FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS

Transcripción

1 FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Presentación curso de postgrado Año 2017 Semestre 2do Nombre del Curso "Aplicaciones básicas de la Citometría de Flujo en el estudio de sistemas biológicos" Profesor Responsable (indicando las horas que participa en el dictado de clases) Fernando Chirdo Docentes Participantes (indicando las horas que participa en el dictado de clases) Coordinadores María Cecilia Alvarez Paula Carasi Docentes: Mariela Bollati. Instituto Pasteur. Montevideo. Uruguay María Bernarda Ganem. Field Applications Specialist. BD Life Sciences. Argentina Gabriel Morón. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología (CIBICI- CONICET). Facultad de Ciencias Químicas, Universidad Nacional de Córdoba, Córdoba, Argentina. María Florencia Quiroga. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y SIDA. Facultad de Medicina. Universidad de Buenos Aires. Buenos Aires, Argentina. Gabriel Gondolesi. Instituto de Trasplante Multiorgánico. Hospital Universitario Fundación Favaloro, Buenos Aires, Argentina. Andrea Bernasconi. Servicio de Inmunología. Hospital Garraham. Buenos Aires Pablo Quiroga. Laboratorios Bago. La Plata Luis Ariel Billordo. (INIGEM). Instituto de Inmunología Genética y Metabolismo. Augusto Sorrequieta. BID-Flow Cytometry Latam South. Life Sciences Solutions Natalia Scaglia. INIBIOLP (UNLP-CONICET). La Plata Duración Total (en horas) 45 Modalidad (Teórico, teórico-práctico, seminario, etc) Tipo de evaluación prevista Teórico-práctico escrita Especificación clara si se lo considera válido para cubrir exigencias del Doctorado. Se considera que el curso propuesto es válido para la carrera de Doctorado

2 Fecha de dictado 7 al 11 de agosto Cupo de alumnos 50 (parte practica 20) Inscripción desde 27 de junio Hasta el día 7 de julio Exigencias y requisitos de inscripción Bioquímicos, Farmacéuticos, Biotecnólogos, Médicos, Veterinarios, Biólogos y carreras afines. Arancelamiento NO SÍ x Montos Gratuito para Docentes, Investigadores y Graduados Destino de los fondos Mecanismo de pago que desarrollan actividades en la Facultad de Ciencias Exactas de la UNLP 2500 pesos teórico practico 1500 pesos solo teórico Se cubrirán gastos de traslado de los disertantes invitados y material bibliográfico, reactivos Los pagos se efectuarán a través de la Fundación Ciencias Exactas. Breve resumen de los objetivos y contenidos Durante el curso teórico-práctico se desarrollarán conceptos básicos y aplicaciones prácticas de la citometría de flujo empleadas en el estudio de distintos sistemas biológicos. El curso proporcionará los conocimientos básicos necesarios para una adecuada utilización del equipamiento. Durante las clases prácticas, los alumnos tendrán la posibilidad de analizar muestras marcadas con diferentes estrategias, y evaluar los resultados obtenidos en talleres de procesamiento de datos. Se pondrá énfasis en aspectos de bioseguridad en la manipulación de las muestras y en el uso del equipamiento. Contacto con el responsable Dirección Laboratorios del Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos- IIFP (UNLP CONICET) Facultad de Ciencias Exactas. 47 y La Plata Teléfono (int 45) Fax Correo electrónico fchirdo@biol.unlp.edu.ar

3 Curso de postgrado "Aplicaciones básicas de la Citometría de Flujo en el estudio de sistemas biológicos" Lugar de realización: Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. (IIFP) (UNLP- CONICET). Facultad de Ciencias Exactas. La Plata Programa del curso Clases teóricas. Introducción a la citometría de flujo. Descripción general de la estructura del citómetro: fluídica, óptica, lásers, electrónica. Conceptos de Fluorescencias: Espectro de excitación y emisión de luz. Fluorocromos (anticuerpos, sondas). Selección de las condiciones de adquisición (compensación). Selección de paneles de fluorocromos en detección multiparamétrica. Separación celular, sorting. Procesamiento y análisis de resultados. Almacenamiento de datos, Análisis de datos. Cuantificación absoluta. Preparación de la muestra para análisis. Controles de calidad en citometría. Bioseguridad en el uso del equipo de citometría de flujo. Empleo de la citometría en el análisis e identificación celular. Estudios de proliferación y muerte celular. Análisis de función mitocondrial, estrés oxidativo, detección de calcio intracelular. Ensayos funcionales, fagocitosis, producción de citoquinas. Aplicaciones en la clínica. Evaluación y diagnóstico en oncohematología y en inmunodeficiencias. Transplante, aplicaciones en la evaluación de compatibilidad y en el seguimiento del post-transplante. Trabajos Prácticos Adquisición (seteo y compensación) en equipos de citometría Entrenamiento en programas de análisis en centro de cómputos. Taller de armado de paneles Análisis de ciclo celular y muerte. Detección múltiple de citoquinas y proteínas fosforiladas. Ejemplo de uso de la citometría en oncohematología

4 Programa analítico del curso Clases Teóricas. Clase 1. Introducción a la citometría de flujo. Descripción general de la estructura del citómetro: fluídica, óptica, lásers, electrónica. Detección de Fluorescencia: Espectro de excitación y emisión de luz. Fluorocromos. 45min (Gabriel Moron) Clase 2. Solapamiento de espectros y compensación, selección de las condiciones de adquisición 30min (Bernarda Ganem) Clase 3. Procesamiento y análisis de resultados. Generación, almacenamiento y análisis de los datos. Informe de resultados y expresión estadística. Tipos de representaciones gráficas 30min (Gabriel Moron) Clase 4. Preparación de la muestra: Consideraciones prácticas. Procesamiento de muestras. Lisantes. Fijadores y conservantes. Titulación de Reactivos. Estabilidad de los reactivos, efectos en la compensación. 30min (Bernarda Ganem) Clase 5. Diseño de paneles en citometría multicolor. Clase 6. Inmunofenotipificación y ensayos funcionales. Parte I Utilidad de las Microesferas en citometría de Flujo. Detección de proteínas intracelulares. Clase 7. Fundamentos y aplicaciones de la separación celular (Sorting). Evaluación del sorting. 45min (Ariel Billordo) Clase 8. Bioseguridad en citometría de flujo 45min (Florencia Quiroga) Clase 9. Control de calidad en Citometría de flujo. Parte I Diseño de los controles experimentales. Evaluación de la reproducibilidad de los resultados. Controles de calidad: Calibraciones 45min (Mariela Bolatti) Clase 10. Inmunofenotipificación y ensayos funcionales. Parte II Respuesta celular. Activación, producción de ROS, Ca 2+, ensayos funcionales Clase 11. Cuantificación absoluta. Conteos relativos y absolutos. Clase 12. Ciclo celular y muerte 30min (Natalia Scaglia) Clase 13. Determinación de viabilidad. Estudios de muerte celular. Ensayos de proliferación, cuantificación de la proliferación. Dilución de CFSE. Análisis de ciclo celular. 45min (Mariela Bolatti) Clase 14. Pruebas funcionales. Ejemplo fagocitosis 30min (disertante a confirmar) Clase 15. Estudio de las inmunodeficiencias 60min (Andrea Bernasconi)

5 Clase 16. Uso en el seguimiento de la infección por HIV 45min (disertante a confirmar) Clase 17. Oncohematología 60min (disertante a confirmar) Clase 18. Aplicaciones de la citometría en partículas pequeñas 45min (Augusto Sorrequieta) Clase 19. Evaluación de bacterias. 30min (disertante a confirmar) Clase 20. Aplicaciones en industria farmacéutica. 45min (Pablo Quiroga) Clase 21. Control de calidad en Citometría de flujo. Parte II Control de calidad de muestras e interlaboratorios. Estandarización. Validación en proyectos extendidos en el tiempo, estudios multilaboratoriales, pruebas clínicas. Trabajos Prácticos TP1. Adquisición (seteo y compensación) en Citometría de 4 u 8 colores TP2. Taller de análisis de datos TP3. Armado de paneles TP4. Ciclo celular y viabilidad. Muerte celular TP5. Detección de citoquinas TP6. Oncohematología