De acuerdo a lo expuesto anteriormente, en el presente estudio se plantean los siguientes objetivos:

Transcripción

1 1 1. INTRODUCCIÓN En el último tiempo la industria de semillas ha crecido considerablemente a nivel mundial, convirtiéndose en una alternativa rentable para muchos países; específicamente en Chile las exportaciones de la industria de semillas en el año 2003 alcanzaron los US$ (SNA, 2003). Esto lleva a nuevos desafíos con el fin de obtener un producto de calidad que sea competitivo y que se adecue a las exigencias de los consumidores. WATKINS (1998) establece que los componentes de la calidad de las semillas más importantes son: el porcentaje de germinación, la pureza física, pureza genética, sanidad y el vigor. Se pueden encontrar muchas evaluaciones que miden los parámetros antes mencionados, ya sea a nivel de laboratorio o en el campo, de los cuales el vigor se ha convertido en un parámetro difícil de evaluar e interpretar. Uno de los problemas es que no existe una relación exacta entre los resultados de laboratorio y los obtenidos en el campo, ya que un lote de semillas puede tener un alta germinación en laboratorio pero en el campo su emergencia es baja y las plántulas producidas son de mala calidad. En estos resultados pueden estar involucrados muchos factores tanto externos (condiciones ambientales) (WATKINS, 1998; DELOUCHE, 1980) como internos (propios de la semilla) (ABDUL-BAKI, 1980; DICKSON,1980).

2 2 Existen varios criterios de selección de semillas de acuerdo a su calidad. Esta selección puede ser por peso, tamaño, apariencia o defectos. Muchas veces se puede subestimar el potencial de las semillas, tanto para las que pertenecen a la fracción de descarte como aquellas que se comercializan, pero se puede recurrir a otras evaluaciones con el fin de determinar la condición de un lote de semillas. De acuerdo a lo expuesto anteriormente, en el presente estudio se plantean los siguientes objetivos: 1. Evaluar el vigor y germinación en semillas y plántulas de pimentón (Capsicum annuum L.) de diferente calidad, tanto en el campo como en laboratorio. 2. Analizar las pruebas de vigor y germinación que pueden predecir el comportamiento de las semillas de pimentón de diferente calidad en el campo. 3. Cuantificar en el campo el comportamiento de las plántulas provenientes de semillas de diferente calidad sometidas a dos condiciones ambientales.

3 3 2. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 2.1 Definición de vigor en semillas: El vigor en semillas tiene muchas definiciones, según MCDONALD (1980) es la suma total de aquellas propiedades que determina el nivel potencial de actividad y comportamiento de la semilla o partida de semillas durante la germinación y la emergencia de plántulas. Vigor es una característica fisiológica determinada por el genotipo y modificada por el ambiente, que gobierna la capacidad de una semilla para producir rápidamente una plántula en el suelo y el límite en el cual la semilla tolera una gama de factores ambientales. La influencia del vigor puede persistir a través de la vida de la planta y afectar la producción (PERRY, 1972). Por otro lado según la AOSA (2002) señala que el vigor de la semilla incluye procesos y reacciones bioquímicas durante la germinación con reacciones enzimáticas y actividad respiratoria, velocidad y uniformidad de la emergencia y crecimiento de las plántulas en el campo, la habilidad de las plántulas para emerger bajo condiciones de campo desfavorables. Según la AOSA (1983) existen muchos factores que causan variaciones en el nivel de vigor de las semillas, entre los factores más importantes están:

4 4 a) Constitución genética b) Ambiente y nutrición de la planta madre c) Madurez del fruto al momento de cosecha d) Tamaño y peso de la semilla e) Integridad mecánica f) Deterioración y envejecimiento g) Presencia de patógenos 2.2 Pruebas de vigor y otras evaluaciones: Una prueba de vigor es un conjunto de análisis acerca de un lote de semillas que dan a conocer el potencial de emergencia en el campo (HOFFMASTER, 2002). El objetivo de las pruebas de vigor es determinar aquellos lotes de semillas que son capaces de germinar en el campo en forma rápida y uniforme con un alto porcentaje de emergencia bajo condiciones ambientales desfavorables (AOSA, 1983). Según la AOSA (2002), la pruebas de vigor se pueden agrupar en tres categorías generales:

5 5 1) Crecimiento de las plántulas: se realizan evaluaciones en plántulas, tales como: clasificación del vigor en plántulas (fuertes y débiles), tasa de crecimiento y velocidad de germinación. 2) Pruebas de estrés: simulan las condiciones de stress a las cuales están sometidas las semillas en el campo, dentro de estas se tienen: prueba de envejecimiento acelerado, prueba de frío, prueba de germinación con frío y la prueba de estrés osmótico. 3) Pruebas bioquímicas: se basan en los cambios bioquímicos que se inician con la germinación de las semillas. Entre estas pruebas están las de: tetrazolio, conductividad eléctrica, respiración, actividad de la enzima glutámico ácido descarboxilasa (GADA) y contenido de ATP Prueba de conductividad eléctrica Está basada en una modificación de la resistencia eléctrica, causada por la lixiviación de electrolitos, cuando la semilla se sumerge en agua destilada por un determinado período de tiempo (DURAN y NAVAS, 2000). Un lote de semillas que presenta mayor conductividad es aquel que presenta mayor permeabilidad de las membranas y por lo tanto un menor vigor. Una de las causas importantes en las diferencias de vigor en las semillas es la integridad de las membranas celulares, que está dada por cambios químicos

6 6 deteriorativos y/o rotura física, la diferencia de vigor puede ser determinada indirectamente midiendo la lixiviación de electrolitos con una prueba de conductividad (MATTHEWS y POWELL, 1986; POPINIGIS, 1975b). Según la AOSA (1983), las semillas pueden reparar las membranas durante estados tempranos de la imbibición, con el cual disminuye el lixiviado de electrolitos, esta es una característica de las semillas de alto vigor que tienen la habilidad de reorganizar sus membranas celulares o reparar algún daño en forma más rápida que las semillas de bajo vigor. Esto se refleja en la prueba de conductividad en donde las semillas de mayor vigor presentan valores de conductividad menores que las semillas bajo vigor. La conductividad eléctrica ha sido usada como un método exitoso para evaluar vigor en varias especies tales como maíz (Zea mays L.) (SCHMIDT y TRACY, 1989; BEKENDAM, KRAAK y VOS, 1987), poroto (Phaseolus vulgaris L.) (THIRAPORN, TEKANO y CHOOMSAI, 1987), porque los resultados de conductividad se correlacionaron con el comportamiento de las semillas en el campo. En otros casos como pimentón (Capsicum annuum L.) (TRAWATHA et al., 1990; SUNDSTROM et al., 1986), tomate (Lycopersicom esculentum Mill.) (ARGERICH y BRADFORD, 1989), arveja (Pisum sativum L.) (DUCZMAL y MINICKA, 1987) y melón (Cucumis melo L.) (PESIS y NG, 1983) no ha sido útil como una prueba de vigor, debido a que la conductividad no se relacionó con el vigor de las semillas.

7 Prueba de envejecimiento acelerado El envejecimiento acelerado (EA), es un método que consiste en exponer las semillas por cortos períodos de tiempo a dos variables ambientales: alta humedad y alta temperatura, las cuales causan una rápida deterioración de la semilla. Los lotes de semillas de alto vigor resistirán estas condiciones de estrés extremas y la tasa de deterioro es baja en comparación con aquellos lotes de bajo vigor (AOSA, 1983). Las condiciones ambientales a las cuales estarán expuestas las semillas dependen de la especie, según las reglas de la AOSA para el caso de Capsicum sp. se recomienda una temperatura de 41 C por 72 horas. Estas condiciones se asumen como similares a las que ocurren durante el envejecimiento natural de las semillas Tasa de crecimiento La tasa de crecimiento es considerada como una prueba de vigor, porque tiene implícito dos términos que forman parte de la definición de vigor en semillas, estos son la rápida y uniforme emergencia (AOSA,1983). Esta prueba consiste en germinar las semillas de acuerdo a lo descrito por la prueba de germinación y al finalizar el período se mide el largo de las plántulas, el cual se relaciona con los días en los cual se obtuvo tal crecimiento (AOSA, 1983).

8 8 Cuando el resultado ha sido un crecimiento precoz, se relaciona con aquellas semillas que logran emitir radícula antes de los 10 días y pueden ser consideradas de buen vigor (JONES, 1996). Para medir el deterioro en semillas de tomate, se hicieron varias evaluaciones de las cuales la tasa de crecimiento de las radículas fue el indicador más sensible de la pérdida de calidad de las semillas, debido a que el meristema apical de la raíz, es el primer tejido dañado durante el deterioro restringiendo el crecimiento longitudinal de la raíz (ARGERICH y BRADFORD, 1989; ARGERICH, BRADFORD y TARQUIS, 1989). Evaluando la tasa de crecimiento de las plántulas, especialmente el crecimiento de las radículas bajo condiciones ambientales controladas, ha sido usado exitosamente como una prueba de vigor, en un gran número de especies vegetales de semilla pequeña como zanahoria (Daucus carota L.), lechuga (Lactuca sativa L), radichio (Cichorium intybus L.), coliflor (Brassica oleracea var. Botrytis L.) y cebolla (Allium cepa L.) (GENEVE y KESTER, 2001), aún cuando otros autores establecen que no tiene relación con el comportamiento en el campo por la alta capacidad de las raíces de emitir raíces secundarias y reestablecer el crecimiento normal de las plantas (ARGERICH y BRADFORD, 1989).

9 Uniformidad de crecimiento Un lote de semillas con un alto porcentaje de semillas muertas es de baja calidad, pero un lote con un alto porcentaje de semillas viables no significa que tenga una buena calidad, ya que este lote posee una población de semillas con una variabilidad la cual puede ser baja, entonces la germinación puede ser casi simultánea, pero si la variabilidad es alta habría un amplio rango de tiempo desde el comienzo al término de la germinación originándose plántulas de tamaños variables (PERRY, 1982). Esta variabilidad puede medirse y se conoce como uniformidad de crecimiento Índice de vigor Una prueba de vigor entrega información útil, pero para obtenerla se requiere de tiempo e incurrir en costos, además los resultados varían de laboratorio en laboratorio (SAKO et al., 2002) es por ello que se han usado sistemas automáticos para realizar ciertas mediciones. SMITH, WELCH y MCCOY (1973b), obtuvieron imágenes de plántulas de lechuga (Lactuca sativa L.) con una cámara de video, las mediciones de largos de raíces y totales se correlacionaron con la emergencia en el campo,

10 10 el inconveniente fue la poca cantidad de plántulas por imagen que se podían obtener al mismo tiempo. Otros trabajos con imágenes obtenidas con escáner y más tarde procesadas en el computador, se han registrado en varias especies como lechuga (Lactuca sativa L.) (SAKO, 2000) y soya ( Glycine max (L.) Merr.) (HOFFMASTER, 2002). Usualmente para determinar el vigor usando la uniformidad y el crecimiento se realizan mediciones manuales de las diferentes estructuras de las plántulas (SAKO et al., 2002). Existe un sistema automático que mide el vigor en semillas, el cual es fácil de usar, económico y objetivo. Este sistema consiste en un software que analiza imágenes de plántulas y entrega valores numéricos tales como promedios de largos de radícula e hipocotilo, desviación estándar de largo de hipocotilo, largo de radícula, largo total (largos de radícula más hipocotilo) y la relación entre largos de hipocotilo y radícula. Todos estos valores se ingresan a una fórmula, la cual entrega el valor de vigor de acuerdo al crecimiento y la uniformidad de las plántulas. Esta fórmula ha sido usada para evaluar el vigor en lechuga (Lactuca sativa L.) y soya (Glycine max (L.) Merr.) (SAKO et al., 2002).

11 Calidad en semillas: Según POPINIGIS (1975a) la calidad de una semilla comprende tanto atributos físicos, genéticos, fisiológicos y sanitarios que afectan la capacidad de originar plantas de alta productividad Color y apariencia de la semilla Las semillas más oscuras en algunos cultivos como arveja (Pisum sativum L.) y poroto (Phaseolus vulgaris L.) han mostrado más resistencia a organismos que atacan las raíces (DICKSON, 1980). Semillas de pimentón (Capsicum annuum L.) de testa más oscura, se les denomina fuera de tipo, presentan un gran desorden divisional, por lo que son incapaces de formar la estructura embrionaria propia produciéndose lisis celular (JONES, 1996). El color de la semilla podría indicar un grado de deterioro, semillas de trébol (Trifolium sp) y alfalfa (Medicago sativa L.) más oscuras presentaron un bajo vigor y una baja germinación (POPINIGIS, 1975a).

12 12 Se han observado daños visibles en semillas de algunas leguminosas como la ruptura de las testas, la ruptura de los cotiledones causada por el daño mecánico (DICKSON, 1980) Tamaño de la semilla Este es un factor que puede afectar el comportamiento de la semilla, así por ejemplo, aquellas más pequeñas tienen una menor germinación y un vigor más bajo (POPINIGIS, 1975a). En fréjol (Phaseolus vulgaris L.), las semillas de calibres más grandes obtuvieron un mayor porcentaje de germinación, menores pérdidas en la emergencia y plantas con un vigor más alto en comparación con las semillas de menor calibre (FAIGUENBAUM y ROMERO, 1989). Semillas de pimentón (Capsicum annuum L.) de mayor tamaño originan plántulas de mayor altura que las semillas pequeñas y medianas, el crecimiento extra, se debe a las reservas adicionales que estuvieron disponibles antes del desarrollo de la raíz en el caso de las semillas más grandes (COCHRAN, 1974). La velocidad de emergencia en plántulas de trigo no se vio afectada por el tamaño de la semilla, en cambio la altura de plántulas fue mayor en aquellas provenientes de semillas más grandes (ILLANES, 1987).

13 13 Las plántulas de brócoli (Brassica oleracea L. var. Italica) de semillas grandes crecen más rápidamente y las futuras plantas producen más flores en comparación con aquellas que provienen de semillas más pequeñas ( HEATHER y SIECZKA, 1991). En semillas de Brassicas sometidas a deterioración controlada las pequeñas tuvieron un vigor bajo en comparación a las grandes, esto se debe a que en las semillas pequeñas, el ingreso de agua es más rápido en condiciones de alta humedad provocando un envejecimiento o una expresión temprana de los efectos de la deterioración (POWELL y MATTHEWS, 1994). Según SHANMUGANATHAN y BENJAMIN (1992) en repollo (Brassica oleracea L. var. Capitata) el tamaño de la semilla afectó el peso total de la materia seca de las plántulas, siendo más livianas aquellas que provenían de las semillas más pequeñas, pero el tamaño no afecto el peso de la materia seca dividida en peso de raíces, hipocotilo y cotiledón, tampoco el tiempo de emergencia de las plántulas Peso de la semilla En soya (Glycine max (L.) Merr.)las plántulas provenientes de semillas más pesadas tienen una tasa de crecimiento mayor que aquellas plántulas de semillas más livianas. La ventaja de las semillas pesadas es su alto contenido de reservas cotiledonales, lo cual les confiere la habilidad de

14 14 entregar la energía para el crecimiento de las plántulas a una mayor tasa (QUI, MOSJIDIS y WILLIAMS, 1994). Según HARTMAN y KESTER (1995), la acumulación de reservas comienza cuando la semilla ha alcanzado su tamaño completo, esta acumulación causa un aumento en el peso seco de las semillas. Si este proceso se realiza en forma adecuada se obtienen semillas de alta calidad que son las de mayor peso. Así las semillas más pesadas son las que contienen más reservas por lo que originan plántulas de mayor vigor. Si el proceso de acumulación de reservas no se efectúa en forma adecuada las semillas serán delgadas y livianas, por un menor contenido de materiales de reserva (HARTMAN y KESTER, 1995) Deterioro de las semillas Existen muchas expresiones fisiológicas del deterioro de las semilla, entre ellas están: alteraciones en el color, lenta germinación, menor tolerancia a las condiciones desfavorables durante el proceso de germinación, disminución en el crecimiento de las plántulas y de la germinación, aumento de las plántulas anormales (OBRADOR, 1982). Lotes de semillas de cebollas almacenados a altos contenidos de humedad (25%), disminuyeron el deterioro, esto se explica en términos de la activación

15 15 de mecanismos de reparación a altos contenidos de humedad, los cuales contrarrestan el daño subcelular que ocurren durante la deterioración natural (WARD y POWELL,1983). Cuando en las semillas deterioradas se muestra un retraso en la emergencia, pero más tarde en el campo se obtienen similares tasas de crecimiento y producción, se debe a que en el meristema de la radícula, las raíces secundarias se pueden diferenciar y reemplazar a las raíces primarias, reestableciendo el crecimiento normal de las plántulas (ARGERICH y BRADFORD, 1989). El deterioro también esta relacionado con las mutaciones y aberraciones cromosomales que afectan la pérdida de vigor y viabilidad, así la estimulación en semillas envejecidas a la replicación de ADN durante la imbibición reestablecería las actividades metabólicas (LANTERI et al., 1996). 2.4 Calidad de planta madre: Existe cierta relación entre la fertilización que se realice a la planta madre y la calidad de las semillas provenientes de ella, así las semillas que provienen de plantas que recibieron una menor fertilización son de bajo vigor (JONES, 1996).

16 16 Según MARURI (1994), el vigor de la planta dado por la cantidad de brotes no afecta el número de semillas comerciales por gramo ni al porcentaje de germinación. La cantidad de frutos que tenga la planta al momento de ser hibridada afecta la calidad de las semillas, se producen semillas vanas que se caracterizan por ser livianas al no tener materiales de reserva en su interior (MARURI, 1994). El incremento de las temperaturas diurnas y nocturnas durante el llenado de la semillas, puede afectar el tamaño de éstas pero no necesariamente se reduce el vigor y el porcentaje de germinación (GIBSON y MULLEN, 1996). 2.5 Calidad de plántulas en el campo: En plantas de pimentón (Capsicum annuum L.) la altura del tallo, el largo de los internudos, el diámetro del tallo, el área foliar, el conteo de hojas e internudos, el volumen de planta y el número de hojas expandidas están en función de las temperaturas diurnas y nocturnas (SI y HEINS, 1996). Las plántulas ideales para el transplante son aquellas que tienen un alto peso seco, un tallo grueso e internudos cortos. Tales plántulas son fáciles de

17 17 transplantar en el campo y más tolerantes a los estrés del transplante, que las plántulas con un bajo peso seco, tallos delgados e internudos cortos. Para obtener las plántulas antes mencionadas se recomienda una temperatura diurna entre C y una temperatura nocturna de 22 a 26 C (SI y HEINS, 1996). La temperatura del aire y del suelo tienen un marcado efecto sobre el desarrollo y floración de las plantas de pimiento, cuando la temperatura disminuye, el desarrollo también disminuye, mostrando que altas temperaturas del suelo y de la noche reducen el número de hojas desde el estado de cotiledón hasta la floración (SI y HEINS, 1996).

18 18 3. MATERIALES Y MÉTODOS 3.1. Ubicación del ensayo Las pruebas de laboratorio se llevaron a cabo en el laboratorio de semillas de la Facultad de Agronomía perteneciente a la Pontificia Universidad Católica de Valparaíso, ubicada en la ciudad de Quillota. Las mediciones en el campo se realizaron en invernaderos pertenecientes a la misma Universidad Material experimental Se usaron cinco variedades de semilla de pimentón (Capsicum annuum L.), pertenecientes a la empresa de semillas PIGA. Las cuales fueron obtenidas en cuatro localidades distintas (Cuadro 1), de la cosecha Tratamientos Los tratamientos provenían de las diferentes separaciones de calidad que realizó la empresa, en las cuales se distinguieron separaciones por color (negras, blancas, blossom), tamaño, apariencia (arrugadas, rotas) y peso (livianas, flotación) todas ellas correspondían a la fracción de descarte. Las semillas negras tenían toda la testa oscura a diferencia de las con blossom

19 19 que presentaban sólo áreas de la testa más oscuras. El bajo peso de las semillas con flotación se asociaba a la presencia de semillas vanas, en cambio el bajo peso de las livianas se debía al pequeño calibre de éstas. Así variedad PM 982 estuvo compuesta por semillas negras y blancas, que se obtuvieron al separar por color la muestra de semillas con flotación; la variedad PM 042 se componía de semillas con flotación ; la variedad 094 de semillas livianas, con flotación ; la variedad 4p 150 semillas arrugadas, con blossom y flotación ; la variedad OP estuvo compuesta de semillas negras, blancas obtenidas de la separación de la muestra de semillas negras livianas, y semillas de calibre dos. Los testigos correspondieron a la variedad pero sin problemas en la calidad de las semillas. CUADRO 1. Identificación de las variedades de pimentón de diferentes calidades obtenidas durante la temporada Variedad Calidad de semilla Localidad Sin problemas Cabildo PM 982 Flotación Cabildo PM 042 Sin problemas Limache Flotación Limache Sin problemas Quillota 094 Livianas Quillota Flotación Limache Sin problemas Quillota 4p 150 Arrugadas Quillota Blossom Quillota Flotación Quillota Sin problemas Melipilla OP Negra liviana Melipilla Calibre 2 Melipilla 3.3 Análisis de características físicas en semillas:

20 20 Para el cálculo de las características biométricas de las semillas, se usaron muestras de 25 semillas, con cuatro replicas por tratamiento. Las imágenes se obtuvieron con un escáner H.P c. El fondo utilizado fue de color azul el cual hizo contraste con el color de las semillas. Estas imágenes se analizaron con el software SigmaScanPro 5.0, el cual entregó los resultados de área, perímetro, volumen, ancho, largo e intensidad de color de cada semilla. Además se pesaron muestras de 100 semillas con cuatro réplicas por tratamiento. Se calcularon los pesos promedios con la respectiva desviación estándar. 3.4 Prueba de germinación: En placas petri se sembraron 25 semillas sobre papel absorbente en dos capas, por cada tratamiento se usaron cuatro réplicas. Estas se mantuvieron en oscuridad por 14 días a 25 C en una cámara de germinación Memnert. Se consideró aquellas plántulas normales emergidas a los 14 días luego de la siembra, en relación con el total de las semillas sembradas (AOSA, 1992). Además se obtuvieron los siguientes porcentajes:

21 21 a) Porcentaje de plántulas anormales: este se estimó según las reglas de la AOSA (2002), se consideró plántula anormal aquella que tenía el hipocotilo enrollado, sin raíces y plántulas con la testa adherida a los cotiledones. Esto se midió a los 14 días después de la siembra (AOSA, 1992). b)porcentaje de semillas muertas: corresponde al porcentaje de semillas que no germinó al día 14, según las reglas de la AOSA (1992). 3.5 Pruebas de vigor y otras evaluaciones: Prueba de envejecimiento acelerado En frascos cerrados herméticamente los cuales contenían 40 ml de agua destilada, se colocaron 50 semillas sobre una malla para evitar el contacto de éstas con el agua, se usaron dos frascos por tratamiento, estos se llevaron a una cámara de envejecimiento acelerado en donde las semillas fueron envejecidas a una temperatura de 41 C y una humedad aproximada del 100% por 72 horas. Al finalizar el tiempo de envejecimiento a las semillas se les midió el contenido de humedad, con un analizador de humedad electrónico SMO 01, cuando el contenido de humedad estuvo entre 40-45% (AOSA, 1992) las semillas se sembraron en placas petri y se siguió el mismo procedimiento de la prueba de germinación.

22 Prueba de conductividad eléctrica Para la medición del lixiviado de electrolitos, se usó una muestra de 10 semillas por tratamiento. Se utilizaron cuatro réplicas por tratamiento. Las semillas se remojaron en 20 ml de agua destilada por un período de 24 hr. La conductividad se midió con un conductivímetro Schott CG 855, obteniéndose lecturas cada una hora las primeras ocho horas y la última lectura se hizo a las 24 hr de remojo ( FERNÁNDEZ, JOHNSTON y MUÑOZ, 1989) Tasa de crecimiento Se calculó en base al crecimiento diario de las plántulas hasta los 14 días después de siembra. Se usó la siguiente fórmula: TC= L (1) t donde, L corresponde al largo del hipocotilo en cm y t son los días desde siembra hasta el conteo.

23 Índice de vigor En cajas plásticas se sembraron 50 semillas sobre tres capas de papel filtro, con 25 ml de agua destilada, se usaron dos cajas por tratamiento. Las semillas fueron dispuestas en dos líneas paralelas con 25 semillas en cada línea. Las cajas se colocaron dentro de una cámara de germinación con una inclinación aproximada de 85 con respecto a la horizontal, estas permanecieron en oscuridad a 25 C por cuatro días. Las plántulas obtenidas se escanearon y las imágenes se analizaron con el programa SigmaScanpro 5.0, con el cual midieron largos totales, largos de radícula e hipocotilo, estos se usaron para calcular el índice de vigor de acuerdo a la fórmula de SAKO et al. (2002), en donde: Vigor = P C crecimiento + P U uniformidad Crecimiento = min(p h l h + P r l r,1000) Uniformidad = max(1000-(p P h + P S r + P S total + P S r/h )- P d n semillas muertas) En donde l h y l r, correspondieron a los largos promedios de hipocotilo y raíz; S h, S r, S total y S r/h, fueron las desviaciones estándar del largo de hipocotilo, largo raíz, largo total y la relación del largo raíz/hipocotilo. Los P corresponden a los porcentajes de ponderación de cada variable que se usó.

24 Peso fresco y peso seco Estos se midieron a los 14 días después de la siembra, se tomaron en cuenta el peso de los tallos, raíz y cotiledones. El peso de la materia seca se obtuvo después de tener las muestras durante 65 horas a 70 C. Ambos pesos se obtuvieron en plántulas provenientes de semillas envejecidas y no envejecidas. 3.6 Ensayo de campo: Este se llevó a cabo en los invernaderos situados en al Facultad de Agronomía de la Pontificia Universidad Católica de Valparaíso. En speedlings se sembraron 80 semillas por tratamiento, se uso tierra de hoja como sustrato. Una vez que las plántulas cumplieron 15 días desde siembra a emergencia, se separaron en grupos de cuarenta plántulas por tratamiento; un grupo se dejó en el campo a una temperatura aproximada de 25 C y lux de intensidad lumínica, el otro grupo de plántulas se llevó a una cámara Marconi MA 403 a 15 C con condiciones de luz artificial ( lux) en un ciclo de 10 horas de luz y 14 de oscuridad, simulando una condición de invierno. En ambos casos las plántulas permanecieron 30 días en los respectivos tratamientos, en ese momento a las plántulas se les midió el largo de raíz e hipocotilo.

25 Plantas útiles al transplante Porcentaje emergencia final Corresponde a la relación entre el número de semillas sembradas y el número de plántulas emergidas, una vez que la emergencia se hace constante. Se usó la siguiente fórmula: %EF = PE x 100 (2) S En donde, PE = Plántulas emergidas S = Número total de semillas sembradas Largo de raíz e hipocotilo Una vez que las plántulas cumplieron 30 días sometidas a dos condiciones ambientales diferentes, se les midió manualmente el largo de raíz e hipocotilo.

26 Diseño experimental Se usó un diseño completamente al azar, tanto en los ensayos en laboratorio como en el campo. Se utilizaron 4 réplicas por tratamiento. Todos los datos obtenidos fueron analizados estadísticamente por medio de un análisis de varianza. Con el fin de observar diferencias entre los tratamientos, se usó la prueba de Tukey con un nivel de significancia P Para correlacionar los datos se usó la prueba de correlación de Pearson con un niveles de significancia P 0,05 y P 0,01.

27 27 4. PRESENTACIÓN Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS 4.1 Características físicas de las semillas Peso de las semillas De acuerdo a los datos mostrados en el cuadro 2 se puede apreciar que existen diferencias significativas entre los distintos tratamientos para los valores de peso. De acuerdo a las calidades de las semillas los testigos que corresponden a los grupo de semillas sin problemas tienen los valores más altos excepto el testigo 2 que su peso no tuvo diferencias significativas con algunos tratamientos con problemas como las semillas arrugadas, blancas, con blossom y livianas. Los valores más bajos corresponden a las flotaciones, las semillas negras y las de calibre 2. Los bajos pesos en estos casos están asociados con el contenido de reservas en las semillas, ya que en las muestras había un alto porcentaje de semillas vanas, delgadas y livianas caracterizadas por su menor contenido de reservas (HARTMAN y KESTER, 1995).

28 28 CUADRO 2: Peso promedio de una muestra de 100 semillas de pimentón de diferentes calidades. Variedad Tratamiento Peso (g) Testigo 1 0,86a ± 0,10 PM 982 Blancas 1 0,77ab ± 0,06 Negras 1 0,57c ± 0,03 Testigo 2 0,70b ± 0,02 PM 042 Flotación 2 0,32e ± 0,04 Testigo 3 0,80ab ± 0,06 Livianas 3 0,74b ± 0,05 94 Flotación 3 0,70b ± 0,02 Testigo 4 0,82a ± 0,02 Arrugadas 4 0,78ab ± 0,04 4p 150 Blossom 4 0,74b ± 0,04 Flotación 4 0,52c ± 0,05 Testigo 5 0,80ab ± 0,08 Blancas 5 0,76b ± 0,02 OP Negras 5 0,67bc ± 0,02 Calibre 2 0,57c ± 0,02 Los valores promedio que comparten la misma letra no presentan diferencias significativas, de acuerdo a la prueba de comparación múltiple de Tukey (P 0,05) Características biométricas de las semillas De acuerdo a los datos del cuadro 3 el testigo 1 presenta los valores más altos para el área, largo, ancho, perímetro y volumen de las semillas, según los valores del cuadro 2 también estuvo en el grupo de las más pesadas.

29 29 Las semillas del tratamiento flotación 3 son las más pequeñas a pesar de no ser las más livianas (Cuadro 2). CUADRO 3. Valores promedio de área, largo, ancho, perímetro y volumen de semillas de pimentón de diferentes calidades. Variedad Tratamiento Área Largo Ancho Perímetro Volumen (mm 2 ) (mm) (mm) (mm) (mm 3 ) Testigo 1 14,1a 4,9a 3,9a 15,1a 33,9a PM 982 Blancas 1 13,1b 4,8ab 3,9a 14,6ab 30,0b Negras 1 12,4bd 4,7b 3,7b 13,5de 26,7c PM 042 Testigo 2 12,5bd 4,3c 3,7b 13,5de 27,2c Flotación 2 12,2d 4,4ce 3,8ab 13,8de 28,2bc Testigo 3 13,9ab 4,6be 3,4c 14,4ab 26,6c 94 Livianas 3 12,5bd 4,4ce 3,8ab 13,8de 29,1bc Flotación 3 11,6d 4,1d 3,6b 13,14e 24,6c Testigo 4 13,1b 4,7b 3,8ab 14,4ab 32,8ab 4p 150 Arrugadas 4 12,1d 4,2cd 3,6b 13,1e 25,2c Blossom 4 12,6bd 4,5be 3,9a 14,1bd 31,2ab Flotación 4 12,9bd 4,5be 3,8ab 14,1bd 29,6bc Testigo 5 12,1d 4,3cd 3,7b 13,6de 26,9c OP Blancas 5 12,0d 4,3cd 3,8ab 13,9de 27,8bc Negras 5 11,7d 4,1d 3,8ab 13,7de 27,0c Calibre 2 11,9d 4,2cd 3,8ab 13,4de 26,5c Los valores promedio que comparten la misma letra no presentan diferencias significativas, de acuerdo a la prueba de comparación múltiple de Tukey (P 0,05)

30 30 En el caso del testigo 2 y 5 tienen valores de tamaño menores que los tratamientos con problemas, además el peso de éstas no se diferencia de algunos tratamientos con problemas (Cuadro 2). De las semillas con problemas las blancas 1 presenta los mayores valores de tamaño siendo superada sólo en volumen por las semillas con blossom. 4.2 Prueba de germinación: En el Cuadro 4, se muestran los porcentajes de germinación, plántulas anormales y semillas muertas medidos al día 14. De todos los tratamientos el testigo 1 presenta los mejores porcentajes, con un 69% de germinación y sólo un 3% de semillas muertas, siendo la más pesada y la de mayor tamaño (Cuadro 2 y 3) lo que se asocia con su buena respuesta a la prueba de germinación (FAIGUENBAUM y ROMERO, 1989). Los testigos 4 y 2 se comportaron de forma similar que aquellos grupos de semillas con problemas en la calidad. El testigo 2 presentó valores bajos tanto para el peso como para el tamaño (Cuadro 2 y 3), que podrían influir en los bajos resultados de la prueba de germinación (POPINIGIS 1975b). El testigo 4 se considera liviana y grande (Cuadro 2 y 3), la respuesta obtenida podría deberse al peso y a la alta proliferación de hongos que lo afectó durante el desarrollo de las prueba, en donde la sanidad está entre los factores que determinan la calidad de las semillas (POPINIGIS, 1975a).

31 31 CUADRO 4. Porcentajes de germinación, plántulas anormales y semillas muertas medidos al día 14, en semillas de pimentón de diferentes calidades. Variedad Tratamiento Germinación Plántulas Semillas (%) anormales (%) muertas (%) Testigo 1 69a 28a 3a PM 982 Blancas 1 61ab 18a 21ab Negras 1 39bc 11a 50cd PM 042 Testigo 2 44ac 26a 30b Flotación 2 23c 13a 64d Testigo 3 53ab 27a 20ab 94 Liviana 3 59ab 22a 19ab Flotación 3 56ab 16a 28bc Testigo 4 34bc 36a 30bc 4p 150 Arrugadas 4 62ab 17a 21ab Blossom 4 18bc 64b 18ab Flotación 4 23bc 21a 56d Testigo 5 60ab 22a 18ab OP Blancas 5 51ac 33a 16ab Negras 5 38bc 29a 33bc Calibre 2 56ab 15a 29bc Los valores promedio que comparten la misma letra no presentan diferencias significativas, de acuerdo a la prueba de comparación múltiple de Tukey (P 0,05) En cuanto a los porcentajes de semillas muertas, estos fueron altos para las semillas negras y las flotaciones. En el caso de las semillas negras el alto porcentaje de semillas muertas está asociado a embriones dañados (JONES, 1996) por posibles oxidaciones que ocurren durante el desarrollo de la semilla, esto les impide formar estructuras embrionarias con lo cual pierden

32 32 la capacidad de emitir radículas, además se encuentran entre las livianas y pequeñas (Cuadro 2 y 3). Para los tratamientos flotación 2 y 4 el alto porcentaje está relacionado con la alta cantidad de semillas vanas existentes en las muestras, las cuales carecen de reservas que les permitan tener una buena germinación. Para el porcentaje de plántulas anormales la mayoría de los tratamientos no presenta diferencias significativas excepto blossom 4 que tuvo un porcentaje bastante alto de plántulas anormales un 64%. La anormalidad más frecuente fue la testa adherida a los cotiledones. En general, la mayoría de los lotes presenta porcentajes de germinación bajos, desde el punto de vista agronómico, ya que se considera como comercialmente aceptable valores sobre el 85%. 4.3 Pruebas de vigor y otras evaluaciones: Prueba de envejecimiento acelerado En el Cuadro 5, se puede observar el efecto del envejecimiento acelerado (EA) en los diferentes tratamientos, para los porcentajes de germinación, plántulas anormales y semillas muertas.

33 33 CUADRO 5. Porcentajes de germinación, plántulas anormales, semillas muertas y emergencia final medidos al día 14, en semillas de pimentón de diferentes calidades con y sin envejecimiento acelerado. Sin envejecimiento acelerado Con envejecimiento acelerado Variedad Tratamiento Germinación Plántulas Semillas Germinación Plántulas Semillas (%) anormales (%) muertas (%) (%) anormales (%) muertas (%) Testigo 1 69a 28a 3a 91a 6a 3a PM 982 Blancas 1 61ab 18a 21ab 51b 21ab 28b Negras 1 39bc 11a 50cd 18c 6a 76c PM 042 Testigo 2 44ac 26a 30b 26c 39bc 35b Flotación 2 23c 13a 64d 20c 13a 67c Testigo 3 53ab 27a 20ab 32c 26bc 42b 94 Liviana 3 59ab 22a 19ab 41b 29bc 30b Flotación 3 56ab 16a 28bc 34bc 15a 51bc Testigo 4 34bc 36a 30bc 15c 20ac 65c 4p 150 Arrugadas 4 62ab 17a 21ab 33bc 32bc 37b Blossom 4 18bc 64b 18ab 21c 28bc 51b Flotación 4 23bc 21a 56d 20c 7a 73c Testigo 5 60ab 22a 18ab 52b 26bc 22ab OP Blancas 5 51ac 33a 16ab 41b 16a 43b Negras 5 38bc 29a 33bc 19c 18a 63c Calibre 2 56ab 15a 29bc 30c 29bc 41b Los valores promedio que comparten la misma letra no presentan diferencias significativas, de acuerdo a la prueba de comparación múltiple de Tukey (P 0,05).

34 34 La respuesta a la prueba de envejecimiento acelerado fue significativamente diferente para todos los tratamientos (SUNDSTROM et al., 1986). Hubo un aumento considerable en los porcentajes de semillas muertas en la mayoría de los tratamientos con problemas, alcanzando porcentajes cercanos al 50%, además de una disminución en el número de plántulas anormales. Los tratamientos más afectados fueron las semillas negras y las flotaciones, que también tenían un bajo peso y eran pequeñas, estos problemas se acentuaron bajo las condiciones del envejecimiento acelerado, ya que al aumentar la humedad y la temperatura se incrementa el deterioro (OBRADOR, 1982). Los testigos 3 y 4 aumentaron considerablemente el porcentaje de semillas muertas, a pesar de no presentar problemas en su calidad asociados a su apariencia o a características físicas (Cuadro 2 y 3), su bajo vigor estaría asociado a otros factores, como podría ser la sanidad, ya que ambos testigos se vieron muy afectados por la presencia de hongos los cuales proliferaron aún más con las condiciones de humedad y temperatura usadas durante el envejecimiento acelerado. Aquellos lotes de semillas, en los cuales el envejecimiento acelerado no afectó negativamente la germinación, son considerados de alto vigor (MATHEWS y POWEEL, 1981), tal es el caso del testigo 1, el cual aumentó

35 35 el porcentaje de germinación después del envejecimiento (91%). Para el resto de los tratamientos el envejecimiento disminuyó el vigor de las semillas como ha sido informado (LANTERI et al. 1996, SUNDSTROM et al. 1986), esto también se ha observado en otras especies como melón (Cucumis melo L.) (PESIS y NG, 1983), tomate (Lycopersicon esculentum Mill.) (ARGERICH y BRADFORD, 1989, ARGERICH, BRADFORD y TARQUIS, 1989; COOLBEAR, FRANCIS y GRIERSON, 1984), cebolla (Allium cepa L.) ; lechuga (Lactuca sativa L.) (POWELL y MATHEWS, 1981), soya (Glycine max (L.) Merr.) (GIBSON y MULLEN,1996) Prueba de conductividad eléctrica De acuerdo a los datos del Cuadro 6, para los valores de conductividad eléctrica se pueden observar diferencias significativas para algunas calidades de semillas, flotación 2 tuvo el valor más alto seguidas por las semillas negras, los resultados se asocian con la mala calidad debido al daño de las membranas, causada principalmente por el deterioro de las semillas (MATTHEWS y POWELL, 1986; POPINIGIS, 1975b) lo cual confirma la respuesta que tuvieron en las pruebas anteriores (Cuadro 3 y 4). Los testigos no presentaron los valores más bajos como era de esperarse, sino que algunos tratamientos con problemas presentaron las menores conductividades, de acuerdo a esto la prueba de conductividad, no estaría indicando diferencias de vigor entre algunas calidades de semillas obtenidas con otras pruebas (DUCZMAL y MINICKA, 1987, SUNDSTROM et al., 1986; PESIS y NG, 1983). Esto podría asociarse con la rápida entrada

36 36 de agua a la semillas durante los primeros minutos de imbibición con lo que la mayor salida de electrolitos en algunos casos no necesariamente estaría asociada a un bajo vigor. CUADRO 6. Valores promedio de conductividad eléctrica (µs/cm/gr) medidos a las 24 h de remojo en semillas de pimentón de diferentes calidades con y sin envejecimiento acelerado. ELECTROCONDUCTIVIDAD Variedad Tratamiento Con envejecimiento Sin envejecimiento acelerado acelerado Testigo 1 167,5c 222,07c PM 982 Blancas 1 180,45bc 200,12c Negras 1 274,35bc 312,9bc PM 042 Testigo 2 313,04b 429,3b Flotación 2 678,86a 737,9a Testigo 3 173,2bc 220,03c 94 Liviana 3 75,73c 188,45c Flotación 3 148,18c 232,02bc Testigo 4 160,9c 206,66c 4p 150 Arrugadas 4 122,65c 154,22c Blosson 4 202,86bc 715,20a Flotación 4 138,59c 588,38ab Testigo 5 150,45c 160,68c OP Blancas 5 184,24a 296,28bc Negras 5 299,33b 327,83c Calibre 2 128,23c 222,10c Los valores promedio que comparten la misma letra no presentan diferencias significativas, de acuerdo a la prueba de comparación múltiple de Tukey (P 0,05).

37 37 Por otro lado, se puede apreciar que sí hubo un efecto del envejecimiento, ya que el significativo incremento en los valores de conductividad después del envejecimiento reflejan un deterioro de las membranas, el aumento se dio en aquellos tratamientos que presentaron el menor vigor. La pérdida de electrolitos fue muy alta en los primeros minutos de imbibición de las semillas, coincidiendo con FERNÁNDEZ, JOHNSTON y MUÑOZ, 1989 ; SCHMIDT y TRACY, 1989; COOBEAR, FRANCIS y GRIERSON, 1984; SIMON y RAJA HARUM, Las semillas envejecidas artificialmente incrementaron la pérdida de electrolitos (GIBSON y MULLEN,1996; FERNÁNDEZ, JOHNSTON y MUÑOZ 1989; COOLBEAR, FRANCIS y GRIERSON, 1984) lo cual está asociado con pobres estructuras de las membranas y el bajo vigor. A diferencia de lo ocurrido en semillas de melón en donde no hubo diferencias en los valores de conductividad entre las semillas envejecidas y no envejecidas (PESIS y NG, 1983). Hubo un incremento en el lixiviado de electrolitos las primeras cuatro horas de imbibición (Figura 1 y 2), luego el aumento se observó a una tasa cada vez más baja (ARGERICH y BRADFORD, 1989). Según DUKE, KAKEFUDA y HARVEY (1983), el aumento del lixiviado en las primeras horas de imbibición es una característica de la hidratación de las semillas, el cual va disminuyendo a través del tiempo, porque las membranas se reorganizan y recuperan su selectividad.

38 38 Conductividad (us/cm/g) Tiempo (h) Testigo 1 Blancas 1 Negras 1 Testigo 2 Flotacion 2 Testigo 3 Livianas 3 Flotacion 3 Testigo 4 Arrugadas 4 Blossom 4 Flotacion 4 Testigo 5 Blancas 5 Negras 5 Calibre 2 Figura 1. Conductividad eléctrica (µs/cm/gr) en semillas de pimentón (Capsicum annuum L.) de diferentes calidades.

39 39 Conductividad (us/cm/g) Tiempo (h) Testigo 1 Blancas 1 Negras 1 Testigo 2 Flotacion 2 Testigo 3 Livianas 3 Testigo 4 Arrugadas 4 Blossom 4 Flotacion 4 Testigo 5 Blancas 5 Negras 5 Calibre 2 Figura 2. Conductividad eléctrica (µs/cm/gr) en semillas de pimentón (Capsicum annuum L.) de diferentes calidades con envejecimiento acelerado.

40 Crecimiento en plántulas En el Cuadro 7 se presentan los valores de largos de radícula, hipocotilo y totales en plántulas con cuatro días de edad. Se puede observar que existen diferencias significativas para los largos de radícula y largos totales, para el largo de hipocotilo no existen diferencias significativas entre los tratamientos. CUADRO 7. Valores promedios de largos totales, de radícula e hipocotilo en plántulas de pimentón provenientes de semillas de diferentes calidades. Variedad Tratamiento Largo Largo Largo total radícula (mm) hipocotilo(mm) (mm) Testigo 11,9ab 3,17a 15,94a PM 982 Blancas 1 14,0a 3,04a 16,02a Negras 1 7,1b 3,04a 11,89ab PM 042 Testigo 2 6,7c 2,65a 7,86bc Flotación 2 2,9d 2,51a 3,83c Testigo 3 5,9c 3,02a 9,63bc 94 Livianas 3 8,8ab 2,96a 10,98b Flotación 3 6,4c 2,55a 9,88bc Testigo 4 5,2c 2,68a 6,86bc 4p 150 Arrugadas 4 7,6b 2,75a 9,28b Blosson 4 8,4ab 3,13a 8,57bc Flotación 4 5,1c 2,91a 9,97b Testigo 5 6,2c 3,02a 8,13bc OP Blancas 5 7,5b 2,92a 10,11b Negras 5 7,4b 2,42a 9,89b Calibre 2 8,8ab 2,86a 10,66b Los valores promedio que comparten la misma letra no presentan diferencias significativas, de acuerdo a la prueba de comparación múltiple de Tukey (P 0,05)

41 41 Los largos de radícula han sido usados para determinar el vigor en lechuga (Lactuca sativa L.) (SMITH, WELCH y LITLLLE, 1973a) y en tomate (Lycopersicon esculemtum Mill.) (ARGERICH y BRADFORD, 1989; ARGERICH, BRADFORD y TARQUIS, 1989) siendo un criterio de longitud y crecimiento temprano. En estados tempranos de crecimiento lo que está influenciando el vigor de las plántulas es la calidad del embrión (LIPTAY y PETER, 1983; WATKINGS y CANTLIFFE, 1983), de acuerdo a esto el testigo 1 y blancas 1 tienen los mejores potenciales embrionarios en comparación con flotación 2 que tiene los largos de radícula menores posiblemente por una pobre y a veces ausente estructura embrionaria. Los tratamientos calibre 2, blossom 4 y livianas 3 presentan problemas en la calidad observados con las pruebas de germinación, envejecimiento acelerado y electroconductividad, esto no se refleja en el largo de radícula. El largo del hipocotilo en estados tempranos, no discrimina como una prueba para evaluar vigor en semillas de pimentón, porque el hipocotilo presenta escaso crecimiento como para percibir diferencias significativas entre los tratamientos. El tiempo de evaluación al día cuatro es muy precoz para medir el hipocotilo, no así la radícula que presenta un mayor crecimiento y se puede usar para detectar diferencias de vigor entre los tratamientos, al igual que lo ocurrido en semillas de lechuga (SMITH, WELCH y LITTLE, 1973a).

42 Índice de vigor Los datos presentados en el Cuadro 8 muestran que existen diferencias significativas entre los tratamientos para el crecimiento, uniformidad y vigor en las plántulas de pimentón de cuatro días. CUADRO 8. Valores de crecimiento, uniformidad y vigor en plántulas de pimentón, provenientes de semillas de diferentes calidades. Variedad Tratamiento Crecimiento Uniformidad Vigor Testigo 1 962a 516a 784a PM 982 Blancas 1 874b 392b 681b Negras 1 547ch 329c 460cd Testigo 2 510g 313c 438c PM 042 Flotación 2 279f 107d 210e Testigo 3 539h 360e 467d Livianas 3 484i 279f 402f 94 Flotación 3 500gi 486g 494g Testigo 4 486hi 246h 390f Arrugadas 4 562ch 284f 451cd 4p 150 Blossom 4 630dh 381a 530h Flotación 4 557ch 317c 461cd Testigo 5 492gi 395a 453cd Blancas 5 569c 439i 517gh OP Negras 5 453e 454i 453cd Calibre 2 640d 450i 564i Los valores promedio que comparten la misma letra no presentan diferencias significativas, de acuerdo a la prueba de comparación múltiple de Tukey (P 0,05)

43 43 El testigo 1 es el que presenta el mejor vigor y flotación 2 el de más bajo vigor. Para todos los tratamientos los valores más bajos son para la uniformidad, es decir las plántulas crecieron pero con una alta heterogeneidad, lo que se puede atribuir a las diferencias en la calidad de los embriones. Según JONES (1996), la calidad de la semilla no tiene relación con el contenido de reservas y la calidad de las enzimas en estados temprano de crecimiento. Lo que estaría marcando las diferencias de vigor podría ser la fuerza que opone el endoesperma al embrión (LIPTAY y SHOOPFER, 1983; WATKINGS y CANTLIFFE, 1983), así embriones de mejor calidad son capaces de superar esta fuerza y emitir la radícula, entonces el peso de la semilla dado por el contenido de reservas en las semillas de pimentón, no sería la razón de las diferencias de vigor entre los diferentes tratamientos antes del cuarto día de crecimiento, sino que sería el embrión. Estas diferencias se ven reflejadas mayoritariamente por la desuniformidad de crecimiento. Desde el cuarto día en adelante (Figura 3 ), las plántulas comienzan a utilizar las reservas cotiledonales y más tarde estaría la transición, desde la heterotrofia a la autotrofia en donde el vigor estaría afectado por otros factores. Al incluir los criterios de uniformidad para determinar vigor, las semillas blancas y con blossom a pesar de pertenecer a la fracción de descarte, presentan un mejor vigor que algunos testigos sin problemas en la calidad como ha ocurrido en las pruebas anteriores, tal vez el criterio de selección por apariencia no estaría siendo lo suficientemente objetivo para separar las semillas.

44 Tasa de crecimiento Las mayores tasas de crecimiento las tuvieron el testigo 1 y blancas 1(Figura 3), la menor tasa fue para flotación 2. Para todos los tratamientos se observa un gran incremento en el crecimiento desde el día seis en adelante. Algunos tratamientos al final de la medición tienden a igualar sus tasas de crecimiento, estos corresponden a las semillas clasificadas como medias de acuerdo a su peso. A partir del día cinco, comenzaría el incremento de la actividad enzimática y el consumo de las reservas, con el consiguiente crecimiento del hipocotilo a una tasa mayor (Figura 3), así las semillas más pesadas crecieron a una tasa más rápida y se desarrollaron antes (QUI, MOSJIDIS y WILLIAMS, 1994) como es el caso del testigo 1, que fue además la más pesada (Cuadro 1) a diferencia de las más livianas. El tratamiento blancas 1, tiene un alto vigor de acuerdo a los resultados del crecimiento de las plántulas, aún teniendo un bajo porcentaje de germinación (Cuadro 3) y además pertenece a la fracción de descarte, en contraste con otros grupos de semillas sin problemas en la calidad que han mostrado un bajo vigor, esto se puede atribuir a factores internos de las semillas no asociados con la apariencia de éstas, los cuales estarían influyendo en el vigor.

45 45 Tasa de crecimiento (mm/dia) Dias Testigo 1 Blancas 1 Negras 1 Testigo 2 Flotacion 2 Testigo 3 Livianas 3 Flotacion 3 Testigo 4 Arrugadas 4 Blossom 4 Flotacion 4 Testigo 5 Blancas 5 Negras 5 Calibre 2 Figura 3. Tasa de crecimiento (mm/día) en plántulas de pimentón provenientes de semillas de diferentes calidades.

46 Peso seco De acuerdo a los valores del Cuadro 9, existen diferencias significativas para el peso seco tanto en las plántulas con 14 días provenientes de semillas envejecidas como no envejecidas CUADRO 9. Valores promedio de peso seco en plántulas de pimentón provenientes de semillas de diferentes calidades con y sin envejecimiento acelerado. Peso seco/plántula (mg) Variedad Tratamiento Sin envejecimiento Con envejecimiento acelerado acelerado Testigo 1 3,92a 4,36a PM 982 Blancas 1 4,05a 4,12a Negras 1 2,63ab 2,04ab PM 042 Testigo 2 3,83a 3,35ab Flotación 2 1,97b 1,7b Testigo 3 4,31a 4,22a 94 Flotación 3 4,04a 3,92a Liviana 3 3,5a 3,28ab Testigo 4 3,42ab 2,43b 4p 150 Arrugadas 4 3,58a 3,67a Blossom 4 3,34ab 2,73ab Flotación 4 2,74ab 2,47b Testigo 5 4,27a 3,77a OP Blancas 5 3,0ab 2,71ab Negras 5 2,69b 2,5ab Calibre 2 2,92ab 2,19b Los valores promedio que comparten la misma letra no presentan diferencias significativas, de acuerdo a la prueba de comparación múltiple de Tukey (P 0,05)

47 47 Los resultados obtenidos se deben posiblemente a que las plantas al momento de las medición se encontraban en un estado de autotrofia, en el cual el vigor podría depender de otros factores. Este resultado se relaciona con la tasa de crecimiento, ya que hubo un mayor consumo de reservas durante ese período de tiempo y con ello un mayor crecimiento. No hubo una disminución significativa en el peso seco en los tratamientos con envejecimiento (BENITEZ, 1987), además el Testigo 1 aumentó su contenido de materia seca, con lo cual se corrobora la capacidad de algunas semillas para reactivar los mecanismos de reparo en condiciones de envejecimiento. 4.4 Plantas útiles al transplante Los resultados del porcentaje de emergencia en condiciones de campo (Cuadro 10) indican que hay diferencias significativas entre las distintas calidades de semillas. El mejor porcentaje lo tuvo el Testigo 1 con un 85%, los valores más bajos son para Negras 1, Flotación 2, Flotación 4 y Negras 5. El resto de los tratamientos presentan porcentajes de emergencia intermedios. Los largos de raíces e hipocotilo se vieron afectados en su crecimiento, presentándose los menores valores en el ensayo a 15 C como se esperaba por la baja temperatura.