NOVEDADES DEL CONGRESO EUROPEO ESHRE 2016 JORNADA DE ACTUALIZACIÓN CIENTÍFICA EN BIOLOGÍA - MEDICINA REPRODUCTIVA 11 de Agosto de 2016
CRIOPRESERVACIÓN DE OOCITOS Y EMBRIONES Dr. A. Gustavo Martínez
HYDROXYPROPYL CELLULOSE IS AN EFFECTIVE SURFACTANT AGENT FOR VITRIFICATION SOLUTIONS: A PROSPECTIVE STUDY ON DONOR OOCYTES M. Gallardo Molina, M. Hebles, B. Migueles, M. Dorado, L. Aguilera, M. Gonzalez, P. Piqueras, L. Montero, S. Pascual, S.M. Fernando, R. Risco
Prueban el uso de Hidroxipropil celulosa como surfactante en un medio de vitrificación
Los medios de vitrificación necesitan un surfactante para poder efectivamente vitrificar
Los medios de vitrificación necesitan un surfactante para poder efectivamente vitrificar El más usado es la suplementación con proteínas
Los medios de vitrificación necesitan un surfactante para poder efectivamente vitrificar El más usado es la suplementación con proteínas Existe riesgo de contaminación
Los medios de vitrificación necesitan un surfactante para poder efectivamente vitrificar El más usado es la suplementación con proteínas Existe riesgo de contaminación Se evalúa la macromolécula Hydroxypropyl cellulosa cómo surfactante en un medio de vitrificación
Materiales y métodos Prospectivo Oocitos maduros de 219 donantes Cada receptora recibió oocitos de la misma donante: * 6 9 MII frescos (Grupo control) * 2 5 vitrificados (Grupo experimental) Los oocito fueron fecundados por ICSI y cultivados en paralelo Se registraron: La tasa de fecundación y la calidad embrionaria de Día 2 y 3
Materiales y métodos Medio de vitrificación: * ES: 7.5% ethylene glycol + 7.5% DMSO * VS: 15% ethylene glycol + 15% DMSO Suplemento: Hydroxypropyl cellulose Cryotop
Resultados Sobrevida post vitrificación: 70/73 (95.9%) (morfología 2 h post warming) Vitrificados Frescos Fecundación normal 49/73 (70%) 105/141 (72%) Día 2 de buena calidad 82% 72% Día 3 de buena calidad 69% 70% Se transfirieron 15 embriones mezclando los provenientes de oocitos frescos y vitrificados La tasa de implantación fue 53%
Conclusión: La vitrificación de oocitos empleando una solución libre de proteínas logró resultados comparables a los de los oocitos frescos de la misma cohorte
Conclusión: La vitrificación de oocitos empleando una solución libre de proteínas logró resultados comparables a los de los oocitos frescos de la misma cohorte Problema para identificar el origen de los embriones transferidos
OXIDATIVE MARKERS IN CRYOPRESERVATION MEDIUM OF FROZEN- THAWED EMBRYOS IN IN VITRO FERTILIZATION: A POSSIBLE TOOL FOR IMPROVED EMBRYO SELECTION Z. Wiener-Megnazi, S. Lahav-Baratz, S. Matarasso, M. Koifman, S. Shnizer, D. Ishai, G. Peer, G. Younes, R. Auslander, M. Dirnfeld, I. Blais
Prueban el uso de la técnica de Termoquimioluminiscencia (TCL) para evaluar el estrés oxidativo en embriones post criopreservación
El proceso de criopreservación está asociado a daño celular por diversos mecanismos, entre ellos el ESTRÉS OXIDATIVO Estudian la posible asociación entre los parámetros de estrés oxidativo medidos en el medio de criopreservación por Termoquimioluminiscencia y las tasas de éxito
Materiales y Métodos Prospectivo 91 transferencias de embriones congelados (slow freezing) Luego del descongelamiento se tomaron 50µl de medio de descongelamiento para analizarlos por TCL Se midió TCL del medio a 50 seg (H1), 150 seg (H2) y 280 seg (H3) Esto fue comparado con las tasas de éxito
Resultados Fueron transferidos 194 embriones a 85 pacientes Lograron 22 embarzos (25%)
Resultados Análisis de regresión Valores <32 unidades para TCL en H1 (50 seg) permitieron discriminar entre LOGRO de EMBARAZO y FALLA Las tasas de implantación y embarazo clínico fueron mayores cuando TCL H1 fue <32 vs. TCL H1 32 No se obtuvieron embarazos cuando H1 fue 40 unidades
Conclusiones El método de evaluación es promisorio ya que es rápido, no invasivo, simple, preciso, y objetivo
Conclusiones El método de evaluación es promisorio ya que es rápido, no invasivo, simple, preciso, y objetivo Dado las amplias variaciones en las medidas de TCL es prematuro recomendar el descarte de los embriones que den con valores altos
Conclusiones El método de evaluación es promisorio ya que es rápido, no invasivo, simple, preciso, y objetivo Dado las amplias variaciones en las medidas de TCL es prematuro recomendar el descarte de los embriones que den con valores altos Debe realizarse un estudio prospectivo y aleatorizado con mayor número transferencias evaluando embriones tempranos y blastocistos antes de hacer recomendaciones clínicas
DIFFERENT THAWED CLEAVED EMBRYO TRANSFER STRATEGY FOR CRYOPRESERVED EMBRYOS ACCORDING TO MODE OF CRYOPRESERVATION: A PROSPECTIVE RANDOMIZED STUDY COMPARING 2 CULTURE MEDIUM DURATION A. Benammar, X. Ferraretto, E. Galati, M.A. Llabador De Royer, S. Gricourt, S. Epelboin, C. Yazbeck, C. Patrat
Estudian el impacto de la duración del cultivo post criopreservación de acuerdo a la técnica empleada: vitrificación vs. congelamiento lento
Algunos estudios muestran que el cultivo in vitro post-congelamiento lento tiene un potencial efecto negativo, debido a la sensibilidad a condiciones ambientales sub-optimas
Algunos estudios muestran que el cultivo in vitro post-congelamiento lento tiene un potencial efecto negativo, debido a la sensibilidad a condiciones ambientales sub-optimas La vitrificación provoca menores daños a las células por lo cual es más eficiente
Algunos estudios muestran que el cultivo in vitro post-congelamiento lento tiene un potencial efecto negativo, debido a la sensibilidad a condiciones ambientales sub-optimas La vitrificación provoca menores daños a las células por lo cual es más eficiente Pero tiene una contra: la alta concentración de crioprotector
Materiales y métodos Prospectivo Embriones de Día 2 con 3-5 blastómeras y fragmentación 30% criopreservados: slow freezing o vitrification Sólo se transfirieron embriones con células intactas 50% post-criopreservación Grupo A: 2 h de cultivo Grupo B: cultivo overnight
Se evaluaron 701 de transferencia de embriones criopreservados 449 cumplieron con los parámetros de inclusión Grupo A (2 h) Grupo B (overnight) Slow freezing 88 116 Vitrificación 125 120
Resultados Nº de transferencias Sobrevida Slow freezing 88 116 Vitrificación 125 120
SLOW FREEZING Grupo A (2 h) Grupo B (overnight) VITRIFICACIÓN Grupo A (2 h) Grupo B (overnight) Tasa de embarazo 21% 20% Tasa de implantación 16% 14% Tasa de embarazo 16% a 28% b Tasa de implantación 12% a 22% b
Prueba adicional: Embriones de día 3 transferidos el mismo día post-criopreservación 132 ciclos con 184 embriones Sobrevida Tasa de embarazo Tasa de implantación Slow freezing 59% a 27% a 20% a Vitrificación 89% b 21% b 17% b Esto sugiere un potencial beneficio del cultivo overnight
Conclusión Los embriones vitrificados necesitan un tiempo de cultivo más largo antes de la transferencia
Conclusión Los embriones vitrificados necesitan un tiempo de cultivo más largo antes de la transferencia Probablemente para terminar de eliminar el crioprotector
Conclusión Los embriones vitrificados necesitan un tiempo de cultivo más largo antes de la transferencia Probablemente para terminar de eliminar el crioprotector Deberían probarlo con otros estadios
Conclusión Los embriones vitrificados necesitan un tiempo de cultivo más largo antes de la transferencia Probablemente para terminar de eliminar el crioprotector Deberían probarlo con otros estadios Qué pasa en el útero?
MORPHOLOGY DYNAMICS OF WARMED BLASTOCYST ARE STRONG PREDICTORS OF CLINICAL OUTCOME A. Galán Rivas, A. Coello, A. Cobo, M. Nohales, L. Alegre, M. Meseguer
Usan el Embryoscope para evaluar embriones post-criopreservación
Si bien la reexpansión del blastocisto se usa como predictor de sobrevida post-criopreservación, sería útil poder cuantificarla
Materiales y métodos Estudio retrospectivo Se valuaron 414 ciclos de transferencia de embriones criopresevados Fueron estudiados 435 blastocistos con datos conocidos de implantación Fueron evaluados usando Time Lapse Fueron colocados en el Embryoscope inmediatamente luego de la desvitrificación Cultivo hasta la transferencia >3.5 h
Vitrificación con Cryotop (Kitazato Biopharma) Variables estudiadas: Grosor inicial y final de la zona pellucida (μm) Área inicial y final del blastocisto (μm 2 ) Área de la masa celular interna (μm 2 ) Colapso post- criopreservación
Resultados: Tasa de implantación mayor cuando: Grosor inicial de la zona pellucida <18 μm Grosor final de la zona pellucida <12 μm Área initial del blastocisto >9900 μm 2 Área final del blastocisto <19136 μm 2
Resultados: No hubo diferencias: En el área de la masa celular interna Entre los blastocistos colapsados y los que no
Conclusiones El análisis de los blastocistos post-criopreservación mediante Time-Lapse nos da un nuevo marcador cuantitativo de implantación
Conclusiones El análisis de los blastocistos post-criopreservación mediante Time-Lapse nos da un nuevo marcador cuantitativo de implantación En aquellos casos en que el blastocisto no alcanza el grosor óptimo de la zona pellucida debería considerarse la transferencia de 2 embriones
HIGHER CUMULATIVE ONGOING PREGNANCY RATE AFTER IVF CYCLES INCLUDING A FRESH EMBRYO TRANSFER THAN AFTER FREEZE-ALL CYCLES V. Barraud-Lange, A. Rouquette, N. Le Foll, N. Celton, P. Santulli, K. Pocate-Cheriet, J.P. Wolf
Comparan las tasas de éxito entre transfer fresco y Freeze-all
Hay numerosas publicaciones que marcan una tendencia hacia el Freeze-all
Las indicaciones más claras para el Freeze-all son: Prevención del síndrome de hiperestimulacíon ovárica Luteinización prematura Hidrosalpinx Pólipo endometrial Endometrosis Fallas previas de implantación
Pero el hacerlo extensivo a todas las pacientes todavía debe ser probado
Materiales y métodos Estudio de cohorte Pacientes que realizan Freeze-all fueron compradas con pacientes que realizan transferencia en fresco Se empleó un un modelo matemático para generar un SCORE para evitar bias
El modelo incluyó 16 variables, entre ellas: Edad Paridad previa Número de oocitos recuperados Número de M2 recuperados Origen de los espermatozoides Número de embriones etc.
Resultados Pacientes: 1624 Transferencia en fresco: 1068 Freeze-all : 556 El SCORE dejó 398 en cada grupo
Transferencia en fresco Freeze-all Número medio de transferencias 1.36 ± 0.72 1.29 ± 0.67 Tasa de embarazo acumulativa 58% a 40.0% b Número medio de transferencias hasta el embarazo 1.33 ± 0.62 1.37 ± 0.78
Conclusiones La tasa de embarazo acumulativa fue más alta en el grupo de transferencia en fresco Pese a ellos no hubo diferencia en lapso para conseguir el embarazo entre los dos grupos
Conclusiones La tasa de embarazo acumulativa fue más alta en el grupo de transferencia en fresco Pese a ellos no hubo diferencia en lapso para conseguir el embarazo entre los dos grupos Esto enfatiza la necesidad de realizar un trabajo de investigación prospectivo, aleatorizado y basado en la evidencia para estudiar la opción Freeze-all
MULTI-CENTER STUDY DEMONSTRATES FREEZE-ALL IVF PROTOCOLS ARE CORRELATED WITH HIGHER ONGOING PREGNANCY RATES IN WOMEN OF ADVANCED MATERNAL AGE A. Santistevan, K. Hunter Cohn, F. Arredondo, B. Miller, S. Ory, M. Leondires, J.N. Gutmann, L. Weckstein, S. Katz, J. Nulsen, P. Lin, A.B. Copperman, E. Widra, J. Schnorr, P. Yurttas Beim
Comparan freez all en pacientes jóvenes con buen pronóstico y en pacientes de edad reproductiva avanzada
Los protocolos Freeze-all han sido enfocados en pacientes con buen pronóstico Todavía queda definer cuales son las pacientes que pueden beneficiarse más con el Freeze-all
Materiales y métodos Studio retrospectivo en 12 centros de fertilidad de EE.UU. Se comparó transferencia en fresco vs. Freeze-all 16.206 ciclos de los cuales 2.100 fueron Freeze-all Se usó un algoritmo (variables similares al trabajo anterior) para emparejar a las pacientes y seleccionar así 2.100 ciclos frescos
Resultados Fresco Freeze-all Tasa de embarazo global 40% 50%
REGRESIÓN Tasa de embarazo Freeze-all significativamente mayor en: Pacientes 35 38 años [OR = 1.48 (1.14, 1.92), p = 0.006] Pacientes 38 41 años [OR = 2.59 (1.90, 3.52), p < 0.001] Pacientes > 41 años [OR = 8.16 (4.89, 13.59), p < 0.001] Pacientes <35 años no mostraron diferencias [OR = 1.02, (0.86, 1.22), p = 0.83]
Además encontraron no tubo impacto sobre el Freeze-all en: Disminución de reserva ovárica PCOS Endometrosis Enfermedades tubáricas Factor uterino Disfunción ovulatoria Infetilidad idiopatica Pico de progesterona >1.5 ng/ml
Conclusión El protocolo Freeze-all mostró resultados equivalentes a los de transferencia en fresco, pero mejoró significativamente las tasa de embarazo en pacientes 35 años
Conclusión El protocolo Freeze-all mostró resultados equivalentes a los de transferencia en fresco, pero mejoró significativamente las tasa de embarazo en pacientes 35 años El estudio incluyó datos retrospectivos de centros de EE.UU. Actualmente se está diseñando un estudio prospectivo y aleatorizado con centros europeos
MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCIÓN