Grupo de Investigación en Fauna Silvestre

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1 REDVET - Revista electrónica de Veterinaria - ISSN Retrospective study of canine Ehrlichiasis in the city of Cali - Valle del Cauca, during Estudo clínico retrospectivo de Ehrlichiasis em caninos na cidade de Cali - Valle del Cauca durante o ano 2013 Gloria Elena Estrada-Cely, PhD *1,2 ; Alba C. Espinosa-Núñez, cmg 1,2; y Andrés F. Morales R, MVZ 1. 1 Universidad de la Amazonía. 2 Grupo de Investigación en Fauna Silvestre Contacto: a-criss@hotmail.com Resumen El presente artículo presenta un estudio descriptivo retrospectivo de casos de ehrlichiosis en perros de la ciudad de Cali Valle del Cauca, diagnosticados a través de pruebas de análisis de El ELISA y el test comercial Anigen Rapid E. canis Ab Test Kit. El análisis de los resultados fue realizado en categorías agrupadas de raza, sexo y edad, en una población total de 125 especímenes en 11 diferentes grupos raciales, durante el periodo comprendido del 1 enero al 31 de agosto de El análisis estadístico incluyó estadística descriptiva y el uso del software InfoStat versión 2008, para análisis multivariado, con diferenciación de las categorías sexo (macho o hembra), edad (neonato, adulto o geriátrico) y raza. De total las muesas sanguíneas analizadas para la detección y diagnóstico de E. canis, el 40% resultó positiva al patógeno y 60% negativa, encontrándose el mayor porcentaje de resultados positivos en muestras provenientes de especímenes de la raza Labrado; sin embrago, tanto la categoría raza como sexo y edad de los animales, no constituyó un factor predisponente para la presencias del patógeno. Palabras claves: caninos, ehrlichiosis, retrospectivo y prevalencia. 1

2 Abstract This article presents a descriptive and retrospective study on cases of ehrlichiosis in dogs living in the city of Cali Valle del Cauca, diagnosed through ELISA and Anigen Rapid E. canis Ab Test Kit. Statistical analysis included descriptive statistics together with the use of InfoStat software, 2008 version for multivariable analysis, differentiating categories of sex (male or female), age (newborn, adult or geriatric) and breed. From the overall blood sampling that was analyzed in order to detect and diagnose E. canis, 40% was positive and 60% negative, finding the highest percentage of positive results in samples from Labrador breed; however, categories such as breed, sex and age did not count as a predisposing factor for the presence of the pathogen. Keywords: canines, ehrlichiosis, retrospective and prevalence. Resumo Este artigo apresenta um estudo retrospectivo dos casos de erliquiose em cães Cali -. Valle del Cauca, diagnosticada através de exames de análise e teste de ELISA comercial Anigen E. canis análise Kit Ab Teste Rápido os resultados foi realizada em agrupados por raça, sexo e idade, em uma população total de 125 amostras em 11 grupos raciais diferentes durante o período compreendido entre 1 de Janeiro a 31 de agosto de A análise estatística incluiu estatística descritiva e uso software Infostat versão 2008 para a análise multivariada, a diferenciação das categorias sexo (masculino ou feminino), idade (criança, adulto ou geriátrica) e raça. Total de amostras de sangue testadas para a detecção e diagnóstico de E. canis, 40% deram positivo e 60% negativo patógeno, sendo o maior percentual de resultados positivos em amostras de espécimes da raça Labrador; sem embreagem, ambos categoria de raça, do sexo e da idade dos animais não foi um fator predisponente para a presença do patógeno. Palavras-chave: erliquiose canina, retrospectiva e prevalência 2

3 Introducción La ehrlichiosis es una enfermedad infecciosa, no contagiosa, producida por microorganismos del género Ehrlichia que infecta células hemáticas de diversos mamíferos incluyendo perros, gatos, y humanos 2. Su prestación en caninos es conocida también como ricketsiosis canina, fiebre hemorrágica canina, tifus de la garrapata canina, desorden hemorrágico de Nairobi y pancitopenia tropical canina, que afecta no sólo a perros, sino a los demás miembros de la familia como zorros, el coyotes y chacale9 8. Su distribución está relacionada con la del vector la garrapata del perro o garrapata café del perro (Rhipicephalus sanguineus), originaria de África y adaptada a condiciones cálidas y secas, por lo que su disminución se presenta prácticamente a nivel mundial. El agente etiológico de la patología corresponde a una bacterias gramnegativas de la familia Anaplasmataceae, género Ehrlichia. Su nombre fue dado en homenaje al microbiólogo Paul Ehrlich. Son bacterias intracelulares que infectan monocitos y macrófagos, poseen una pared estructuralmente semejante a la de las bacterias gram-negativas, de ahí su clasificación, pero no presentan lipopolisacárido (LPS) ni capa de peptidoglicanos. Contrario a lo que ocurre con el género Rickettsia, estas bacterias permanecen en la vacuola del leucocito, hecho que propicia a la formación de mórulas visibles al microscopio 6,10,5. La garrapata se convierte en vector patógeno, cuando ingiere sangre de un animal infectado, adquiriendo el parásito en forma de larva o ninfa y transmitiéndola en forma de ninfa o adulto. Cuando una garrapata portadora entra en contacto con un nuevo animal huésped le transmite el parásito a través de la saliva, en el momento de la alimentación alimentarse. También se produce la infección a través de transfusiones sanguíneas en las que el animal donador sea rickketsiémico. Una vez producida la infestación el período de incubación es de 2 a 3 semanas 7. La ehrlichiosis presenta tres etapas, y cada una varía en su severidad. La fase aguda, que se presenta varias semanas después de la infección, puede durar hasta un mes, y ocasiona fiebre y trastornos de la sangre; La segunda etapa, llamada fase subclínica, no tiene signos externos y pueden durar hasta cinco años. Si el sistema inmunológico del perro infectado es incapaz de eliminar el microorganismo la tercera y más grave fase de la infección, la fase crónica, se iniciará, presentando posibles trastornos neurológicos, oftálmicos, enfermedad renal, anemia y cojeras. Esta fase podría ser fatal. (Peraza, 2012). Se ha considerado que la variación de la temperatura ambiental puede tener efectos significativos sobre diferentes hábitats de garrapatas, por lo que las condiciones ambientales tropicales del municipio de Cali Valle del Cauca, favorecen la presencia de la garrapata Rhipicephalus sanguineus, ante lo que resulta necesaria la realización de estudios que permitan identificar su tasa de prevalencia 3

4 Metodología Localización y especímenes de investigación El estudio fue desarrollarlo en el laboratorio de referencia ZOOLAB en la ciudad de Cali, Colombia, a partir del análisis de 125 muestras sanguíneas de caninos, durante un periodo comprendido del 1 de enero al 31 de agosto del El criterio de selección de las especies a incluir en el estudio, correspondió a contar con por lo menos cinco de la misma. Los especímenes fueron muestreados en el marco de los procedimientos clínicos requeridos por cada médico tratante, y no teniendo como finalidad última el presente estudio. Como garantía de confidencialidad, no serán mencionados los datos específicos de los aportantes de cada muestra. Análisis de laboratorio El total de muestras fueron procesadas mediante dos métodos de análisis de tipo comercial: El ELISA con una especificidad de 100% y una sensibilidad de 95% 1 ; y el test comercial Anigen Rapid E. canis Ab Test Kit bajo las normas del fabricante. Análisis de los datos Los datos fueron analizados por medio de estadística descriptiva y el uso del software InfoStat versión 2008, para análisis multivariado, con diferenciación de las categorías sexo (macho o hembra), edad (neonato, adulto o geriátrico) y raza. Para la categoría de edad se tuvo en cuenta la clasificación presentada por la American Kennel Club 3 que dicta: RAZA CACHORRO O NEONATO ADULTO GERIÁTRICO O SENIL Pequeña Hasta los 10 meses Hasta los 120 meses A partir de los 120 meses Mediana Hasta los 12 meses Hasta los 84 meses A partir de los 84 meses Grande Hasta los 15 meses Hasta los 60 meses A partir de los 60 meses Gigante Hasta los 18 meses Hasta los 60 meses A partir de los 60 meses 4

5 Resultados y Discusión Se identificaron un total de 11 razas, predominando la Mestiza con el 20% de la población, seguida de la raza Labrador con el 14.4 y Poodle con el 10.4%. (Tabla 1). Tabla 1. Número de especímenes muestreados por cada raza RAZA CANT % MESTIZOS LABRADOR 18 14,4 POODLE 13 10,4 SCHNAUZER 11 8,8 PUG 10 8 BULL DOG 9 7,2 GOLDEN RETRIVER 9 7,2 YORK SHIRE TERRIER 8 6,4 BEAGLE 8 6,4 SHIT ZU 7 5,6 SIBERIANO 7 5,6 TOTAL DE MUESTRA De total de 125 muestras sanguíneas analizadas para la detección y diagnóstico de E. canis, 50 resultaron positivas lo que corresponde al 40% de la población total y 75 negativas, que corresponde al 60%. De las 11 razas estudiadas, se identificó la raza Labrador como la de mayor cantidad de porcentaje de casos positivos con un 61.11% de las muestras de especímenes de la raza, seguido del Bull Dog y Pug con un 50 y 55.56% respectivamente; La raza Poodle, presentó el mayor porcentaje de casos negativos, con 76.92% de las muestras de especímenes de la raza, seguido del Beagle con el 75% y Shit Zu y Siberiano, cada una con el 71.43%. (Tabla 2 ) Tabla 2. Porcentaje de positivos y negativos al interior de cada raza RAZA TOTAL POSITIVOS % DE LA RAZA NEGATIVOS % DE LA RAZA TOTAL MESTIZOS , , LABRADOR , , POODLE , , SCHNAUZER , , PUG , , BULL DOG , , GOLDEN RETRIVER , , YORK SHIRE , , BEAGLE , , SHIT ZU , , SIBERIANO , , TOTAL

6 Del total de los resultados, se identificaron en su orden a las razas Labrador, Mestizo, Pug y Bull dog, como en las de mayor presencia de resultados positivos; y a las razas Mestizo, Poodle, Schnauzer y Labrador, como las mayor presencia de resultados negativos. Tabla 3. Porcentaje de positivos y negativos del total de la muestra n:125 RAZA TOTAL POSITIVOS % DEL TOTAL NEGATIVOS % DEL TOTAL MESTIZOS ,00 LABRADOR ,8 7 5,60 POODLE , ,00 SCHNAUZER ,2 7 5,60 PUG ,00 BULL DOG ,20 GOLDEN RETRIVER 9 3 2,4 6 4,80 YORK SHIRE 8 3 2,4 5 4,00 BEAGLE 8 2 1,6 6 4,80 SHIT ZU 7 2 1,6 5 4,00 SIBERIANO 7 2 1,6 5 4,00 TOTAL ,00 Al desarrollar el análisis del animal como unidad muestreal y conglomerando jerárquicamente la aparición de casos positivos y negativos en función de la raza, se identifican agrupamientos entre las razas Mestizo, Pug y Labrador; Poodle y Golden retriver; York shire, Shit zu, Siberiano y Bull dog; y Schnauzer y Beagle en este orden de tendencia para la presentación del patógeno (Gráfica 1); sin embargo, la tendencia de hallazgos negativos significativos en las mismas razas y orden, suponen una independencia de la patología de la categoría de raza. MES PUG LAB POO GOR YST SHI SIB BUD SCH BEA Gráfica 1. Análisis de conglomerados por razas. La mayor prevalencia del patógeno en la raza labrador, concuerda con resultados de estudios realizados por Sánchez, Silva y Loaiza en La raza pertenece al grupo de las denominadas razas grandes, para quienes 6

7 estudios como los realizados por McQuiston y otros en , identificó como de mayor susceptibilidad a al patología, con particular enfoque en la raza Pastor Alemán, que no fue considerada para el estudio, en razón al bajo número de muestras específicas. Al análisis de resultados positivos o negativos, frente a categorías de sexo, se identificaron los Machos adultos, con los de mayor presencia de la enfermedad, con un total del 34 % de las muestras positivas, seguido de las Hembras neonatas y los Machos geriátricos, con un 18 y 20% respectivamente; para la incidencia de negativos, se identificó a las Hembras adultas como las de mayor porcentaje, con un total 29.3% de los hallazgos negativos, seguidas por los Machos neonatos y adultos con un 21.3% cada uno. Dentro de la categoría de edad, se identificó las Hembras neonatas como las de mayor porcentaje de presencia del patógeno, seguidas de los machos adultos y geriátricos con un y % cada uno; para hallazgos negativos se identificó a los machos neonatos como los de mayo porcentaje de hallazgos negativos, con un 84.21% de los resultados, seguidos de las Hembras adultas con un 73.33% y las Hembras geriátricas con un 27.14% (Tabla 4). Tabla 4. Distribución de resultados en relación al tipo de respuesta y categoría de edad EDAD/SEXO % DENTRO DEL GRUPO DE % DENTRO DEL GRUPO DE TOTA RESPUESTA (% DE LOS ESTADÍO (% DE LOS NEONATO, L POSTIVOS O NEGATIVOS) ADULTOS O GERIÁTICOS) Positivos Neonato 3 6,0 15,79 Adulto 17 34,0 51,52 Geriátrico 9 18,0 47,37 Neonato 10 20,0 58,82 Adulto 8 16,0 26,67 Geriátrico 3 6,0 42,86 Negativos Neonato 16 21,3 84,21 Adulto 16 21,3 48,48 Geriátrico 10 13,3 52,63 Neonato 7 9,3 41,18 Adulto 22 29,3 73,33 Geriátrico 4 5,3 57,14 TOTAL 125 Tanto para el análisis de distribución de resultados en respuestas positivas y negativas, como según el estadío de desarrollo o edad de los animales, se identificaron a los Machos adultos y geriátricos y las hembras neonatas, como los tres grupos de mayor incidencia del patógeno; sin embargo, en consideración a las limitantes de tamaño de la muestra, no es posible inferir con certeza estadística si la edad o el género, constituyen o no un factor de riesgo para la presencia del patógeno. 7

8 Para el estudio se analizaron un total 54 muestras de especímenes hembras que corresponden al 43,2% dela población total, y 71 de machos, que corresponden al 56,8%. El mayor porcentaje de hallazgos positivos se identificó en los machos, con el 23,2% de las muestras analizadas; sin embargo, al interior de la categoría sexo, las muestras positivas correspondientes de especímenes machos, correspondieron al 40,8% de las muestras de machos analizadas, mientras que las negativas, al 59,2% (Tabal 5), ante lo que se puede concluir que a partir de los datos colectados, no existen predisposición para la presencia de Ehrlichia canis, por sexo o edad de los animales, en correspondencia con los reportes de Sainz y otros 11. Tabla 5. Distribución de hallazgos por sexo y total de muestras SEXO TOTAL % POSITIVOS POR SEXO NEGATIVOS POR SEXO % DEL TOTAL DE MUESTRAS TOTAL % TOTAL % POSITIVOS NEGATIVOS HEMBRAS 54 43, , ,1 16,8 26,4 MACHOS 71 56, , ,2 23,2 33, % 60% El limitado número de variables consideradas en el estudio, así como el tamaño de las muestras para cada raza, limitó el desarrollo de un mayor número de análisis multivariado que permitan vincular la patología a uno o varios factores específicos de riesgo o protección. Conclusiones De total de 125 muestras sanguíneas analizadas para la detección y diagnóstico de E. canis, el 40% de la población total resultó positiva al patógeno y 60% negativa. De las 11 razas estudiadas, se identificó la raza Labrador como la de mayor porcentaje de casos positivos con un 61.11% de las muestras de especímenes de la raza, seguido del Bulldog y Pug con un 50 y 55.56% respectivamente. Las razas de talla grande presentan una mayor probabilidad a ser infectadas por Ehrlichia canis. El sexo o la edad de los animales, no constituye un factor predisponente para la presencias de Ehrlichia canis. 8

9 Bibliografía 1. ADRIANZÉN, J y otros Seroprevalencia de la Dirofilariosis y Ehrlichiosis canina en tres distritos de Lima. Inv Vet Perú, 14(1), Pp AGUILAR, D. y otros Prevalence of Ehrlichia canis (Rickettsiales: Anaplamataceae) in dogs and Rhipicephalus sanguineus (Acari: Ixodidae) ticks from Brazil. Journal of Medical Entomology, 44, Pp American Kennel Club AKC. [En línea]. Disponible desde inernet en: 4. BIOGAL GALED LABS. Product Information. ImmunoComb canine ehrlichia antibody test kit. Catalog Nº 50CEH201/50CEH210. [En línea]. Biogal Galed Labs, Israel. Disponible desde internet en: co.il 5. GARRITY, G Bergey s Manual of Systematic Bacteriology. [En línea] Springer. Disponible desde internet en: 6. HOSKINS, J. D Consensus Statement on Ehrlichial Disease of Small Animals from the Infectious Disease Study Group of the ACVIM. J Vet Intern Med 2002.Pp KAHN, Cynthia, Editor Manual Merck de Veterinaria. Sexta edición. Barcelona: Ocano. p MCQUISTON, J.H. y otros Ehrlichiosis and related infections. Journal of American Veterinary Medical Association. v. 223, n. 12, Pp PERAZA, Natalia Ehrlichiosis Canina. [En línea]. Geosalud. Disponible desde internet en: RISTIC, M., y HOLLAND, C Ehrlichiosis canina. En: Manual de las enfermedades infecciosas en pequeños animales. (Primera ed.). Buenos Aires, Argentina: Editorial Médica Panamericana S.A. 11. SAINZ, A.y otros Las ehrlichiosis en el perro: presente y futuro.. Profesión Veterinaria, 12(47), Pp SÁNCHEZ, N., SILVA, R. F., y LOAIZA, A. M Reporte de presentación de Ehrlichia canis en muestras sanguíneas de caninos en la ciudad de Cali, Colombia. Vet.zootec. Universidad de Caldas. Pp REDVET: 2016, Vol. 17 Nº 3 Este artículo Ref _REDVET está disponible en concretamente en REDVET Revista Electrónica de Veterinaria está editada por Veterinaria Organización. Se autoriza la difusión y reenvío siempre que enlace con Veterinaria.org y con REDVET - 9