Universidad de Colima

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1 Universidad de Colima POSGRADO INTERlNSTlTUClONAL EN ClENClAS PECUARIAS ADAPTAClÓN Y CRECIMIENTO DE LAS TILAPIAS Oreochromis niloficus, Oreochromis aureus, Oreochromis mossambicus x Oreochromis niloticus EN AGUA SALADA. TESIS QUE PARA OBTENER EL GRAD0 DE DOCTORA EN CIENCIAS PECUARIAS PRESENTA TZETZANGARI MARGARITA MARTÍNEZ CONTRERAS COMITÉ TUTORIAL DR. MARIO NIEVES SOT0 DR. DOMENICO VOLTOLINA DRA. ELAINE ESPINO BARR DR. ALEJANDRO OTTO MEYER WILLERER DR. HERIBERTO SANTANA HERNANDEZ PICP TECOMAN, COLIMA, MEXICO Mayo de 2003

2 Agradecimientos Al Consejo National de Ciencia y Tecnologia (CONACYT), por su apoyo recibido durante la realización de mis estudios de Doctorado. A la Universidad de Colima y al Posgrado lnterinstitucional en Ciencias Pecuarias de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, por la formación de Recursos Humanos con alto grado de conocimientos en el area de Acuacultura. Al Laboratorio de Ciencias Marinas de la Facultad de Ciencias Naturales, Universidad Autonoma de Guadalajara, Barra de Navidad, Jalisco; por el apoyo para la realización de este trabajo de investigación. Al Laboratorio lnterinstitucional de Microalgas de la Universidad Autonoma de Sinaloa, Faculrad de Ciencias del Mar y Centro de lnvestigaciones Biologicas del Noroeste, S. C. por el apoyo recibido para la culminación de este trabajo. Al Dr. Mario Nieves Soto, Director de Tesis por todo el apoyo, conocimientos y dedication para concluir este estudio. Al Dr. Domenico Voltolina investigador del Laboratorio lnterinstitucional de Microalgas de la Universidad Autonoma de Sinaloa, Facultad de Ciencias del Mar y Centro de lnvestigaciones Biologicas del Noroeste, S. C., por su orientación, colaboracion, motivación y confianza brindada, mi más profundo y sincero agradecimiento. A mi amigo: M. en C. Luis Jorge Garcia Márquez, quien dirigio con sus consejos y asesorias, el desarrollo de la investigación en el análisis histopatológico. A los M. en C Daniel Enrique Godinez Siordia y Julian Gamboa Delgado por su colaboración en el trabajo de laboratorio. A mis sinodales por sus valiosas sugerencias al presente trabajo: Al Dr. Alejandro 0. Meyer Willerer investigador del Centro Universitario de lnvestigaciones Oceanológicas de la Universidad de Colima. A la Dra. Elaine Espino Barr investigadora del Centro Regional de lnvestigaciones Pesqueras de Manzanillo, Colima. Al Dr. Heriberto Santana Hernandez investigador lnvestigaciones Pesqueras de Manzanillo, Colima. del Centro Regional de A mis compañeros, amigos, por su tiempo y apoyo incondicional.

3 Dedicatoria A mi familia, que han aportado algo de su vida y que con esa invaluable aportación he logrado vivir auténticos momentos de crecimiento, con cariño. A mi querida Marihan, que despertó un mundo de ilusiones y que vive desde lo profundo.

4 RESUMEN ABSTRACT ÍNDICE DE TABLAS ÍNDICE DE FIGURAS INDICE Página I. INTRODUCClÓN 1 II. HIPÓTESIS 7 III. OBJETIVOS 8 IV. IV.1. IV.2. IV.3. lv.4. REVlSlÓN DE LITERATURA Historia del cultivo de tilapia en agua salada Aclimatacion al agua salada Metodos de aclimatacion a agua salada Crecimiento V. MATERIALES Y MÉTODOS 16 V.I. Módulo experimental 16 v.2. Organismos experimentales 17 v.3. Experimentos de aclimatacion 17 v.3.1. Transferencia directa 18 V.3.2. Transferencia gradual 19 v.4. Pruebas de cultivo 20 v.4.1. Cultivos de laboratorio 20 V.4.2. Crecimiento en jaulas 21 v.5. Alimentos suministrados 22 V.6. Evaluación biologica -~w 22 v.7. Análisis histopatológico 24 V.8. Análisis de resultados 25 VI. VI.1. VI.1.I. VI.1.2. Vl.2. Vl.2.1. Vl.2.2. Vl.2.3. Vl.2.4. Vl.2.5. Vl.3. RESULTADOS Pruebas de aclimatacion Pruebas preliminares Aclimatacion de las tres especies Cultivos en laboratorio Prueba preliminar con Oreochromis niloficus Crecimiento en laboratorio de las tres especies Sobrevivencia Evaluación biologica Analisis histológicos Cultivos en jaula

5 VII. VI I. 1. Vll.2. VIII. IX. DISCUSlÓN Aclimatación Cultivos de laboratorio CONCLUSIONES BlBLlOGRAFÍA

6 RESUMEN Mediante pruebas de aclimatación con salinidades progresivamente mayores o de transferencia directa en agua con 15, 25 y 33 %0 de salinidad, se determinaron la talla y la técnica más convenientes para el proceso de transferencia de las tilapias Oreochromis aureus, O. niloticus y del híbrido O. mossambicus y O. niloticus, para su posterior cultivo en ambiente salobre y marino. Pruebas posteriores de cultivo en el laboratorio, en agua dulce y con salinidades de 17% y 33% sirvieron para determinar en forma comparativa la velocidad de crecimiento, la sobrevivencia, el factor de conversion alimenticia y el indice de condición de estas tres especies, con el fin de determinar la más conveniente para su cultivo en agua salada o con influencia marina. Los resultados demostraron que el hibrido tiene un mayor grado de adaptabilidad, en vista de que puede ser transferido directamente a agua de mar a partir de un peso promedio initial de 5 g, mientras que las dos especies restantes deben ser aclimatadas mediante el aumento progresivo de la salinidad. Las pruebas de cultivo confirmaron que en agua de mar el hibrido tiene la mayor velocidad de crecimiento y los indicadores biológicos corroboraron que es la mejor opción para cultivos en ambiente marino, aunque O. aureus presentó caracteristicas de crecimiento, de conversion de alimento y de condición final, que indicaron que tambien esta especie puede ser cultivada en este ambiente. Estos resultados de laboratorio se verificaron en condiciones reales mediante una prueba de cultivo intensivo en jaulas flotantes ubicadas en la Laguna de Barra de Navidad, Jalisco, las cuales indicaron que solamente el híbrido puede ser cultivado exitosamente en agua de mar, en vista de que la mortalidad de 0. aureus y 0. niloticus fue del 100%, mientras que en tres meses el peso medio individual de 0. mossambicus x O. niloticus fue 534 g, con una ganancia que varió entre los 408 y 474 g. Globalmente las cosechas finales fueron de 49 kg.m-3. La sobrevivencia media fue del 86% y el factor de conversion alimenticia fue adecuado para fines comerciales, con un valor medio de 1.75.

7 ABSTRACT The feasibility of growing the tilapias Oreochromis niloticus, O. aureus and O. mossambicus x O. niloticus in seawater was tested with acclimation experiments with 5 and 10% daily increases of salinity and with direct transfer to water of 15, 25 and 33%0, using fry of increasing mean weights, from 1 to 30 g. All species could be successfully acclimated to marine conditions with the first technique, but direct transfer to 25 and 33%0 salinity caused 100% mortalities of O. niloticus and O. aureus, while the hybrid of 5 g and higher showed percentages of survival close or equal to 100%. Laboratory growth experiments demonstrated reduced growth of O. niloticus accompanied by lower survival, high food conversion and lower condition indices in water of 33%0 salinity, with intermediate values in the trial with 17%. O. aureus had equal performances in brackish or fully saline conditions than those obtained in freshwater, while the hybrid performed better at 17 and 33%. A field experiment in suspended 1 m 3 cages in the lagoon of Barra de Navidad, Jalisco, Mexico, with mean salinity of 33%0, gave 100% mortalities in few weeks, in the cases of O. niloticus and O. aureus grown under intensive culture conditions (100 individualsam-3, initial weights >60g). In contrast, the hybrid had a mean survival of 86% and after 3 months in culture the individual mean weight was 534 g, with a net gain of 408 to 474 g. The mean yield was 49 kg.m-3 and the food converstion factor was 1.75, which is compatible with commercial intensive cultures.

8 ÍN DICE DE TABLAS P ágina Tabla 1 Tabla 2 Tabla 3 Tabla 4 Tabla 5 Tabla 6 Tabla 7 Experimento preliminar de aclimatacion: mortalidad media (en %) ± desviacion estándar registrada despues de 7 dias de aclimatacion de O. niloficus y del hibrido 0. mossambicus x O. niloticus de pesos diferentes: transferencia gradual con aumentos diarios de salinidad de 5 y de 10 %. Experimento preliminar de aclimatacion: mortalidad media (en %) ± desviacion estándar de 0. niloticus y del hibrido 0. rnossambicus x 0. niloticus de peso diferente registrada despues de 8 horas de exposición directa a salinidades de 15, 25 y 33 %. Control: 0 %. Pruebas de aclimatacion: mortalidad global (en %) de 0. aureus, 0. niloticus y del hibrido 0. mossambicus x 0. niloticus de pesos diferentes registrada despues de 7 dias de aclimatacion con aumentos diarios de salinidad de 5 y 10 %. Control: 0 %. Pruebas de aclimatacion: mortalidad global (en %) de O. aureus, O. niloticus y del hibrido O. rnossarnbicus x O. niloticus de pesos diferentes, registrada despues de 8 horas de exposición a salinidades de 15, 25 y 33%. Control: 0%. Valores de la pendiente (b), coeficientes de determinación (R 2 ) y probabilidad de ajuste al modelo lineal (p) de las regresiones calculadas entre la edad de los cultivos y los valores de peso total en g (A) y longitud, en cm (B) registrados semanalmente en las pruebas preliminares de cultivo de Oreochromis niloticus en agua dulce, en agua salobre (17%) y en agua marina (33%). Letras diferentes indican pendientes significativamente diferentes (a<b). Valores medios (± desviacion estandar) de peso (en g) y de longitud (en cm) registrados al inicio y al final de la prueba preliminar de cultivo de Oreochromis niloticus en agua dulce y a 17 y 33% de salinidad. Letras diferentes indican diferencias significativas (análisis de varianza de una via, a=0.05). a<b. Valores de la pendiente (b), coeficientes de determinación (R2) y probabilidad de ajuste al modelo lineal (p) de las regresiones calculadas entre la edad de los cultivos y los valores de peso total en g (A) y longitud, en cm (B) registrados semanalmente en las pruebas de cultivo de Oreochromis niloticus en agua dulce, en agua salobre (17%) y en agua marina (33). Letras diferentes indican diferencias significativas entre pendientes. a<b.

9 Tabla 8 Tabla 9 Tabla 10 Tabla 11 Tabla 12 Tabla 13 Valores medios (± (+ desviacion estandar) de peso (en g) y de longitud (en cm) registrados al inicio y al final de la prueba de cultivo de Oreochromis niloticus en agua dulce y a 17 y 33 %O de salinidad. Letras diferentes indican diferencias significativas (analisis de varianza de una via, α = 0.05). a<b. Valores de la pendiente (b), coeficientes de determinación (R 2 ) y probabilidad de ajuste al modelo lineal (p) de las regresiones calculadas entre la edad de los cultivos y los valores de peso total en g (A) y longitud, en cm (B) registrados semanalmente en las pruebas de cultivo de Oreochromis aureus en agua dulce, en agua salobre (17%) y en agua marina (33%) Las. letras iguales indican falta de diferencias entre pendientes. Valores medios (± desviacion estandar) de peso (en g) y de longitud (en cm) registrados al inicio y al final de la prueba de cultivo de Oreochromis aureus en agua dulce y a 17 y 33% de salinidad. Letras diferentes indican diferencias significativas (análisis de varianza de una vía, a = 0.05). a<b. Valores de la pendiente (b), coeficientes de determinación (R 2 ) y probabilidad de ajuste al modelo lineal (p) de las regresiones calculadas entre la edad de los cultivos y los valores de peso total en g (A) y longitud, en cm (B) registrados semanalmente en las pruebas de cultivo de Oreochromis mossambicus x 0. niloticus en agua dulce, en agua salobre (17%) y en agua marina (33%. Las letras iguales indican falta de diferencias entre pendientes. Valores medios (± desviacion estandar) de peso (en g) y de longitud (en cm) registrados al inicio y al final de la prueba de cultivo del hibrido Oreochromis mossambicus x 0. niloticus en agua dulce y a 17 y 33 %. de salinidad. Las letras diferentes indican diferencias significativas (analisis de varianza de una via, α = 0.05). a<b. Comparación de las tasas de crecimiento en peso en g (A) y en longitud en cm (B) por semana ± error estandar de Oreochromis aureus, Oreochromis niloticus y del hibrido (0. mossambicus x 0. niloticus) cultivados en agua dulce y a 17 y 33 %O de salinidad. %o. Letras iguales o comunes indican falta de diferencias significativas entre especies y condiciones de cultivo (Analisis de varianza de dos vías, α=0.05). a ab b y a<b

10 Tabla 14 Sobrevivencia promedio final (número de individuos ± desviacion estandar) de Oreochromis aureus, Oreochromis niloticus y del hibrido (0. rnossarnbicus x 0. niloticus) cultivados en acuarios a 0, 17 y 33 %. Letras iguales o comunes indican falta de diferencias significativas entre sobrevivencias de la misma especie en las tres condiciones de salinidad (ANDEVA de una via, a=0.05; a ab b y a<b). 46 Tabla 15 Tabla 16 Valores promedio ± desviacion estandar de la tasa especifica de crecimiento (TEC) de Oreochromis niloticus, Oreochromis aureus y del hibrido 0. mossambicus x 0. niloticus cultivadas en agua dulce y a 17 y 33% de salinidad. Letras iguales o comunes indican falta de diferencias significativas entre la tasa de crecimiento de la misma especie en las tres condiciones de salinidad (ANDEVA de una via, a=0.05; a ab b y a<b). 48 Valores promedio del factor de conversion alimenticia (FCA) ± desviaciones estandar de Oreochromis niloticus, Oreochromis aureus y del hibrido O. mossambicus x O. niloficus cultivadas en agua dulce y a 17 y 33% de salinidad. Letras iguales o comunes indican falta de diferencias significativas entre datos de la misma especie en las tres condiciones de salinidad (ANDEVA de una via, a=0.05; a ab b y a<b). 49 Tabla 17 Tabla 18 Tabla 19 Tabla 20 Tabla 21 Tabla 22 Valores promedio del factor de condición simple (K) ± desviaciones estandar de Oreochromis niloticus, Oreochromis aureus y del hibrido O. rnossambicus x O. niloticus cultivadas en agua dulce y a 17% y 33% de salinidad. Letras iguales o comunes indican falta de diferencias significativas entre sobrevivencias de la misma especie en las tres condiciones de salinidad (ANDEVA de una via, a=0.05; a ab b y a<b). Alteraciones microscopicas encontradas en la piel de 0. niloticus cultivado en diferentes concentraciones de salinidad. Alteraciones microscopicas en branquias encontradas en 0. niloticus cultivado en diferentes concentraciones de salinidad. Alteraciones microscopicas en el riñón de 0. niloticus cultivado en diferentes concentraciones de salinidad Alteraciones microscopicas del intestino de 0. niloticus cultivado en diferentes concentraciones de salinidad. Alteraciones microscopicas del higado de 0. niloticus cultivado en diferentes concentraciones de salinidad

11 Tabla 23 Tabla 24 Tabla 25 Tabla 26 Tabla 27 Tabla 28 Tabla 29 Alteraciones microscopicas encontradas en la piel de 0. aureus cultivado en diferentes concentraciones de salinidad 55 Alteraciones microscopicas encontradas en las branquias de 0. aureus cultivado en diferentes concentraciones de salinidad. 56 Alteraciones microscopicas en el riñón de 0. aureus cultivado en diferentes concentraciones de salinidad. 56 Alteraciones microscopicas del intestino de 0. aureus cultivado en diferentes concentraciones de salinidad. Alteraciones microscopicas del higado de 0. aureus cultivado en diferentes concentraciones de salinidad. Valores promedio iniciales ± desviación estándar de la longitud total (Lt en cm y del peso total (Pt en g, de 0. niloticus, 0. aureus y del hibrido 0. mossambicus x 0. niloticus, usados para el experimento de cultivo en jaulas. Biomasa inicial y final, sobrevivencia, alimento suministrado y factor de conversion alimenticia del hibrido O. mossambicus x O. niloticus cultivado en tres jaulas colocadas en agua de mar durante 90 dias de cultivo, a una densidad inicial de 100 individuos por jaula

12 ÍNDICE DE FIGURAS Figura 1 Figura 2 Figura 3 Figura 4 Figura 5 Valores promedio de longitud total en cm (A) y de peso en g (B) registrados a intervalos semanales durante la prueba preliminar de cultivo de Oreochromis niloticus en agua dulce (+) o con salinidades de 17 (w) y de 33 %O (A). Valores promedio de longitud total en cm (A) y de peso en g (B) registrados a intervalos semanales durante la prueba de cultivo de Oreochromis niloticus en agua dulce (+) o con salinidades de 17 (m) y de 33 %O (A). Valores promedio de longitud total en cm (A) y de peso en g (B) registrados a intervalos semanales durante la prueba de cultivo de Oreochromis aureus en agua dulce (+) o con salinidades de 17 (H) y de 33 %O (A). Valores promedio de longitud total en cm (A) y de peso en g (B) registrados a intervalos semanales durante la prueba de cultivo de 0. mossambicus x 0. niloticus en agua dulce (+) o con salinidades de 17 (m) y de 33 %O (A). Modelo de crecimiento de Von Bertalanffy aplicado a los datos de longitud (A) y peso (B) del hibrido 0. mossambicus x 0. niloticus, cultivado en tres jaulas colocadas en agua de mar durante un periodo de tres meses

13 I. INTRODUCCIÓN De acuerdo a las estadisticas oficiales recopiladas y publicadas anualmente por la FAO, la disponibilidad de productos acuaticos destinados al consume humano tanto directo como indirecto alcanzó su máximo histórico en el atio 2000, cuando las capturas reportadas por las varias agencias nacionales responsables a nivel oficial de la recopilación de estos datos sumaron un total de millones de toneladas metricas, de las cuales poco menos de 46 millones (equivalentes al 32.2%) correspondieron a la producción por acuicultura. Los aproximadamente 96 millones de toneladas restantes se debieron a la pesqueria de captura y es importante destacar que este valor, el cual representó solamente un incrementó de poco menos del 1% con respecto al máximo histórico anterior (1997), indica un aumento similar a la tasa promedio de crecimiento anual de los desembarques de las flotas pesqueras a nivel mundial, calculada para el periodo (FAO, 2002a). Por otra parte, aunque se pudiera mantener con regularidad, esta tasa de increment0 es inferior a la tasa de crecimiento de la población humana, que en la actualidad se calcula oscilar anualmente entre el 1.2 y el 1.4% (Currie, 2000). Es importante recordar tambien que, aparte de no ser suficiente para satisfacer la demanda actual, la disponibilidad de productos pesqueros es altamente variable, debido a que los niveles de las capturas son susceptibles de fluctuar ampliamente tanto a nivel regional coma global, ya que son influenciados por eventos climatológicos y oceanograficos diversos. Un ejemplo de estas fluctuaciones fue el causado por el evento de El Niño de 1998, a consecuencia del cual la producción pesquera mundial de ese atio disminuyó hasta aproximadamente 88 millones de toneladas. Esto fue debido principalmente a la fuerte disminución de las capturas de pelagicos menores en el Pacífico meridional, la cual tuvo coma consecuencia una caida del 44% con respecto a los niveles de los desembarques que se reportaron en años anteriores por las flotas que operan en esa area oceánica (FAO, 2000). 1

14 Es necesario tambien subrayar que los incrementos de las capturas se deben primariamente a la búsqueda de nuevos recursos para las industrias de transformación, por lo cual se calcula que más de un 30% de la producción pesquera no llega a los mercados dedicados a la comercializacion de alimentos para el consumo humano directo (FAO, 1999). Por último, de acuerdo a las estadisticas de los últimos años, se estima que aproximadamente un 25% de las especies sujetas a explotacion pesquera son sobreexplotadas, mientras que un 44% adicional se están pescando a niveles cercanos a su máximo potencial biológico de recuperación. Por este conjunto de motivos, se ha calculado que la capacidad de las flotas pesqueras mundiales no podrá cubrir el deficit de alimentos de origen acuatico de la población humana cuya demanda, según las más recientes proyecciones, alcanzara los millones de toneladas para el año 2010, en comparación con los millones que en la actualidad llegan anualmente a los normales canales de comercializacion, los cuales abastecen los mercados oficiales de consumo directo (Currie, 2000). Un dato estadistico adicional, el cual sirve para confirmar la urgente necesidad de incrementar la disponibilidad de proteínas de origen acuático, debido a la gran importancia de estos productos para la alimentación humana, ha sido recientemente reportado y comentado por De Silva (2000). De acuerdo a los datos que reporta este autor, los productos pesqueros representan en promedio solamente cerca del 8% del consumo individual de calorías, las cuales provienen principalmente de la agroindustria y consisten en especial en cereales y otros tipos de granos. Por otra parte, los alimentos que provienen del ambiente acuatico constituyen en su conjunto aproximadamente un 16-17% del consumo de proteinas de origen animal, cuya disponibilidad en cantidades adecuadas es sumamente importante para la seguridad alimenticia de la humanidad (Tacon, 2000). Bajo este escenario, el cual ha sido ampliamente subrayado por varios autores e instancias gubernamentales e internacionales a lo largo de las últimas décadas (e.g Russell-Hunter, 1970; Wijkstrom y New, 1989; Williams, 1996; Ye, 1999, entre otros), 2

15 se ha intentado impulsar la acuacultura coma una solución que permitiria incrementar la disponibilidad de estas proteinas que, por su composición y su fácil digestibilidad, se consideran de alta calidad. En efecto, con la excepción de Australia, el porcentaje de la poblacion que consume proteinas de origen acuatico se ha incrementado notablemente en la mayoria de los paises del mundo y tambien ha aumentado el consume medio individual (De Silva, 2000) y este incrementó se debe principalmente al cultivo de peces de aguas continentales, coma los ciprinidos (carpas) y varias especies de ciclidos, que se conocen con el termino genérico de tilapia. Esta familia está constituida por varios generos (Cichla, Cichlasoma, Tilapia, Oreochromis y Sarotherodon, entre otros), que en la actualidad se encuentran distribuidos en la mayoria de los continentes, pero los dos de mayor importancia tanto para la pesca coma para fines de acuacultura son Tilapia y Oreochromis, ambos originarios de la region subsahariana de Africa (Costa-Pierce y Doyle, 1997). Entre los 1950s y 1970s varias especies de estos dos generos fueron introducidas a algunos paises asiáticos y de allí pasaron por diferentes canales, muchos de los cuales son insuficientemente documentados y en varios casos desconocidos, a más de 50 naciones distribuidas en todos los continentes. Tanto por su adaptabilidad, coma por su tasa de crecimiento elevado, las tilapias fueron inicialmente utilizadas en la mayoria de los paises en proyectos de tipo social para la promoción de la acuacultura de tipo rural y de repoblamiento y además, por lo menos en algunos casos, se usaron tambien para el control biológico de organismos acuaticos nocivos (Costa-Pierce y Doyle, 1997). La tilapia se introdujo oficialmente a Mexico en 1964, cuando las autoridades federales autorizaron la importación de reproductores de las especies Tilapia rendalli, Oreochromis mossambicus y Oreochromis aureus, todos procedentes de la Universidad de Auburn, Alabama, E.U.A. (Arredondo y Lozano, 1996). Posteriormente, las crías producidas por estos ejemplares adultos fueron distribuidas en una gran cantidad de cuerpos de agua naturales y artificiales ubicados en la zonas templadas y tropicales del país, coma parte de un programa con fines sociales, mediante el cual se intentaba fomentar las actividades de pesca y de 3

16 acuicultura en las aguas continentales nacionales, con el fin de mejorar de esta manera la dieta y las condiciones de vida de las comunidades rurales (Hernández Avilés y Garcia Calderón, 1990). En 1978 se introdujo tambien la tilapia del Nilo (O. niloticus), procedente de Panama y tres años más tarde, en 1981, se implementaron programas de reproducción controlada con la importación del hibrido conocido como tiiapia roja de Florida (O. mossambicus x O. urolepis hornorum). Estas especies se distribuyeron en los centros acuicolas más importantes del país, basando su distribución en sus caracteristicas biologicas y en las condiciones climáticas e hidrográficas regionales. La primera linea de una variedad roja de O. niloficus, procedente de la Universidad de Stirling, Escocia, se importó en 1986 por el Centro de lnvestigaciones y Estudios Avanzados del lnstituto Politécnico National, Unidad Merida, de donde fue distribuida a varios Centros Acuicolas de la entonces Secretaria de Pesca. En 1987 nuevamente se introdujeron al país reproductores de O. urolepis hornorum y de O. mossambicus, así como de T. zillii, y a partir de entonces el Gobierno Federal, a través de la Secretaria de Pesca y con el apoyo de productores privados, foment6 la importación de algunas nuevas variedades, entre las cuales destacan la tilapia hibrido rojo de Taiwan (O. mossambicus x O. niloficus), procedente de Puerto Rico, la tilapia blanca conocida como Rocky Mountain White (0. aureus x 0. niloticus) y una línea de O. aureus procedente de Cuba (Arredondo y Lozano, 1996). El objetivo primordial de este programa de importación de especies exoticas, era el de fomentar la acuacultura extensiva y de repoblamiento en los diferentes cuerpos de agua dulce existentes en nuestro país, como bordos, lagos, lagunas y presas, con la finalidad principal de producir fuentes alternativas de empleo y de aumentar la disponibilidad de proteinas de alta calidad y de bajo costo, las cuales fueran económicamente accesibles para todos los estratos sociales. Par otra parte, este programa no tuvo el éxito que se esperaba, en vista de que las tilapias cultivadas en estos sistemas tenían una escasa aceptación en el mercado, por su sabor desagradable derivado de sus hábitos alimenticios, ya que todas estas especies son prevalentemente herbivoras y detritivoras. 4

17 Ademas, aunado a esta característica poco deseable, todas las tilapias se reproducen cuando todavía no alcanzan una talla suficiente para comercialización,lo cual explica el escaso interés tanto de los consumidores como de los productores, que resultó en el fracaso de estos primeros intentos. Esta situación ha cambiado en años relativamente recientes ya que en la actualidad, gracias a la tecnica de reversion sexual con hormonas masculinizantes, como la alfa-metil-testosterona, es posible obtener organismos que pertenecen a un solo sexo (machos). Esto permite evitar la reproducción prematura, por lo cual es posible mantener un mejor control del cultivo y obtener organismos de mayor tamaño y por lo tanto de mayor interés comercial. Además, estos pueden ser producidos en varios sistemas de cultivo de tipo semiintensivo o intensivo, debido a la disponibilidad de alimentos balanceados formulados especialmente para las necesidades dieteticas de las tilapias, con los cuales es posible evitar el sabor desagradable que adquieren con su dieta natural y ofrecer de esta manera un producto que, por su presentación y sabor, es mucho más atractivo para los consumidores (Kuwaye et al., 1990). El gran interés que han despertado todas estas especies se explica por las caracteristicas fisiológicas que presentan las tilapias, las cuales las convierten en recursos con gran potencial para la acuacultura, en especial porque poseen una gran capacidad de adaptación a diferentes condiciones ambientales. En particular, a pesar de su origen tropical o subtropical, son todas especies altamente euritermicas las cuales, aunque detienen su crecimiento en condiciones extremas, pueden sobrevivir en un amplio intervalo de temperaturas, que se extiende desde los 12 hasta los 42 ºC (Arredondo y Lozano, 1996). Otra de sus caracteristicas deseables es que varias especies son eurihalinas, por lo cual pueden subsistir y crecer tanto en aguas dulces, como en ambientes salobres y marinos, con intervalos de tolerancia que pueden abarcar desde el agua dulce hasta más de 40 % de salinidad (Stickney, 1986). Considerando que la disponibilidad de cuerpos de agua dulce de uso exclusive para la acuacultura ha disminuido, debido a que el agua tiene otros usos prioritarios, en especial para cubrir las demandas agrícolas e industriales, además del consumo 5

18 humano directo, existe la necesidad de generar tecnologias que sean apropiadas a las condiciones tipicas de cada país. En el caso de México, con su riqueza de áreas costeras, esto se puede lograr aprovechando por ejemplo esteros, lagunas costeras y el ambiente marino para el cultivo de especies de alto rendimiento, las cuales tengan además un buen valor comercial y las deseables caracteristicas de tolerancia a estos diferentes ambientes y condiciones de cultivo, coma es el case de las tilapias. Es con esta finalidad que se llevó a cabo el presente estudio, mediante el cual se pretende evaluar la adaptabilidad y el crecimiento de dos especies de tilapia (Oreochromis aureus y O. niloficus), además del hibrido O. mossambicus x O. niloticus mediante dos tipos de pruebas de aclimatación y con experimentos de cultivo en condiciones de laboratorio y con diferentes salinidades, para posteriormente verificar los resultados en condiciones naturales, mediante su cultivo intensivo en jaulas, en la Laguna de Barra de Navidad, Jalisco. 6

19 II. HIPÓTESIS De acuerdo a la Iiteratura, todas las especies de Oreochromis y de Tilapia presentan un alto grado de adaptabilidad a la concentración de las sales disueltas en el agua marina, aunque ésta puede variar en dependencia de la especie, así como la edad de los organismos expuestos a una nueva situación. Recordando ademas que las especies de tilapia que se mantienen en los bancos de reproductores representan en realidad líneas geneticas seleccionadas hace varios años, las cuales se mantienen en los Centros Piscicolas con diferentes grados de control sobre la posibilidad de reproducción entre líneas diversas, es posible que sus caracteristicas de adaptabilidad al agua marina sean diferentes de las originales que se describen en literatura. Bajo este escenario, la hipótesis de trabajo que se seleccionó como la más probable es que las tres líneas de tilapia objeto de este estudio (Oreochromis aureus, O. niloficus y el hibrido O. mossambicus x O. niloticus) presentan grados diferentes de adaptabilidad al agua del mar. Entre las tres, el hibrido puede ser aclimatado más facilmente al agua marina y ademas, por lo menos en este ambiente, presenta mejores caracteristicas de sobrevivencia y de crecimiento, por lo cual es la opción más viable para su cultivo intensivo en agua de mar. 7

20 III. OBJETIVOS OBJETIVO GENERAL Evaluar el potencial de cultivo de tres especies de tilapia (O. niloticus, O. aureus y mossambicus x O. niloticus) en agua marina, por medio de estudios de adaptabilidad y de evaluación de crecimiento y sobrevivencia. OBJETIVOS PARTICULARES Definir la mejor técnica de aclimatación mediante pruebas de tolerancia a diferentes concentraciones de salinidad y con tecnicas de transferencia directa y gradual, utilizando alevines de diferentes pesos para cada una de las tres especies. Evaluar, en condiciones de laboratorio, la sobrevivencia y el crecimiento de las tres especies en agua dulce, en agua salobre (17 %) y en agua salada (33%). Evaluar, mediante el examen histológico de la piel, branquias, riñón, intestino e higado, el efecto de la salinidad sobre las especies, para determinar cual es la menos adaptable. Evaluar la sobrevivencia y el crecimiento de las tres especies en cultivos intensivos en jaulas, en la Laguna de Barra de Navidad, Jalisco. Con base en los resultados anteriores, definir la mejor opción para el cultivo de tilapia en agua marina. 8

21 IV. REVlSlÓN DE LITERATURA Aunque las tilapias se cultivan en muchos paises, la mayor producción se concentra basicamente en China, Egipto, Tailandia, Filipinas y Mexico (FAO, 2000) y se basa principalmente en el cultivo de tres especies del genera Oreochromis: O. niloticus, O. aureus y O. mossambicus y dos del genera Tilapia: T. zillii y T. rendalli (Siddiqui y Al- Harbi, 1995; FAO, 1995; Alvarez y Diaz, 1996). En 1999 se produjeron 1.8 millones de toneladas de tilapia y de otros ciclidos a nivel mundial y su producción ha venido creciendo con una tasa del 8% anual. En ese atio, el principal productor fue China con 620 mil toneladas y Mexico, que aportó 66 mil toneladas, en comparación con las 2455 reportadas en 1992, se considera actualmente como el mayor productor de tilapia cultivada del continente americano (Fitzimmons, 2000). En terminos de porcentaje, China produjo un 35% del total, siguiendole Egipto con el 12%, Tailandia (9%), Filipinas (6%), Uganda (5%) y finalmente Mexico, con el 4%. Varios otros paises conjuntamente aportaron el restante 29% (FAO, 2002b). IV.l. HISTORIA DEL CULTIVO DE TILAPIA EN AGUA SALADA Los primeros estudios sobre la posibilidad de cultivar tilapia en agua salada se realizaron en Hawaii en 1950, en un intento de garantizar la disponibilidad y la estabilidad de precios de la carnada viva que era necesaria para la pesqueria de túnidos de la flota varera (Hida, Harada y King, 1962). Con esta finalidad, se mantuvieron cultivos intensivos de O. mossambicus en tanques con agua salobre, con una salinidad de entre 10-15%. Los resultados de sobrevivencia y de crecimiento que se obtuvieron en esas condiciones con esta especie fueron superiores a los logrados en agua dulce, con lo cual quedó demostrada la factibilidad de su cultivo en agua salobre. En forma practicamente paralela se llevaron a cabo otros experimentos a pequeña escala en Israel, mediante los cuales se pudo demostrar que tambien otras tilapias, coma por ejemplo O. aureus y T. zillii tienen una elevada capacidad de adaptación a 9

22 salinidades diferentes, desde aguas salobres hasta condiciones completamente marinas por lo cual se sugirio evaluar la conveniencia de utilizarias para fines de acuicultura en este tipo de ambientes (Chervinski y Zorn, 1974). Aunque mediante estos primeros estudios se concluyó que era factible cultivar todas estas especies de tilapia en agua de mar, esta posibilidad no fue aprovechada a nivel comercial hasta mediados de los 80 s, cuando se desperto el interés de los mercados internacionales para la tilapia, que antes se destinaba principalmente al autoconsumo o a los mercados locales. A partir de ese período se llevaron a cabo varios estudios adicionales, que tenían la finalidad de definir las especies y las variedades más apropiadas para su cultivo en el ambiente marino, el cual fue considerado como una industria alternativa interesante para fomentar el desarrollo económico en zonas áridas de la costa, que de otra manera hubieran quedado marginadas o subutilizadas (Watanabe, Olla, Wicklund y Head, 1997). En la actualidad, el cultivo de tilapia en agua salada se ha hecho una realidad y en efecto ha sido objeto de numerosos estudios, mediante los cuales se determinaron las especies más adecuadas, en dependencia de las condiciones que prevalecen en cada tipo de ambiente y además se evaluó la importancia de los diferentes factores, tanto biologicos como ambientales, que son de mayor relevancia para esta nueva tecnologia, entre los cuales destacan: Edad apropiada para la aclimatacion de los organismos (Watanabe, Ellingson, Olla, Ernest y Wicklund, 1990a), Metodos de aclimatación (Suresh y Lin, 1992), Temperatura (Suresh y Lin, 1992), Factores genéticos (Watanabe et al., 1990a), Cantidad de proteinas en las dietas (Clark, Watanabe, Olla y Wicklund, 1990; Shiau y Huang, 1990), Densidades de siembra (Watanabe, Clark, Dunham, Wicklund y Olla, 1990b), Sistemas de cultivo (Al-Ahmad, Ridha y Al-Ahmed, 1988; Cruz, Ridha y Abdullah, 1990; Al-Ahmed, 2001), 10

23 Concentration de salinidad (Liao y Chang, 1983; Stickney, 1986; Watanabe, Ellingson, Wicklund y Olla, 1988; Suresh y Lin, 4992; Garcia Ulloa, Llauger, Contreras y Costero, 1996). IV.2. ACLlMATAClÓN AL AGUA SALADA Es necesario considerar que, a pesar de su reconocida eurihalinidad, todas las especies de tilapia son de origen dulceacuicola, por lo cual viven y se reproducen normalmente en cuerpos de agua continentales. Por este motivo, la concentración de las sales disueltas en las aguas salobres o marinas puede ser un factor importante de estres, en especial para larvas y juveniles, cuyo impacto debe ser evaluado para cada especie que se desee cultivar en este tipo de ambientes; además, es necesario verificar su línea genetica, que pudiera resultar en diferentes respuestas, debido a diferentes grados de interacción entre genotipo y medio ambiente. En efecto, varios estudios con diferentes especies (O. rnossambicus, O. niloticus, O. aureus) y con varios hibridos como O. mossambicus x O. niloticus y O. urolepis hornorum x O. mossamblicus han demostrado que, aparte de la especie y de la línea genetica, tanto la edad y la talla o el peso de los alevines, como el protocolo que se utiliza durante el proceso de aclimatacion, influyen en la sobrevivencia de los organismos en agua de mar. En general, se ha encontrado que las crías son menos tolerantes a la salinidad que los individuos más grandes, por lo cual la determinación de la edad o talla optima para proceder a la transferencia al nuevo ambiente es crítica para asegurar la maxima sobrevivencia de los organismos en cultivo (Watanabe, Kuo y Huang, 1985a, 1985b; Villegas, 1990; Watanabe et al., 1997). Mediante diferentes estudios sobre la halotolerancia de algunas especies de tilapia de importancia comercial, se pudo verificar que en general los adultos toleran la transferencia directa de agua dulce (0-2%) a agua salada (> 32 %) Por otra parte, se ha encontrado que si las crías de la tilapia roja de Florida son transferidas de %. a 19 %. de salinidad, manifiestan reacciones de estres y reacciones similares 11

24 se han reportado también para los alevines de otras especies halotolerantes, como O. mossambicus, O. aureus y para el híbrido de esta especie con O. niloticus. Los diferenciales máximos de salinidad que se han reportado como viables para el proceso de transferencia directa de los juveniles de tilapia desde agua dulce a agua salada, sin una aclimatación previa, varían tanto en dependencia de la especie como de la edad, de 15 a 20 % (Villegas, 1990), entre 18 y 23 % (Watanabe et al., 1985a, 1985b), hasta un máximo de 25.2% (Al-Almoudi, 1987). lv.3. MÉTODOS DE ACLIMATACIÓN A AGUA SALADA El incremento gradual de la salinidad es el método más utilizado para aclimatar un gran número de especies al agua salada aunque, dependiendo de la especie, esto requiere en general de períodos de dos a cinco días, lo cual eleva el costo de este proceso debido al mayor uso de agua y de mano de obra. Por este motivo, la tolerancia a la salinidad de las diferentes especies de tilapia se ha estudiado usando diferentes métodos de aclimatación; por ejemplo, Suresh y Lin (1992) reportan para O. aureus una tolerancia a salinidades superiores a 51.8% con una aclimatación gradual, mientras que cuando la transferencia fue directa, se registraron mortalidades elevadas a partir de 21 % (Watanabe et al., 1997). En general, los límites de tolerancia a una transferencia directa para varias especies de tilapia es alrededor de 18 % (Perschbacher y McGeachin, 1988). Sin embargo Hopkins, Rhida, Leclercq, Al-Ameerii y Al-Ahmad (1989) concluyeron que una tasa de incremento de 5 % de salinidad por día es más efectiva para la adaptación de 0. spilurus al agua salada y este mismo procedimiento se utiliza normalmente a nivel comercial para aclimatar a los alevines de la tilapia roja de Florida (O. urolepis hornorum x O. mossambicus) (Watanabe et al., 1988). En otro trabajo realizado por Villegas (1990) con O. mossambicus, O. ní/oticus y sus híbridos para evaluar la tolerancia a la salinidad, se determinó que ésta se incrementa con la edad y por consecuencia con el peso de los organismos, lo cual coincide con los resultados obtenidos por Watanabe et al. (1985b) con 0. niloticus, O. aureus y O. mossambicus (hembras) x O. niloticus (machos). 12

25 En un estudio similar con la tilapia roja de Florida, en el cual se determinó la tolerancia a la salinidad con peces de diferentes edades, los resultados demostraron que, aunque la transferencia directa al agua marina es factible, es necesario considerar el posible impacto económico de este procedimiento, ya que el porcentaje de sobrevivencia de los organismos puede disminuir notablemente cuando estos son demasiado pequeños. Por este motivo, es necesario definir cual es la edad de transferencia más adecuada para cada especie, con base en el conocimiento de las variaciones de su tolerancia a cambios bruscos de la osmolalidad del medio, las cuales son de origen ontogenético (Watanabe et al., 1990a). IV.4. CRECIMIENTO El crecimiento de las tilapias en agua salobre y salada ha sido investigado por numerosos autores, los cuales han evaluado en estos ambientes las respuestas a numerosos factores, como por ejemplo el porcentaje de cloruros o de proteínas en su dieta, la densidad de siembra, técnicas diferentes de cultivo, usando además diferentes especies de tilapia. Por este motivo, los resultados que se obtuvieron en varios de estos estudios son difícilmente comparables y son además por lo menos parcialmente contrastantes. Por ejemplo, Al-Ahmad et al. (1988) cultivaron O. spilurus en agua salada (38-40%) en tanques de fibra de vidrio, en un sistema de agua corriente y en jaulas. En este estudio se suministraron tres diferentes raciones alimenticias y se observó un mayor crecimiento y una mejor conversión del alimento cuando la dieta se suministró a razón de un 2% del peso corporal, pero no se encontraron diferencias entre los tres sistemas de cultivo. Cruz et al. (1990) cultivaron la misma especie a salinidad de 36 % en dos tipos de encierro (inicialmente jaulas y posterior transferencia a tanques circulares de concreto) y concluyeron que la tasa de crecimiento y la conversión alimenticia fueron comparables con los resultados obtenidos en agua dulce. 13

26 Por otra parte, Cruz y Ridha (1991) cultivaron 0. spilurus a una salinidad de 33 % y con diferentes densidades de siembra. En este trabajo se concluyó que la densidad que dio el mejor resultado fue la de 200 peces.m -3, la cual coincide con los resultados reportados por Al-Ahmad et al. (1988) y que implica la factibilidad del cultivo intensivo de esta especie, aún en un ambiente estresante, representado por el agua de mar. Finalmente, Deguara y Agius (1997) evaluaron el crecimiento de una variedad de tilapia roja (O. mossambicus x O. niloticus) y de O. spilurus en agua dulce, agua salobre (18%) y agua salada (37%) y concluyeron que la tilapia roja presentó una mejor tasa de crecimiento en agua salobre y salada de la que registraron con O. spilurus por lo cual, a diferencia de los autores anteriores, no aconsejaron el cultivo de la segunda de estas especies en agua de mar, o en cuerpos de agua con influencia marina. El cultivo intensivo de la tilapia roja de Florida en agua salada se ha realizado en diferentes sistemas de cultivo y se ha comparado con los resultados obtenidos con otras especies de tilapia. Como en el caso anterior, existen discrepancias entre algunos de estos trabajos, en los cuales se compararon diferentes salinidades y temperaturas, además de varios sistemas de cultivo, densidades de siembra y porcentajes de proteína en la dieta. Se usaron también diferentes tallas de organismos, lo cual dificulta la valoración y la comparación entre los varios datos obtenidos con una gran variedad de especies y de condiciones ambientales, por lo cual se consideró necesario realizar nuevos experimentos con las especies que se cultivan en nuestro país, sobre las cuales no existe suficiente información, por lo menos en lo que se refiere a su cultivo en ambientes marinos. De acuerdo a Fitzsimmons (2000), existen reportes incompletos y pobremente documentados sobre la introducción de O. mossambicus en el estado de Sonora, que se utilizó para el control del crecimiento de algas en estanques de camarón en los 1970s, y de cultivos realizados en los 1980s con O. aureus y 0. mossambicus, además que con tres híbridos diferentes, aclimatados a 35 %) 14

27 En años posteriores se realizaron también algunos cultivos experimentales en jaulas en la Bahía de Bacochibampo, también en el estado de Sonora, con salinidades medias de aproximadamente 35%) aunque no existe información publicada sobre la especie que se utilizó y sobre los resultados de estas primeras experiencias. García-Ulloa et al. (1996) cultivaron en condiciones experimentales juveniles de O. niloficus bajo diferentes concentraciones de salinidad y llegaron a la conclusión, inesperada y poco probable, que esta especie tiene un mayor crecimiento y un mejor índice de conversión alimenticia a 40%) que en agua dulce. Otros resultados que contradicen la mayor parte de la literatura vigente fueron el bajo crecimiento en agua de mar de la tilapia híbrido rojo O. mossambicus x O, niloticus el reportado por Tintos (1999) y más recientemente por Mena (2001), el cual además encontró un efecto negativo de la salinidad sobre las variables gasométricas en la sangre de esta variedad por lo cual ambos llegaron a la conclusión que el cultivo de este híbrido es recomendable solamente en un intervalo de salinidad de 0 a 15%) el cual parece muy restringido en comparación con su reconocida tolerancia para las altas salinidades. Este tipo de resultados refuerza la necesidad de realizar más estudios con las especies y variedades que se mantienen desde hace años en los Centros Piscícolas Mexicanos, para poder seleccionar con base en estudios realizados tanto en condiciones de laboratorio como de campo, la que resulte ser la más conveniente para su cultivo en agua de mar. 15

28 V. MATERIALES Y MÉTODOS V.1. MÓDULO EXPERIMENTAL Para el desarrollo de este trabajo se contó con la colaboración del laboratorio de Ciencias Marinas de la Universidad Autónoma de Guadalajara, que cuenta con una sala húmeda en la cual se llevaron a cabo los experimentos de aclimatación y de crecimiento. El agua dulce del laboratorio, que se obtiene de la red de distribución urbana de agua potable, no contiene cloro libre o cloraminas por lo cual se pasa solamente a través de un filtro de cartucho con una capacidad de retención de partículas de 5 Pµ de diámetro. El agua salada es bombeada directamente de la Laguna de Barra de Navidad, Jalisco. Antes de su uso se pasa por un filtro rápido de arena y por dos filtros verticales de cartucho, los cuales aseguran una retención nominal de las partículas con dimensiones de hasta 5 Pµ. Como medida adicional de seguridad, se aplica una solución de sal disódica de EDTA (ácido etilenediamino tetraacético), la cual sirve como quelante de los metales pesados eventualmente presentes en solución, y finalmente el agua se esteriliza por exposición a radiación ultravioleta. Con la excepción de los períodos de verano, que se caracterizan por las fuertes precipitaciones típicas de los climas subtropicales, la salinidad de la laguna se mantiene aproximadamente constante y cercana a 33 %) que fue el valor medio registrado en el transcurso de las pruebas de aclimatación y de cultivo en laboratorio que se llevaron a cabo para el presente estudio. El aire forzado que se utiliza en el laboratorio proviene de una turbina de 2 HP marca Baldor Pacer, sin prefiltros o filtros en línea, de cuyo ducto principal se derivan líneas que abastecen los acuarios en forma individual, mediante mangueras plásticas y piedras de aireación. Los acuarios usados en este estudio son de sección rectangular y miden 120x30x40 cm de largo, ancho y alto, respectivamente, con un volumen de 144 litros y volumen útil de aproximadamente 100 litros. 16

29 V.2. ORGANISMOS EXPERIMENTALES Los organismos experimentales de las tilapias O. niloficus, O. aureus y del híbrido O. mossambicus x O. niloticus, revertidos sexualmente con uso de andrógenos (Watanabe et al., 1988), se obtuvieron de la Granja Acuacultura Paraíso, localizada en el estado de San Luis Potosí y del Centro Acuícola Jala perteneciente a la Secretaría del Medio Ambiente, Recursos Naturales y Pesca, localizado en el Estado de Colima y se transportaron en bolsas de polietileno, con una densidad de 100 organismos por bolsa, colocadas en cajas de poliuretano para su protección durante el transporte. Una vez en el laboratorio, los organismos se mantuvieron en agua dulce, en tanques de fibra de vidrio de 3000 litros de capacidad, con aireación constante y con recambios diarios de agua equivalentes al 50% del volumen total, que sirvieron también para eliminar por sifoneo tanto las heces como el alimento sobrante. La alimentación fue ad libitum con alimento peletizado Super Zeigler 40%, iniciador para tilapias, durante los primeros 15 días de permanencia. Después de este primer periodo de aclimatación, los organismos se siguieron alimentando y se mantuvieron en las mismas condiciones de cultivo, hasta cuando alcanzaron los pesos previstos para llevar a cabo los experimentos de aclimatación y de evaluación del crecimiento en peceras. V.3. EXPERIMENTOS DE ACLIMATACIÓN Estas pruebas se llevaron a cabo siguiendo dos modalidades: la primera fue por transferencia directa a las salinidades finales previstas y la segunda fue siguiendo la técnica clásica de aclimatación gradual, utilizando los protocolos que se especifican a continuación. En cada prueba se tomaron muestras para obtener los valores medios de las tallas y de los pesos iniciales, con el fin de verificar la igualdad en peso de los organismos y los cultivos se mantuvieron con las condiciones estándar de calidad de agua, de aireación y de alimentación.

30 V.3.1 atransferencia DIRECTA Para estas pruebas se usaron organismos con pesos nominales de 1, 5, 10 y 30 g, los cuales se transfirieron directamente a las salinidades de 15, 25 y 33 %o, manteniendo en cada caso un grupo de peces de igual talla en las condiciones originales de 0 % de salinidad, el cual sirvió como control. En una primera prueba, se utilizaron solamente alevines de 1 y 5 g de 0. niloticus que se obtuvieron del Centro Acuícola Jala, Colima y de 1, 5, 10 y 30 g del híbrido O. mossambicus x O. niloticus, con procedencia de la granja Acuacultura Paraíso, de San Luis Potosí. En todos los casos se colocaron 15 organismos en cada uno de los nueve acuarios que se usaron como repeticiones para cada especie y cada salinidad. En una segunda serie de pruebas se emplearon las tres especies previstas en los objetivos, todas con los cuatro pesos establecidos (1, 5, 10 y 30 g). En este caso, todos los organismos fueron facilitados por la granja Acuacultura Paraíso de San Luis Potosí aunque, en vista del número limitado de alevines de O. aureus y de O. mossambicus, los experimentos fueron todos en cuadruplicado, con 25 especímenes por repetición, solamente en la primera prueba, la cual fue llevada a cabo con especímenes con un peso aproximado de 1 g. Para los pesos mayores, las pruebas se llevaron a cabo con cuatro repeticiones y con 25 organismos en el caso del híbrido, mientras que la sobrevivencia de los alevines de las demás especies se verificó solamente en dos acuarios, con 25 organismos por cada repetición. Todas estas pruebas duraron ocho horas, con observaciones horarias para la evaluación de la mortalidad, determinando en cada hora de observación la temperatura y la salinidad, además del número de organismos sobrevivientes entre una observación y la hora siguiente de muestreo. Al final de estos experimentos los organismos sobrevivientes se mantuvieron durante una semana en los mismos acuarios, en condiciones normales de cultivo y a la salinidad de aclimatación, con el fin de verificar eventuales efectos a plazo más largo del que se utilizó para este tipo de prueba. 18