Laboratorio No. 7 Titulo: DESNATURALIZACIÓN DE PROTEÍNAS

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Hugo Mendoza Correa
hace 6 años
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1 Laboratorio No. 7 Titulo: DESNATURALIZACIÓN DE PROTEÍNAS Introducción: Las proteínas se encuentran involucradas en virtualmente todos los procesos que se llevan a cabo dentro del organismo, teniendo una gran variedad de funciones. Algunas son enzimas, otras formadoras de estructuras claves como el músculo, otras son transportadoras, otras defienden al cuerpo humano y otras son parte de la estructura corporal. Estas moléculas son capaces de cumplir tantas funciones tan distintas debido a que poseen varios niveles de organización que les permite ser el centro de atención de la mayoría de procesos dentro del organismo humano. En cada caso, la función de una proteína depende enteramente de su estructura. Se pretende demostrar cuáles son las consecuencias evidentes de la desnaturalización de las proteínas que se encuentran en los alimentos. Las proteínas de interés clínico, en su mayoría, son proteínas globulares solubles, que son moléculas compactas con muy poco espacio para agua en su interior. Sin embargo, la actividad biológica de las proteínas se mantiene solamente en un rango limitado de temperatura y ph, entre otras condiciones. Cualquier período extenso de temperatura o ph extremo causan la "desnaturalización" de la proteína, lo cual implica la pérdida de la función, así como de su solubilidad en medios acuosos. Esto se debe principalmente a que ciertos agentes, como temperatura, iones hidrógeno y ciertas sustancias, irrumpen en los enlaces iónicos que mantienen la estructura en tercera dimensión, causando que ésta se pierda y, por lo tanto, la función de la molécula que la sufre. Objetivos: Que el estudiante: 1. Se familiarice con los diferentes niveles de estructura de las proteínas: primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria. 2. Observe y analice los cambios evidentes en una proteína cuando sufre desnaturalización. 3. Asocie la pérdida de estructuras secundaria, terciaria y cuaternaria a la pérdida de función de una proteína. 4. Infiera las consecuencias pérdida de función de una proteína a causa de su desnaturalización.

2 5. Se familiarice con el manejo de biomoléculas dentro del laboratorio bioquímico. 6. Conozca los factores que causan la desnaturalización de proteínas. 7. Tome en consideración las precauciones al manejar reactivos de peligro moderado dentro del laboratorio, (ácidos y bases). Material y Equipo: Cristalería Reactivos: o Pip eta s pas teu r o Beake rs de 250 ml o Tubo s de ensa yo o Jugo de limón o HCl grado reacti vo o Solución de NaOH 40% o Solución saturada de sal de mesa o Solución Plumbato sodio de de o Solución de alfa naftol

3 Instrumentos: al 5% en etanol o Ácido concentrado, sulfúrico H2SO4 o Una gaseosa tipo cola o Carne de res en trozos pequeños o Un huevo o Leche entera o descremada o Gradillas o Tubos de ensayo o estufa Procedimiento: 1. Preparación de tubos de ensayo En una gradilla coloque 14 tubos de ensayo y numérelos claramente como sigue, y coloque unas veinte gotas de las siguientes soluciones en ellos: 2. tubo solución tubo Solución 1 Un trozo de carne 8 Clara de huevo 2 Un trozo de carne 9 Leche entera 3 Un trozo de carne 10 Clara de huevo 4 Clara de huevo 11 Leche entera 5 Leche entera 12 Clara de huevo 6 Clara de huevo 13 Leche entera 7 Leche entera 14 Agua destilada Observación: a. Al tubo de ensayo 1 agregue un poco de jugo de limón. b. Al tubo de ensayo 2 agregue un poco de gaseosa de cola c. Al tubo de ensayo 3 agregue agua

4 d. Al finalizar el laboratorio, anote cualquier cambio que haya sufrido el trozo de carne. 3. Exposición al calor: a. Ponga a calentar alrededor de 100 ml de agua en un beaker de 250 ml. b. Cuando el agua ya se encuentre caliente, coloque los tubos de ensayo 4 y 5 dentro del agua, obsérvelos durante un par de minutos. Anote cualquier cambio en apariencia. 4. Efecto del ácido a. Cuidadosamente, agregue una gota de HCl a los tubos de ensayo 6 y 7. b. Agítelos y anote cualquier cambio en apariencia. 5. Efecto de la base a. Agregue una gota de NaOH 40% a los tubos de ensayo 8 y 9, y agítelos. b. Anote cualquier cambio en apariencia. 6. Efecto de las sales a. Agregue 1 ml de solución de NaCl a los tubos de ensayo 10 y 11 y agítelos. b. Anote cualquier cambio en apariencia. 7. Efecto de los metales pesados a. A los tubos 12, 13 y 14 agregue 10 gotas de hidróxido de sodio 40% y caliéntelos en baño de María durante dos minutos. b. Enfríe los tubos y agregue 10 gotas de plumbato de sodio. c. Anote cualquier cambio en apariencia. Pre laboratorio: En forma individual, conteste las siguientes preguntas, este pre-laboratorio debe de entregarlo en hojas tamaño carta sin líneas, no debe de llevar fólder, identifíquelo en la parte superior de la hoja con su nombre, carné y sección, según formato. La fecha de entrega es el día asignado para laboratorio, la hora de entrega antes de iniciar la práctica, al ingresar al mismo, debe

5 entregarlo al profesional, asistente de laboratorio, una vez iniciada la práctica no se reciben trabajos. Únicamente lo pueden entregar en el laboratorio los estudiantes que tienen práctica en ese momento, no se recibirán trabajos retrasados. Investigue usted lo siguiente y describa de acuerdo a sus conocimientos: a. Describa claramente cómo se forman los cuatro niveles de organización de una proteína y la importancia de cada una de ellas en la función que desempeña la misma proteína en el organismo. b. Defina el término desnaturalización, específicamente para proteínas, y qué factores la producen. c. Cómo causa la desnaturalización el ácido y la base? La solución saturada de sal de mesa? d. En qué procesos de su actividad diaria (en casa) utiliza o induce usted la desnaturalización de las proteínas? e. En qué procesos del cuerpo humano se da la desnaturalización de las proteínas? f. Cuáles son las proteínas de la albúmina y de la leche?

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