmicos. Térmicos por calor seco (Horno Pasteur) Térmicos por calor directo Flameado Incineración Térmicos por calor Húmedo (Autoclave)
No Térmicos Filtros de membrana Químicos: Óxido de etileno (muy tóxico) Aldehídos 3.4.- Control de calidad de la esterilización. 3.4.1.- Control del proceso Físicos: Se efectúan mediante indicadores gráficos de presión y temperatura. Químicos: Tiras reactivas: impregnadas de un compuesto que cambia de color Tubos de Brown Biológicos (test de esporas): Mediante cultivo y un indicador de ph