MANUAL DE PROCEDIMIENTOS
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- Teresa Villalobos Villalba
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1 Título: SOLUCIONES PARA BACTERIOLOGIA Página: 1 de 11 Fecha vigencia: 01-Jun-04 CONTENIDO Página A) PATRONES PERMANENTES PARA CLORO RESIDUAL 2 B) PREPARACION DE SOLUCION DE DPD Y PREPARACION DE 5 ORTOTOLIDINA C) PREPARACION DE SOLUCION DE TIOSULFATO DE SODIO 7 D) PREPARACION DE SOLUCIONES UTILIZADAS PARA LA DETERMINACION DE CLORO ACTIVO 9 Revisión Nº Preparó Redactó Revisó Aprobó 01
2 Título: SOLUCIONES PARA BACTERIOLOGIA Página: 2 de 11 A) PATRONES PERMANENTES PARA CLORO RESIDUAL 1. OBJETIVO: El objetivo del presente Documento Técnico es establecer la metodología adecuada para la preparación de los patrones que permitan la determinación colorimétrica del cloro residual en muestras de agua potable por el método del DPD. 2. ALCANCE: Este Documento Técnico se aplica al Laboratorio de la empresa Aguas de Tumbes e involucra al Jede de Control de Calidad y Asistente. 3. DEFINICIONES Y ABREVIATURAS: p.a. : Para Análisis : Grado de pureza de los reactivos químicos, generalmente se utilizan reactivos de alta pureza. DPD: Dietil-p-fenilendiamida 4. REFERENCIAS: PG.09 - Control del Servicio de Agua PE - LAB.01 Medición y seguimiento de la producción y prestación de agua IO - LAB Preparación de material de muestreo IO - LAB Muestreo de agua IO - LAB Control y seguimiento de reactivos y soluciones patrón IO - LAB Análisis de rutina 5. RESPONSABILIDADES: Jefe de Laboratorio: Verifica y gestiona los recursos necesarios para el cumplimiento de lo establecido en el presente Documento Técnico. Asistente del Laboratorio: Cumplen con los lineamientos establecidos en el presente Documento Técnico. 6. DESCRIPCION: El Asistente del Laboratorio prepara los patrones permanentes de Cloro Residual de acuerdo a la siguiente metodología: 6.1 Preparación de reactivos: Método del DPD a) Solución amortiguadora de fosfato: Disolver 24 g. de fosfato ácido de sodio anhidro y 46 g de fosfato ácido de potasio anhidro en agua destilada. Combinar
3 Título: SOLUCIONES PARA BACTERIOLOGIA Página: 3 de 11 esta solución con 100 ml de agua destilada en la que se ha disuelto 800 mg de EDTA y diluir con agua destilada hasta 1 litro. Añadir 20 mg de HgCl2 para impedir el crecimiento de mohos e interferencias en la prueba del cloro libre, debida a trazas de ioduro en los reactivos (Precaución: El HgCl2 es tóxico, se debe tener cuidado de evitar su ingestión). b) Solución Indicadora de N,N-dietil-p-fenilendiamida (DPD): disolver 1 gr. De oxalato de DPD. O 1.5 g. de sulfato de DPD pentahidratado, g de sulfato de DPD anhidro en agua destilada exenta de cloro que contenga 8 ml de solución de H2SO4 (1+3) y 200 mg de EDTA. Completar a 1 litro y conservar en oscuridad en frasco ámbar con tapón de vidrio. c) Solución de Sulfato de Amonio y hierro II (SAF): Disolver 1,106 g de Fe(NH4)2.6H2O en agua destilada que contenga 8 ml de solución H2SO4 (1+3) y completar hasta 1 litro con agua destilada recién hervida y enfriada. d) Solución de Yoduro de Potasio al 0,5% (m/v): Disolver 500 mg de KI y diluir a 100 ml, con agua destilada recien hervida y enfriada. Conservar refrigerada en frasco color ámbar con tapón de vidrio. Descartar la solución cuando presente color amarillo. e) Solución de arsenito de sodio al 0.5% (m/v): Disolver 5,0 g de NaAs=2 en agua destilada y diluir a 1 litro. f) Solución de tioacetamida al 0.25 % (m/v): Disolver 250 mg de CH3CSNH2 en 100 ml de agua destilada. 6.2 Preparación de patrones permanentes: Los patrones permanentes de Cloro Residual Libre se preparan diluyendo el volumen que se indica en la columna I o II con solución buffer de ph = 6,5 (c) hasta 100 ml, en tubos Nessler de dicha capacidad, de acuerdo a la tabla que figura en el Anexo I. 6.3 Precauciones: Los patrones permanentes están preparados para obtener la máxima sensibilidad y una prolongada duración, sin embargo para asegurar su estabilidad en el tiempo es conveniente guardarlos en un lugar fresco y seco al abrigo de la luz solar. 7. REGISTROS Y ANEXOS: ANEXO I. Tabla de patrones permanentes de cromato y dicromato de potasio para determinación del cloro residual. 8. ARCHIVOS: No aplicable. 9. LISTA DE DISTRIBUCION: Este documento es utilizado por:
4 Título: SOLUCIONES PARA BACTERIOLOGIA Página: 4 de 11 Jefe de Laboratorio. Analistas y demás personal del Laboratorio ANEXO I. Tabla de patrones permanentes de cromato y dicromato de potasio para determinación del cloro residual I ml SOLUCION DILUIDA (e) 0,0 0, ,1 10, ,2 20, ,3 30, ,4 40, ,5 50, ,6 60, ,7 70, ,8 80, ,9 90, ,0 100, , ,0 2, ,0 2, ,0 3, ,0 PATRON EQUIVALENTE CLORO RESIDUAL (mg/l) II ml SOLUCION MADRE (d)
5 Título: SOLUCIONES PARA BACTERIOLOGIA Página: 5 de 11 B) PREPARACION DE SOLUCION DE TIOSULFATO DE SODIO AL 0.1 N y N 1. OBJETIVO: El objetivo del presente Documento Técnico es establecer las pautas correctas a cumplir para la preparación de la solución de tiosulfato de sodio usada para la eliminación del cloro residual total en las muestras de agua. 2. ALCANCE: Este Documento Técnico se aplica en el Laboratorio de la empresa Aguas de Tumbes e involucra al Jefe de Control de Calidad y Asistente de Laboratorio. 3. DEFINICIONES Y ABREVIATURAS: p.a. : Para Análisis : Grado de pureza de los reactivos químicos, generalmente se utilizan reactivos de alta pureza. 4. REFERENCIAS: NTP Norma Técnica PG.09 - Control del Servicio de Agua PE - LAB.01 Medición y seguimiento de la producción y prestación de agua IO - LAB Preparación de material de muestreo IO - LAB Muestreo de agua IO - LAB Control y seguimiento de reactivos y soluciones patrón IO - LAB Análisis de rutina 5. RESPONSABILIDADES: Jefe de Laboratorio: Verifica y arbitra los recursos necesarios para el cumplimiento de lo establecido en el presente Documento Técnico. Asistente de Laboratorio: Cumplen con los lineamientos establecidos en el presente Documento Técnico. 6. DESCRIPCION: Para la preparación de la solución de tiosulfato de sodio empleada para la eliminación del cloro residual en las muestras de agua, el asistente cumple lo siguiente: 6.1.Solución de Tiosulfato de sodio al 0.1 N Preparación: Pesa 25 gr. de tiosulfato de sodio pentahidratado (Na2S2O3 x 5 H2O) p.a. y los disuelve en agua destilada, deja enfriar hasta temperatura ambiente; estandarizar con dicromato de potasio o biiodato de potasio después de al menos dos semanas de almacenamiento. Este almacenamiento es necesario para permitir la
6 Título: SOLUCIONES PARA BACTERIOLOGIA Página: 6 de 11 oxidación de cualquier bisulfito presente. Añadir aproximadamente 2 ml de cloroformo para minimizar la descomposición bacteriana. 6.2 Solución de tiosulfato de Sodio 0.25 N o 0.01 N Preparación: Diluir la solución almacenada de Na2S2O3 0,1 N a las concentraciones deseadas, utilizando agua destilada recientemente hervida y enfriada. Para acentuar su estabilidad, agregar 4 g. de borato y 10 mg de ioduro de mercurio por cada litro de solución. Para determinaciones precisas, estandarizar diariamente esta solución usando soluciones 0,01 N ó 0,025 N dicromato de potasio o biiodato de potasio. 7. REGISTROS Y ANEXOS: No aplicable. 8. ARCHIVOS: No aplicable. 9. LISTA DE DISTRIBUCION: Este documento es utilizado por: Jefe de Laboratorio. Asistente de Laboratorio
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