Validación de métodos en microbiología industrial y ambiental a la luz de la ISO 17025

Transcripción

1 Validación de métodos en microbiología industrial y ambiental a la luz de la ISO 17025

2 Dios mío nos llego la auditoría!! 2

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4 5.4.5 VALIDACIÓN DE LOS MÉTODOS La validación es la confirmación, a través del examen y el aporte de evidencias objetivas, de que se cumplen los requisitos particulares para un uso especifico previsto.

5 Qué se valida? Los métodos no normalizados Los métodos que diseña o desarrolla. Los Métodos normalizados En el caso en que utilice métodos oficiales, métodos normalizados o métodos de organismos nacionales o internacionales reconocidos, o basados en ellos, antes de analizar cualquier muestra, los laboratorios deberán verificar su capacidad para cumplir de forma satisfactoria todos los requisitos establecidos en dichos métodos

6 METODO NORMALIZADO METODO NO NORMALIZADO Método analítico: Desarrollado por un organismo de normalización u otro organismo reconocido cuyos métodos son generalmente aceptados por el sector técnico correspondiente. Método analítico: Desarrollado por un tercero o que ha sido adaptado por el laboratorio a partir de un método normalizado. (Ref. ILAC-G18). (Ref. ILAC-G18).

7 El laboratorio que va a utilizar un método normalizado debe verificarlo contra sus especificaciones de validación, atendiendo los requisitos para el aseguramiento de la calidad, y no necesita validarlo. METODO NORMALIZADO El laboratorio que va a modificar un método normalizado debe revalidarlo para demostrar que las especificaciones del método original no se ven afectadas por la modificación introducida. CAMBIO MENOR CAMBIO MAYOR

8 El laboratorio debe validar todos los métodos que utiliza para confirmar que son aptos para el fin previsto. La validación debe ser tan amplia como sea necesario para satisfacer las necesidades de aplicación. Se debe registrar los resultados obtenidos, el procedimiento utilizado para la validación y una declaración sobre la aptitud del método para el uso previsto.

9 CUANDO REVALIDAR UN METODO

10 Definir los requerimientos analíticos Como VALIDAR UN METODO Planeación y y ejecución de ensayos Emplear los datos Análisis estadístico Comparación con requisitos de uso previsto GENERAR EL INFORME DONDE SE DECLARE EL CANCE DE LA VALIDACION Y SU ACPETACION

11 MUY IMPORTANTE!!! NO EXISTE UNA RECETA, FORMULA O PROTOCOLO GENERAL PARA VALIDAR UN METODO ANALITICO SOLO LINEAMINETOS GENERALES O GUIAS!!!!

12 BASADOS EN EVIDENCIA EJEMPLO : CALIDAD EN AGUA ISO/TR 13843:2000

13 CONDICIONES DE ACEPTACIÓN CONDICIONES QUE EL METODO DEBE CUMPLIR PARA SER VÁLIDO DEFINIDAS POR EL CLIENTE DEFINIDAS POR EL MISMO METODO ESTANDAR DEFINIDAS POR EL MISMO LABORATORIO

14 Análisis de la información Generación del concepto A P Definir los Métodos a validar Las matrices Establecer el protocolo Asignar responsables Fechas de ejecución Asignación de recursos V H Manejo estadístico de los datos Ej Ejecución del Protocolo Obtención recolección y tabulaciones los datos

15 TIPOS DE VALIDACION VALIDACION PRIMARIA ESTABLECE MANUFACTURA GRUPOS CIENTIFICO ESPECIFICACIONES NUMERICAS Y DESCRIPTIVAS VALIDACION SECUNDARIA VERIFICA USUARIO DEL METODO REUNE EVIDENCIA OBJETIVA DE CUMPLIMIENTO

16 ESPECIFICACIONES DE DESEMPEÑO PRECISION CONCORDANCIA CONDICIONES (r) Repetibilidad (R) Reproducibilidad ERROR ALEATORIO DS DSR CV% EXACTITUD CORRESPONDENCIA METODO DE REFERENCIA % RECUPERACION RESPUESTA METODO EN ESTUDIO MUESTRAS IDENTICAS

17 ESPECIFICACIONES DE DESEMPEÑO ROBUSTEZ INSENSIBILIDAD FRENTE AL CAMBIO SELECTIVIDAD DIFERENCIA DE SEÑALES INTERFERENCIAS

18 ESPECIFICACIONES DE DESEMPEÑO SENSIBILIDAD VP MUESTRAS ADICIONADAS CON LA CEPA PURA ESPECIFICIDAD VN MUESTRAS BLANCO

19 TABLAS DE 2 X 2

20 ESPECIFICACIONES DE DESEMPEÑO INCERTIDUMBRE (U) TIPO A TIPO B ESTANDAR O TIPICA RELATIVA COMBINADA EXPANDIDA RELACION DE EXACTIUTD

21 OTROS : INTERVALO DE VALIDACION ININTERVALO DE CONCENTRACION OPTIMO PARA LA VALIDACION INTERVALO DE CONCENTRACION PARA LA APLICACION CUANTITATIVO CUALITIATIVO INTERVALO DE RECUENTOS CONFIABLES PRESENCIA AUSENCIA DETECTORES SOLIDO LIQUIDO

22 OTROS : CONTROL DE CALIDAD CONTROL DE CALIDAD INTERNO CEPAS ATCC : evidencia de recuperación R Y r : duplicados precisión GRAFICOS DE CONTROL ESQUEMA DE EVALUACION EXTERNO PRUEBAS DE APTITUD API ERA PICAP

23 PREMISAS Analito Microbiológico VIVO VARIABLE DISCRETA Interacciones del detector Medio liquido Medio solido Cohabitación por micro flora en el mismo tubo Apiñamiento enmascaramiento

24 PREMISAS ESTRESS BIOLOGICO ESTRESS TERMICO ROBUSTEZ EFECTOS DE MATRIZ COMPOSICION DE LA FLORA MICROBIANA DE LA MUESTRA CALIDAD DE LOS SUBSTRATOS IDONEIDAD DE LOS ANALISTAS

25 PREMISAS VARIACION 1.MUESTRAS: MATRIZ PROPIEDADES FISICOQUIMICAS Y SU FLORA MICROBIANA 2.EL TALENTO HUMANO (PERSONAL) 3.PREANALITCA : PREPARACION DE LA MUESTRA, ALMACENAMIENTO REFRIGERACION, HOMEGENIZACION 4.CONDICIONES DE INCUBACION: TEMPERATURA, TIEMPO, HUMEDAD, ATMOSFERA, 5. MEDIO DE DETECCION Liquido / solido

26 PREMISAS LA VARIACION ESTADISTICA BASICA DE LOS RECUENTOS PUEDE MODELARSE MATEMATICAMNTE POR DISTRIBUCION DE POISSON En medios líquidos NMP, factor e dilución número de tubos, se puede trabajar con la formula de COCHRAN Se pueden realizar transformación logarítmicas y trabajar con estadística paramétrica, media, DSR,

27 PREMISAS LA VALIDACION DEBE SIMULAR LA RUTINA TANTO COMO SEA POSIBLE LAS MUESTRAS NATURALES CONSTITUYEN EL MATERIAL DE ENSAYO OPTIMO METODO VALIDO MEJOR RECUPERACION MENOR % FP MENOR % FN

28 MUESTRA S LAS MUESTRAS NATURALES CONSTITUYEN EL MATEIRAL DE ENSAYO OPTIMO MATERIAL DE REFERENCIA CERTIFICADO MUESTRAS ADICIONADAS MUESTRAS BLANCO ( MUESTRAS NATURALES QUE NO CONTENGAN EL ANALITO OBJETO FP

29 NUMERO DE MUESTRAS SUFICIENTE REPRESENTATIVO CONVINCENTE ESTADISTICA PARAMETRICA

30 CARACTERISITCAS DEL DESEMPEÑO QUIMIOMETRICAS PRECISION RECUPERACION LIMITE DE DETECCION LIMITE DE CUANTIFICACION SELECTIVIDAD SENSIBILIDAD ESPECIFICIDAD ESPECIFICACIONES EXPRESION NUMERICA

31 ESPECIFICACIONES DESCRIPTIVAS ESPECIFICACIONES Identificación morfológica del objeto Declaración de temperatura de incubación Tiempo, gas, humedad Medios de cultivo : características, Ph, Limites de trabajo Expresión de la incertidumbre

32 LIMITE DE DETECCION LOD

33 LoD LIMITE DETECCION P/A CUALITATIVO P/A PROBABILIDAD DE TENER UN RESULTADO POSITIVO CUANDO ESTAMOS FRENTE A UNA DITRIBUCION DE POISSON P(+) = 1 e -m RECUENTO Es la concentración en la cual el método tiene la probabilidad de detectar la presencia del analito con un nivel de confianza del 95 %

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35 TEST DE RECUPERACION RECOVERY TEST

36 METODO QUE PROPORCIONA RESPUESTAS PARA UN NUMERO DE COMPUESTOS QUIMICOS QUE PUEDEN O NO DISTINGUIRSE SI LA REPUESTA ES DISTINGUIBLE EL METODO ES SELECTIVO SELECTIVIDAD

37 ESPECIFICIDAD METODO QUE PROPORCIONA UNA RESPUESTA PARA UN SOLO ANALITO METODO QUE REPONDE UNICAMANTE AL ANLITO EN ESTUDIO

38 VERIFICACIÓN DE LA INCERTIDUMBRE FRENTE A LA TOLERANCIA ESPECÍFICA DE LOS MÉTODOS DE ENSAYO DE ACUERDO A LA MATRIZ EMPLEADA

39 INFORME DE VALIDACION OBJETIVO ALCANCE TRAZABILIDAD DE EQUIPOS DETALLES DE INSUMOS REACTIVOS, MATERIALES DE REFERENCIA DURACION DEL ESTUDIO ACONDIONAMIETO DE LA MUESTRAS CONDICIONES AMBIENTALES DE OPERACIÓN PARAMETROS DE VALIDACION EVALUADOS PROTOCOLO DE EVALUACION RESULTADOS Y GRAFICOS ANALIS DE LOS DATOS INCERTIDUMBRE PERSONAS QUE PARTICIPARON CRITERIOS DE ACPTACION RECHAZO CRITERIOS DE REVALIDACION

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