La enfermedad de la Tristeza del pimiento causada por Phytophthora parasitica: susceptibilidad a la infección de las distintas partes de la planta

Transcripción

1 La enfermedad de la Tristeza del pimiento causada por Phytophthora parasitica: susceptibilidad a la infección de las distintas partes de la planta M.C. Rodríguez-Molina, M.C. Morales-Rodríguez, C. Palo Osorio, E.J. Palo Núñez, M.S. Duarte Maya, J. Picón-Toro Centro de Investigación Agraria Finca La Orden-Valdesequera. Vicepresidencia Segunda y Consejería de Economía, Comercio e Innovación. Finca La Orden, Guadajira (Badajoz). carmen. rodriguez@juntaextremadura.net Palabras clave: inoculación, Capsicum annuum, Jaranda, pimentón. RESUMEN En Cáceres se localizan alrededor de 1000 ha de cultivo de pimiento (Capsicum annuum L.) acogidas a la Denominación de Origen Pimentón de La Vera. En prospecciones realizadas en 2006 y 2007 se identificó a Phytophthora parasitica como el agente causal de la enfermedad de la Tristeza del pimiento en la zona. El objetivo de este trabajo era determinar la susceptibilidad de las distintas partes de las plantas de pimiento (raíz, tallo y fruto) a la infección por P. parasitica. Las raíces se inocularon mediante riego al sustrato con una suspensión de propágulos del hongo en plantas con 6-8 hojas verdaderas. Los tallos se decapitaron a la altura de la 6ª-7ª hoja verdadera, colocándose una pastilla de inóculo sobre la zona de corte. Se inocularon frutos inmaduros y maduros, en campo y en laboratorio, localizando en cada fruto una pastilla de inóculo. En todas las inoculaciones se empleó el cv. Jaranda. De los 15 aislados inoculados en la raíz 13 provocaron necrosis, pérdidas del sistema radicular y chancros en cuello y hubo diferencias significativas entre ellos en la gravedad del daño causado. En las inoculaciones en tallo los 15 aislados produjeron necrosis, con formación frecuente de estrías; también hubo diferencias significativas entre aislados en la longitud de las necrosis causadas. En las inoculaciones en fruto no se produjeron daños en condiciones de campo; en laboratorio los 2 aislados inoculados produjeron daño en los frutos inmaduros y solamente uno de ellos en los maduros. Los síntomas en los frutos fueron lesiones blandas, arrugadas y acuosas, y en ocasiones desarrollo de micelio dentro del fruto. Tanto las raíces como los tallos de pimiento son susceptibles a la infección por P. parasitica. Los frutos sólo son susceptibles cuando se desprenden de la planta y esta susceptibilidad disminuye cuando el fruto madura. INTRODUCCIÓN En los valles de los ríos Tiétar y Alagón, al norte de la provincia de Cáceres se localizan en torno a 1000 ha de cultivo de pimiento (Capsicum annuum L.) acogidas a la Denominación de Origen Pimentón de la Vera. Prospecciones realizadas en 2006 y 2007 permitieron evaluar la gravedad de la enfermedad de la Tristeza del pimiento en la zona e identificar a Phytophthora parasitica Dastur (1913) = P. nicotianae Breda de Haan (1896) como el agente causal de la misma (Rodríguez Molina et al., 2008). La especie que habitualmente causa esta enfermedad es P. capsici (Erwin y Ribeiro, 1996), aunque se ha encontrado asociada a P. cryptogea en el País Vasco (Larregla, 2003) y a P. parasitica en Galicia (Andrés et al., 2003). La situación encontrada en Cáceres es 451

2 comparable a la descrita por Bartual et al. (1991) en Castilla-La Mancha y por Allagui et al. (1995) en Túnez, ya que es P. parasitica la única especie implicada en la enfermedad. Cuando es P. capsici el agente causal de la enfermedad además de los daños en la raíz son también frecuentes las infecciones de otras partes de la planta, como el tallo, las hojas o los frutos (Risatino y Johnston, 1999). El objetivo de este trabajo era determinar la susceptibilidad de las distintas partes de las plantas de pimiento para pimentón a la infección por P. parasitica. MATERIAL Y MÉTODOS El material vegetal empleado para el estudio fueron plantas de pimiento (Capsicum annuum L.) cv. Jaranda. El material fúngico utilizado fueron 15 aislados de P. parasitica provenientes de plantas de pimiento de la zona de La Vera. La inoculación de la raíz se realizó mediante riego al sustrato con una suspensión miceliar. Para producir el inóculo los aislados se sembraron en placas petri (90 mm de diámetro) con 18 ml de medio agar-v8. Cuando el crecimiento de la colonia alcanzó el borde de la placa, se trituró en 100 ml de agua destilada, obteniéndose la unidad de inóculo para 10 plantas (Tello et al., 1991). Las plantas se inocularon en estado de 6-8 hojas verdaderas, regando cada planta con 10 ml de dicha suspensión. La severidad de la enfermedad fue evaluada semanalmente mediante una escala del 0 al 4: 0= planta sana; 1 = planta marchita o amarillenta; 2 = daño leve en el cuello; 3 = daño y necrosis en cuello y tallo; 4 = planta muerta. La última evaluación se realizó a los 30 días de la inoculación. La inoculación por decapitación se realizó según el método de Pochard y Chambonnet (1971). Se seccionó el tallo de la planta por encima de la 6ª-7ª hoja verdadera en el estado fenológico de diferenciación del primer botón floral y se colocó un disco de agar-v8 de 5 mm de diámetro de cultivo del hongo sobre la sección practicada. La longitud de la necrosis se midió a los 4, 8, 11 y 18 días después de la inoculación. Para la inoculación en fruto se emplearon sólo 2 aislados y se llevó a cabo en estado de fruto inmaduro (verde) y fruto maduro (rojo), realizándose tanto en campo como en el laboratorio. Cada uno de los frutos se inoculó disponiendo una pastilla de agar-v8 de 7 mm de diámetro en la superficie, que para evitar la desecación se recubrió con papel parafilm. Transcurridos 7 días se evaluó el % en peso de la superficie afectada. Las inoculaciones en campo se hicieron en frutos de plantas cultivadas al aire libre, mientras que para las de laboratorio se emplearon frutos desprendidos de las plantas el mismo día de la inoculación. En este último caso los frutos inoculados se colocaron en bandejas que se mantuvieron a 25ºC en cámara de cultivo con un fotoperiodo de 16 h de luz y 8 h de oscuridad. El análisis estadístico de los datos se realizó mediante Análisis de la Varianza (ANOVA). RESULTADOS En las inoculaciones en la raíz 13 de los 15 aislados estudiados provocaron necrosis en las raíces, pérdidas del sistema radicular y chancros en cuello. Hubo diferencias significativas entre aislados en la gravedad de los síntomas causados (F=9,64; P<0,05), que varió entre 0 y 85% (Fig. 1). En las inoculaciones en tallo todos los aislados produjeron necrosis y fue frecuente la formación de estrías. Hubo diferencias significativas entre aislados en la longitud de las necrosis causadas (F=10,86; P<0,05), que varió entre 23 y 171 mm a los 18 días de la inoculación (Fig. 2). La ordenación de los aislados en base a la longitud de las necrosis 452

3 producidas no se correspondió con la ordenación de éstos según los daños en las inoculaciones por riego en la raíz. En las inoculaciones en fruto no se produjeron daños en condiciones de campo, ni en frutos inmaduros ni en maduros. Sin embargo en condiciones de laboratorio, con los frutos desprendidos de las plantas, los 2 aislados inoculados produjeron daño en los frutos inmaduros: los 10 frutos inoculados con P23 tuvieron lesiones que ocupaban el 100% de la superficie; 4 de los 10 frutos inoculados con P13 tuvieron lesiones que se extendían en el 62% de la superficie en el fruto menos dañado, el 89% en otro de ellos y el 100% en los otros dos. En frutos maduros el aislado P13 no provocó ningún daño, mientras que el aislado P23 sólo produjo lesiones en uno de los 10 frutos inoculados, lesiones que cubrieron el 77% de la superficie. Los síntomas que se observaron en los frutos eran lesiones blandas, arrugadas y acuosas, y en ocasiones abundante desarrollo de micelio en el interior del fruto. DISCUSIÓN Aunque en condiciones de campo la raíz es la parte de la planta más expuesta a la infección por P. parasitica, nuestros resultados indican que también el tallo es susceptible, siendo posible su infección por el avance del hongo en la planta o por las salpicaduras de agua de riego. Las discrepancias entre los resultados obtenidos en inoculaciones de raíz y de tallo coinciden con las observadas por otros autores al emplear varias técnicas de inoculación (Clerjeau et al., 1976; Allagui y Lepoivre, 1996), lo que sugiere diferentes susceptibilidades según la parte de la planta infectada. Puesto que los daños que se observan en campo se localizan fundamentalmente en raíces y cuello, la inoculación por riego sería el método más adecuado para evaluar resistencia a P. parasitica en germoplasma de pimiento. Los resultados de las inoculaciones de fruto indican que los frutos son bastante resistentes a la infección por P. parasitica, aunque esta resistencia puede disminuir cuando se desprenden de la planta. En los frutos desprendidos la resistencia aumenta con la maduración, lo que puede ser debido a los cambios fisiológicos asociados al crecimiento y desarrollo del fruto. Agradecimientos El presente trabajo fue financiado con el proyecto 3PR05B019 del III Plan Regional de Investigación de la Junta de Extremadura. Referencias Allagui, M.B., Marquina, J.T. et Mlaiki, A Phytophthora nicotianae var. parasitica pathogène du piment en Tunisie. Agronomie 15: Allagui, M.B. and Lepoivre, P., Comparaison de différentes techniques d inoculation du piment par Phytophthora nicotianae var parasitica. Agronomie 16, Andrés Ares, J.L., Rivera Martínez, A. and Fernández Paz, J Phytophthora nicotianae pathogen to pepper in northwest Spain. J. Plant Pathol. 85: Bartual, R., Marsal, J.I., Carbonell, E.A., Tello, J.C. y Campos, T Genética de la resistencia a Phytophthora capsici Leon en pimiento. Bol. San. Veg. Plagas 17: Clerjeau, M., Pitrat, M., Nourrisseau, J.G., La résistance du piment (Capsicum annum) à Phytophthora capsici. IV. Étude de l agressivité de divers isolats au niveau 453

4 des feuilles, des tiges et du collet de plantes sensibles et résistantes. Ann. Phytopathol.8 : Erwin, D.C. and Ribeiro, O.K Phytophthora Diseases Worldwide. APS PRESS, St. Paul, Minnesota. Larregla del Palacio, S Etiología y epidemiología de la Tristeza del pimiento en Bizkaia. Su control. Tesis Doctoral, Universidad del País Vasco. Leioa. Pochard, E. and Chambonnet, D Méthodes de sélection du piment pour la résistance au Phytophthora capsici et au virus du concombre. Annuaire de la Faculté des Sciences Agronomique Université de Torino 7: Ristaino, J.B. and Johnston, S.A Ecologically based approaches to management of Phytophthora blight on bell pepper. Plant Dis. 83: Rodríguez Molina, M.C., Morales Rodríguez, M.C., Palo Núñez, E.J., Palo Osorio, C., Verdejo Alonso, M.E., Duarte Maya, M.S., Espárrago Rodilla G La Tristeza del pimiento para pimentón en los valles de los ríos Tiétar y Alagón (Cáceres). XIV Congreso de la Sociedad Española de Fitopatología. Lugo, sept. P Tello, J., Varés, F. y Lacasa, A Análisis de muestras. En Manual de Laboratorio. Diagnóstico de hongos, bacterias y nematodos fitopatógenos. Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación. Madrid. Págs Índice de enfermedad (%) P4 P5 P10 P11 P12 P13 P15 P18 P21 P23 P26 P28 P29 P32 P35 Aislado Fig. 1. Índices de enfermedad (media de 10 plantas) de plantas de pimiento cv. Jaranda a los 30 días de la inoculación por riego con 15 aislados de P. parasitica. 454

5 Necrosis (mm) P4 P5 P10 P11 P12 P13 P15 P18 P21 P23 P26 P28 P29 P32 P35 Aislado Fig. 2. Longitud de la necrosis del tallo (media de 10 plantas) de plantas de pimiento cv. Jaranda a los 18 días de la inoculación por decapitación con 15 aislados de P. parasitica. 455