CALIDAD MICROBIOLÓGICA DE LAS AGUAS SUPERFICIALES EN LAS BAHÍAS DE MAYAGÜEZ Y AÑASCO, PUERTO RICO

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1 CALIDAD MICROBIOLÓGICA DE LAS AGUAS SUPERFICIALES EN LAS BAHÍAS DE MAYAGÜEZ Y AÑASCO, PUERTO RICO Brenda Guzmán-Colón*, José Norat-Ramírez Departamento de Salud Ambiental, Recinto de Ciencias Médicas, Universidad de Puerto Rico, P.O. Box , San Juan, Puerto Rico Tel. (787) ext En este estudio se midieron las densidades de distintos indicadores microbiológicos (coliformes totales y fecales, enterococos, colifagos, Giardia y Cryptosporidium) de contaminación fecal en las bahías de Mayagüez y Añasco, localizadas en la costa oeste de Puerto Rico, con el propósito de estudiar la calidad microbiológica de las aguas superficiales en las áreas monitoreadas en estas bahías. Las densidades microbiológicas de los organismos estudiados resultaron mayores en las estaciones cercanas a las desembocaduras de los ríos Guanajibo (E1), Yagüez (E2) y Añasco (E3) y en la estación localizada en el área de descarga del efluente de la Planta Regional de Tratamiento de Aguas Usadas de Mayagüez (E4) en comparación con las densidades de microorganismos encontradas en una muestra compuesta de ambas bahías. Los promedios más altos de coliformes totales y enterococos los encontramos en la estación E1 (12,508 col/100ml y 3,333 col/100ml, respectivamente), mientras que en la estación E4 encontramos los promedios más altos para los parámetros de coliformes fecales (4,248 col/100ml) y colifagos (190 fagos/100ml). El parásito Giardia se detectó solamente en la estación E4, mientras que Cryptosporidium no se detectó en ninguna de las estaciones estudiadas. En todas las estaciones monitoreadas ocurren violaciones consecuentes a los estándares de calidad de agua para los parámetros de coliformes totales y coliformes fecales establecidos por la Junta de Calidad Ambiental. Es necesario la implementación de medidas de control de calidad de aguas de escorrentías, así como mayor control de descargas sanitarias ilegales a estos cuerpos de agua. Palabras Clave: Indicadores microbiológicos, Contaminación fecal de aguas marinas, Giardia, Cryptosporidium Introducción La contaminación de nuestros cuerpos de agua representa uno de los principales problemas que confrontamos hoy en día, afectando no sólo la calidad y bienestar de nuestros recursos de agua sino también nuestro bienestar y salud. La contaminación tanto de nuestros ríos, lagos y quebradas así como de nuestras aguas costeras se ha incrementado con el aumento en el desarrollo de áreas urbanas, la deforestación, la proliferación de industrias contaminantes, el crecimiento poblacional y la falta de control del uso de los terrenos en la Isla. Muchas de las fuentes de contaminación descargan sus desperdicios directamente al cauce de los ríos, aguas costeras y otros cuerpos de agua a través de tuberías o canales, lo que se conoce como fuentes directas de contaminación. Pero no son sólo estas descargas las que contaminan las aguas ya que además existen fuentes dispersas de contaminación, las cuales también tienen efectos adversos en el ambiente y son más difíciles de controlar y reglamentar. La presencia de microorganismos patógenos en el agua se relaciona directamente con fuentes de contaminación dispersas y precisas. Algunos de los microorganismos patógenos encontrados en ambientes marinos incluyen víruses, bacterias, protozoarios y parásitos. Debido a la dificultad que representa la identificación de los diferentes patógenos presentes en las aguas dado el alto costo de los análisis y el personal especializado que requieren, así como el tiempo necesario para llevar a cabo los mismos, se utilizan organismos indicadores de contaminación fecal para determinar la presencia y densidad de patógenos en las aguas. En este estudio se midieron las densidades de seis indicadores microbiológicos de contaminación fecal en las bahías de Mayagüez y Añasco durante el período comprendido entre agosto de 1994 a mayo de Se utilizaron tres indicadores clásicos de contaminación fecal, éstos fueron: coliformes totales, coliformes fecales y enterococos. Además se midieron las densidades de colifagos, organismos propuestos por varios investigadores como indicador alterno de contaminación fecal humana en las

2 aguas. También se analizaron las aguas superficiales de las bahías para detectar la presencia de los protozoarios parasíticos Giardia sp. y Cryptosporidium sp. Las bahías de Mayagüez y Añasco están localizadas en la costa oeste de Puerto Rico y la calidad de sus aguas está directamente afectada por descargas reguladas y no reguladas provenientes principalmente de fuentes industriales, agrícolas y desperdicios sanitarios, además del transporte de contaminantes de los efluentes de los ríos Guanajibo, Yagüez y Añasco. El río Añasco recibe flujos de desechos sanitarios de comunidades río arriba, mientras que también río arriba el Guanajibo recibe efluentes de plantas de tratamiento de aguas usadas que sirven los pueblos de Hormigueros, Sabana Grande, San Germán y Maricao. El río Yagüez pasa por la ciudad de Mayagüez y drena mucha de la escorrentía urbana de esta ciudad (ENSR, 1992). Estos ríos también introducen a las bahías cantidades substanciales de sedimentos suspendidos provenientes de escorrentías agrícolas y la erosión del terreno. La Planta Regional de Tratamiento de Aguas Usadas de Mayagüez descarga su efluente directamente a la bahía de Añasco a través de un emisor submarino, el cual está localizado aproximadamente 1.7 Km de la costa en la parte sur de la bahía de Añasco. Este emisor ha estado en operación desde el año 1985 e introduce aproximadamente 15 millones de galones por día (MGD) de aguas servidas sujetas a tratamiento primario (Barbot (1990) citado por ENSR, 1992). Antes del 1985 las aguas usadas crudas de la ciudad de Mayagüez eran descargadas a la bahía al sur del río Yagüez (ENSR, 1992). Varios estudios se han realizado en las últimas tres décadas para caracterizar la calidad de las aguas y los patrones de distribución de contaminantes en las bahías de Mayagüez y Añasco (Muñoz et al., 1968; del Valle, 1970; R.M.Guzmán, 1974; PRIDCO, 1974; PRDPW, 1974; Metcalf & Eddy, 1985). Los principales indicadores de contaminación detectados en las bahías incluyen altos niveles de demanda bioquímica de oxígeno (DBO), demanda química de oxígeno (DQO), bacterias coliformes y nutrientes. Esta investigación se realizó como parte del proyecto Land Use Patterns and Fecal Contamination of Western Coast of Puerto Rico, auspiciado por la Administración Nacional de Aeronáutica y Espacio de los Estados Unidos (NASA). El mismo se realizó conjuntamente con el Departamento de Salud Ambiental del Recinto de Ciencias Médicas, el Departamento de Ciencias Marinas del Recinto Universitario de Mayagüez y el Departamento de Biología de la Universidad de Puerto Rico, Recinto de Río Piedras. Materiales y métodos Durante el período de agosto de 1994 a febrero de 1995 se tomó una muestra compuesta de las aguas de las bahías de Mayagüez y Añasco. También durante este período se tomaron muestras en el área de descarga del emisor submarino de la Planta de Tratamiento de Aguas Usadas de Mayagüez. Los muestreos se realizaron desde la embarcación R/V Sultana de 42 pies, perteneciente al Departamento de Ciencias Marinas, Recinto Universitario de Mayagüez. La muestra compuesta fue tomada mediante el uso de una bomba sumergible de succión de agua, la cual fue instalada en la embarcación. Se tomaron aproximadamente 10 litros de agua. A partir de julio de 1995 hasta mayo de 1996 se establecieron tres estaciones de monitoreo en la bahías, estas estaciones se localizaron en aquellas áreas de las bahías cercanas a las desembocaduras de los ríos Guanajibo (E1), Yagüez (E2) y Añasco (E3). La estación de monitoreo localizada en el área de descarga de las aguas usadas de la Planta Regional de Tratamiento de Aguas Usadas de Mayagüez a través de un emisario submarino (E4) se continuó monitoreando. Las muestras de las aguas marinas de la bahía fueron tomadas a una profundidad de entre 0 a 3 pies en la columna de agua. Las muestras de agua tomadas durante esta investigación fueron analizadas para los siguientes parámetros microbiológicos: coliformes totales, coliformes fecales, enterococos, colifagos y los parásitos protozoarios Giardia y Cryptosporidium. Tanto la colección de muestras y la preservación de las mismas así como los análisis de laboratorio se realizaron según los métodos estándares

3 estipulados en Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater (APHA, 1992). Para el análisis bacteriológico se utilizó la técnica de filtración por membrana descrita en los métodos estándares (APHA, 1992). Los medios de cultivo y de confirmaciones utilizados para estos análisis fueron los siguientes: Análisis Medio de cultivo Medio de confirmación Coliformes Totales M-endo Agar Lauryl Tryptose Broth Coliformes Fecales M-FC Agar EC Medium Enterococos M-enterococcus Agar Azide Dextrose Broth Los análisis para la detección de colifagos se realizaron mediante el método directo, utilizando como hospedero la bacteria Escherichia coli C3000 (ATCC 15597), la cual fue obtenida comercialmente. Este método consiste de la mezcla directa de la muestra de agua con el agar, lo que nos permite determinar de forma directa la concentración de colifagos presentes en 100 ml de una muestra de agua. Se utilizó Tryptic Soy Broth (TSB) para crecer el cultivo de la bacteria hospedero, E. coli C3000. Para el ensayo de fagos se utilizó el medio 2X TSA, el cual se prepara utilizando Tryptic Soy Broth a doble concentración y añadiéndole 1.5% de agar. Este medio se preparó en tubos de ensayos, se esterilizó y se mantuvo en estado líquido en un baño de maría a una temperatura entre ºC. A cada tubo se le añadió 10 ml de la muestra junto con 0.5 ml de la bacteria hospedero, se virtió en placas petri estériles y se incubó a una temperatura de 35 ºC por un período de tiempo de entre horas. Los resultados del ensayo se reportan como número de placas (lisis) totales en 100 ml de muestra (PFU/100mL). Para los análisis de los parásitos Giardia sp. y Cryptosporidium sp se utilizaron dos metodologías distintas. Desde agosto de 1994 a febrero de 1995 para la detección de quistes y ovoquistes de estos parásitos se tomaron muestras de 10 litros de agua. Estas muestras se procesaron mediante el método de floculación para concentrar las partículas presentes en el agua y utilizando la técnica de inmunofluorescencia indirecta con anticuerpos monoclonales. La técnica de floculación fue sustituida a partir de marzo de 1995, ya que era necesario analizar un volumen mayor de agua ante la no detección de quistes y ovoquistes debido a la posible dilución de los mismos en las aguas marinas. A partir de marzo de 1995 las muestras se obtuvieron usando filtros de polipropileno de 1 m de porosidad para retener las partículas y posibles protozoarios patógenos presentes en un volumen grande de agua. La filtración se llevo a cabo mediante el uso de una bomba eléctrica de succión de agua y se filtró un volumen aproximado de 100 galones ( litros) de agua en cada estación. Las muestras se preservaron a una temperatura de 4 ºC hasta el momento de ser analizadas para la detección de los quistes y ovoquistes de los párasitos. Esto se hizo utilizando la técnica desarrollada por Musial (1987). En cada estación de monitoreo se tomaron medidas de temperatura y salinidad y se analizaron las muestras para determinar la concentración de sólidos suspendidos. Las medidas de salinidad y temperatura fueron tomadas mediante el uso del instrumento TEMPSAL modelo 541 (Interocean Systems, Inc) instalado en la embarcación. El análisis para determinar la concentración de sólidos suspendidos fue llevado a cabo utilizando membranas de policarbonato con porosidad de 0.47 m y un diámetro de 47mm siguiendo el protocolo estipulado en Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater (APHA, 1992).

4 Resultados y Discusión La tabla 1 resume los promedios obtenidos de los distintos parámetros microbiológicos estudiados en las áreas monitoreadas de las bahías de Mayaguez y Añasco. Existe gran variabilidad entre los resultados de los distintos parámetros estudiados. Las desviaciones estándar observadas son altas lo que sugiere cuan dispersos están los datos de la medida de tendencia central. La bahía de Mayagüez está clasificada como un cuerpo de agua SC por el Reglamento de Estándares de Calidad de Agua de la Junta de Calidad Ambiental, esto es, aguas costaneras destinadas a usos en los que el cuerpo humano pueda entrar en contacto indirecto con el agua y para la propagación y preservación de especies deseables (JCA, 1990). La bahía de Añasco está clasificada como un cuerpo de agua SB desde la línea de costa hasta 500 metros mar afuera. Más allá de estos 500 metros la clasificación de las aguas cambia a SC. Los cuerpos de agua clasificados SB son para usos recreativos de contacto primario y secundario y para la propagación y preservación de especies deseables (JCA, 1990). Tabla 1. Promedios de los distintos parámetros microbiológicos estudiados en las bahías de Mayaguez y Añasco. Estaciones Coliformes totales (CFU/100mL) Coliformes fecales (CFU/100mL) Enterococos (CFU/100mL) Stdev N Stdev N Stdev N Muestra Compuesta 1,939 1, (E1). Cerca desemb. Río 12,508 21, ,664 4, ,333 10, Guanjibo (E2). Cerca desemb. Río 5,909 10, ,436 1, ,136 3, Yaguez (E3). Cerca desemb. Río 9,239 17, ,433 1, ,686 5, Añasco (E4). Emisario Submarino- (AAA) 9,009 16, ,248 12, Tabla 2. Promedios de los distintos parámetros microbiológicos estudiados. Estaciones Colifagos Giardia Cryptosporidium (PFU/100mL) Stdev N Stdev N Stdev N Muestra Compuesta 1,939 1,090 5 ND ND (E1). Cerca desemb. Río 12,508 21, ND ND Guanjibo (E2). Cerca desemb. Río 5,909 10, ND ND Yaguez (E3). Cerca desemb. Río 9,239 17, ND ND Añasco (E4). Emisario Submarino- 9,009 16, ND (AAA) En todas las estaciones monitoreadas se exceden consecuentemente los estándares de calidad de agua existentes para coliformes totales y fecales establecidos por el Reglamento de Calidad de Agua de la

5 Junta de Calidad Ambiental. Los estándares de coliformes totales y coliformes fecales establecidos para aguas SC son 10,000 col/100ml y 2,000 col/100ml, respectivamente (JCA, 1990). En aguas clasificadas SB el estándar existente es de 200 col/100ml para el parámetro de coliformes fecales (JCA, 1990). Entre las estaciones monitoreadas, la estación donde ocurren un mayor número de violaciones a los estándares de calidad de agua es la estación localizada cerca de la desembocadura del río Añasco. Esta estación está localizada en aguas clasificadas como SB. Al norte de esta estación hay áreas que son utilizadas para propósitos recreacionales. Los promedios de los distintos parámetros microbiológicos estudiados para la muestra compuesta (coliformes totales (CT)-1,939 col/100ml; coliformes fecales (CF)-94 col/100ml; enterococos(ent)-183 col/100ml; y colifagos(cfg)-0 pfu/100ml) son mucho menores que las densidades de microorganismos encontrados en las estaciones localizadas cerca de las desembocaduras de los ríos Guanajibo, Yagüez y Añasco. Los promedios más altos de coliformes totales y enterococos los encontramos en la estación E1 (12,508 col/100ml y 3,333 col/100ml, respectivamente). Le siguen la estación E3 con un promedio de coliformes totales de 9,239 col/100ml y un promedio de enterococos de 2,686 col/100ml. En la estación E4 encontramos los promedios más altos para los parámetros de coliformes fecales y colifagos (4,248 col/100ml y 190 fagos/100ml, respectivamente), mejores indicadores de contaminación fecal humana, seguido de los promedios de la estación E1 donde encontramos un promedio de coliformes fecales de 2,664 col/100ml y 73 colifagos/100ml. Los ríos Guanajibo, Yaguez y Añasco difieren tanto en el tamaño de sus cuencas así como en sus respectivos flujos. En la tabla 3 se resumen los flujos promedios y áreas de captación de los ríos Guanajibo, Yaguez y Añasco. Tabla 3. Áreas de captación y promedios de flujos de los ríos Guanajibo, Yaguez y Añasco. Río Río Guanajibo, cerca de Hormigueros Río Yagüez, cerca de Mayagüez Río Añasco, cerca de San Sebastián a Año hidrológico 1995 b Años hidrológicos Fuente: USGS, 1993; 1994; 1995; Datos sin publicar Flujo promedio (p 3 /seg) Área de captación (Km 2 ) 148 a b a 360 De los análisis de parásitos realizados en las aguas de la bahías de Mayagüez y Añasco encontramos que sólo en la estación E4 se detectaron quistes del parásito protozoario Giardia sp. mientras que Cryptosporidium sp. no fue detectado en ninguna de las estaciones monitoreadas en estas bahías. No se encontraron correlaciones significativas entre quistes de Giardia y los demás parámetros microbiológicos estudiados (coliformes totales, coliformes fecales, enterococos y colifagos) en la estación E4. Se ha demostrado que aguas de desperdicios domésticos son una fuente significativa de quistes de Giardia (Bitton, 1994). Estos quistes son capaces de sobrevivir a condiciones ambientales adversas y son excretados por humanos y animales infectados. Los resultados obtenidos sobre ambos parásitos coinciden con los resultados de un estudio realizado en diferentes aguas de Puerto Rico, incluyendo aguas marinas, donde sí se demostró la presencia de Giardia sp. más no así la de Cryptosporidium sp. (Correa,1990). Estos resultados pueden ser indicativos de que la incidencia de Cryptosporidium sp. en la isla es muy baja. En las estaciones E1 y E4 encontramos los índices más altos de contaminación fecal. La estación E4 está localizada en el área de descarga del efluente de la Planta Regional de Tratamiento de Aguas Usadas de Mayagüez, por lo que podemos asumir que esta descarga constituye una aportación significativa de contaminación microbiológica de origen fecal en la bahía.

6 Por otro lado, dado los altos índices de microorganismos de origen fecal en la estación E1, podemos asumir que el río Guanajibo tiene una aportación mayor en términos de contaminación microbiológica de origen fecal en el área de la bahía comparado con los otros dos ríos que descargan a la misma. Encontramos una posible asociación directa entre el flujo en el río Guanajibo y las densidades de microorganismos encontrados en la estación E1, o sea, que flujos altos están asociados a densidades altas de microorganismos (R (CT)=0.85, R (CF)=0.71, R(ENT)=0.98 y R(CFG)=0.90) Los promedios de sólidos suspendidos encontrados en las estaciones estudiadas se muestran en la tabla 4. El promedio más alto de sólidos suspendidos se encontró en la estación E3; el mismo fue de mg/l, seguido de la estación E2 con un promedio de mg/l. En la estación E3 un plumacho de sedimentos proveniente del río Añasco era claramente visible en el área durante la realización de los muestreos. En la estación E1 y E2 un plumacho de sedimentos provenientes de los ríos Guanajibo y Yagüez sólo era visible durante los muestreos que eran precedidos por un período de bastante lluvia. En la estación E1 el promedio de sólidos suspendidos fue de mg/l y en E4 encontramos el promedio menor con 3.75 mg/l. Como era de esperarse las concentraciones mayores de sólidos suspendidos las encontramos en las estaciones E1, E2 y E3, las cuales están influenciadas por el arrastre de sedimentos de los tres ríos que descargan en estas áreas. Por los resultados obtenidos podríamos asumir que de estos tres ríos, el río Añasco es el que más contribuye con sedimentos suspendidos a la bahía. Tabla 4. Resultados de sólidos suspendidos (mg/l) en las estciones monitoreadas de las bahías de Mayaguez y Añasco. Sólidos Suspendidos (mg/l) Estación E1 (Guanajibo) Estación E2 (Yaguez) Estación E3 (Añasco) Estación E4 (Emisario) Promedio Desv. STD Máximos Mínimos N En la estación E3 encontramos una posible relación lineal entre las concentraciones de sólidos suspendidos y las densidades de coliformes totales (coeficiente de correlación (R) = ), coliformes fecales (R= ) y enterococos (R= ), o sea que altas concentraciones de sólidos suspendidos en el agua están asociados con altas densidades de bacterias coliformes y enterococos en esta estación, más no así con altas densidades de colifagos. Tanto las actividades agrícolas como actividades de construcción en las cuencas de los ríos tienen un impacto significativo en la cantidad de sedimentos suspendidos en los cuerpos de agua (Guevara, 1996). Los sedimentos suspendidos son un elemento importante debido al efecto detrimental que tiene la sedimentación en los ecosistemas de arrecifes de coral (Goenaga et al., 1979). Altas concentraciones de sólidos suspendidos provocan una reducción en la penetración de luz afectando no sólo los sistemas de arrecifes de coral sino también otras comunidades bénticas y algas marinas. Cabe señalar que el margen exterior de las bahías de Mayaguez y Añasco está bordeado por varios sistemas de arrecifes (Manchas Interiores, Manchas Exteriores, Escollo Rodríguez y Manchas Grandes).

7 Conclusiones En todas las estaciones monitoreadas en las bahías de Mayagüez y Añasco ocurren violaciones consecuentes a los estándares de calidad de agua para los parámetros de coliformes totales y coliformes fecales establecidos por la Junta de Calidad Ambiental. Entre estas estaciones, la estación E3 es donde más violaciones encontramos al estándar de coliformes fecales, ya que el 75% de las muestras tomadas exceden el estándar de 200 col/100ml establecido para estas aguas. En las visitas realizadas a esta área pudimos constatar que algunas zonas son utilizadas para propósitos recreacionales de contacto directo, por lo que pudiese existir un potencial peligro a la salud pública en estas aguas. Es necesario realizar estudios epidemiológicos que relacionen densidades de microorganismos indicadores con enfermedades relacionadas con el contacto con las aguas (tanto enfermedades entéricas como enfermedades no entéricas), para de esta manera determinar el potencial de peligro a la salud de las aguas. Sólo en la estación E4 se detectaron quistes del parásito protozoario del género Giardia, el cual es patógeno y produce una enfermedad conocida como Giardiasis. La detección de Giardia en aguas marinas confirma que este parásito puede sobrevivir en agua salada, lo que podria representar un riesgo a la salud en aguas marinas utilizadas para propósitos recreacionales. El parásito Cryptosporidium sp. no se detectó en ninguna de las muestras tomadas. Además del parásito Giardia, en la estación E4 encontramos los promedios más altos para los parámetros de coliformes fecales (4,248 col/100ml) y colifagos (190 fagos/100ml). Esta estación está influenciada por la descarga del efluente de la Planta Regional de Tratamiento de Aguas Usadas de Mayagüez. Esta descarga al parecer constituye una fuente significativa en cuanto a contaminación microbiológica de origen fecal se refiere en las aguas de la bahía. También los ríos Guanajibo, Yagüez y Añasco, que descargan en las bahías de Mayagüez y Añasco, contribuyen a la contaminación microbiológica de origen fecal del área. Es necesario la implementación de medidas de control de calidad de aguas de escorrentías, así como mayor control de descargas sanitarias ilegales a estos cuerpos de agua. En la estación E3 encontramos las concentraciones más altas de sólidos suspendidos. Dado que esta estación está influenciada por la descarga del río Añasco podemos concluir que este río es el que más contribuye con sólidos suspendidos a la bahía. En esta estación (E3) encontramos una posible relación lineal entre las concentraciones de sólidos suspendidos y las densidades de coliformes totales, coliformes fecales y enterococos, o sea que altas concentraciones de sólidos suspendidos en el agua están asociados con altas densidades de bacterias coliformes y enterococos en esta estación, más no así con altas densidades de colifagos. Es necesario el establecimiento de prácticas de control de erosión y conservación de suelos, para de esta manera controlar el arrastre de sedimentos por los ríos. Algunas áreas de las bahías de Mayagüez y Añasco son hábitats de algunas especies en peligro de extinción como tortugas marinas y manatíes. Estos últimos fueron vistos principalmente en el área estudiada ya que suelen acercarse a las desembocaduras de los ríos en busca de agua dulce. Las altas densidades de microorganismos indicadores de contaminación fecal en las áreas estudiadas pudiesen ser un aviso de posibles efectos adversos al bienestar de estas especies.

8 Referencias APHA. (1992). Standard methods for the examination of water and waste water. 17th Edition. American Public Health Association, American Water Works Association, American Water Pollution Control Federation. American Public Health Association, Washington, DC. Bitton, Gabriel. (1994). Wastewater microbiology. Wiley-Liss, New York. Correa, I., Yumet, G., and G. Toranzos. (1990). Removal of Giardia spp. by conventional water and sewage treatment processes and presence of cysts in surface waters of Puerto Rico. Tropical Hydrology and Caribbean Water Resources, American Water Resources Association. July P del Valle, L. (1970). Determination of present level of pollution in some bays of Puerto Rico-sanitary phase. Research Project A-001-PR. Water Resources Research Institute, University of Puerto Rico, Mayaguez, PR. ENSR Engineering and Consulting. (1992). Declaración de impacto ambiental: propuesta planta de cogeneración de 300 MW, Mayaguez, Puerto Rico. Preparada para la Compañia de Fomento Industrial de Puerto Rico. Guevara González, Evelyn. (1996). El impacto de las actividades de construcción y agrícolas en los sedimentos suspendidos de dos cuencas hidrográficas. Tesis, Universidad de Puerto Rico, Recinto de Ciencias Médicas. Junta de Calidad Ambiental (JCA). (1990). Estándares de Calidad de Agua de Puerto Rico. Estado Libre Asociado de Puerto Rico, Hato Rey, PR. Metcalf & Eddy, Inc. (1985). Application of a waiver of secondary treatment for Mayaguez Regional Wastewater Treatment Plant. Prepared for Puerto Rico Aqueduct and Sewer Authority (PRASA), San Juan, Puerto Rico, for submittal to U.S. Environmental Protection Agency (Region 2), New York, NY. Muñoz, Nazario and Associates. (1968). A pollution study of Mayagüez Bay. Prepared for Puerto Rico Department of Health. Mayagüez, PR. pp.41 Musial, C., M. Arrwood, C. Sterling and C. Gerba. (1987). Detection of Cryptosporidium in water by using polypropylene cartridge filters. Applied Environmental Microbiology. 53 (4): Puerto Rico Departments of Public Works (PRDPW). (1974). Oceanographic baseline data ( ) for the formulation of marine waste disposal alternatives for Puerto Rico. Volumes 1 and 2. Prepared for Environmental Quality Board, San Juan, PR. Puerto Rico Industrial Development Company (PRIDCO). (1975). Viability and environmental investigation for dredging and reclamation works at Mayagüez Bay, PR. Mayagüez, Puerto Rico. R.M. Guzmán Associates. (1974). Oceanographic considerations for wastewater treatment and disposal at the El Maní area at Mayagüez, Puerto Rico. San Juan, PR. 121 pp.