Verificación de Técnicas Analíticas Caso de Aplicación

Agenda Introducción Conceptos Generales Caso de Aplicación Conclusiones

Introducción Validación de Métodos Estudios de evaluación que se realizan para determinar si un ensayo cumple con los requerimientos de calidad del usuario (laboratorio) Evaluación n de errores. Empleo de herramientas estadísticas. sticas. Magnitud del error Utilidad clínica del resultado TE TE a

Introducción Validación n Analítica de Métodos Control de Calidad

Introducción En los laboratorios es una práctica frecuente efectuar control de calidad Por qué? Asegurar la utilidad clínica de los resultados. Qué controlamos? La estabilidad del sistema analítico.

Introducción Control de Calidad Qué voy a controlar? Estabilidad del sistema analítico Para poder controlar algo, primero debo conocerlo!!!! Cómo puedo conocer el desempeño del método en condiciones estables? Validación n analítica de métodosm

Introducción Un proceso de control de calidad arbitrariamente asignado no nos asegura que nuestro laboratorio cumpla con los requerimientos de calidad establecidos Objetivo Principal del Laboratorio Resultados Clínicamente útiles

Conceptos Generales Necesidad Selección del Método Requerimientos de Calidad Evaluación del Método Desarrollo del Método Implementación Mantenimiento Muestra Análisis Control de Calidad Tietz Textbook of Clinical Chemistry Informe de resultados

Conceptos Generales Claves para la validación n de métodosm 1) Definir los Requerimientos de Calidad (TEa). 2) Seleccionar los experimentos apropiados para detectar los distintos tipos de error. 3) Juntar los datos experimentales. 4) Aplicar los operadores estadísticos apropiados. 5) Comparar el TE (error total) con el TEa (error máximo tolerable) establecido previamente como requerimiento de calidad. 6) Juzgar la aceptabilidad del método considerando su desempeño.

Conceptos Generales TE < TEa TE: Error Total TEa: Error Máximo Tolerable

Error Total El TE por sís solo no nos dice si los resultados cumplen con los requerimientos de calidad. Para lograr esa información debo definir previamente los requerimientos de calidad. (TEa) Conceptos Generales Performance Driven Quality Control Zoe C Brooks

Caso de Aplicación Recuento de Glóbulos Blancos Contador Hematológico Sysmex XT 1800i Uso de reactivos recomendados por el fabricante del instrumento

Caso de Aplicación: TEa Definir los Requerimientos de Calidad (TEa)

Caso de Aplicación: TEa Requerimientos de Calidad Buscar los requerimientos de calidad disponibles para el recuento total de glóbulos blancos, considerando el uso previsto del ensayo en el laboratorio. Laboratorio privado que atiende pacientes ambulatorios.

Caso de Aplicación: TEa De dónde d obtengo esta información? n? Literatura Páginas web www.westgard.com www.dgrhoads.com

Caso de Aplicación: TEa Qué criterio debo elegir? Considerar el uso previsto del ensayo. Considerar la jerarquía de los requerimientos de calidad. Aplicar algoritmos.

Caso de Aplicación: TEa 1) Requerimientos Médicos. 2) Variabilidad Biológica. 3) Intervalos de Referencia. 4) Requerimientos Regulatorios (Ej. CLIA 88 ). 5) Error Alcanzable EQAs o PT (resultados por grupo). SD del proceso. CLSi (NCCLS) EP 21. 6) Especificaciones del fabricante para el método.

Caso de Aplicación: TEa www.westgard.com

Caso de Aplicación: TEa Calcular el Mínimo TEa y el Máximo TEa. Mínimo: 3 * SD 0 CV del proceso Máximo: CLIA 88 (Cómo máximo se emplea un TEa regulatorio) Seleccionar el TEa a partir de la fuente de mayor jerarquía disponible. Si el TEa seleccionado se encuentra entre el máximo y el mínimo utilizarlo. Si es menor que el mínimo, emplear el mínimo. Si es mayor que el máximo, emplear el máximo. www.dgrhoads.com

Caso de Aplicación: TEa Mínimo Nivel de decisión Médica: 2,90 x10 3 /mm 3 SD: 0,09 x10 3 /mm 3 CV: 3,1% 3*CV= 9,3% Máximo CLIA: 15% Mayor Jerarquía Variabilidad Biológica: 14,6 % 9,3 Mínimo 14,6 < < VB 15 Máximo

Caso de Aplicación: TEa CLIA VB 3*CV Niveles de decisión Médica 0.5 x10 3 /mm 3 3.0 x10 3 /mm 3 12.0 x10 3 /mm 3 30.0 x10 3 /mm 3 EP Evaluator R8

Caso de Aplicación Seleccionar los experimentos apropiados para detectar los distintos tipos de error Juntar los datos experimentales Aplicar los operadores estadísticos sticos apropiados

Caso de Aplicación Premisas: Contamos con documentos actualizados que describen los protocolos a emplear durante la evaluación del ensayo. Contamos con un plan para la evaluación. Existe una validación previa realizada por el fabricante del reactivo en el instrumento que vamos a emplear.(verificación ó Validación) Contamos con manual del instrumento con las especificaciones de desempeño del ensayo.

Caso de Aplicación: Rango Reportable Documentos externos Manual del Operador del instrumento. Inserto del calibrador. Certificado de trazabilidad e incertidumbre del calibrador. Inserto del material a emplear en el ensayo de linealidad. (opcional)

Caso de Aplicación: Rango Reportable Rango Reportable: 0 310.0 x 10 3 /mm 3

Caso de Aplicación: Rango Reportable

Caso de Aplicación: Linealidad/ Rango Reportable EP Evaluator R8

Caso de Aplicación: Linealidad Acotada EP Evaluator R8

Caso de Aplicación: Background Experimento Desarrollo: Se ensaya el diluyente recomendado por el fabricante 10 veces. Se verifica que los resultados sean menores al límite de fondo especificado por el fabricante.

Caso de Aplicación: Precisión Precisión Analizo la información provista por el fabricante en el manual del instrumento.

Caso de Aplicación: Precisión Veo que el fabricante ha establecido el perfil de precisión empleando el protocolo EP 5 de la CLSi. Decido emplear el protocolo EP 15 A2 de la CLSi, que es el que se recomienda para verificación, cuando los datos de referencia son generados por el EP 5.

Caso de Aplicación: Veracidad Exactitud/Veracidad Busco la posibilidad de realizar la comparación frente a un método de referencia. dentro del laboratorio fuera del laboratorio control de calidad externo programa interlaboratorio Busco la posibilidad de contar con materiales de referencia. Analizo las posibilidades.

Caso de Aplicación: Veracidad Decido emplear material de referencia (controles de veracidad) con el protocolo EP 15 A2.

Caso de Aplicación: Veracidad Busco el reporte del programa interlaboratorio. Laboratorio Dr. House

Caso de Aplicación: Precisión n y Veracidad Verificación n de Precisión n y Veracidad A partir del mismo protocolo puedo verificar precisión y veracidad. Planifico el diseño para un mejor aprovechamiento del protocolo. Preparo las planillas de Excel para procesar los datos. Selecciono las especificaciones a emplear.

Caso de Aplicación: Precisión n y Veracidad Esquema: Selecciono 2 ó3 materiales de referencia con concentraciones próximas a niveles de decisión médica. Proceso los 2 ó3 materiales por triplicado durante 5 días. Durante los 5 días que dura el protocolo continúo con el esquema de calibraciones, y corro los controles normalmente.

Caso de Aplicación: Precisión n y Veracidad

Caso de Aplicación: Precisión n y Veracidad Sa= SDg Ng

Caso de Aplicación: Precisión n y Veracidad

Caso de Aplicación: Precisión n Simple a Concentración n Baja EP Evaluator R8 SD: 0.009 x 10 3 /mm 3 CV: 0.9% Media: 0.997 x 10 3 /mm 3

Caso de Aplicación: Precisión n Simple a Concentración n Baja EP Evaluator R8

Caso de Aplicación: Comparación n de Métodos Selecciono 20 muestras de pacientes que cubran el rango reportable del ensayo de manera homogénea. Proceso 4 muestras por día en paralelo por los dos métodos a evaluar. Verifico diariamente la presencia de datos aberrantes. La diferencia en tiempo entre el procesamiento de las muestras por uno y otro método no supera la 2 horas. Proceso los datos y evalúo las diferencias obtenidas.

Caso de Aplicación: Comparación n de MétodosM EP Evaluator R8

Caso de Aplicación: Comparación n de MétodosM Comparar el TE (error total) con el Tea (error máximo tolerable) establecido previamente como requerimiento de calidad Juzgar la aceptabilidad del método considerando su desempeño

Caso de Aplicación: Comparación n de MétodosM Evaluación n del desempeño o del MétodoM todo Considero el requerimiento de calidad establecido. Tomo los datos del estudio de precisión. Tomo los datos del estudio de verificación de veracidad. Tomo herramientas de la Web. (www.westgard.com) Analizo los datos.

Caso de Aplicación: Desempeño o del Método M Test or Analyte WBC Low Analyst Dr House Methodology Sysmex XT 1800i Date 23/03/2008 Quality Requirement Sigma Limits s Allowable Total Error 14,6 6 2,43 Offset 0,0 5 2,92 Method Performance 4 3,65 Bias (% diff) 2,8 3 4,87 Imprecision (% CV) 2,4 2 7,30 Sigma Metric 4,9 Vectors 6 Sigma 0 14,6 0 0 2,43 0 0,00 0 5 Sigma 0 14,6 0 0 2,92 0 0,00 0 4 Sigma 0 14,6 0 0 3,65 0 0,00 0 3 Sigma 0 14,6 0 0 4,87 0 0,00 0 2 Sigma 0 14,6 0 0 7,30 0 0,00 0 www.westgard.com

Caso de Aplicación: Desempeño o del Método M Test or Analyte WBC Normal Analyst Dr House Methodology Sysmex XT 1800i Date 23/03/2008 Quality Requirement Sigma Limits s Allowable Total Error 14,6 6 2,43 Offset 0,0 5 2,92 Method Performance 4 3,65 Bias (% diff) 1,9 3 4,87 Imprecision (% CV) 1,3 2 7,30 Sigma Metric 9,8 Vectors 6 Sigma 0 14,6 0 0 2,43 0 0,00 0 5 Sigma 0 14,6 0 0 2,92 0 0,00 0 4 Sigma 0 14,6 0 0 3,65 0 0,00 0 3 Sigma 0 14,6 0 0 4,87 0 0,00 0 2 Sigma 0 14,6 0 0 7,30 0 0,00 0 www.westgard.com

Caso de Aplicación: Desempeño o del Método M Test or Analyte WBC High Analyst Dr House Methodology Sysmex XT 1800i Date 23/03/2008 Quality Requirement Sigma Limits s Allowable Total Error 14,6 6 2,43 Offset 0,0 5 2,92 Method Performance 4 3,65 Bias (% diff) 0,4 3 4,87 Imprecision (% CV) 1,9 2 7,30 Sigma Metric 7,5 Vectors 6 Sigma 0 14,6 0 0 2,43 0 0,00 0 5 Sigma 0 14,6 0 0 2,92 0 0,00 0 4 Sigma 0 14,6 0 0 3,65 0 0,00 0 3 Sigma 0 14,6 0 0 4,87 0 0,00 0 2 Sigma 0 14,6 0 0 7,30 0 0,00 0 www.westgard.com

Caso de Aplicación: V.I.R. Verificación n de Intervalos de Referencia Verifico el intervalo de referencia del Laboratorio. En nuestro laboratorio el valor vigente difiere levemente del propuesto por el fabricante. Laboratorio IR Pacientes Adultos: 4 a 11 x 10 3 /mm 3 Manual del instrumento

Caso de Aplicación: V.I.R. Selecciono 20 pacientes normales. Proceso los 20 pacientes seleccionados. Comparo la distribución obtenida con la propuesta. Máxima desviación permitida: 10 %

Caso de Aplicación: V.I.R. EP Evaluator R8

Caso de Aplicación: V.I.R. La implementación del ensayo comprende las siguientes etapas: Redactar los procedimientos y procesos relacionados con el ensayo e incorporarlos al sistema de gestión de calidad. Preparar material de entrenamiento para el personal que realizará el ensayo y efectuar la capacitación correspondiente. Planificar los procedimientos de control de calidad en base a los datos de desempeño obtenidos durante la validación del ensayo. Implementar los procedimientos de control de calidad. Monitorear cuidadosamente el desempeño del ensayo durante los primeros meses para identificar posibles errores. Una vez descubiertos los errores, aplicar medidas correctivas.

Conclusiones Resultados de Pacientes La validación de métodos es el punto de partida para lograr resultados de alta calidad. Las validaciones analíticas deben llevarse a cabo sobre instrumentos calificados. La validación de métodos analíticos forma parte del proceso de planificación de la calidad que da comienzo al circuito de gerenciamiento de la calidad.

Conclusiones El nuevo método cumple con los requerimientos de calidad establecidos por el laboratorio de acuerdo a su uso previsto. Los datos de la verificación analítica se emplearán en la planificación del control de Calidad Interno. El seguimiento del desempeño del método se complementará con un esquema interlaboratorio y un control de calidad externo.

MUCHAS GRACIAS!