MINISTERIO DE SALUD LABORATORIO CENTRAL Tránsito Cáceres de Allende 421 TE: (0351)

Transcripción

1 Importante: Todas las muestras deben conservarse REFRIGERADAS, NO CONGELADAS, y deben ser derivadas inmediatamente al Laboratorio para su oportuno procesamiento. Los resultados de las pruebas de laboratorio deben estar en un lapso no mayor a 24hs de recibida la muestra. Muestras clínicas: Aspirado nasofaríngeo, hisopado nasofaríngeo, hisopado nasal combinado con hisopado faríngeo u otras muestras respiratorias como: aspirado traqueal, lavado bronquial, lavado bronqueo-alveolar, líquido de derrame pleural o biopsias de pulmón. Toma de muestras: La recolección de la muestra debiera ser realizada lo antes posible luego de la aparición de la enfermedad. Es muy importante realizar el manejo y transporte adecuado de la muestra en términos de condiciones y temperatura y bajo medidas de precaución para el manejo de muestras biológicas. El personal de salud encargado de realizar la toma de la muestra, debe colocarse los elementos de protección personal apropiados, antes de proceder a la toma de la misma. 1. Aspirado Nasofaríngeo: Se recomienda en niños pequeños Aspirar las secreciones faringonasales con una sonda nasogástrica conectada a una fuente de succión (bomba de vacío o jeringa de 20 ml). Introducir la sonda en una de las fosas nasales, hasta la pared posterior de la faringe paralelamente al paladar. Activar el vacío y retirar suavemente la sonda con movimiento giratorio. Repetir el procedimiento en la otra fosa nasal (las muestras de ambas fosas nasales se obtienen con la misma sonda). Lavar la sonda con 2 ó 3 ml de medio de transporte para descargar su contenido en un tubo cónico. Este procedimiento final se lleva a cabo en el laboratorio cuando el médico envía directamente al laboratorio la sonda sellada en ambos extremos. 1

2 2. Hisopado Nasal: Se recomienda su uso en adultos Insertar un hisopo seco de poliéster y dacrón en uno de las fosas nasales, paralelamente al paladar; mantenerlo inmóvil por unos segundos y retirarlo suavemente realizando un movimiento rotatorio. Repetir el procedimiento en la otra fosa nasal (las muestras de ambas fosas nasales se obtienen con el mismo hisopo). Inmediatamente después de haber tomado la muestra, introducir el hisopo en el tubo que contiene el medio de transporte (2-3 ml) y cortar el aplicador para poder tapar el tubo (los hisopos siempre deben mantenerse húmedos). En el caso de utilizar sistemas comerciales como Virocult (TM), colocar el hisopo dentro del tubo de manera que quede en contacto con la esponja embebida en el medio de transporte que se encuentra en el fondo del tubo. 3. Hisopado nasal y faríngeo combinados Frotar vigorosamente con un hisopo ambas amígdalas y la faringe posterior y, con otro hisopo, colectar la muestra de la manera ya descripta para el procedimiento en las fosas nasales. Los dos hisopos deberán ser colocados en un tubo cónico de plástico que contenga de 2 a 3 ml de medio de transporte para virus. Cortar el resto de los aplicadores como en el procedimiento anterior. Transporte de las muestras Las muestras deben ser transportadas refrigeradas respetando siempre las normas de bioseguridad. Todas las muestras deben ser correctamente rotuladas y deben incluir la correspondiente ficha epidemiológica. IMPORTANTE: 1- Para los centros que no realizan IF, las muestras deberán remitirse inmediatamente, SIN NINGUN TRATAMIENTO PREVIO, al Laboratorio correspondiente para su oportuno diagnóstico. 2- Para los centros que realizan IF, el ANF debe re suspenderse inicialmente en 2ml de PBS o medio de transporte viral para su posterior procesamiento. De este volumen total de muestra, se debe separar 1ml en un eppendorf estéril (utilizar tips estériles y colocar en recipiente estéril), y conservar a 4ºC para derivar al 2

3 Laboratorio Central en el caso de que la muestra resultara negativa para todo el panel respiratorio o positiva para Influenza, con su correspondiente ficha clínico epidemiológica de Influenza. Con el mililitro restante, se realizará la IF in situ. 3- Las muestras de adultos para realizar PCR (Hisopados nasofaríngeos) enviarlas como habitualmente lo realiza, a través de la Dirección de Epidemiología de la provincia. Métodos: - Inmunofluorescencia Directa: La detección de antígenos virales por inmunofluorescencia es un método virológico rápido que puede distinguir entre 7 virus respiratorios: VSR, ADV, influenza A y B y parainfluienza 1, 2 y 3. - Amplificación de ácidos nucleicos virales: La detección y subtipificación del genoma viral de Influenza A y B se realiza mediante PCR convencional o en tiempo real a partir de muestras respiratorias. Estrategia vigilancia epidemiológica de Infecciones Respiratorias Agudas La vigilancia epidemiológica de Infecciones Respiratorias Agudas incluye en su investigación a las siguientes a patologías: Enfermedad Tipo Influenza (ETI), neumonías, bronquiolitis en menores de 2 años, coqueluche, Infecciones Respiratorias Agudas Graves (IRAG), Infecciones Respiratorias Agudas Graves Inusitadas (IRAGI). La vigilancia epidemiológica de Infecciones Respiratorias Agudas es esencial para la planificación de las actividades de prevención y control, la detección de situaciones epidémicas o de brotes, la determinación de la frecuencia y distribución de los distintos agentes etiológicos virales y bacterianos (con el apoyo del laboratorio) y para la evaluación antigénica y genética de nuevas cepas. Además, permite detectar brotes de enfermedades respiratorias virales inusuales o inesperadas, calcular la carga de la enfermedad en pacientes ambulatorios y hospitalizados, los costos relacionados con la enfermedad, describir la magnitud de las enfermedades respiratorias y la distribución de casos por grupos de edad, tiempo y lugar geográfico, con el objetivo de orientar las políticas para la prevención y control entre ellas la composición de la vacuna de influenza y los grupos prioritarios a vacunar. 3

4 La vigilancia epidemiológica frente a los brotes estacionales de Infecciones Respiratorias Bajas (IRB), nos permite tomar decisiones con respecto a la organización de los servicio (tanto ambulatorios, como de internación). Las infecciones respiratorias agudas (incluyen Enfermedad Tipo Influenza, bronquiolitis en menores de 2 años, coqueluche y neumonías), son eventos de declaración obligatoria, y deben ser notificados por todos los servicios de salud de los diferentes niveles, con los procedimientos de notificación establecidos: para los servicios de atención médica a través del módulo C2 y para los laboratorios a través del módulo SIVILA del Sistema Nacional de Vigilancia de la Salud. Para establecer la vigilancia tanto en los servicios de atención médica de salud, en los laboratorios, como en las unidades centinela, se utilizan definiciones operacionales, que corresponden a la definición de caso. Para las patologías incluidas en la vigilancia de las Infecciones Respiratorias Agudas dichas definiciones se detallan a continuación. Definiciones operacionales: ETI (Enfermedad tipo influenza): Aparición súbita de fiebre superior a 38 C, más tos o dolor de garganta y ausencia de otras causas. Puede acompañarse de mialgias y/o postración. Bronquiolitis en menores de 2 años: Todo niño menor de 2 años, con primer o segundo episodio de sibilancias, asociado a evidencia clínica de infección viral con síntomas de obstrucción bronquial periférica, taquipnea, tiraje, o espiración prolongada, con o sin fiebre. Neumonía: Enfermedad respiratoria aguda febril (> 38 ) con tos, dificultad respiratoria y taquipnea. IRAG (Infección respiratoria aguda grave) (Para individuos de cinco y más años): todo paciente con infección respiratoria aguda que requiere internación. Comprende diferentes cuadros de enfermedad respiratorias entre los que se encuentra la Enfermedad Tipo Influenza y la Neumonía. IRAGI (Infección respiratoria aguda grave inusitada) todo paciente entre los 5 y 64 años, previamente sano, sin factores de riesgo, con infección respiratoria aguda grave. 4

5 La vigilancia epidemiológica de Infecciones Respiratorias Agudas en Unidades Centinela Las Unidades Centinela están integradas por tres componentes: epidemiológico, clínico y de laboratorio, que cumplen funciones específicas en relación con la recolección, el análisis y la difusión de información. La vigilancia centinela se realiza a través de la notificación por médicos centinelas (MC) y Hospitales Centinela, quienes informan incidencia de Enfermedad Tipo Influenza (ETI), neumonías, entre los pacientes y toman muestras para diagnóstico de virus influenza y otros virus respiratorios, gérmenes comunes, M. pneumoniae, Chlamydophila spp. que son analizadas por el laboratorio de la unidad centinela y el Laboratorio Nacional de Referencia (LNR). La información recolectada y procesada por los médicos y hospitales centinela y el LNR, es incorporada al módulo UC de Influenza del SNVS. El sistema de vigilancia centinela, mejora el sistema de vigilancia mediante la obtención más rápida de los datos y el agrupamiento, la interpretación y la difusión de datos más específicos y completos. Además, permite la confirmación de laboratorio de un número determinado de casos elegidos sistemáticamente. Criterio de Inclusión: Todo paciente atendido de forma ambulatoria que cumpla con la definición de caso clínico de ETI con menos de 72 horas de iniciado los primeros síntomas. Tamaño de la muestra: Se debe seleccionar un número de Casos de ETI previamente fijado para cada Centro Centinela por semana epidemiológica acorde con los recursos existentes, entre los que se destacan: Insumos y/o reactivos limitados y/o equipamiento Recursos para bioseguridad para el MC y para el traslado de las muestras Existencia de condiciones para guardar muestras el fin de semana, etc. Horarios con RRHH con capacidad para tomar, recibir y procesar las muestras 5

6 Tipo de Muestreo: Se recomienda el muestreo sistemático por cuotas, el cual dependerá, en primer lugar de las capacidades del laboratorio utilizado por la Centro Centinela y del análisis de la situación epidemiológica, como puede ser el alza estacional en el invierno o la presencia y circulación de una nueva cepa potencialmente pandémica. 6