Comportamiento productivo y serológico de una parvada de postura comercial vacunada contra Gallibacterium anatis.

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1 Comportamiento productivo y serológico de una parvada de postura comercial vacunada contra Gallibacterium anatis. Castellanos L 1., Vazquez M 1., Carrillo A 1., Campogarrido R 1. (1)Boehringer Ingelheim Vetmedica, S.A. de C.V. Calle 30 No. 2614, Zona Industrial Guadalajara Jalisco México. lcastella@gua.boehringer-ingelheim.com Palabras clave: Gallibacterium anatis, serología, producción, ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), anticuerpos. INTRODUCCION Gallibacterium anatis es un cocobacilo Gram (-) que pertenece a la familia Pasteurellaceae, no móvil, encapsulado β hemolítico que forma colonias semitransparentes grisáceas y circulares con un tamaño de 1 a 2 mm de diámetro. De acuerdo a los estudios realizados con la metodología molecular publicada por Christensen y colaboradores, las bacterias identificadas antes como Pasteurella haemolytica like, Actinobacillus salpingitidis y Pasteurella anatis, pertenecen al género de Gallibacterium. (1,2) A este microorganismo se le considera uno de los responsables de originar reducción en la producción de huevo, ya que afecta especialmente el aparato reproductor tanto de gallinas de postura comercial, así como de reproductoras; ocasionando lesiones importantes en estos órganos tales como atrofia de ovario con hemorragias y regresión del mismo, ruptura y deformación de folículos ováricos, oviducto no funcional con hemorragias y postura abdominal. Además de otras lesiones como peritonitis, nefromegalia entre otras. (3) Debido a que la edad mas susceptible a esta enfermedad en las aves ligeras es entre las 22 y 34 semanas de edad y de las reproductoras pesadas aproximadamente a las 40 semanas, el impacto económico es importante ya que en la etapa subclínica las aves pueden estar aparentemente sanas pero existe una baja en la producción del huevo o un retraso para alcanzar el pico de

2 postura.(4,5) Mientras en la etapa clínica además de la disminución en la producción se puede observar descarga nasal, fiebre, depresión, crestas caídas y cianóticas, anorexia, deshidratación, diarrea verdosa, postración, y mortalidad que puede ser variable.(6,7) De acuerdo a su virulencia las cepas se han clasificado en severas, moderadas y leves. Vázquez y Campogarrido encontraron que aves desafiadas con cepas de virulencia severa la reducción de la producción disminuye un 33% al día, mientras las cepas de virulencia moderada 25% y leve 22%. El diagnóstico debe integrar el trabajo de campo considerando la observación de signos clínicos y los resultados obtenidos a partir de las muestras enviadas al laboratorio. Una nueva herramienta para conocer el estatus serológico de las aves es la técnica de ELISA, la cual nos permitirá determinar la presencia de anticuerpos contra los 3 biogrupos principales aislados en la República Mexicana, de este modo se evidenciará la respuesta inmune estimulada por la aplicación de vacunas y el desafío en caso de existir este y se determinará el biogrupo prevalerte en la parvada.(8) El objetivo de este trabajo fue evaluar la respuesta inmune, estimulada por la vacunación y conocer el comportamiento productivo de una parvada de postura comercial. MATERIAL Y METODOS: -Animales: En el estudio se vacunaron aves de estirpe Hy-Line. Las cuales se alojaron en jaula en su etapa de crianza y desarrollo. A las 17 semanas se trasladaron a la granja de producción en casetas elevadas con jaulas dispuestas en pirámide, en el Estado de Nuevo León, recibieron agua y alimentación ad libitum de acuerdo a la etapa de crianza o de producción correspondiente. -Biológico a evaluar: Volvac AC+Ga KV que contiene 3 biogrupos diferentes de Gallibacterium anatis y preparada con los serotipos A, B y C de Haemophillus paragallinarum ( Avibacterium paragallinarum), inactivada y emulsionada en aceite.

3 -Técnica de laboratorio: Prueba de ELISA no comercial indirecta específica, para biogrupos 1, 2 y 4 de Gallibacterium anatis. Los títulos de anticuerpos se expresan en log 10 (P/N). El biológico fue aplicado vía subcutánea a las 6 y 16 semanas de edad. Se tomaron muestras de suero (n=20) de las aves a partir de las 3 semanas y hasta las 39 semanas de edad. Se verificó el estado de salud de las aves, así como la producción obtenida de ellas. Los sueros fueron analizados por la técnica de ELISA para evaluar los títulos de anticuerpos producidos por la inmunización de las aves contra las tres cepas de los 3 biogrupos que contiene la vacuna, los títulos fueron analizados calculando medias de los valores obtenidos.

4 RESULTADOS: ELISA Gallibacterium Field Conditions (Cavazos) 12 2a Vac AC+Gal (SC) 9 Título (P/N) 6 1a. Vac AC+Gal (SC) Edad ( semanas) Bio-1 Bio-2 Bio-4 Grafica 1.- Comportamiento serológico de una parvada vacunada contra Gallibacterium anatis. EDAD Bio-1 Bio-2 Bio Tabla 1.- Títulos de anticuerpos contra los Biogrupos 1, 2 y 4 a las edades monitoreadas.

5 De acuerdo a los resultados observados en la gráfica anterior se puede apreciar el valor basal de anticuerpos que presentaron las aves a las 3 semanas de edad, siendo el mas alto el correspondiente al Biogrupo 2 con un título ( log 10 P/N) de 2.12; mientras el título para el biogrupo2 fue de 0.82 y para el biogrupo 4 de Así mismo se observa el aumento de los títulos producidos por la vacunación llegando a su punto mas alto a la semana 23 en el caso del Biogrupo 1 con un título de 9.08, y el Biogrupo 4 con un título de 7.29; mientras en el Biogrupo 2 se observa el título mas alto estimulado por la vacunación a las 19 semanas con un valor de Hasta la semana 25 se puede observar un comportamiento muy similar de la respuesta inmune para los 3 biogrupos; sin embargo a partir de la semana 27 se observa una diferencia entre los biogrupos 1 y 2 los cuales nuevamente aumentan para las semanas 27 y 29. ELISA Gallibacterium VS % de Producción % Producción EDAD (semanas) % Producción Bio-1 Bio-2 Bio Título Gráfica 2.- Comportamiento productivo y serológico de una parvada vacunada con Gallibacterium anatis. (Y1= Producción; Y2= Título (log 10 P/N); X= Edad.)

6 En la gráfica 2 se aprecia el comportamiento productivo de la parvada, el cual alcanza su pic de postura entre la semana 23 y 25; entre las 28 y 32 semanas de edad se observa el incremento de títulos para los biogrupos 1 y 2, los cuales no son ocasionados por vacunación sin tener ninguna repercusión en la tendencia de producción que llevaba la parvada. CONCLUSION: De acuerdo a los resultados obtenidos en la gráfica 1 por medio de la técnica de ELISA se puede evaluar el desempeño que induce una vacuna de Gallibacterium anatis, a través de los títulos de anticuerpos. Con esta herramienta se detectó un incremento de anticuerpos que no corresponden al programa de vacunación ente las 27 y 29 semanas para los biogrupos 1 y 2 probablemente debido a un contacto con este agente en el campo; sin embargo la curva de producción no se ve afectada, infiriéndose que los animales estaban protegidos. De acuerdo a las curvas de los títulos de ELISA (Gráfica 1), para los tres biogrupos se observa producción de anticuerpos desde la primer semana postvacunación, demostrando la sensibilidad de la técnica. Los resultados y el comportamiento observado a partir de la semana 27 por los títulos de los biogrupos 1 y 2 corresponden a una estimulación por el desafío de campo; es importante conocer el momento en que las aves reciben este desafío y asegurarse que la inmunidad producida por la vacunación se realizó a tiempo para proteger a las aves de un problema de campo en el cual se vería afectada la postura. De acuerdo a la gráfica observada, los títulos producidos por las inmunizaciones protegieron a la parvada entre la semana 20 y 40 de edad momento en que las aves requieren de mayor protección ya que son susceptibles al desafío por Gallibacterium anatis; además de ser el momento de mayor estrés en producción;

7 ya que llegan al pic de postura, lo cual se demuestra sosteniéndose el porcentaje de producción hasta las 39 semanas de edad. Es conveniente que las vacunas de Gallibacterium anatis produzcan títulos similares de anticuerpos para asegurar la protección de la producción en las parvadas. Es necesario realizar estudios en los cuales se determine el valor mínimo y máximo de anticuerpos para resistir un desafío ocasionado por este agente bacteriano en el campo. De acuerdo a los estudios de Campogarrido y col.(4) la producción puede disminuir por este agente etiológico desde un 22% en un caso leve hasta un 33% en casos severos, Así mismo se evidencia la importancia económica que puede acarrear un problema por este agente etiológico; al disminuir la producción de huevo durante este período de producción crítico en el caso de que las aves no reciban una adecuada vacunación. Con este estudio se demuestra que la técnica de ELISA es una herramienta adecuada para evaluar el comportamiento serológico de una parvada de postura comercial vacunada contra Gallibacterium anatis. BIBLIOGRAFIA: 1.- Christensen H., Bisgaard M., Bojesen A.M., Mutters R. and Olsen J.E. Genetic relationships among avian isolates classified as Pasteurella haemolytica, Actinobacillus salpingitidis or Pasteurella antis with proposal of Gallibacterium anatis gen. nov. Comb. Nov. And description of additional genomospecies within Gallibacterium gen. nov. Intl. Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology (2003), 53, Vázquez M.E., Campogarrido M.R., González C.P. y Sivanandan V. Isolation and identification of Pasteurella haemolytica aviar. Memorias de la XXVII Convención Anual ANECA, Puerto Vallarta, México. 3.- Gonzalez C., Vázquez M.E., Campogarrido R.M., Humberto R. and Sivanandan H. A new and emerging disease of chickens caused by Pasteurella Haemolytica-

8 like. Program and Abstracts of XIII Congress of the world veterinary poultry Association. Denver Pag Campogarrido M.R., Vázquez M.E., González C.P. y Sivanandan V. Impacto de la Pasteurella haemolytica en parvadas comerciales. Memorias de la XXVII Convención Anual ANECA, Puerto Vallarta, México. 5.- Vazquez M., Bojensen A., Mora R., and Gonzalez C. Effect of Gallibacterium anatis challenge in the egg production in comercial and SPF birds under controlled conditions. 14 th.world veterinary poultry congress. Istanbul, Turkey Pag Vázquez M.E., Campogarrido M.R., Cubillas C.A., Coss J., González C.P. y Sivanandan V. Reporte de un caso de Pasteurella haemolytica en gallina de postura en Tehuacán, Puebla. Memorias del XXVI convención anual ANECA, Acapulco, Guerrero. México. Pág: Bisgaard M., Christensen H., Bojesen A.M. and Christensen J.P. Avian infections caused by species of Pasteurellaceae, an update. 14 th.world veterinary poultry congress. Istanbul, Turkey Pag Vazquez M.E., Campogarrido, R., Rodriguez H., Sivanandan V.,Gonzalez C. A new and emerging disease of chickens caused by Pasteurella haemolytica-like. Organisms: Prevalence, Isolation and characterization. Program and Abstracts of XIII Congress of the world veterinary poultry Association. Denver July Pag. 121.