TRATAMIENTO PRONOSTICO DIAGNOSTICO
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- Adolfo Moya Quintana
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2 Pruebas moleculares en oncología Diagnostico genético Pruebas moleculares en Enfermedades Hematológicas Pruebas moleculares en Infecciosas FarmacoGenomica. TRATAMIENTO PRONOSTICO DIAGNOSTICO.
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5 ACREDITACION ISO VALIDEZ COMPETENCIA ISO CONFIABILIDAD
6 ESTRATEGIA FUNDAMENTALES DEL CONTROL DE CALIDAD PLANEAR AJUSTAR TRANSVERSAL HACER VERIFICAR
7 Personal Instalaciones y condiciones ambientales Equipo de laboratorio, reactivos y materiales consumibles Procesos pre analíticos. Procesos analíticos. Aseguramiento de la calidad de los resultados del análisis Procesos pos analíticos. Reporte de resultados. Liberación de los resultados. Gestión de la información del laboratorio.
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10 ESTANDARIZACIÓN : DOCUMENTAR EL PROTOCOLO CORRECTO PACIENTE CORRECTO LA IDENTIFICACION CORRECTA Sangre periférica: 5ml con EDTA. Los materiales de extracción y tubos con EDTA (tapa morada) deben estar estrictamente estériles. Las muestras deben conservarse a 4oC por un tiempo no mayor de 24 horas. El laboratorio puede suministrarle los tubos. LOS ADITIVOS CORRECTOS LA MUESTRA CORRECTA LCR: mínimo 0.2 ml. Los materiales de extracción y tubos deben ser nuevos y estar estrictamente estériles. Las muestras deben conservarse a 4oC por un tiempo no mayor de 24 horas. El laboratorio puede suministrarle los tubos y materiales para la punción.
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15 SAFETY DATA SHEETS MSDS FICHA DE SEGURIDAD DE LOS REACTIVOS Acrilamida Cloroformo Bromuro de Etidio Materiales de Referencia Guía ISO 033 Good Practice in Using Reference Materiales SEGURIDAD Y SALUD EN EL TRABAJAO IDENTIFICACIÓN EVALUACIÓN ANÁLISIS MITIGACIÓN ISO 31000:2009, Risk management Principles and guidelines,
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19 CALIBRACIÓN DE TERMOCICLADORES CALIBRACIÓN DEL SISTEMA ÓPTICO EN LA PCR REAL TIME CALIBRACIÓN DE PIPETAS
20 Las muestras que presenten partículas en suspensión o turbidez deben aclararse por centrifugación a x g durante 5 minutos antes de analizarlas.
21 OH POR DIOS Y AHORA LA METROLOGÍA
22 CONTROL INTERNO ENSAYO Y SUS VARIABLES CONTROL EXTERNO RESULTADO Y SU VALIDEZ VALIDACIÓN VERIFICACIÓN ESTANDARI ZACIÓN VERIFICAR EL USO PREVISTO
23 Clark A. Rundell, Ph.D.
24 Control de calidad ENDÓGENO. (housekeeping) que son coamplificados con el analito target. Sujetos a las mismas condiciones de la muestra del paciente. Detectar problemas de reactivos, integridad del DNA de la muestra del paciente, sustancias inhibitorias en la matriz de la muestra, y fallas del equipo. Fallas en la amplificación y detección del control de calidad interno, indican un problema con la muestra o con el ensayo y generar FALSO NEGATIVOS Control de calidad DEPENDIENTE E INDEPENDIENTE Controles que contiene una cantidad medida de Acido nucleico es coprocesado con la muestra del paciente.(antes o después de la extracción del acido nucleico Pruebas de Aptitud Valida la calidad del resultado Valida la estructura del control interno Validez al proceso de medición
25 Control homologo MIMÉTICO Comparte el mismo sito de unión del cebador como la secuencia Target Controles Herólogos Un producto de un gen diferente en la muestra del paciente es amplificado usando un par de cebadores separados
26 Procesado en la misma corrida de las muestras de los pacientes Pero en diferente pozo o tubo de la muestra Test Cualitativo: Control negativo y Control Positivo Test Cuantitativo Control Negativo Positivo bajo Positivo alto
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28 CLIA ( [c]) (36) MÍNIMO PARTICIPAR DOS VECES EN AL AÑO EN LOS ENSAYOS DE APTITUD.
29 MBPT
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31 PROGRAMA DE EVALUCIÓN EXTERNA DE LA CALIDAD PEEC Matriz Prueba Características Presentació n Estababilidad Forma y/o condiciones de almacenamiento OBSERVACIONES HIV HBV HCV * Fabricado a partir de suero o plasma humano. * Al momento de procesar el control, permita que este alcance la temperatura ambiente y mézclelo suavemente por inversión. * La muestra debe ser procesada siguiendo las instrucciones del fabricante del kit para muestras desconocidas. 1,2 ml * Una vez * Almacenar a: abierto es estable: * (-20 C) o a una temperatura * (-20 C) o inferior. menos durante 3 ciclos de * Almacenar en congelación y forma vertical. descongelación. Ninguna De acuerdo al método que se utilice en el laboratorio se debe tener en cuenta: *Esta muestra está fabricada a partir de celular humanas obtenidas en cultivos tisulares y conservados en una solución de metanol tamponado. * Qiagen hc2 High-Risk HPV DNA Utilice toda la muestra y procésela según las instrucciones del kit de análisis para una muestra Conservar a una desconocida. temperatura de: HPV * Al momento de procesar se debe mezclar suavemente de manera manual de modo que se obtenga una suspensión celular homogénea. * La muestra debe ser procesada siguiendo las instrucciones del fabricante del kit para muestras desconocidas 4,0 ml Una vez abierto * Cervista HPV HR * (2-8 C) hasta el y usado no Pipetee 2ml de la suspensión momento que se debe volverse a celular y extraiga el ADN vaya a utilizar. utilizar utilizando el kit de extracción de Genfind; detecte la sea del VPH * Almacenar en con ayuda del análisis Cervista forma vertical. VPH HR. * Analisis VPH Cobas de Roche Pipetee 1ml de la suspensión celular en el tubo recomendado por Roche y procésela según instrucciones del kit de análisis para una muestra desconocida.
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DANAGENE BLOOD DNA KIT
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