Lab. # 4 Análisis Químico de moléculas orgánicas. BIOL 3013-Laboratorio de Biología General I Dra. Varela Agront y Dra.

Transcripción

1 Lab. # 4 Análisis Químico de moléculas orgánicas BIOL 3013-Laboratorio de Biología General I Dra. Varela Agront y Dra. Hernández Vale

2 Objetivos Mencionar algunas de las biomoléculas más importantes para los organismos Definir el término grupo funcional y reconocer aquellos que son característicos de las diferentes moléculas biológicas identificadas Realizar pruebas bioquímicas para identificar carbohidratos (monosacáridos, polisacáridos), grasas y proteínas Utilizar pruebas bioquímicas para identificar desconocido Definir términos importantes (en negrillas)

3 Macromoléculas (Moléculas orgánicas) Esqueleto de Carbono (C) enlazado a átomos de Hidrógeno (H) Hidrocarburos Carbono (C) posee las propiedades únicas para ser/formar el esqueleto de moléculas esenciales para la vida Cuatro enlaces; covalentes

4 Macromoléculas de importancia biológica Carbohidratos Lípidos (grasas) Proteínas Ácidos nucléicos

5 Macromoléculas de importancia biológica Carbohidratos Proteínas Lípidos (grasas) Ácidos nucléicos

6 Macromoléculas de importancia biológica Enlace covalente C, H, O (elementos esenciales) Monómeros Unidad individual Polímero Más de un monómero p o l í m e r o monómero dímero

7 Grupos funcionales grupo de átomos (molécula) enlazados a una cadena de hidrocarburos (R-) Otorga propiedades y características a los compuestos orgánicos Grupo Funcional etano Gas a 25 C etanol Bebidas alcohólicas

8 Qué buscamos hacer? En este laboratorio haremos una serie de pruebas para detectar los distintos grupos funcionales de tres de estas macromoléculas Proteínas Carbohidratos Lípidos (grasas)

9 Grupos funcionales

10 Proteínas Polímeros de aminoácidos (aa) Enlace peptídico entre 2 aa El grupo carboxilo de un aa se une con el grupo amino de otro aa Se desnaturalizan con temperaturas altas y/o condiciones acídicas

11 Pruebas para detectar proteínas Prueba de Biuret Identifica grupo amino Hidróxido de sodio (NaOH) y sulfato cúprico (CuSo 4 ) reaccionan con grupo amino Produce un color violeta (Resultado (+) Prueba de coagulación Identifica desnaturalización de proteínas HCl y alta temperatura rompe enlaces que forman estructura 3D de las proteínas Se forman coágulos (Resultado (+)

12 Carbohidratos Se compone de los átomos de carbono, hidrógeno y oxígeno en las siguientes proporciones: C n H 2n O n = C n (H 2 O) n Se pueden clasificar de acuerdo a la cantidad de monómeros que tenga: Monosácaridos Disacáridos Polisácaridos glucosa Grupos funcionales presentes Hidroxilo Carbonilo (aldehído, cetona) Aldehído Cetona

13 Carbohidratos Monosacáridos* Disacáridos Maltosa (glucosa + glucosa) Sacarosa (glucosa+ fructosa) Lactosa (glucosa + galactosa) glucosa Polisacáridos

14 Pruebas para detectar carbohidratos Prueba de Benedict Identifica azúcares reductoras (transfieren e-) Generalmente son monosacáridos Usa Fe 3+ o Cu 2+ Precipitado verde, anaranjado- rojo Resultado (+) Prueba Yodo Identifica almidón Produce color violeta intenso Resultado (+)

15 Lípidos (grasas) Hidrofóbicas No se disuelven en agua 1 glicerol + 3 ácidos grasos Compuestos por C, H y O; pero no en la misma proporción del agua Grupos funcionales envueltos: (ver cuaderno fig 4.6 pag 58 y tabla 4.1 pag 48) Metilo (R-CH3) Carboxilo (R-COOH) Hidroxilo (R-OH)

16 Prueba para detectar grasas Prueba de papel Solubles en eter etílico; penetran y son absorbidos por papel Produce mancha en papel Resultado (+) Prueba de Sudan IV tinte es hidrofóbico y se disuelve en grasas Produce color rosado o naranja Resultado (+)

17 Ejercicios de laboratorio Pruebas de detección de proteínas Biuret ( presencia de proteína- detección g. amino) y de coagulación (desnaturalización de la proteína) Prueba de detección de carbohidratos Benedict ( azúcares reductoras monosácaridos) y Yodo (almidón- polisácarido) Prueba de detección de grasas Sudan IV Estas pruebas se harán siguiendo el apéndice que se les entregará y se va a realizar a escala (se usarán fosas) las pruebas de detección de proteínas y carbohidratos) Junto con las soluciones a utilizarse se harán las pruebas para una sustancia desconocida y al finalizar debe identificar sus componentes.

18 Pruebas y metodología a utilizar Biuret Yodo Benedict A B C D E F A B C D E A B C D/E Siga el diagrama para colocar las soluciones B C G A Agite bien c/solución antes de usarla E H F I D Esperar al final para calentar las pruebas de coagulación (por calor) y la de Benedict Al finalizar todas las pruebas deje correr un poco de agua en la placa Coagulación (Calor) (7g muestra*) Coagulación (acidez) (3g muestra*) Solución Desconocida