El jitomate es una hortaliza altamente susceptible a ser atacado por microorganismos después de la cosecha, uno de los principales protagonistas de

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2 El jitomate es una hortaliza altamente susceptible a ser atacado por microorganismos después de la cosecha, uno de los principales protagonistas de esta problemática es Rhizopus spp. responsable de la pudrición algodonosa, y Botrytis spp. del moho gris.

3 El control de plagas y enfermedades dependen principalmente de la utilización de agroquímicos sintéticos, provocando un aumento significativo en costos de producción y problemas graves de contaminación ambiental. (Rovalo, 1983 citado en Moreno, 2012). En la actualidad las alternativas de control después de la cosecha, contemplan el uso de extractos de origen natural.

4 El jitomate es una hortaliza de gran importancia a nivel nacional y mundial. A NIVEL MUNDIAL MÉXICO OCUPA: Segundo lugar en exportación de jitomate. Octavo lugar en producción de jitomate. San Luis Potosí se encuentra entre los principales estados productores de tomate en México. Rios,H.I.y col.,(2003)

5 Problemática postcosecha Gran demanda de agroquímicos. Antimicrobianos botánicos. 5

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7 Estudios realizados por Cerón,C.T.y cols.,(2014) demuestran propiedad antimicrobiana en el crecimiento de Escherichia coli, Lactobacillus casei y a Penicillium spp., al observar una inhibición causada por extractos obtenidos de chile poblano. Resultados no solo atribuidos a capsaicina y compuestos fenólicos sino a compuestos como: ÁCIDOS GRASOS, ESTEREROLES, POLIPÉPTIDOS, ALCALOIDES, LECTINAS, FLAVONOIDES ENTRE OTROS.

8 COMPONENTES FENÓLICOS. TERPENOS Y ACEITES ALCALOIDES CAPSAICINOIDES. 9

9 PROBLEMÁTICA. Desecho de semillas de chile ancho. Tecnologías hacia la transformación sustentable de residuos de la agroindustria. Propiedades antimicrobian as del genero Capsicum. Disminución del uso de agroquímicos. Obtención de alimentos inocuos.

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14 Hipótesis nula (H 0 ) : El extracto de semilla de chile ancho no tiene efectos antifúngicos sobre hongos fitopatógenos aislados de jitomate. Hipótesis alternativa (Ha):

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16 Donde se evaluará concentraciones del extracto y la longitud de inhibición del patógeno.

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18 Recolección de semillas. Preparación de la muestra. Análisis fisicoquímico previo de la semilla. Obtención del extracto por maceración. Evaluación de la actividad antifúngica in vitro sobre fitopatógenos. Análisis fisicoquímico del extracto. Concentración por rotavapor. Análisis de resultados y conclusiones.

19 Las semillas se recolectaron de la microempresa alimentaria CASA RENO ubicada en el municipio de Venado S.L.P. Se colocaron en costales y se registro fecha de recolección.

20 La muestra se coloco en un lugar seco, libre de humedad y sin exposición a los rayos solares.

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23 La extracción se realizó por maceración en etanol al 96% durante siete días al abrigo de la luz. La extracción se realizo por triplicado.

24 El macerado se concentró por rotavapor a una temperatura de 60 C.

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26 ANÁLISIS MÉTODO LUGAR. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE CAPSAICINOIDES. Espectrofotometría. Método descrito por Ramirez,H. y cols., (2009). Laboratorio de biotecnología Molecular del IPICyT. DETERMINACIÓN DE FENOLES TOTALES. Espectrofotometría. Método Folin Ciocalteu Laboratorio de Bioprocesos de la Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad Autónoma de San Luis Potosí.

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28 La cepa de Rhizopus spp. se obtuvo del laboratorio de Microbiología de la Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad Autónoma de San Luis Potosí. La cepa de Botrytis spp. se obtuvo del laboratorio de Enología de la Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad Autónoma de San Luis Potosí.

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30 Se evaluó la actividad antifúngica del extracto sobre Botrytis spp. y Rhizopus spp. por el método halos de inhibición utilizando tres concentraciones.

31 30% extracto. 50% extracto. 20% extracto.

32 Ya teniendo las concentraciones se empaparon círculos de papel filtro de tamaño uniforme y se colocaron por triplicado en las cajas Petri con agar papa dextrosa estéril. Incubar a 25±2ºC por siete días, para luego observar si hay o no expansión de crecimiento del patógeno.

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34 ANÁLISIS PORCENTAJE %. Cenizas ± Humedad ± Extracto etéreo. 10 ± 0.20 Cuadro 1. Resultados obtenidos del análisis fisicoquímico de la semilla

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36 Cuadro 2. Resultados del análisis fisicoquímico del extracto. ANÁLISIS RESULTADO. RENDIMIENTO ± % CAPSAICINOIDES ± mg capsaicinoides 50 g -1 POLIFENOLES TOTALES ± mg acido gálico / L

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38 Rojas, G. F. y cols., (2009), reporto 9.49% de cenizas totales en páprika (Capsicum annuum L.) dentro de los cuales las especies del género Capsicum contienen Potasio, Yodo, Azufre, Hierro, Sodio etc. 8.36% de cenizas total se obtuvo de la semilla de chile ancho, indicando gran contenido de minerales en esta parte de la hortaliza.

39 MATERIAL VEGETAL. mg capsaicinoides 50 g -1 Chile poblano Semillas de chile ancho EL contenido de capsaicina presente en el extracto fue bajo comparado con Cerón C.T. y cols., (2014), utilizando el extracto del chile poblano completo. Esto se debe que la mayor cantidad de capsaicinoides se concentra en el pericarpio de estas especies.

40 MATERIAL VEGETAL. mg acido gálico / L Chile poblano 55.8±10.2 Semillas de chile ancho ± EL contenido de polifenoles totales presente en el extracto fue mucho mayor que el obtenido por Cerón, C.T. y cols., (2014), utilizando el extracto del chile poblano completo. Observando un alto contenido de polifenoles en las semillas de esta hortaliza.

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42 Figura 1. (1) Blanco. (2) crecimiento en glicerol puro. (3) crecimiento en extracto puro. Figura 2. Ensayo con extracto al 50%.

43 Figura 3. Ensayo con extracto al 30% Figura 4. Ensayo con extracto al 20%

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45 Figura 5. (1) crecimiento en extracto puro(2) crecimiento en glicerol puro. (3) blanco Figura 2. Ensayo con extracto al 50%.

46 Figura 3. Ensayo con extracto al 30% Figura 4. Ensayo con extracto al 20%

47 Con base en los resultados obtenidos del crecimiento a diferentes concentraciones de extracto, no se observó inhibición alguna, esto puedo atribuirse a la baja concentración de capsaicinoides presentes en el extracto, o por la capacidad de resistencia a este tipo de sustancias.

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49 Dentro de la investigación se observo actividad antifúngica sobre Penicillium spp. Corroborando el resultado obtenido por Cerón,C.T. y cols.,(2014). Esto puede atribuirse a la adhesión de sustancias del extracto con glicoproteínas presentes en la pared celular del hongo. O por la inactivación de enzimas, provocando estrés e interrumpiendo los procesos vitales del fitopatogeno. Por lo que no se descarta propiedad antimicrobiana del extracto de la semilla de chile ancho.

50 El análisis del extracto muestra un contenido ± mg capsaicinoides 50 g -1, ± mg acido gálico / L, sustancias que se han reportado con capacidad antimicrobiana. Con base en los resultados obtenidos del crecimiento a diferentes concentraciones de extracto, no se observó inhibición alguna, por lo que se acepta la hipótesis nula.

51 Estos resultados puede atribuirse a diferentes factores como: La baja concentración de capsaicinoides presentes en el extracto, ya que el mayor contenido de estas sustancias se encuentran en el pericarpio de estas especies. Cambio de la composición estructural de los compuestos fenólicos que en su mayoría se encuentran glicosilados y el enlace glicosídico es inestable a cambios de ph y temperatura. Por lo que la temperatura usada para concentrar el extracto pudo afectar la composición estructural de estas sustancias.

52 CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES TALLER I ACTIVIDADES. MESES. ENERO FEBRERO MARZO ABRIL MAYO JUNIO. Búsqueda de asesor. Elección de titulo. Consulta bibliográfica. Problema de investigación y marco teórico. Elaboración de protocolo.

53 resultados. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES TALLER II. Actividades Meses. Julio. Agosto Septiembre Octubre Noviembre. Diciembre. Obtención de la materia prima. Análisis de humedad y ceniza de la semilla Obtención del extracto de la semilla Análisis fisicoquímicos del extracto. Análisis de

54 CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES TALLER III. ACTIVIDADES. MESES. ENERO FEBRERO MARZO ABRIL MAYO JUNIO. Obtención de las cepas fitopatógenas. Evaluación de la actividad antifúngica. Análisis de resultados Aceptar o rechazar hipótesis propuestas y conclusiones del proyecto. Artículo de divulgación.

55 Academia mexicana de ciencias, revista ciencia, recuperado de 81%3Acontrol-biologico-de-organismos-fitopatogenos-un-retomultidisciplinario&catid=36. Arjona, M., Díaz., R., Iriarte, A., (2006), parámetros físico-químicos en oleorresina de pimentón en diferentes sistemas de secado, Revista del CIZAS, Volumen 7, Número 1 y 2, Bekker, P., N., (2001), physicochemical properties and composition of lipids from capsicum annuum seeds, chemistry of natural compounds, vol. 37, no. 2, Calvo, A., J., A., Rivera, C., G., Orozco, C., S., Orozco, R., R., (2012), aislamiento y evaluación in vitro de antagonistas de botrytis cinerea en mora, agronomía mesoamericana 23(2): Castresan, J.,E., Rosenbaum, J., Gonzales, L., A., (2013), estudio de la efectividad de tres aceites esenciales para el controlde áfidos en pimiento, capsicum annuum l., Idesia, (chile), volumen 31, nº 3,

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