Defectos en Células Fagocíticas y su Diagnóstico. JAIRO MUÑOZ CERÓN MD. Esp. MSc. Fundación Universitaria Sanitas Facultad de Medicina
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- José María Acosta Cuenca
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1 Defectos en Células Fagocíticas y su Diagnóstico JAIRO MUÑOZ CERÓN MD. Esp. MSc. Fundación Universitaria Sanitas Facultad de Medicina
2 IDP Incidencia: 1/10,000 (2:1, : ) Distribución: 5% 10% 5% Humorales Combinadas: LB LT 15% 65% LT Fagocitos Complemento
3 Fagocitos polimorfonucleares Producción, división y maduración en la médula ósea ( x 10 6 células por día) Circulación durante ~ 6-10 hs Extravasación hacia los tejidos a través del endotelio capilar Función efectora: Fagocitosis y lisis
4 Clasificación de los defectos en células fagocíticas Deficiencias Cuantitativas Neutropenia Deficiencias Funcionales Adhesión Quimiotaxis Fagocitosis Microbicidas
5 Neutropenias Neutropenia severa congénita: ELA2, R-GCSF, RAS. RAN (<200/mm3). GFI1, HAX1, Glucosa6PDH. Monocitosis Mcl-1(Antiapoptótica) Estrés RE. Neutropenia cíclica I. propidio Anexina V
6 Neutropenias
7 A cmpo FITC -> FSC-Height -> CD45PECY5 -> B CMPO FITC -> FSC-Height -> CD45 PECY5 ->
8 Fagocitos polimorfonucleares Deficiencias Funcionales Microbicidas -Vía dependiente de O 2 : Enfermedad granulomatosa crónica, deficiencia de mieloperoxidasa, Glu-6-P dehidrogenasa, vía del glutatión. -Vía independiente de O 2 : Chediak-Higashi, deficiencia de gránulos secundarios
9 Enfermedad granulomatosa Crónica (EGC) IDP, caracterizada por alteración NADPH Oxidasa e infecciones severas y recurrentes (Dinauer et al., 1996). Prevalencia 1/ a 1/ RNV (Fleisher et al., 2009) Colombia ocupa el cuarto lugar en registro de casos a nivel latinoamericano (pacientes) (Franco et al.,2009). Registro nacional de 18 pacientes con diagnostico de EGC (Franco et al.,2009) Diagnóstico por reducción de NBT y Citometría de flujo.
10 NADPH oxidasa PG DAG o PMA PKC Modificado, Cell. Mol. Sci.2009;66:
11 NADPH oxidasa Especies reactivas del oxígeno (EROs) NADPH oxidasa Funciones Daño tisular Presentación cruzada
12 Mutaciones en las subunidades de NADPH Autosomal recessive CGD <1% NCF4 gene Modificado, Semin Immunopathol. 2009; 30:
13 Análisis de la NADPH-oxidasa por la técnica de 123-Dihidrorodamina 123-Dihidrorodamina 123-Rodamina C21H18N2O3 C 21 H 17 ClN 2 O 3 H202
14 Paciente 1 Sin estimulo IMF N: 4.7 IMF M: 4.6 PMA 1ug/ml IMF N: 1771 IMF M: 116 Control Sin estimulo IMF N: 4.7 IMF M: 4 PMA 1ug/ml IMF N: 272 IMF M: 24 Paciente. Disminución del estallido respiratorio en neutrófilos y monocitos del paciente con respecto al control. N: Neutrófilos, M: Monocitos; IMF: Intensidad Media de Fluorescencia.
15 Paciente 2 Sin estimulo IMF N: 4.4 IMF M: 4.2 PMA 1ug/ml IMF N: IMF M: 64 Control Sin estimulo IMF N: 4.0 IMF M: 3.9 PMA 1ug/ml IMF N: 12 IMF M: 10.5 Paciente Se observa una marcada disminución en el estallido respiratorio de neutrófilos y monocitos del paciente. N: Neutrófilos, M: Monocitos; IMF: Intensidad Media de Fluorescencia.
16 Madre del Paciente 2 (paciente 3) En Rojo IMF Neutrófilos del control: 1510 Subpoblación celular Paciente IMF N N M M En Rojo IMF Monocitos del control: 76.3 Presencia de dos poblaciones de neutrófilos y monocito con diferente IMF en la madre del paciente 2.
17 Fagocitos polimorfonucleares
18 Gránulos de Chediak-Higashi
19 Fagocitos polimorfonucleares Deficiencias Funcionales - Deficiencias de meléculas de adhesión
20 Deficiencia de Adhesión Leucocitaria Tipo de cada RNV Glicoproteína 110kD Autosómico recesivo Infecciones por bacterias entéricas Gram negativas, Staphylococcus aureus, Cándida. Infecciones recurrentes en piel, TGI, Periodontales, Cordón umbilical Expresión de CD18 cuantificable.
21 DAL
22 Citometría de CD18 IMF N: 1397 IMF N: IMF N: 34932
23 Citometría de CD18 Neutrófilos control Neutrófilos paciente Paciente: <10% de la expresión de CD18 del control. CD18 Paciente: No incremento de La expresión post Activación. CD18
24
25 DAL tipo 2
26 DAL Expresión anormal de selectina E Deficiencia de Rac2: Quimiotaxis, Degranulación, NADPH oxidasa. DAL 3
27 Otras Deficiencias Funcionales Quimiotaxis -Deficiencias de meléculas de adhesión, -Deficiencias de meléculas de adhesión, periodontitis juvenil, deficiencia de β-actina, quemaduras extensas, alcoholismo, Hiper IgE
28 Otras deficiencias funcionales Deficiencias Funcionales Fagocitosis -Deficiencias de móléculas de adhesión (mediado por Complemento), deficiencias de anticuerpos, deficiencias de Complemento.
29 Deficiencia de NET s
30 Fagocitos mononucleares Células de estirpe mieloide producidas y maduradas en la médula ósea Circulan ~70 hs como monocitos, luego se extravasan hacia los tejidos transformándose en macrófagos tisulares Funciones: Fagocitosis y lisis, secreción de mediadores inflamatorios, presentación antigénica
31 MSMD
32 Citometría: IFNγ/IL-12/23
33 Evaluación por citometría de flujo Detección de IL-12p40 MONOCITOS LPS LPS+IFNγ IL-12p40 CD64
34 Síndrome MonoMac
35 Gracias
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