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1 DESARROLLO EMBRIONARIO Y LARVAL DEL MOLUSCO BIBALVO Pinna rugosa SOWERBY, 1835 CON FINES DE PRODUCCION DE SEMILLA DE CALIDAD. XX CONGRESO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGIA DEL MAR. Blas García Castañeda José Luis García Corona y Rosa Blanca González Chan. Cabo San Lucas, B.C.S; 01 al 04 de Octubre de 2013.

2 INTRODUCCIÓN Pinna rugosa, hacha larga o callo de hacha, es un molusco bivalvo que se distribuye en ambos litorales de la Península de Baja California. Esta especie representa una de las pesquerías más importantes en Baja California Sur y el litoral Mexicano. Sin embargo, se sabe muy poco sobre su desarrollo embrionario (etapa crucial y crítica en el desarrollo de este organismo), información muy valiosa que podría ser utilizada en un posible cultivo, para desarrollar técnicas que permitan la producción de semilla de calidad y por ende la recuperación de las poblaciones.

3 OBJETIVOS GENERAL Contribuir al conocimiento sobre el manejo reproductivo del molusco bivalvo Pinna rugosa. ESPECÍFICOS: Inducir el desove artificial del molusco bivalvo Pinna rugosa y realizar la descripción de su desarrollo embrionario y larval. Definir las mejores técnicas y condiciones ambientales para el cultivo de embriones y larvas de P. rugosa en condiciones de laboratorio para producir semilla de calidad.

4 MATERIAL Y MÉTODOS Captura y tratamiento previo Extracción de organismos reproductores del medio natural; Bahía de La Paz, B.C.S mediante buceo SCUBA y LN ; y LW. En el laboratorio de acuacultura de la UABCS, los ejemplares fueron limpiados y colocados en recipientes de PVC de 20 L en agua marina esterilizada con aireación constante a una temperatura de 22 C.

5 Inducción al desove artificial Se sometió a 8 individuos (6 y 2 ) a choques térmicos incrementando la temperatura a 30 C, para posteriormente bajarla y mantenerla en 22 C durante 30 minutos. Se repitió dos veces el mismo proceso, para después mantener la temperatura en 27 C hasta que se produjera el desove.

6 Cultivo embrionario experimental Se paso por tamiz (30μm ) el agua que contenía las células fecundadas, lavándolas con agua marina a 22 C (previamente esterilizada con rayos UV), se colocaron en tanques para su desarrollo hasta larva véliger (Larva D). Los embriones fueron transportados a nuevos recipientes ( larvas/l aprox.) a 28 C y aireación continua suave.

7 Desarrollo embrionario y Calidad de agua Se realizaron observaciones de los embriones en desarrollo al microscopio óptico compuesto cada 10 min. Se llevó a cabo el monitoreo y control constante (cada 30 min) de parámetros FQ como temperatura, salinidad, ph y O2.

8 T C RESULTADOS Los desoves inducidos artificialmente fueron satisfactorios, ya que la densidad de células sexuales/ml fue muy alta (aprox. 350 cels/ml). Los parámetros fisicoquímicos monitoreados durante el experimento se mantuvieron en valores relativamente constantes, sobre todo la S /oo y ph (con valores de 35 ppm y 7.9, respectivamente), sin embargo, durante las etapas de gastrulación y metamorfosis larval se noto un decremento en cuanto a la [O 2 ] :53 15:10 15:55 16:10 16:20 16:37 17:14 17:30 19:26 00:17 02:47 07: T C O₂ [mg/l] Tiempo del experimento en horas

9 El desarrollo embrionario y larvario de P. rugosa se completo con una supervivencia de 53% en un lapso de 18 hrs bajo condiciones controladas de laboratorio. Ovocitos Fertilización Fecundación 1 División División 3 División Morula 455 Blástula Gástrula Larva Trocófora Larva Véliger Desarrollo embrionario de Pinna rugosa (Tiempo en minutos)

10 Fase de desarrollo Observaciones Figura Ovocitos vírgenes Células grandes y redondas. Con regular cantidad de vitelo (mesolécitos). Fertilización Formación de un cono de atracción (indicador de que se ha llevado a cabo la fertilización y que el ovulo ha sido activado para iniciar el desarrollo embrionario). Fecundación Liberación de cuerpos polares (indicador de la unión de los núcleos de los gametos o anfimixia). Segmentación 1 División Los dos blastómeros resultantes poseen tamaños similares (no idénticos). El plano de la 1er división de segmentación coincide con el eje animal-vegetal (meridional).

11 Fase de desarrollo Observaciones Figura Segmentación 2 División Cuatro células como resultado de la 2da división mitótica. El plano de segmentación es latitudinal perpendicular al anterior y divide al huevo en mitad animal y mitad vegetal. Segmentación 3 División Mórula Ocho células como resultado de la 3er mitosis. Los blastómeros mantuvieron su tamaño. El plano de división en esta etapa fue ecuatorial. Forma similar a una frambuesa, característica dada por el gran número de blastómeros. Se mantuvo casi el mismo tamaño de la célula huevo (cigoto). Blástula Esteroblástula caracterizada por la presencia de una cavidad (blastocele) y blastodermo

12 Fase de desarrollo Observaciones Figura Gastrulación El embrión sufre una serie de movimientos morfogenéticos (Epibolia) para reacomodar las partes jóvenes que originan la presencia de nuevas estructuras (blastoporo y arquénteron). Larva trocófora Larva con simetría bilateral. Flagelos formando penachos apicales. Formación del cinturón ciliar (prototroca y metatroca). Movimientos rápidos y estables. Larva Véliger (Larva D) Larva de simetría bilateral. Presencia de un pie diminuto, dos pequeñas valvas traslucidas y órganos internos en pleno desarrollo al interior (desarrollo de manto y masa visceral).

13 DISCUSIÓN En este estudio el desarrollo embrionario de P. rugosa se completó en 18hrs, lo cual es muy diferente a la de otros moluscos bivalvos (Robles Mungaray, 2004); P.ej: el desarrollo embrionario y larvario de la almeja catarina (Argopecten circularis) se completa en un periodo de 22-25hrs (Monsalvo Spencer, 1997). En el caso del callo de hacha se reporta una mortalidad de hasta el 90% durante el cultivo larvario en la mayoría de los cultivos experimentales (Robles- Mungaray, 2004); mediante las técnicas utilizadas en el presente estudio, la tasa de mortalidad se redujo al 53%.

14 CONCUSIONES La producción de larva y semilla de hacha larga P. rugosa es muy diferente a la de otros moluscos bivalvos, siendo esta especie en la que se presenta una de las menores tasas de sobrevivencia durante su producción en laboratorios. El enfoque del estudio está encaminado a reducir las altas tasas de mortalidad que se presentan en los laboratorios de producción de esta especie durante su desarrollo embrionario. Dado la importancia comercial del recurso, resulta relevante realizar estudios, que se enfoquen en la descripción del desarrollo embrionario de esta y otras especies de moluscos bivalvos con el fin de intervenir en su manejo y desarrollar técnicas acuaculturales que permitan la producción de semilla de calidad.

15 Ing. Blas García Castañeda Depto. de Acuacultura Centro de Estudios Tecnológicos del Mar No. 12 Manzanillo, Col. Tels. +52 (314)

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