Universidad autónoma de Chiapas extensión Ocozocoautla
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- Margarita Sánchez Correa
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1 Universidad autónoma de Chiapas extensión Ocozocoautla Identificación de biomoléculas Practica 1 y 2 Biología celular Dra. Ana Olivia cañas Urbina Integrantes Andrea Pérez Ochoa Diana Laura Vázquez Vázquez Blanca Guadalupe Penagos Gómez
2 Que son las biomoléculas? Son moléculas constituyentes de los seres vivos los cuatro constituyentes más abundantes de los seres vivos son carbono, hidrogeno, oxigeno, nitrógeno. Las biomoléculas se pueden clasificar en: inorgánicas y orgánicas, en esta práctica solo abordaremos las biomoléculas orgánica: hidratos de carbono, lípidos y proteínas. Los carbohidratos son moléculas compuestas por H, C, O con dos funciones principales en los seres vivos, que son energética y estructural. Su grupo funcional es un grupo carbonilo, cetona. Algunos glúcidos forman importantes estructuras esqueléticas, como la celulosa, constituyentes de la pared celular vegetal o la quitina que forma la cutícula de los artrópodos. Los lípidos son hidrofóbicas y cuentan con tres funciones: estructural, energética y reguladora. Su grupo funcional es el carboxilo, los lípidos cuentan con 9kc/g. se pueden clasificar en dos grupos: saponificables estas cumplen dos funciones importantes por una parte, los fosfolípidos forman el esqueleto de las membranas celulares (bicapa lipídica); por otra, los triglicéridos son el principal almacén de energía de los animales y no saponificables que desempeñan funciones reguladoras.
3 Los carbohidratos Los carbohidratos son componentes estructurales importantes de las células y son además una forma importante de almacenar energía; los que conocemos como las azúcares y polímeros de azúcares. Estas moléculas usualmente contienen carbono, hidrógeno y oxígeno. Los carbohidratos se clasifican como monosacáridos, disacáridos o polisacáridos, dependiendo del tamaño y la complejidad de la molécula. Los monosacáridos se componen de una sola molécula de azúcar. Cuando dos monosacáridos se unen se produce un disacárido, y cuando dos o más se unen se produce un polisacárido. Prueba de benedict Muchos monosacáridos, como la glucosa y la fructosa, y algunos disacáridos, son azúcares reductores porque poseen un aldehído libre (no enlazado a los otros grupos en la molécula). La Prueba de Benedict se usa para detectar la presencia de azúcares reductores porque el reactivo de Benedict contiene cobre que se reduce en presencia de azúcares reductores. Durante esta reacción el azúcar se oxida. La reacción antes mencionada se conoce como una reacción oxidación-reducción ( REDOX ) porque la oxidación del azúcar sucede simultáneamente con la reacción de reducción del cobre Cuando se añade el reactivo de Benedict al azúcar reductor, y se aplica calor, el color de la mezcla cambia a naranja o ladrillo intenso mientras mayor sea la abundancia de azúcares reductores. Un cambio a color verde indica la presencia de menos azúcares reductores. Las azúcares que no reducen, como la sacarosa, no producen cambios en color y la solución se mantiene azul. Los monosacáridos que forman anillos no son azúcares reductores porque no tienen un grupo aldehído libre, pero pueden reducir si se convierten en monosacáridos abiertos.
4 Azucares reductores Las soluciones problema a utilizar son: jugo de naranja natural y procesado, solución de edulcorante light y refresco o bebida light. Como solución testigo se empleará solución glucosada al 10% y como blanco de reactivo se usará agua. Procedimiento Agregar 1 ml de la solución testigo, blanco de reactivo y soluciones problema a un tubo de ensayo de 13x100 y añadir 2 ml de reactivo de Benedict a cada tubo. Una vez preparadas las soluciones, los tubos se calentarán por separado a baño maría (agitación constante) durante tres minutos. Azucares complejos Las muestras problema a utilizar son: una rebanada de zanahoria fresca, una rebanada de zanahoria congelada, una rebanada de papa, una rebanada de manzana, un cuarto de tortilla de maíz natural, un cuarto de tortilla de mazeca, un cuarto de tortilla de trigo. Prueba de Yodo: La prueba de yodo se usa para detectar almidón. El almidón es un polímero de glucosa producido por las plantas y es una fuente importante de energía almacenada. La molécula de almidón forma hélices entre las cuales se inserta el yodo, tiñendo el almidón de azul oscuro a negro. Procedimiento Añade a cada muestra problema, dos gotas de lugol, reposa durante 5 minutos y enjuaga. Tabla 1. Prueba de Benedict para azucares reductores Solución Color después de la Intensidad de color reacción Blanco de reactivo azul(no cambio) Medio intenso Solución glucosada Verde y entre color rojizo Intenso ladrillo (cambio) Jugo de naranja natural Amarillo (cambio) Intenso Jugo de naranja procesado Naranja (cambio) Medio intenso Solución de edulcorante Azul (negativo ) Medio intenso light Refresco o bebida light Verde jade (negativo) Intenso
5 Tabla 2. Prueba de Lugol para azucares complejos (almidón) Solución Color después de la reacción Azúcar reductor (+)(-) Zanahoria fresca No se definió el color - Zanahoria congelada No se definió el color - Papa Violeta + Manzana Café + 1/2 Tortilla de maíz natural Violeta + Tortilla de mazeca Violeta + 1/2 Tortilla de trigo No hubo color -
6 Grasas (o Lípidos) Los lípidos, igual que los carbohidratos, son una fuente importante de energía almacenada. Los lípidos son componentes importantes de las membranas celulares, de algunas vitaminas, de ciertas hormonas y del colesterol. Los lípidos son solubles en solventes no-polares y son muy poco solubles en agua porque se componen principalmente de cadenas de hidrocarbonos. Prueba de Sudán para identificación de grasas: Detecta las cadenas de hidrocarbonos. El reactivo de Sudán produce una reacción hidrofóbica donde los grupos no-polares (los hidrocarbonos) se agrupan y son rodeados por moléculas del reactivo. La prueba de Sudán tiñe los hidrocarbonos de rojo Los alimentos problema a utilizar son: leche de vaca light, leche o bebida de soja, queso panela, tortilla de maíz en suspensión, aceite vegetal y margarina derretida. Procedimiento Añada 2 ml de alimento a un tubo de ensayo de 13x100 y añada 5 gotas de Sudán III. Registre sus observaciones (Tabla 3) y discuta. Tabla 3. Determinación de lípidos (Sudan III) Solución Color después de la reacción Lípidos (+)(-) Leche vaca light lila (cambio) + Leche o bebida de soja Naranja(cambio) + Tortilla de maíz en suspensión Amarillo(cambio) + Aceite vegetal Naranja (cambio) + Margarina derretida Mas amarilla(cambio) +
7 Proteínas Las proteínas son componentes estructurales de las células, controlan sus procesos metabólicos y actúan como mensajeros químicos. Además, son parte importante de los anticuerpos, enzimas y receptores celulares. Las proteínas están formadas por cadenas de aminoácidos. Debido a la presencia de los grupos amino y carboxilo, los aminoácidos resisten cambios en ph y son amortiguadores importantes en soluciones biológicas. Reactivo de biuret El reactivo de Biuret se compone de hidróxido de sodio y sulfato de cobre. El grupo amino de las proteínas reacciona con los iones de cobre del reactivo de Biuret y el reactivo cambia de azul a violeta Los alimentos problema a utilizar son: caldo de frijoles (concentrado), solución de caldo de pollo knorr, papilla de salchicha, caldo de sopa nissin, suspensión de tortilla de maíz, leche de vaca light y leche o bebida de soja. Procedimiento Colocar en un tubo de ensayo de 13x100, 1 ml de de soluciones de alimento y 12 gota de reactivo de Biuret Resultados Tabla 4. Determinación de proteínas (Biuret) Solución Color después de la reacción Proteínas (+)(-) Caldo de frijoles No hubo cambio - Solución de caldo de pollo No hubo cambio - knorr Papilla de salchicha No hubo cambio - Caldo de sopa nissin No hubo cambio + 1/2 Leche de vaca light Lila (cambio) + Leche o bebida de soja Rosa (cambio) +
8 Discusión de ideas En la práctica realizada de determinación de biomoleculas se determinaron distintos tipos de alimentos, light, natural, vegetal entre otros, se pudo observar con la prueba del lugol que con los alimentos como la papa, la zanahoria congelada y la tortilla de maíz fueron positivos al presenciar almidón el único que no se marco fue el de la tortilla de maíz ya que hubo entre unas y otras tortillas que si marcaban. La prueba de benedict se presenció la intensidad de color en jugo de naranja. El de sudan lll todos sus alimentos fueron positivos, el biuret presenciamos los positivos que fueron leche de vaca light, leche de soja y medio de sopa nissi. Conclusión En esta práctica aprendimos identificar los biomoléculas y a saber sobre los diferentes reactivos que utilizamos, comprobamos muchas cosas que nosotros no crecíamos como la salchicha que solo tiene almidón (harina)
9 CUESTIONARIO 1- Defina cada una de las biomoléculas identificadas Moléculas que son compuestas por Hidrogeno, Carbono y Oxigeno que contienen tres funciones las cuales son: Lípidos Son sustancias que contienen en sus moléculas grupos hidrocarbonados de cada cadena larga, que está presente en organismos vivientes, o que derivan de los mismos. Son insolubles en agua, pero solubles en solventes orgánicos como el cloro formo, metanol, éter o benceno. En las células vivientes, forman parte de la estructura de las membranas, almacenan energía para las células, y a partir de ellas la célula fabrica prostaglandina. Proteínas Son biomoléculas que más diversidad de funciones realizan en los seres vivos, todos los procesos biológicos dependen de su presencia o actividad. Son proteínas casi todas las enzimas, catalizadores de reacciones metabólicas de las células. Hemoglobina: Es la que trasporta oxígeno en la sangre. Anticuerpos encargados de acciones de defensa natural contra infecciones o agentes extraños. Carbohidratos Son moléculas formadas por carbono, hidrogeno y oxigeno (CHO) e incluyen algunas moléculas más relevantes en la vida de los organismos, como son la glucosa, que es universalmente utilizada por las células para la obtención de la energía metabólica, el glucógeno contenido en el hígado y el musculo que forma la reserva de energía más fácilmente para las células. 2- Proporcione la clasificación de cada una de las biomoléculas identificadas Lípidos Se clasifican en saponificables se dividen en simples y complejos y no saponificables son esteroides y terpeno. Proteínas Se clasifican en fibrosas, globulares y de membranas. Estructura primaria: consta de una secuencia lineal de aminoácidos Estructura secundaria: son las de forma laminar plegada
10 Estructura terciaria: es una cadena peptídica se dobla en sí Misma para formar una proteína globular. Estructura Cuaternaria: se forma por la agrupación de dos o más cadenas peptídicas de tipo globular. Carbohidratos Monosacáridos: son aldosas y cetosas, Oligosacáridos: son disacáridos de trisacáridos a decasacaridos y polisacáridos. 3- Describa el principio de cada una de las pruebas realizadas en la presente práctica (Benedict, lugol, SUDAN III y Biuret) Benedict Identifico los azucares reductores, aquellos que contienen libre su SU OH. Como la glucosa, maltosa y lactosa, en soluciones puede producir Cu 2+, ya que teníamos el objetivo de obtener el color entre naranja rojizo o como ladrillo. Lugol El lugol lo utilizamos para identificar al almidón en alimentos con azucares más complejos, cuando nos daba positivos el color que obtendríamos seria celeste violeta y si no se presenciaba nada sería negativo. Sudan III Es un tinte diazo del tipo lisocromo tinte soluble en grasas lo usamos para manchar los triglicéridos en secciones congeladas y algunos lípidos y lipoproteínas. Biuret El reactivo contiene CuSo 4 en solución acuosa alcalina, lo utilizamos para determinar la presencia de las proteínas en la solución cuando es positivo la concentración tendrá un color violeta. 4- Mencione la función de cada una de las biomoléculas identificadas Lípidos Estructural, energética y reguladora de hormonas Proteína Estructurales, defensa, bioreguladoras, funcional etc.
11 Carbohidratos Energética y estructural 5- Cuáles son las estructuras celulares que conjuntan la presencia de las principales biomoléculas? Citoplasma: contiene proteínas y carbohidratos Membrana plasmica: forma bicapas lipidas y dobles capas los fosfolípidos Núcleo: contiene proteínas como histonas Citoesqueleto: contiene fibras proeteicas Peroxisomas: contiene enzimas para catalizar carbohidratos Aparato de Golgi: recepción de proteínas lípidos y carbohidratos Centrosoma: contiene proteínas 6- Qué beneficios obtenemos al consumir alimentos que contienen azucares reductores y qué beneficios obtenemos al consumir edulcorantes light? Beneficios con azucares reductores En cierta parte nos beneficia porque obtenemos es la que produce energía en nuestro cuerpo Beneficios con edulcorantes Light Nos ayuda a mantener la glucosa en el peso de nuestro cuerpo. 7- En términos de lípidos, qué beneficios presentan los alimentos light frente a los naturales? Explique su respuesta Los alimentos light nos beneficia en su bajo consumo de azúcar ya que estabiliza el peso en nuestro cuerpo y mantiene la glucosa y no contiene excesos de azucares y en las alimentos naturales son los que no son sometidos a ningún proceso de azucares o químicos para reducir el azúcar así es como se le llama es natural su contenido. 8- Por qué los lípidos y las proteínas deben incluirse en la dieta humana? Los lípidos son ácidos grasos que nos dan energía, consumirlo es importante ya que nos aportan una cierta cantidad de kilo calorías. Y Las proteínas son la base de nuestro cuerpo para mantenerlo en forma.
12 REFERENCIAS Medel, R. (2015) Biomoleculas. Recuperado el 20 de agosto del 2015 : L%C3%89CULAS.pdf Bioquímica interactiva (2008) los carbohidratos. Recuperado el 19 de agosto del 2015: Bloomfiel M. (1992): Química de los organismos vivos. Limusa, México D.F. recuperado el 19 de agosto del 2015:
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