Genética de bacteriófagos

Transcripción

1 Genética de bacteriófagos

2 Bacteriofago T4 virulento

3

4 Ciclo lítico de los fagos (fagos virulentos)

5 Bacteriófago λ (temperado) lítica lisogénica

6 Integración del bacteriófago

7 Recombinación genética en fagos

8 Placas de lisis de los recombinantes

9 Virus de Eucariontes (Retrovirus)

10 Virus de la Influenza

11 Genética bacteriana E. coli

12

13 Selección de mutantes en bacterias Prototrófico : Son bacterias silvestres que pueden crecer en medios mínimos (sales inorgánicas, fuente de carbono glucosa- y agua). A partir de estas sustancias mínimas las bacterias pueden construir todas las macromoléculas necesarias para vivir. Auxotrófico : Las bacterias son generalmente mutantes y no pueden crecer al menos que se adicionen al medio nutrientes específicos ( Adenina, biotina, metionina, etc.) Resistencia o susceptibilidad a antibióticos

14

15 Plásmidos Varian en tamaño. En general se replican de manera autónoma. Tienen un origen de replicación y controlan su número de copias.

16 Tipos de plásmidos Plásmidos de fertilidad (F): los cuales contienen información que les permite conjugarse. Plásmidos de resistencia (R ): los cuales contienen genes que pueden constituir resistencia contra antibióticos o venenos. Históricamente conocidos como Factores R. Col-plásmidos: los cuales contienen genes que codifican (determinan la producción de) colinas y proteínas que pueden matar a otra bacteria.

17 Vías de intercambio de genes entre bacterias

18 Transformación bacteriana Incorporación e integración de un ADN extraño al cromosoma bacteriano

19 Transducción generalizada

20 Transducción especializada

21 Conjugación bacteriana E. coli F + (Factor de fertilidad) Pili F - F + Plásmido F *Plásmido F codifica alrededor de 100 genes

22 Descubrimiento del fenómeno de conjugación

23 Las células tienen que estar en contacto para modificarse No hubo modificación genética

24 Plásmido F

25

26

27 Cepas de alta frecuencia de recombinación (Hfr) Las células Hfr producen hasta 1000 veces más recombinantes Al conjugarse con una célula F- no producían células F+ El plásmido F tiene secuencias de inserción

28 Dos eventos de recombinación

29 La transferencia de ADN no es recíproca La bacteria donadora es la que contribuye con un fracción de material genético a la bacteria receptora El fragmento de DNA donado es llamado exogenota y el genoma receptor el endogenota Una bacteria que contiene el exogenota y el endogenota se conoce como merocigoto ó diploide parcial a + b + a - b - Exogenota Endogenota

30 Factores F con genes bacterianos

31

32 Factor F

33 Mapeo por conjugación interrumpida

34 Mapeo de genes bacterianos usando conjugación Hfr str s azi r gal + lac + ton + str r azi s gal - lac - ton -

35

36 Una mutante de E. coli no puede sintetizar triptofano (trp-). Para determinar la localización del gene en el cromosoma, se realizan experimentos de conjugación interrumpida con 4 diferentes Hfr s que contienen los alelos dominantes de los respectivos genes, mientras que la cepa F- tiene los recesivos. HfrA man+ (1) trp+(9) aro+(17) gal+(20) lac+ (29) thr+ (37) Hfr B trp+ (6) man (14) his (22) tyr (34) met (42) arg (48) HfrC thr (3) ilv+ (20) xyl+ (25) arg+ (33) met+ (39) tyr+ (47) HfrD met+ (2) arg+ (8) xyl+ (16) ilv+ (21) thr+ (38) lac+ (46) Construye la secuencia de genes en el cromosoma, considerando la thr como tiempo 0 thr 0/100

37 Elementos genéticos transponibles Los elementos de secuencias de inserción (IS) son segmentos de DNA que pueden moverse de una posición cromosómica a otra del mismo cromosoma o diferente. Cuando los IS aparecen en medio de los genes, pueden interrumpir la secuencia codificante e inactivar la expresión del gen. Fueron descubiertos por primera vez en E.coli en el operon gal y son los transposones más simples. Tienen entre 700 y 1500 pb; son frecuentes en bacteriófagos y plásmidos Transposasa

38 Secuencias de inserción (IS) Transposones en procariontes

39 Transposones simples y compuestos

40 Plásmidos R con el mapa de transposones

41 Mecanismo de transposición

42 Dos formas de transposición

43 Transposones de eucariontes Retrotransposones Transposones de ADN

44 Transposones en humano