Epidemiologia de Tomato leaf curl New Delhi virus (ToLCNDV)

Transcripción

1 Instituto de Investigación y Formación Agraria y Pesquera CONSEJERÍA DE AGRICULTURA, PESCA Y DESARROLLO RURAL Epidemiologia de Tomato leaf curl New Delhi virus (ToLCNDV) DIRK JANSSEN IFAPA La Mojonera, Almería VIROSIS EN HORTÍCOLAS, Almería, 22 de enero de 2015.

2 El virus del rizado de la hoja del tomate de Nueva Delhi Tomato leaf curl New Delhi virus (ToLCNDV) Qué es ToLCNDV? Huéspedes encontrados en el laboratorio Y en el campo Aislados de ToLCNDV Eficiencia de transmisión La transmisión entre diferentes cultivos

3 ...VERANO del 2013

4 Durante el verano del 2013 se detectó ToLCNDV en cultivos de zucchini en Almeria y Murcia, España. Síntomas de ToLCNDV en calabacín Juárez, Tovar, Fiallo-Olivé, Aranda, Gosálvez, Castillo, Moriones & Navas, Plant Disease, Plantas de calabacin con infección natural mostrando mosaico amarillo y deformación en hojas jovenes.

5 Sintomas de ToLCNDV en frutos de calabacín Rizado de la piel Deformación Rajado

6 Tomato leaf curl New Delhi virus Familia Geminiviridae Topocuvirus Curtovirus Mastrevirus Begomovirus Solanaceae: tomate, pimiento, y patata Cucurbitaceae: pepino, melón, sandía, calabaza, calabacín, Luffa, Lagenaria

7 Tomato leaf curl New Delhi virus Organización genómica DNA-A: -Rep (replication-associated protein) - Ren ( replication enhancer protein) - TrAP (transactivator protein) - CP (coat protein) DNA-B: -NSP (nuclear shuttle protein) - MP (movement protein) CR (common region) Contains motifs required for the control of gene expression and initiation of replication

8 Ciclos de cultivo en Almería plantación (verde); veget. (amarillo), produc. (rojo) Tomate (aire libre) Tomate (Invernad ero) Pimiento Ene Feb Mar Apr May Jun Jul Ago Sep Oct Nov Dic Berenjena Pepino Sandía Melón Calabacín

9 Susceptibilidad de distintas especies hortícolas en condiciones controladas Pepino cv. Cumlaude RZ (Rijk Zwaan) Berenjena cv. Cristal (Fito) Tomate cv.tintoretto F1 (Ramiro Arnedo) Melón cv. Vedrantais Calabacín cv.victoria (Clause) Sandía cv. Sweet marvel (Syngenta) Pimiento Capsicum annuum cv. mallorquín, Capsicum chinense PI Judía cv. Donna (Nunhems)

10 INOCULACIONES CON B. tabaci en cajas insectario Calabacín Melón Berenjena Tomate + 9 días dpi Pimiento

11 Síntomas en CUCURBITÁCEAS Calabacín Pepino Melón Sandía

12 Síntomas en CUCURBITÁCEAS Calabacín Calabacín Melón Sandía

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14 Pimiento Síntomas en SOLANÁCEAS Berenjena

15 tomate Síntomas en SOLANÁCEAS

16 Detección de ToLCNDV -En planta PCR Sana Ca To C+ C- -En B. tabaci Sana Ca To C+ C-

17 DETECCIÓN de ÁCIDO NUCLEICOS DEL VIRUS HYBRIDACIÓN MOLCULAR CON SONDAS GENÉTICAS TYLCV ToLCNDV Sondas DIG homologas a parte del gen cp de DNA-A y nsp de DNA-B para ToLCNDV Sondas DIG homologas a parte del gen cp de TYLCV.

18 ToLCNDV EN CALABACÍN DNA -A DNA B C+ C- C+ C- ToLCNDV EN TOMATE DNA -A DNA -B C+ C- C+ C- C-

19 DETECCIÓN de ÁCIDO NUCLEICOS DEL VIRUS PCR a TIEMPO REAL (qpcr) Cebadores específicos para el gen cp (DNA-A) y mp (DNA-B). Sondas Taq-Man específicos para DNA-A y DNA-B.

20 ToLCNDV en distintas especies hortícolas en condiciones naturales pepino melón

21 ToLCNDV en distintas especies hortícolas en condiciones naturales pepino melón

22 ToLCNDV en distintas especies hortícolas en condiciones naturales pepino melón

23 TYLCV...OTOÑO 2013

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26 Síntomas en especies espontáneas Chenopodium album - Cenizo -

27 Síntomas en especies espontáneas Sonchus oleraceus - Cerraja -

28 Aislados de ToLCNDV

29 Aislados de ToLCNDV

30 La eficiencia transmisión de ToLCNDV por mosca blanca

31 Eficiencia de Transmisión en tomate INOCULACIÓN 48 H

32 INOCULACIÓN 48 H Eficiencia de Transmisión en calabacín

33 Eficiencia de Transmisión +9 días dpi

34 Eficiencia de Transmisión % de plantas infectadas Nº de moscas blancas calabacin tomate Resultados anteriores con ToLCNDV: 90% Sohrab et al., 2013, DOI: /AJB Resultados con TYLCV y B. tabaci : %

35 Ensayos de transmisión con B. tabaci entre diferentes especies C- A B C D C+ 750bp 600bp A) TRANSMISIÓN de CALABACÍN a CALABACÍN B) TRANSMISIÓN de CALABACÍN a TOMATO C) TRANSMISIÓN de TOMATE a CALABACÍN D) TRANSMISIÓN de TOMATE a TOMATE

36 A) TRANSMISIÓN DE CALABACÍN A CALABACÍN B) TRANSMISIÓN DE CALABACÍN A TOMATE

37 C) TRANSMISIÓN DE TOMATE A CALABACÍN

38 D) TRANSMISIÓN DE TOMATE A TOMATE

39 RESULTADOS ORIGEN TRANSMISIONES con B. tabaci DESTINO PRIMEROS SINTOMAS ANÁLISIS Calabacín Calabacín 9 dpi PCR+/qPCR + Calabacín Tomate dpi PCR+/qPCR + Tomate Calabacín 8 dpi PCR+/qPCR + Tomate Tomate 13 dpi PCR+/qPCR + Ruiz, Simon, Velasco, García & Janssen. Plant Disease,

40 Conclusiones - Diferentes aislados de ToLCNDV son molecularmente similares entre si y se diferencian de aislados de otros países y cultivos. -En condiciones controladas, la mosca blanca B. tabaci es capaz de infectar miembros de especies de los principales cultivos en invernadero, salvo la judía. - La eficiencia de transmisión de ToLCNDV por B. tabaci es mas elevada en calabacín que en tomate. - Mientras que infecciones naturales en calabacín suelen producir sintomas evidentes, en otros cultivos, como tomate, pueden ser mas discretas. Sin embargo, este último no debe ser subestimado como fuente de nuevas infecciones.

41 Gracias por su atención Leticia Ruíz Almudena Simón Antonia Belmonte Carmen García Leonardo Velasco Centro La Mojonera Camino de San Nicolás La Mojonera dirk.janssen@juntadeandalcia.es - Proyecto IFAPA: AVA "virus en horticultura - INIA E-RTA C04: Epidemiologia y Control de Tomato leaf curl New Delhi virus. Instituto de Investigación y Formación Agraria y Pesquera CONSEJERÍA DE AGRICULTURA, PESCA Y DESARROLLO RURAL