RECOPILADO POR: EL PROGRAMA UNIVERSITARIO DE ALIMENTOS
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- Alberto Moreno Pérez
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1 NMX-F DETERMINACIÓN DE COLORANTES SUBSIDIARIOS EN COLORANTES ORGÁNICO SINTÉTICOS. DETERMINATION OF SUBSIDIARY DYES IN ORGANIC SYNTHETIC DYES. NORMAS MEXICANAS. DIRECCION GENERAL DE NORMAS. 1. ALCANCE La presente Norma establece el procedimiento para la determinación de colorantes subsidiarios en colorantes orgánico-sintéticos. 2. APARATOS Y EQUIPO Cuba para cromatografía (figuras 1 y 2) que conste de: Cuba (A) y Tapa (B) Marco para soportar (C) la hoja de papel cromatográfico. Bandeja (D) para disolvente empleado para el desarrollo. Soporte secundario (E) para colgar papel filtro. Microjeringa capaz de liberar 0.1 ml ± ml. Espectrofotómetro. 3. MATERIALES Y REACTIVOS RECOPILADO POR: EL PROGRAMA UNIVERSITARIO DE ALIMENTOS Los reactivos que a continuación se mencionan, en la Tabla I deben ser grado analítico; cuando se indique agua, debe entenderse agua destilada. Hojas de papel grado cromatográfico, de 20 por 20 cm.
2 FIGURA 1 CUBA CROMATOGRÁFICA
3 FIGURA 2 HOJA CROMATOGRÁFICA
4 TABLA 1
5 4. PROCEDIMIENTO 4.1 DOS HORAS DE REALIZAR LA DETERMINACIÓN Preparar las hojas de papel filtro dentro de la cuba y verter sobre ellas suficiente disolvente para saturar la atmósfera dentro de la cuba con mezcla de reactivos y de acuerdo con el colorante, como se indica en 3.1 y cubrir el fondo con este disolvente de saturación hasta 1 cm, poner la bandeja (D) en posición y tapar la cuba. 4.2 Marcar la hoja de papel cromatográfico como se muestra en la fig. 2, aplicar 0.10 ml de solución al 1.0% de el colorante que se va a probar tan uniformemente como sea posible dentro de los limites que forma el rectángulo de 18 cm x 7 mm de la hoja cromatográfica, manteniendo la punta de la microjerínga firmemente en contacto con el papel. Dejar secar el papel a la temperatura ambiente por 1-2 horas o a 50 C por 5 minutos seguido de 15 minutos a la temperatura ambiente, montar la hoja, junto con otra hoja limpia que actúa como blanco en el marco (C). Verter suficiente disolvente revelador en la bandeja (D), llevando la superficie del solvente a cerca de 1 cm bajo la base de la línea de la hoja cromatográfica. (El volumen necesario, depende de las dimensiones del aparato). Poner el marco (C) en posición y poner la cubierta. Permitir que el solvente ascienda la distancia especificada para cada colorante (arriba de la base de la línea) que se indica a continuación. (ver inciso 6.3).
6 Después quitar el marco C con papel y ponerlo en un desecador o en un gabinete y secarlo a C, por minutos transcurrido ese tiempo quitar las hojas del marco "C"; cortar cada banda de colorante subsidiario de las hojas, en forma de tira y cortar una tira equivalente desde la posición correspondiente de la hoja blanca. Poner cada tira, subdividida en número apropiado y aproximadamente en porciones iguales, en tubo de prueba por separado. Adicionar 5.0 ml de disolvente de extracción a cada tubo de prueba y agitar por 2-3 minutos, adicionando 15.0 ml de solución de carbonato ácido de sodio 0.05 N, agitar el tubo para asegurar su mezcla. Filtrar el extracto coloreado y el blanco a través de papel filtro de 9 cm y poro abierto y determinar la densidad óptica de los extractos coloreados a sus longitudes de onda de máxima absorción, usando celda de 40 mm contra una mezcla filtrada de 5.0 ml de disolvente de extracción y 15.0 ml de solución de carbonato ácido de sodio 0.5 N medir las densidades ópticas de los extractos de las tiras testigo a las longitudes de onda a que se midieron los extractos coloreados correspondientes. 5. CÁLCULOS El contenido de colorante subsidiario, expresado en porcentaje (S) de la muestra esta dado por: S = F (D1 + D ) - (b1 + b ) Donde: F es el factor de conversión específico para cada colorante siendo los siguientes: 1.- Rojo2 Amaranto Rojo3 Eritrosina Rojo5 Carmoisina Rojo6 Ponceau 4R Amarillo5 Tartrazina Amarillo6 Crepúsculo19.3
7 7. Azul 1 Brillante Azul 2 Indigotina10.4 D 1 D 2 etc. son las densidades ópticas de los extractos de los colorantes subsidiarios. b 1 b 2 etc. son las densidades ópticas de los extractos de los correspondientes testigos. 6. APÉNDICE 6.1 OBSERVACIONES El factor de conversión (F) de la expresión anterior, está derivado del coeficiente de extinción del colorante principal, no tanto del colorante subsidiario, y según las otras constantes de la determinación. 6.2 Para el caso de la Eritrosina Después del desarrollo del color en las hojas cromatográficas, se secan estas a la temperatura ambiente por 15 minutos en la obscuridad y dado que las soluciones y cromatogramas son sensibles a la luz es esencial hacer esto desde la preparación fresca de la solución de colorante y la extracción y medición de las zonas subsidiarias inmediatamente después de completar el desarrollo y secado de los papeles. 7. BIBLIOGRAFÍA British standard 3210 Methods for the Analysis of Water-Soluble Coal-Tar Dyes Permitted for Use in Foods. Normas de Identidad y Pureza para Aditivos Alimentarios. Vol. II Colores Alimentarios FAO PARTICIPANTES Pepsi Cola Mexicana, S.A. Pigmentos y Oxidos, S.A. Warner Jenkinson, S.A. de C.V. Subdirección de Alimentos y Bebidas de la S.S.A.
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