Historia del microscopio

La resolución y el aumento Con lentes adecuadas podemos conseguir muchos aumentos y ver imágenes cada vez más grandes. Pero esto sirve de poco si no conseguimos ver más detalles en la imagen, y esto depende del poder de resolución del microscopio. El poder de resolución es la capacidad que tiene el instrumento de observación para poder distinguir dos puntos que están muy próximos: cuanto más juntos estén y los veamos como puntos distintos, mayor será la resolución del instrumento. Esto es resolución Esto es aumento Cálculo: Aumentos objetivo x Amentos ocular Los dos puntos de arriba dibujados en la imagen están separados por menos de 0,1 mm (100 µm); los de abajo por más de 0,1 mm. Con nuestros ojos sólo vemos un punto en el cuadro superior porque el poder de resolución del ojo humano está por encima de los 0,1 mm. Si miras a través de una lupa o un microscopio óptico percibirás dos puntos separados porque el poder de resolución de un microscopio óptico es de 0,2 µm (0.0002 mm) Lo que aparentemente es una línea, visto con un microscopio de poco poder de resolución aparece como una línea más gruesa de contornos difusos. Con mayor poder de resolución resulta ser una línea doble de contornos bien definidos.

La resolución y el aumento Microscopio óptico y ojo humano El microscopio óptico puede lograr hasta 1000 aumentos. Para calcular el valor del aumento se multiplican los aumentos del objetivo por los aumentos del ocular El poder de resolución del ojo humano es de 0,1 mm (100 µm): dos puntos separados una distancia menor de 0,1 mm nuestro ojo los ve como un solo punto. Para poder velos como dos puntos separados tienen que estar separados una distancia igual o mayor de 0,1 mm. El poder de resolución del microscopio óptico es de 0,2 µm: dos puntos separados una distancia menor de 0,2 µm con el microscopio óptico los vemos como un solo punto. Para poder velos como dos puntos separados con el microscopio óptico tienen que estar separados una distancia igual o mayor de 0,2 µm. Por tanto, el poder de resolución del microscopio óptico es 500 veces superior al del ojo humano. Resolución ojo humano Resolución mic. óptico 100 μm 0,2 μm 500 Aumentos conseguidos

Tipos de microscopios Para observar las células y los tejidos, los científicos emplean dos tipos de microscopios que se diferencian en su resolución y en su capacidad de aumento: Microscopio óptico: Contiene un conjunto de lentes (objetivos y oculares) que aumentan la imagen de la muestra cuando ésta es atravesada por la luz. Normalmente es necesario teñir la muestra, pero algunas técnicas permiten la observación in vivo. Consigue hasta 1000 aumentos y tiene un poder de resolución de 0,2 µm. Permite observar material vivo: microscopio de contraste de fase; microscopio de fondo oscuro. La imagen se puede observar en colores, que dependen de la tinción de la muestra. Hay distintos tipos: de campo claro, de campo oscuro, de fluorescencia, de polarización, etc. Microscopio electrónico: Es un dispositivo que utiliza un haz de electrones que dirigen o focaliza con electroimanes sobre una muestra. Consigue de 500 000 a 1000 000 de aumentos y un poder de resolución de 0,0004 µm = 0,4 nm (500 superior al del m. óptico) No permite observar material vivo. No muestra imágenes en color, aunque actualmente se procesan informáticamente y se pueden colorear. Existen dos tipos básicos: los microscopios electrónicos de transmisión (MET), con los que se obtienen imágenes en dos dimensiones, y los microscopios electrónicos de barrido (MEB), que permiten obtener imágenes en tres dimensiones. El poder de resolución del microscopio óptico es de 0,2 µm y el del microscopio electrónico de de 0,0004 µm. Por tanto, el poder de resolución del microscopio electrónico es 500 veces mayor que el del microscopio óptico. Resolución mic. óptico 0,2 μm Resolución mic. electrónico 0,0004 μm 500

Tipos de microscopios Imágenes en microscopio óptico o electrónico

Microscopio óptico Utiliza luz transmitida: la luz parte de la fuente luminosa, es concentrada (condensador), atraviesa la muestra y llega al ojo a través de lentes (objetivo y ocular) El objetivo funciona como una cámara fotográfica y el ocular como una lupa; la imagen nos llega invertida. Alcanza unos 1000 aumentos. Su máximo poder de resolución es de 0,2 (el ojo humano lo tiene de 0,1 mm = 100 ) El microscopio de contraste de fase y el de campo oscuro son variantes que permiten observar en fresco las células o tejidos.

Microscopio óptico. Variantes.

Microscopio electrónico Un haz de electrones sustituye a la luz. Pueden lograrse aumentos de un millón de veces, con una resolución 500 veces superior a la del microscopio óptico. De transmisión (MET): Los electrones viajan por una columna (al vacío) guiados por bobinas electromagnéticas. Los que consiguen atravesar partes de la muestra (teñida con metales pesados) llegan a una pantalla fluorescente (iluminada), los que no al llegar dan un efecto sombra (negro) en la pantalla fluorescente. El grosor de la muestra ha de ser inferior a 0,5 mm. Debido a los tratamientos de la muestra sólo se pueden observar materiales muertos. De barrido (MEB): Los electrones no atraviesan la muestra; ésta se recubre de una capa de algún metal pesado y es barrida por los electrones, que rebotan, produciendo una imagen en relieve (zonas brillantes y oscuras que componen una imagen de aspecto tridimensional). Se detectan detalles superficiales pero no internos de las muestras que no se cortan y están enteras. Se obtienen menos aumentos (hasta 20 000) y menos resolución que con el MET. Imágenes de una gran calidad tridimensional. Microscopio electrónico de transmisión (MET) Microscopio electrónico de barrido (MEB)

Comparativa de los microscopios

Qué tipo de microscopio se ha utilizado?