ESTUDIO DE PREVALENCIA DE LA Fasciola hepatica Y Caracol Lymnaea spp. EN PREDIOS DEL MUNICIPIO DE SIMIJACA CUNDINAMARCA

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1 ESTUDIO DE PREVALENCIA DE LA Fasciola hepatica Y Caracol Lymnaea spp. EN PREDIOS DEL MUNICIPIO DE SIMIJACA CUNDINAMARCA ADRIANA MARCELA CABRA ÁNGEL CLAUDIA CONSUELO HERRERA HUÉRFANO UNIVERSIDAD DE LA SALLE FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA BOGOTÁ, D.C. 2007

2 ESTUDIO DE PREVALENCIA DE LA Fasciola hepatica Y Caracol Lymnaea spp. EN PREDIOS DEL MUNICIPIO DE SIMIJACA CUNDINAMARCA ADRIANA MARCELA CABRA ÁNGEL. Código CLAUDIA CONSUELO HERRERA HUÉRFANO. Código Trabajo de grado presentado como requisito parcial para optar al título de Médico Veterinario Director JOSÉ FERNÁNDEZ MANRIQUE Médico Veterinario Universidad de la Salle Docente de Epidemiología y Salud Pública UNIVERSIDAD DE LA SALLE FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA BOGOTÁ, D.C 2007

3 DIRECTIVOS RECTOR Hno. Fabio Gallego Arias VICERRECTOR ACADÉMICO Hno. Carlos Gabriel Gómez Restrepo VICERRECTOR DE PROMOCIÓN Y DESARROLLO HUMANO Hno. Edgar Figueroa Abrajím VICERRECTOR ADMINISTRATIVO Dr. Mauricio Fernández Fernández DECANO DE LA FACULTAD Dr. Pedro Pablo Martínez Méndez SECRETARIO ACADÉMICO Dra. María Teresa Uribe Mallarino DIRECTOR CLÍNICA VETERINARIA Dr. Humberto Vásquez Romero

4 Nota de aceptación: Director. Dr. José Fernández Manrique. Jurado Dr. César Díaz Rojas Jurado Dr. Dildo Márquez Lara Secretaria Académica. Dra. María Teresa Uribe Mallarino. Bogotá, 21 de marzo de 2007

5 COMPROMISO El presente trabajo de investigación no contiene ideas que de una u otra forma, sean contrarias a la Iglesia Católica, en cuanto a su doctrina, dogma y moral. Las ideas aquí expuestas por los graduandos no son responsabilidad ni del director del proyecto de investigación, ni de los jurados o la Universidad de La Salle.

6 DEDICATORIA A Dios por haberme brindado la posibilidad de cumplir esta meta tan importante de mi vida. A mis padres Myriam Cecilia y Roberto que a través de la vida siempre han depositado su confianza en mí, guiándome para ser cada día una mejor persona teniendo en cuenta los valores impartidos por ellos como la lealtad, la honestidad y la responsabilidad en todos mis actos. A mi familia por sus consejos. A mis amigos que con su voz de aliento en los momentos difíciles hicieron realidad este sueño. Adriana Marcela Cabra Ángel A Dios por darme la vida y por concederme todas las condiciones físicas e intelectuales. A mis padres José y Georgina por todo el esfuerzo que hicieron para permitirme estudiar a pesar de todas las adversidades. A mis hermanos por estar siempre conmigo y a mi esposo por brindarme su amor, apoyo y consejos durante todo este tiempo. Claudia Consuelo Herrera Huérfano

7 AGRADECIMIENTOS Al Dr. José Fernández Manrique por su tiempo y orientación durante todo el proceso del trabajo de grado. A la alcaldía municipal de Simijaca Cundinamarca por su colaboración en la parte práctica de este proyecto. A los ganaderos del municipio de Simijaca Cundinamarca, quienes con buena voluntad nos permitieron utilizar sus predios para la toma de muestras del proyecto. A los señores Luís Ávila y Alberto Molina por su servicio en la toma de las muestras. A la Universidad de La Salle por permitirnos utilizar sus instalaciones y equipos para el desarrollo del proyecto. A don Aquilino y la Señora Yolanda por todos los servicios prestados. A los Doctores César Díaz Rojas y Dildo Márquez Lara por el tiempo dedicado para la revisión y aprobación de este proyecto. Al Dr. Danilo Parra Gil por su orientación durante el desarrollo del trabajo. A la Dra. Luz Helena Velásquez Directora del centro de Malacología de la Universidad de Antioquia (Medellín) por su orientación y capacitación en técnicas malacológicas.

8 TABLA DE CONTENIDO Pág. RESUMEN....1 ABSTRACT.. 3 INTRODUCCIÓN MARCO TEÓRICO Fasciola hepatica Morfología CICLO EVOLUTIVO HOSPEDERO INTERMEDIARIO Taxonomía EPIDEMIOLOGÍA Hábitat Temperatura Humedad y precipitación PATOGENIA MANIFESTACIONES CLÍNICAS Fasciolasis aguda Fasciolasis crónica DIAGNÓSTICO Diagnóstico parasitológico CONTROL Y PREVENCIÓN Medidas preventivas y manejo del animal MATERIALES Y MÉTODOS LOCALIZACIÓN CONDICIONES CLIMÁTICAS.20

9 3.2.1 Precipitación Temperatura Humedad POBLACIÓN Y MUESTRA FUENTE DE DATOS VARIABLES MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS MÉTODOS PROCEDIMIENTOS Reconocimiento del hospedero Área de estudio y técnica malacológica Identificación de huevos de Fasciola hepatica RESULTADOS Y DISCUSIÓN RESULTADOS Caracterización de predios Resultados Fasciola hepatica Resultados hospedero intermediario Comparación de presencia de Fasciola hepatica y Caracol Lymnaea cousini DISCUSIÓN CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES BIBLIOGRAFÍA ANEXOS

10 LISTA DE TABLAS Pág. Tabla1. Animales a muestrear según población total por predio.22 Tabla 2. Número de predios por vereda y población observada...22 Tabla 3. Prevalencia de predios positivos a Fasciola hepatica, vereda Aposentos 39 Tabla 4. Prevalencia de predios positivos a Fasciola hepatica, vereda DonLope...39 Tabla 5. Prevalencia de predios positivos a Fasciola hepatica, vereda Pantano Tabla 6. Prevalencia de predios positivos a Fasciola hepatica, vereda Táquira.40 Tabla 7. Prevalencia de Fasciola hepatica de predios positivos, muestreos Tabla 8. Prevalencia de Fasciola hepatica por animal, muestreos

11 Tabla 9. Prevalencia de predios positivos a Caracol Lymnaea, vereda Aposentos...42 Tabla 10. Prevalencia de predios positivos a Caracol Lymnaea, vereda Don Lope. 42 Tabla 11. Prevalencia de predios positivos a Caracol Lymnaea, vereda Pantano 43 Tabla 12. Prevalencia de predios positivos a Caracol Lymnaea, vereda Táquira.43 Tabla 13. Prevalencia de caracol Lymnaea cousini de predios positivos muestreos

12 LISTA DE FIGURAS Pág. Figura 1. Ciclo biológico de la Fasciola hepatica Figura 2. Veredas del municipio de Simijaca.19 Figura 3. Claves taxonómicas para reconocimiento del Caracol Lymnaea 28 Figura 4. Materiales para recolección del caracol..28 Figura 5. Lavado de la muestra...29 Figura 6. Identificación de las especies encontradas y cuantificación...29 Figura 7. Comparación de los caracoles hallados...30 Figura 8. Caracol común...30 Figura 9. Caracol Lymnaea...31 Figura 10. Hallazgo de muestra positiva..32

13 LISTA DE GRÁFICOS Gráfico 1. Fuente de Agua en los predios muestreados municipio de Pág. Simijaca Cundinamarca.34 Gráfico 2. Suministro de Agua en los predios muestreados municipio de Simijaca Cundinamarca.35 Gráfico 3. Topografía del Predio en los predios muestreados municipio Simijaca Cundinamarca. 36 Gráfico 4. Plan de Desparasitación en los predios muestreados municipio de Simijaca Gráfico 5. Prevalencia de Fasciola hepática por animal Gráfico 6. Predios positivos y negativos al muestreo de Caracol Lymnaea.44 Gráfico 7. Población del Caracol Lymnaea cousini...44 Gráfico 8. Comparación de variables ambientales y presencia de Caracol Lymnaea.45 Gráfico 9. Comparación de presencia de Fasciola hepatica y caracol cousini....46

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15 RESUMEN La infección de los rumiantes domésticos por Fasciola hepatica ocasiona pérdidas económicas significativas representadas en reducción de la ganancia de peso, decomiso de hígados a nivel de matadero, baja producción de leche, lana e incluso la muerte. El hospedero intermediario de la Fasciola hepatica es un caracol del género Lymnaea sp. caracterizado por ser muy resistente a las condiciones medioambientales; en épocas de lluvia desarrolla su potencial reproductivo el cual disminuye en períodos de sequía. Teniendo en cuenta la problemática que causa la Fasciola hepatica en el municipio de Simijaca Cundinamarca representada en la presentación de animales con los signos y síntomas característicos de esta parasitosis y los constantes decomisos de hígados que se realizan en el matadero, se realizó este estudio que permitió establecer los parámetros epidemiológicos de esta enfermedad. El presente estudio se llevó a cabo en el municipio de Simijaca Cundinamarca, en un período de 1 año con intervalo de muestreo de 2 meses; se seleccionaron 150 fincas de las 12 veredas del municipio con un promedio de 10 animales por finca para un total de 1500 animales; mediante el programa epidemiológico EPIINFO se calculó el tamaño de la muestra (306 animales por muestreo) y se analizaron los resultados obtenidos. Con la realización de este estudio se buscó conocer la prevalencia actual de la enfermedad y del hospedero intermediario en predios del municipio de Simijaca Cundinamarca, teniendo en cuenta variables ambientales como además de factores predisponentes como fuente y manejo de agua, plan de desparasitación y manejo de excretas entre otras. 1

16 Para el diagnóstico de esta parasitosis se hizo la recolección de materia fecal de los animales seleccionados para la confirmación de huevos de Fasciola hepatica por medio de la técnica de Dennis, al mismo tiempo se identificó el hábitat adecuado para la presencia del hospedero intermediario (Caracol Lymnaea), tomando una muestra para su identificación en base a claves taxonómicas. 2

17 ABSTRACT The domestic infection of the ruminant ones for Fasciola liverwort causes economic significant losses represented in reduction of the gain of weight, seizure of livers at slaughterhouse level, low production of milk, wool and even the death. The intermediary hospedero of Fasciola hepatica is a snail of the gender Lymnaea sp. characterized to be very resistant to the environmental conditions; in rain times it develops their reproductive potential which diminishes in periods of drought. Keeping in mind the problem that Fasciola hepatica causes in the municipality of Simijaca Cundinamarca being reflected in the presentation of animals with the signs and characteristic symptoms of this parasitosis and the constant seizures of livers that are carried out in the slaughterhouse, he/she was carried out this study that allowed to establish the epidemic parameters of this illness. The present study was carried out in the municipality of Simijaca Cundinamarca, in a 1 year-old period with interval of sampling of 2 months; 150 properties of the 12 sidewalks of the municipality were selected with an average of 10 animals by property for a total of 1500 animals; by means of the epidemic program EPIINFO the size of the sample (306 animals for sampling) was calculated and the obtained results were analyzed. With the accomplishment of this study one looked for to know the situation present epidemiologist the disease and the intermediary hospedero in estates of the municipality of Simijaca Cundinamarca, considering variable environmental as in addition to predisponentes factors as source and handling of water, plan of desparasitación and handling of you excrete among others. 3

18 For the diagnosis of this parasitosis the gathering of fecal matter of the animals was made selected for the confirmation of eggs of Fasciola hepatica liverwort by means of Dennis' Technique, at the same time the appropriate habitat was identified for the presence of the intermediary (Snail Lymnaea) hospedero, taking a sample for its identification based on key taxonomics. 4

19 INTRODUCCIÓN Las prácticas de manejo realizadas en una finca tienen como finalidad obtener el máximo rendimiento económico de los animales. Por este motivo es importante conocer cual es el efecto de las enfermedades parasitarias, aunque no causan gran mortalidad producen bajo nivel de producción en los animales. Por lo tanto el conocimiento de la epidemiología de una enfermedad parasitaria en un área determinada y el examen cuidadoso de los factores predisponentes con carácter regional es de gran utilidad para establecer medidas de prevención y control. Actualmente, el control parasitario se orienta a proteger el animal parasitado basándose en el uso de antihelmínticos y así proporcionar una defensa contra los efectos causados por la enfermedad. Sin embargo estas medidas de control no son suficientes para eliminar estas parasitosis ya que existen otras condiciones biológicas y ambientales que contribuyen con la presentación de la enfermedad como la presencia de los hospederos intermediarios y los hábitats necesarios para su desarrollo. La Fasciolasis bovina es una enfermedad parasitaria muy común en las ganaderías de clima frío, especialmente en las ganaderías de leche, ocasionando grandes pérdidas económicas como la disminución en la producción láctea, reducción de la ganancia de peso, decomiso de hígados a nivel de matadero y la muerte del animal. La Fasciola hepatica es un tremátodo aplanado que afecta principalmente a los bovinos pero también puede afectar a otras especies como ovinos, caprinos, equinos e incluso el hombre. Para el desarrollo de esta enfermedad es de vital 5

20 importancia la presencia del hospedero intermediario, caracol del género Lymnaea necesario para que se lleve a cabo el ciclo biológico de la Fasciola hepatica, quien a su vez es multiplicador de este parásito. Este caracol intermediario necesita para su desarrollo buenas condiciones de humedad, zonas de fácil estancamiento con escaso flujo de agua como zonas pantanosas, pequeñas charcas, orillas de arroyos y después de fuertes precipitaciones, las huellas de las pezuñas de los animales pueden proporcionarle hábitats temporales. Son muchas las especies de Lymnaea identificadas, se considera al Lymnaea bogotensis el principal hospedero intermediario en Colombia (Camargo y Camacho, 1999). Es pequeño de 8 a 15 mm de longitud, de concha cónica delgada, con 3 a 4 espiras bien marcadas y de color pardo. Para obtener un conocimiento real de las de las enfermedades parasitarias como la ocasionada por Fasciola hepatica con un ciclo evolutivo indirecto es necesario hacer un estudio sistemático durante un tiempo prudencial para conocer los factores ecológicos, parasitológicos y del hospedero intermediario que interviene en el ciclo biológico. Con la realización de este estudio se buscó conocer la prevalencia actual de la enfermedad y del hospedero intermediario en predios del municipio de Simijaca Cundinamarca, teniendo en cuenta variables ambientales y factores predisponentes como fuente y manejo de agua, plan de desparasitación y manejo de excretas entre otras. El conocimiento de la enfermedad por parte del ganadero es importante para desarrollar programas de control adecuado como el manejo de las fuentes agua para evitar la reproducción de caracoles y medidas de prevención como un plan de desparasitación pero basándose en un diagnóstico de laboratorio. 6

21 2. MARCO TEÓRICO En Colombia, por estar en el trópico existen condiciones climáticas adecuadas y necesarias para el desarrollo y multiplicación de diferentes especies de parásitos obstaculizando el desarrollo ganadero, reduciendo la productividad, bajo rendimiento en la producción de leche y carne, aumentando la susceptibilidad a enfermedades infecciosas, disminuyendo la eficiencia de la conversión alimenticia, aumentando los costos de tratamientos y en caso de enfermedades zoonóticas una repercusión en la salud pública. La Fasciolasis bovina es una enfermedad parasitaria muy común en las ganaderías de clima frío, especialmente en las ganaderías de leche, ocasionando grandes pérdidas económicas como la disminución en la producción láctea, reducción de la ganancia de peso, decomiso de hígados a nivel de matadero y aún la muerte del animal. En una perspectiva histórica que sintetiza las pérdidas económicas ocasionadas por la Fasciola hepatica y su prevalencia se pueden referenciar en las diversas investigaciones que se han realizado en el país. Para los años la prevalencia de la enfermedad estaba calculada en un 25%. Trabajos posteriores del ICA indican que para algunas zonas de los departamentos de Boyacá, Nariño y Cundinamarca, la prevalencia del parásito a nivel de fincas está por encima del 80%. (Vázquez, 2005). Otro estudio efectuado en el Departamento de Nariño en el año 1977 evidenció que teniendo en cuenta la población bovina de clima frío en Colombia según el programa de parasitología del ICA, el 25% estaba infestado de Fasciola, afectando en algunos casos el 50-70% del hato, y aún el 100%, con una mortalidad del 3.3%; por cada hembra adulta afectada con Distomatosis se pierden 7

22 aproximadamente 840 litros de leche, 40 kg de carne y un hígado que pesa aproximadamente 6 Kilos. (Marín y Martínez, 1977). Posteriormente otro estudio del año 1984 mostró que la prevalencia de Fasciola hepatica era del 25%, con una disminución en la producción de leche en una vaca infestada del 16% menos con relación a su potencial productivo y una mortalidad del 3.3%. (Crossley, 1987). En Colombia las pérdidas anuales por la Fasciola hepatica son de $ millones de pesos (Benavides,1996); el decomiso de hígados es de 9.18% (Becerra, 2000). Como antecedente para la realización de este proyecto se tuvo en cuenta el alto número en el decomiso de hígados por Fasciola hepatica en el matadero de Simijaca Cundinamarca. El número total de hígados decomisados en el 2006 fue de 182 hígados. Se encontró que el mes de octubre fue el de mayor decomiso de hígados con un total de 35, y los meses con menor decomiso fue julio y agosto con solo 4 hígados decomisados, en el mes de noviembre no se encontró reporte de hígados decomisados 1. Por otra parte se reportaron las causas de decomiso de hígados donde sobresale que la mayor causa es por la Fasciola hepatica con un valor del 91 hígados que corresponde al 50%, la segunda causa mas importante es la presencia de tumores con 31 hígados decomisados (17%), la tercera causa fue cirrosis con un valor de 24 hígados (13%) y la cuarta causa fueron las alteraciones físicas del hígado como cambio de color, estructura, etc., con un valor de 22 (12%) 2. 1 Colombia, Cundinamarca, Simijaca, UMATA. 2 Ibid., p. 8. 8

23 2.1 Fasciola hepatica La Fasciola hepatica es el tremátodo hepático del ganado bovino, ovino y de otros rumiantes. Es quizá el tremátodo más importante en medicina veterinaria desde el punto de vista económico debido a que produce destrucción hepática. (Hendrix, 1999) Morfología El parásito adulto mide de 18 a 50 mm de largo por 4 a 13 mm de ancho. Es un parásito hermafrodita aplanado en forma de hoja de simetría bilateral siendo su parte anterior más ancha que la posterior, la coloración en fresco es pardo grisáceo o gris cuando se conserva en formol, esta revestido por pequeñas espinas y posee dos ventosas muy próximas donde la ventral es más grande que la oral. Debajo de la ventosa ventral se abre el poro genital. (Romero, 1994). Los huevos de la Fasciola se caracterizan por su gran tamaño que varía de 130 a 150 micras de largo por 70 a 90 micras de ancho, son de forma ovalada, segmentados, operculados, teñidos por los pigmentos biliares en tonos amarillos hasta ligeramente pardos. Se deben diferenciar de los huevos de Paramphistomum spp., por su mayor tamaño no teñidos de amarillo, opérculo netamente visible y células embrionadas bien definidas. (Soulsby, 1987; Borchert, 1986) CICLO EVOLUTIVO Los parásitos adultos de la Fasciola hepatica habitan en los conductos biliares de los rumiantes y otros mamíferos. Cuando depositan los huevos son arrastrados hacia la luz del intestino con la bilis y posteriormente al exterior con las heces. 9

24 Luego cuando caen al agua se desarrolla el primer estadio larvario llamado miracidio, el cual está cubierto de cilios y posee una papila cónica en su extremo anterior la cual permite perforar la piel del caracol (por cada miracidio que penetra el caracol, se producen de 500 a 600 cercarias). El miracidio estará totalmente desarrollado y listo para la eclosión después de 2 a 4 semanas en época de verano. Luego escapa de la envoltura del huevo y se va nadando en busca del hospedero intermediario (Caracol del género Lymnaea spp.), si no lo encuentra en un plazo de 24 horas el miracidio muere. Si el miracidio penetra el caracol pierde su envoltura de cilios y se dirige hacia las gónadas o la glándula digestiva donde se formará el segundo estadio larvario denominado esporocisto. (Dwight, 2004) Cada célula germinal se convierte en una esfera germinal y mediante un proceso de crecimiento y varias divisiones alcanza la fase de redias dando lugar en condiciones favorables a una segunda generación de redias la cual sigue evolucionando a un tercer estadio larvario conocido como cercaria. Las cercarias abandonan el caracol nadando en busca de las hojas de los pastos a las orillas de los vallados, estanques, charcos o los abrevaderos donde se enquistan y después de 3 días de maduración pierden la cola para transformarse en metacercaria, que es la fase infectante (Las metacercarias pueden permanecer viables hasta ocho meses si se mantienen en buenas condiciones de humedad). (Atias, 1984) Luego de ser ingerida por los animales continúa su desarrollo en el tubo digestivo donde disuelve su envoltura y queda libre su forma juvenil, atraviesa la pared intestinal y 3 horas después se encuentra en la cavidad peritoneal. Permanece allí de 3 a 15 días, avanzando por el peritoneo hasta llegar a la cápsula de Glisson la que perfora para penetrar en el hígado. Migra a través del parénquima hepático y se localiza en los conductos biliares, cuando alcanza entre 60 a 70 días de edad está madura y comienza la ovoposición, los huevos salen a la materia fecal por la bilis para comenzar de nuevo el ciclo. (Parra, 1996; Becerra, 2000). 10

25 Figura 1. Ciclo biológico de la Fasciola hepatica Fuente: DWIGHT, Bowman. Parasitología para veterinarios HOSPEDERO INTERMEDIARIO Taxonomía Phylum: Clase: Sub-clase: Orden: Sub-orden: Familia: Género: Especie: Molluscos Gasterópodo Eythyneura Pulmonada Basommatophora Lymnaeidae Lymnaea L. cousini 11

26 En Colombia se han encontrado otras especies del Género Lymnaea dependiendo de la región; Lymnaea ubaquensis de la Laguna de Ubaque en el departamento de Cundinamarca; Lymnaea bogotensis en la Sabana de Bogotá y Lymnaea columella extensamente distribuido en los departamentos de Antioquia, Cundinamarca, Meta, Nariño, Valle Cauca y Tolima. (Salazar L. y Col. 2006). En este estudio el hospedero intermediario de la Fasciola hepatica encontrado pertenece a la especie Lymnaea cousini 3. Es un caracol anfibio que en épocas de lluvia desarrolla todo su potencial reproductivo pero en las épocas de sequía se entierra profundamente y allí puede sobrevivir por varios meses. Mide de 8 a 15 mm de longitud y de 3 a 7 mm de ancho, la concha es cónica, puntiaguda y posee de 3 a 4 espiras bien marcadas. La abertura es grande, el lóbulo inferior está ligado al cuerpo espiral y es de color blanquecino. El animal posee las aberturas pulmonar y genital sobre el lado derecho, los tentáculos son aplanados y triangulares en cuya base se encuentran los ojos. (Parra, 1996). La concha es habitualmente de color marrón oscuro, cuando se sujeta con la concha en vertical y la abertura frente al observador la longitud de esta última es aproximadamente la mitad de la del caracol, está situada en el lado derecho. (UrQuhart G, et al. 2001). 3 VELÁSQUEZ, L. Synonymy between Lymnaea bogotensis Pilsbry, 1935 and Lymnaea cousini Jousseaume, 1887 (Gastropoda: Lymnaeidae),

27 2.1.4 EPIDEMIOLOGÍA La presencia de Fasciola hepatica depende de los factores que controlan la existencia de los hospederos intermediarios, como la existencia de hábitats adecuados y condiciones óptimas de humedad y temperatura Hábitat El hospedero intermediario necesita para su desarrollo zonas de fácil estancamiento con movimiento lento del agua como zonas pantanosas, pequeñas charcas, orillas de arroyos y después de fuertes precipitaciones, las huellas de las pezuñas de los animales pueden proporcionarle hábitats temporales al igual que las zonas con vegetación como musgo y junco entre otros. Aunque un ph del medio ligeramente ácido es óptimo, valores de ph excesivamente ácidos son perjudiciales. Ibid., p Temperatura Una temperatura ambiental media igual o superior a 10ºC es necesario tanto para la reproducción de los caracoles como para el desarrollo de la Fasciola hepatica dentro del caracol; ambos procesos se paralizan a 5ºC. Esta es también la temperatura mínima necesaria para el desarrollo y la eclosión de los huevos de Fasciola hepatica. Ibid., p Humedad y precipitación Las condiciones óptimas de humedad para la reproducción de los caracoles y el desarrollo de la Fasciola hepatica en su interior se producen cuando las precipitaciones superan a la evaporación y alcanzan niveles de saturación. Estas 13

28 condiciones son también esenciales en el desarrollo de los huevos del parásito, para que los miracidios encuentren a los caracoles y la dispersión de las cercarias. Ibid., p PATOGENIA El poder patógeno de la Fasciola hepatica varía de acuerdo con algunos factores como el huésped ya que los ovinos son más susceptibles que los bovinos, cantidad de cercarias ingerida, si es una infestación o reinfestaciones. La patogenia tiene dos fases: la primera se produce durante la migración en el parénquima hepático y está asociada con las lesiones y hemorragias hepáticas. La segunda se produce cuando el parásito se localiza en los conductos biliares donde se presenta una actividad hematófaga de los tremátodos adultos y lesiones de la mucosa biliar producida por las espinas de su cutícula. (Romero, 1994) MANIFESTACIONES CLÍNICAS Fasciolasis aguda La fasciolasis aguda ocurre cuando las metacercarias ingeridas invaden el hígado. Cuando las infestaciones son muy intensas el traumatismo provocado por los parásitos que perforan túneles por todo el hígado y la consecuente reacción inflamatoria provoca un cuadro clínico mortal, caracterizado por dolor abdominal y tendencia a la inmovilidad (Los signos clínicos aparecen 5 a 6 semanas después de la ingestión de metacercarias). En la necropsia la cavidad abdominal está llena de exudado hemorrágico y el hígado tiene consistencia friable, cubierto con depósitos de fibrina; se observan grandes cantidades de parásitos. (Dwight, 2004) 14

29 Fasciolasis crónica Esta se desarrolla lentamente y esta asociada con la presencia de tremátodos adultos en los conductos biliares. Esta caracterizada por síntomas clínicos como pérdida gradual de peso, debilidad progresiva, anemia, hipoproteinemia con aparición de edemas subcutáneos especialmente en el espacio intermandibular y en el abdomen. Los tremátodos adultos causan colangitis, obstrucción biliar, destrucción del tejido hepático y fibrosis con calcificación. La hiperplasia de los conductos biliares se debe a la excreción por parte de la Fasciola hepatica de grandes cantidades de Prolina responsable en parte de la anemia. (Dwight, 2004; Blood D.C y Col. 1992) DIAGNÓSTICO En los animales, el diagnóstico de la fasciolasis aguda se basa en la necropsia, mediante la observación de lesiones hepáticas características de la enfermedad y por la presencia del parásito. Durante la fase aguda, el diagnóstico se dificulta mediante el examen coprológico ya que durante esta fase no hay eliminación de huevos por la materia fecal. (Crossley, 1987). El diagnóstico de la fasciolasis crónica se fundamenta en el hallazgo de huevos en la materia fecal. En la necropsia se observan las fasciolas en el parénquima hepático, conductos biliares y en la vesícula biliar, además de las lesiones hepáticas características ocasionadas por el parásito en esta fase. Existen otros métodos para realizar el diagnóstico como la identificación de caracoles infectados a nivel de la finca, que le sirven de hospederos intermediarios a la Fasciola hepatica y el hallazgo de metacercarias en los pastos recogidos a orillas de los pantanos, los vallados o bebederos. (Parra, 1996). 15

30 Los exámenes hematológicos también son de utilidad para estimar el nivel de enzimas plasmáticas liberadas como consecuencia de la lesión de las células hepáticas. Habitualmente se analizan dos enzimas. La glutamato deshidrogenasa (GLDH), esta es liberada cuando las células parenquimatosas están dañadas y se incrementa durante las primeras semanas post-infección. La gamma glutamil transpeptidasa (GGT) indica lesión en las células epiteliales que tapizan los conductos biliares y se incrementa especialmente una vez que las fasciolas alcanzan los conductos biliares, manteniendo niveles elevados durante un período de tiempo más prolongado. (UrQuhart G, et al. 2001). Los tets serológicos como ELISA han sido de gran ayuda en el diagnóstico de la fasciolasis. Un aumento de la tasa de anticuerpos puede ser detectado dos semanas después de la infección pero no es válido para el diagnóstico hasta pasadas de 6 a 8 semanas. (Blood D.C y Col. 1992) Diagnóstico parasitológico La detección de huevos de Fasciola hepatica en las heces de los animales sospechosos es útil para diagnosticar la fasciolasis crónica, muchas veces caracterizada por una reducción en la productividad. El propósito es concentrar los huevos a partir de una muestra de heces mediante el método de sedimentación, el cual se basa en la mayor densidad de los huevos lo que permite concentrarlos en el sedimento tras repetidos lavados. La adición de un colorante de contraste al sedimento permite destacar los huevos. (Cordero del Campillo, 1999) CONTROL Y PREVENCIÓN El control de la Fasciola hepatica debe iniciarse con un diagnóstico preciso de la situación sanitaria de la finca para establecer las especies de animales 16

31 parasitados, los lugares donde permanecen los caracoles infectados y la situación sanitaria de las fincas vecinas para determinar los lugares de donde pueden venir las cercarias por las corrientes de agua o con las aguas lluvias. Las bases para un programa de control eficaz son: la prevención del desarrollo de los caracoles que le sirven de hospederos intermediarios y que en último término son los diseminadores de la enfermedad y el control simultáneo de la Fasciola hepatica en los hospederos finales. (Parra, 1996) Medidas preventivas y manejo del animal Evitar que el ganado entre a zonas infestadas de caracoles Evitar incorporar animales infestados procedentes de otras fincas, sin el debido examen coprológico. El agua utilizada para el riego de los potreros y para los bebederos, deben ser limpias y no proceder de sitios donde la materia fecal la contamine. La materia fecal que se utiliza como abono, debe recibir un tratamiento especial para no diseminar la enfermedad, almacenándola por dos meses y rociándola con cal para eliminar huevos y larvas. Evitar que la materia fecal infestada, llegue a extensiones de agua dulce, donde existan caracoles que le sirvan de huésped intermediario a la Fasciola hepatica. Los canales, zanjas, y surcos de desagüe, deberán conservarse constantemente limpios. Examinar los estanques y charcos intermitentes donde se crían los caracoles, ya que estas áreas son las más susceptibles de repoblarse. 17

32 Cercar las áreas pantanosas a una distancia mayor de un metro y tratando con herbicidas la zona comprendida entre la orilla y la cerca, para evitar que los animales entren en contacto con los pastos contaminados. Cuando no se puedan drenar, rellenar, ni cercar los sitios en donde viven los caracoles entonces se procede a aplicar molusquicidas. (Parra, 1996; Crossley, 1987). 18

33 3. MATERIALES Y MÉTODOS 3.1 LOCALIZACIÓN El estudio de prevalencia de la Fasciola hepatica y el caracol Lymnaea spp., tuvo lugar en predios del municipio de Simijaca Cundinamarca. Está ubicado a 138 Km de la ciudad de Bogotá D.C, sobre la vía que conduce hacia Chiquinquirá (Boyacá), al extremo nor-occidental del departamento de Cundinamarca en la región de Ubaté: limitado al norte, oriente y occidente con el departamento de Boyacá y al sur con los municipios de Susa y Carmen de Carupa. Figura 2. Veredas del municipio de Simijaca VEREDA EL FICAL VEREDA HATO CHICO VEREDA EL JUNCAL VEREDA SAN JOSE VEREDA SALITRE VEREDA PEÑA BLANCA VEREDA CHURNICA VEREDA CENTRO VEREDA TAQUIRA VEREDA PANTANO VEREDA DON LOPE VEREDA APOSENTOS Fuente: Planeación municipal de Simijaca 19

34 3.2 CONDICIONES CLIMÁTICAS El clima es el elemento fundamental que incide sobre las características como tipo de suelo, vegetación y el uso que se haga de ellos Precipitación El municipio de Simijaca esta fuertemente determinado por la condición de valle (valle de Ubaté- Chiquinquirá), como cuenca de subsistencia rodeada por elevaciones que le dejan en una posición de sombra seca, con respecto a las corrientes de vientos húmedos provenientes de sureste y que ascienden por la vertiente oriental de la cordillera oriental depositando su humedad en este ascenso y pasando a la vertiente occidental débiles y secos. Las precipitaciones en las cuencas altas de los ríos de ubate y Suárez superiores a los 1000mm, en la cuenca del río Suárez, la precipitación fluctúa entre los 700 mm al sur de la cuenca y los 1500mm al norte, presentando un promedio de 850 mm. La distribución de lluvias es bimodal alternándose con pocos periodos secos entre los meses de junio, septiembre, diciembre y febrero y dos periodos húmedos entre los meses de marzo, mayo, octubre y noviembre. La precipitación promedio que oscila entre los periodos húmedos esta entre 100 y 150 mm y en los meses secos entre los 25 y los 75 mm, con un promedio anual medio de 822,2 mm, anual máximo de 2275,0 mm y mínimo anual de 172,5. (Ver anexo A) Temperatura En el municipio de Simijaca que se ubica en zona de clima frío oscila entre los 10 y 18 ºC con un promedio medio anual de 14.2 C, máximo anual de 16.7 C y mínimo anual de 12.0 C (Ver anexo A). Las alturas oscilan entre 2000 y

35 m.s.n.m. debido a este proceso también son comunes las heladas definidas como la ocurrencia de temperaturas iguales o menores a 0 ºC entre 1.5 y 2 sobre el nivel del suelo y que también determina como la temperatura mínima a partir de la cual los tejidos de las plantas comienzan a sufrir daño Humedad Tiene relación directa con la precipitación. A nivel espacial se presentan los valores más altos en las zonas de mayor pluviosidad y menores en las zonas mas secas. La humedad anual en la región es del 79% y su variación espacial y temporal va del 67 % al 90%, con un promedio medio anual de 67%, máximo anual del 80% y mínimo anual del 58% (Ver anexo A). 3.3 POBLACIÓN Y MUESTRA La población objeto de estudio fueron las doce veredas del municipio de Simijaca, a su vez estuvo conformada por 150 predios de dichas veredas y el número de animales fue seleccionado al azar de acuerdo a la población total del predio. (Tabla 2) El tamaño de la muestra se determinó mediante el programa EPIINFO teniendo como población total 1500 animales en los predios a evaluar, con un nivel de confianza del 95%, una proporción estimada del 50 % de bovinos infectados y un margen de error de 5%; el tamaño de la muestra fue de 306 animales a muestrear (Ver anexo B). 21

36 El muestreo por finca fue ponderado al número de animales así: X= Np*n N Np: tamaño del predio (numero de animales por predio) n : tamaño de la muestra( 306) N: tamaño de la población (1500 animales) (Martín S, y Col. 1997) Tabla 1. Animales a muestrear según población total por predio. Número de animales total/predio Número de animales a muestrear Mayor a Tabla 2. Número de predios por vereda y población observada NÚMERO DE PREDIOS NÚMERO DE ANIMALES VEREDA DON LOPE APOSENTOS TAQUIRA PANTANO JUNCAL 3 38 FICAL HATO CHICO CENTRO SALITRE CHURNICA PEÑA BLANCA 6 40 SAN JOSE 4 17 TOTAL

37 3.4 FUENTE DE DATOS La información recolectada es de carácter primario, donde inicialmente se realizó una encuesta a los propietarios o administradores de las diferentes explotaciones. Se tuvieron en cuenta distintas variables demográficas, antecedentes del manejo de los animales y de la finca como fuente y sumunistro de agua, manejo sanitario de los animales como plan de vacunación y desparasitación. (Ver anexo C). Luego de confirmar los predios disponibles de cada vereda, en la segunda visita y primer muestreo se inició con la realización de la encuesta epidemiológica del animal donde se reportaron aspectos como identificación del animal (nombre o número), raza, edad, plan de desparasitación, producto utilizado y fecha de la última desparasitación, síntomas como disminución de peso, diarrea, edema submandibular y disminución de la producción pero teniendo en cuenta que podrían ser causadas por la Fasciola hepatica u otra enfermedad. (Ver anexo D). En los 5 muestreos posteriores también se realizó la encuesta epidemiológica del animal, ya que los animales eran escogidos al azar. Adicionalmente en todos los muestreos realizados, se diligenciaba un formato para llevar control de la presencia de caracoles; en este formato se registraba el medio donde se encontraba el caracol, su presencia y la especie hallada. (Ver anexo E). 3.5 VARIABLES Para la realización de este proyecto se tuvieron en cuenta las variables ambientales: temperatura, humedad y precipitación, además de las variables de la finca como topografía del predio, tipo de pastoreo, fuente y suministro de agua 23

38 para el ganado, pasto presente en la finca, asistencia técnica, tipo de ordeño, sistema de reproducción, manejo de excretas y sanidad animal (Ver Anexo F). 3.6 MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS MÉTODOS El tipo de estudio es Longitudinal Descriptivo. Los resultados obtenidos del muestreo se representaron por medio de gráficas y tablas para su interpretación. Se comenzó con la visita inicial a las diferentes fincas del municipio donde se informó en que consistía el proyecto, que ventajas traería al productor y la importancia de realizar el estudio de la Distomatosis bovina. Posteriormente se llevaron a cabo dos etapas, las cuales se hicieron en cada muestreo durante un año con intervalo de 2 meses; la primera fue el reconocimiento y confirmación de la presencia del hospedero intermediario (Caracol Lymnaea spp.) en la explotación, y la segunda etapa fue la recolección de una muestra de materia fecal del animal para su procesamiento en el laboratorio y determinar la presencia de los huevos del parásito. Se elaboró una base de datos general, conformada por los diversos formatos, la observación directa y las entrevistas. Se evaluó la presencia del caracol Lymnaea spp., en los predios seleccionados y se determinó cuales de estos fueron positivos, confirmando la presencia del caracol por medio de claves taxonómicas. Posteriormente se evaluó la relación existente entre la presencia del Caracol Lymnaea spp. y la presencia de Fasciola hepatica en el municipio. 24

39 Para la confirmación de la Fasciola hepatica en los animales muestreados por medio de un examen coproparasitológico se llevó a cabo la técnica de Dennis para determinar la presencia de los huevos de este parásito. Finalmente se hizo la base de datos de las fincas examinadas y sus variables en el programa EPIINFO para determinar la asociación de estas con respecto a los resultados en los predios tanto para Fasciola hepatica como hospedero intermediario, teniendo en cuenta los valores de Chi cuadrado (X²), Odds Ratio (OR), Riesgo Relativo (RR) y Probabilidad (p). La Prueba de Chi cuadrado es una prueba de frecuencias que compara la frecuencia observada en un grupo de población contra la frecuencia teórica o esperada de la misma población. Valor de p o probabilidad: probabilidad de que un riesgo determinado ocurra. Cuando p es menor que (< 0,05) es estadísticamente significativa y cuando p es mayor que (> 0,05) no es estadísticamente significativa. (Osorno, 1998). El Riesgo Relativo (RR) es la medida usual de asociación entre la característica y la enfermedad, es decir mide la proporción de animales enfermos expuestos sobre la proporción de animales no expuestos a un riesgo determinado. Cuando un Riesgo Relativo es mayor de 1 se considera que existe una asociación positiva, si es menor de 1 sugiere una asociación negativa teniendo un efecto protector frente a la enfermedad. (Thrusfield, 1990; Osorno, 1998). Los Intervalos de Confianza son los límites dentro de los cuales se puede esperar que se encuentre un parámetro determinado; cuando el límite inferior es mayor a 1 25

40 es un riesgo real, por el contrario si es menor que 1 es un riesgo no real. (Castillo y Hernández, 2004). Odds Ratio (OR) es llamado en español Razón de Productos Cruzados, constituye otra forma diferente al Riesgo Relativo (RR) de cuantificar la asociación entre dos variables dicotómicas y puede ser utilizada en algunos estudios. Cuando el valor de OR es igual a 1 no hay asociación entre la presencia del factor y el evento, el valor de OR mayor que 1 se presenta si la asociación es positiva y si el valor de OR de menor de 1 la asociación es negativa. (Martín S, y Col. 1997) La prevalencia se refiere la cantidad de enfermedad presente en una población conocida durante un período de tiempo determinado, sin distinguir los casos nuevos de los antiguos. (Thrusfield, 1990). Nº de animales que presentan la enfermedad en un período de tiempo P= x 100 Nº de individuos en riesgo de la población en el mismo período de tiempo Se realizó el cálculo de la prevalencia (P) de la Fasciola hepatica en cada uno de los muestreos bimensuales para cada vereda y la prevalencia anual para el municipio. 26

41 PROCEDIMIENTOS Reconocimiento del hospedero Área de estudio y técnica malacológica. Los miembros de la familia Lymnaeidae se pueden reconocer fácilmente por ser habitantes de agua dulce, con concha cónica y puntiaguda, tiene giros enrollados en espiral, siempre en forma dextrógiro, o sea la abertura se encuentra a la derecha. Son hermafroditas, con hábitos anfibios, bien en las márgenes húmedas de la vegetación acuática y sobre el lodo del fondo acuático. El caracol se alimenta de detritos vegetales y materia orgánica; su hábitat permanente son lagos, lagunas, ríos tranquilos y áreas pantanosas. (Hickman C, y Col. 1986). En el muestreo de campo se llevó a cabo la visualización del área adecuada para la presencia del hospedero como zonas pantanosas, orillas de vallados, zanjas, bebederos, etc. Posteriormente se seleccionaban 1 metro cuadrado de tierra en las zonas húmedas, con pala de mango se tomaba una muestra del lugar seleccionado o agua en el caso de albercas o tanques; luego se lavaba la muestra, y posteriormente se orientaba el caracol con el vértice dirigido hacia el norte; de esta manera se podía determinar la posición de la abertura frente al observador (lado derecho: genero Lymnaea y hacia la izquierda Physa acuta o caracoles comunes). Luego se realizaba la cuantificación de caracoles encontrados en el predio. Por último se diligenciaba el formato registrando el medio donde se encontraba (natural o artificial), movimiento del agua y las especies encontradas. 27

42 Figura 3. Claves taxonómicas para reconocimiento del Caracol Lymnaea Giros en espiral Vértice dirigido hacia el norte Concha cónica, puntiaguda color marrón oscuro Abertura a la derecha (Dextrógiro) Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera. Figura 4. Materiales para recolección del caracol Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera 28

43 Figura 5. Lavado de la muestra Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera. Figura 6. Identificación de las especies encontradas y cuantificación Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera. 29

44 Figura 7. Comparación de los caracoles hallados Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera Figura 8. Caracol común (Physa acuta) Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera 30

45 Figura 9. Caracol Lymnaea Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera Identificación de huevos de Fasciola hepatica. Se tomó una muestra de materia fecal directamente del animal vía rectal con la ayuda de una manga de palpar, la cual iba previamente marcada con un número asignado que permitía saber a que animal correspondía cada muestra y este número se registraba en el formato de muestreo junto a los demás datos del animal, de la finca y la vereda de procedencia. Posteriormente estas muestras se refrigeraban con hielo en neveras de icopor donde se almacenaban para luego llevarlas al laboratorio y ser procesadas. En el momento del procesamiento en el laboratorio, el número de la manga se registraba en el formato utilizado en el laboratorio, el número del tubo que le correspondía y el resultado (positivo o negativo). (Ver anexo G). 31

46 Figura 10. Hallazgo de muestra positiva. Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera. 32

47 4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 4.1 RESULTADOS Caracterización de predios Los predios objeto de estudio se dedican principalmente a la explotación lehera; los pequeños productores se concentran en la parte alta del municipio y los medianos y grandes productores (lechería especializada) se localizan en la parte baja. La mayoría de las variables tenidas en cuenta para la presentación de la Fasciola hepatica representaron una asociación estadística negativa y no fueron consideradas como un factor de riesgo para la presentación de la enfermedad ya que el valor de probabilidad (p), fue mayor de 0,05, el riesgo relativo fue menor de 1, el límite inferior es menor de 1 considerado como un riesgo no real y el (OR) es menor de 1. Sin embargo las variables que presentaron asociación estadística positiva fueron fuente de agua nacedero, suministro de agua en batea, topografía plana, estercolero como manejo de excretas y producto de desparasitación albendazol. (Ver anexo H) La fuente de agua administrada para los animales es principalmente del acueducto en 69 predios (46%), Nacedero 38 (25.3%), Quebrada 11 (7.3%), Pozo 9 (6%), Algibe 6 (4%) y Vallado 3 (2%). El nacedero mostró una probabilidad (p) de 0,0206, (RR: 3,54), límites de confianza (1,14<RR<10,39), (OR) 4,01, límites de confianza (0,99<OR<16,67). 33

48 Gráfico 1. Fuente de Agua en los predios muestreados municipio de Simijaca Cundinamarca VARIABLE FUENTE DE AGUA 8% 7% 4% 2% ACUEDUCTO NACEDERO QUEBRADA 51% POZO ALGIBE 28% VALLADO En cuanto al suministro de agua, 44 predios (29%) utilizan Bateas, Tanque 42 (28%), suministro Directo y Alberca 18 (12%) respectivamente, Caneca 12 (8%) y Llanta 6 (4%). La Batea presentó una probabilidad (p) de 0,0274, (RR: 3,61), límites de confianza (1,07<RR<12,18), (OR) 4,03, límites de confianza (0,93<OR<18,39). 34

49 Gráfico 2. Suministro de Agua en los predios muestreados municipio de Simijaca Cundinamarca VARIABLE SUMINISTRO DE AGUA 7% 8% 4% 29% BATEA DIRECTO ALBERCA TANQUE BEBEDERO 28% 12% 12% CANECA LLANTA La topografía de los predios utilizados en este estudio corresponden 77 a topografía plana (51.3%), Quebrado 39 (26%), semipendiente 28 (18.3%), Pendiente 4 (2.7%), Ondulado 2 (1.3%). La topografía plana presentó una probabilidad (p) de 0,00637, (RR: 9,48), límites de confianza (1,24<RR<72,23), (OR) 10,75, límites de confianza (1,34<OR<234,30). 35

50 Gráfico 3. Topografía del Predio en los predios muestreados municipio Simijaca Cundinamarca TOPOGRAFÍA DEL PREDIO 19% 1% 3% 26% 51% PLANO QUEBRADO PENDIENTE SEMIPENDIENTE ONDULADO El manejo de Excretas demostró que en 104 predios (69.3%) realizan el esparcimiento de este en las praderas, no hacen ningún manejo de excretas en 43 predios (28%), solo 2 fincas (1%) tienen Estercolero, este presentó una probabilidad (p) de 0,0133, (RR: 8,22), límites de confianza (1,79<RR<37,73), (OR) 15,44, límites de confianza (0,00<OR<641,38). A nivel de Desparasitación los productos utilizados en 63 predios (42%) corresponden al grupo de los Albendazoles, Levamisol 46 (30.7%), Ivermectinas 20 (13%), entre otros. El Albendazol mostró una probabilidad (p) de 0,0280, (RR: 3,78), límites de confianza (1,05<RR<13,70), (OR) 4,20, límites de confianza (0,94<OR<21,25). 36

51 Gráfico 4. Plan de Desparasitación en los predios muestreados municipio de Simijaca PRODUCTO DESPARASITACIÓN 4% 2% 6% 14% IVERMECTINA ALBENDAZOL LEVAMISOL 32% 42% FEBENDAZOL IVERMECTINA- FEMBENDAZOL BENZIMIDAZOL En cuanto al tipo de pasto presente en los predios, 91 predios tienen Kikuyo (60.7%), combinación de Kikuyo y Raigrass 22 (14.7%), Kikuyo-Raigrass y Carretón 12 (8%), Kikuyo-Carretón 9 (6%), Kikuyo-Avena y Kikuyo-Falsa Poa con 4 predios (2.7%) cada uno y Kikuyo-Avena-Maralfalfa y Kikuyo-Aromática con 3 predios (2%) respectivamente y Kikuyo-Datil 1 (0.7%). El manejo de los pastos sobresale que 62 predios (41%) no realizan ninguna práctica de manejo, utilizan Abono 36 (24%) y Fumigación 31 (20%) entre otras. El tipo de pastoreo para las 150 fincas es de tipo Rotacional (100%). 37

52 La Asistencia Técnica es prestada por Médicos Veterinarios Particulares a 28 predios (19%), por UMATA 73 (49%) y no hay Asistencia Técnica en 49 predios (32%). En cuanto a Tecnología, el sistema de ordeño utilizado se obtuvo como resultado que 6 predios (4%) emplean Sala de Ordeño, Establo móvil 10 (7%) y 134 predios (89%) no utilizan ningún método para realizar el ordeño. En la parte de reproducción emplean la Inseminación Artificial en 137 predios (91%), Monta Natural 9 (6%) y solo 4 fincas (3%) utilizan la combinación de estas. En el plan de vacunación de los animales, 132 predios (88%) realizan la vacunación contra Fiebre Aftosa y Brucella, Aftosa-Brucella y Carbón 16 (10%) y Aftosa-Brucella-Leptospira 2 (1.3%). En cuanto a la Frecuencia de Desparasitación, 23 predios (15.3%) la realizan cada 3 meses, cada 6 meses 73 (48.7%) y posparto 39 (26%). En cuanto el hospedero intermediario (caracol Lymnaea) las únicas variables que representan un factor de riesgo para la presencia de este son topografía plana con una probabilidad de (p) de , (RR: 5,25), límites de confianza (1,20<RR<22,73), (OR) 5,92, límites de confianza (1,16<OR<40,79) y suministro de agua directo con una probabilidad de (p) de , (RR: 3,26), límites de confianza (1,12<RR<9,50), (OR) 3,9, límites de confianza (0,86<OR<16,82). 38

53 Resultados Fasciola hepatica Durante los 6 muestreos realizados se obtuvo como resultado que las veredas Aposentos, Don Lope, Pantano y Táquira mostraron la presencia de Fasciola hepatica. Tabla 3. Prevalencia de predios positivos a Fasciola hepatica, vereda Aposentos VEREDA APOSENTOS MUESTREO TOTAL PREDIOS PREDIOS POSITIVOS PREVALENCIA (%) Tabla 4. Prevalencia de predios positivos a Fasciola hepatica, vereda Don Lope VEREDA DON LOPE MUESTREO TOTAL PREDIOS PREDIOS POSITIVOS PREVALENCIA (%)

54 Tabla 5. Prevalencia de predios positivos a Fasciola hepatica, vereda Pantano VEREDA PANTANO MUESTREO TOTAL PREDIOS PREDIOS POSITIVOS PREVALENCIA (%) Tabla 6. Prevalencia de predios positivos a Fasciola hepatica, vereda Táquira VEREDA TÁQUIRA MUESTREO TOTAL PREDIOS PREDIOS POSITIVOS PREVALENCIA (%) Tabla 7. Prevalencia de Fasciola hepatica de predios positivos, muestreos 1-6 MUESTREOS TOTAL PREDIOS PREDIOS POSITIVOS PREVALENCIA (%)

55 Tabla 8. Prevalencia de Fasciola hepatica por animal, muestreos 1-6 MUESTREO NÚMERO POSITIVOS NÚMERO NEGATIVOS POBLACIÓN EN RIESGO PREVALENCIA (%) , , , , , ,82 Prevalencia General ,33 Gráfico 5. Prevalencia de Fasciola hepática por animal PREVALENCIA DE Fasciola hepatica POR ANIMAL PORCENTAJE ,05 8,82 8,82 6,53 5,88 5, PREVALENCIA MUESTREO 41

56 Resultados hospedero intermediario En este estudio la especie de caracol hallada fue Lymnaea cousini (Hospedero intermediario), Physa acuta (Caracol común). Los habitats de los caracoles fueron localizados en el área pantanosa cerca del lugar de consumo de los animales. Los predios positivos a Caracol Lymnaea encontrados en los muestreos 1-6 se ubicaron principalmente en las veredas de Don Lope, Aposentos, Pantano y Táquira. Tabla 9. Prevalencia de predios positivos a Caracol Lymnaea, vereda Aposentos VEREDA APOSENTOS MUESTREO TOTAL PREDIOS PREDIOS POSITIVOS PREVALENCIA (%) Tabla 10. Prevalencia de predios positivos a Caracol Lymnaea, vereda Don Lope VEREDA DON LOPE MUESTREO TOTAL PREDIOS PREDIOS POSITIVOS PREVALENCIA (%)

57 Tabla 11. Prevalencia de predios positivos a Caracol Lymnaea, vereda Pantano VEREDA PANTANO MUESTREO TOTAL PREDIOS PREDIOS POSITIVOS PREVALENCIA (%) Tabla 12. Prevalencia de predios positivos a Caracol Lymnaea, vereda Táquira VEREDA TÁQUIRA MUESTREO TOTAL PREDIOS PREDIOS POSITIVOS PREVALENCIA (%) Tabla 13. Prevalencia de caracol Lymnaea cousini de predios positivos muestreos 1-6 MUESTREOS TOTAL PREDIOS PREDIOS PREVALENCIA POSITIVOS (%) La población del caracol Lymnaea de acuerdo en los muestreos realizados durante el año estudio se reportó que el menor número de caracoles fue en los meses de Enero y Noviembre (Muestreos 1 y 6), el mayor número de caracoles 43

58 se encontró en los meses de Marzo y Junio (Muestreos 2 y 4), y el número medio se encontró en los meses de Mayo y Agosto (Muestreos 3 y 5). Gráfico 6. Predios positivos y negativos al muestreo de Caracol Lymnaea NÚMERO DE PREDIOS CON PRESENCIA DE CARACOL Lymnaea N PREDIOS POSITIVOS PREDIOS NEGATIVOS MUESTREO 1 MUESTREO 2 MUESTREO 3 MUESTREO 4 MUESTREO 5 MUESTREO 6 Gráfico 7. Población del Caracol Lymnaea cousini POBLACIÓN Lymnaea cousini N CARAC ene 2. mar 3. may 4. jul 5. sep 6. nov MUESTREO CARACOL Lymnaea CARACOL COMÚN 44

59 Se determinó que para la presencia del hospedero intermediario (caracol Lymnaea) el municipio de Simijaca Cundinamarca posee condiciones medioambientales adecuadas para la presencia de este y el posible desencadenamiento del ciclo de la Fasciola hepatica. Gráfico 8. Comparación de variables ambientales y presencia de Caracol Lymnaea COMPARACIÓN DE VARIABLES AMBIENTALES Y PRESENCIA DE CARACOL NUMERO ºC,%,mm CARACOL Lymnaea TEMPERATURA HUMEDAD PRECIPITACION 0 0 ENERO FEBERO MARZO ABRIL MAYO JUNIO JULIO AGOSTO SEPTIEMBRE OCTUBRE NOVIEMBRE DICIEMBRE MESES Comparación de presencia de Fasciola hepatica y caracol Lymnaea cousini En este estudio, los predios positivos a Fasciola hepatica también fueron positivos a la presencia del hospedero intermediario lo que permite afirmar que el parásito necesita del hospedero intermediario para su desarrollo. 45

60 Gráfico 9. Comparación de presencia de Fasciola hepatica y de Caracol Lymnaea cousini Fasciola hepatica y Caracol Lymnaea Nº CARACOLES ENERO MARZO MAYO JULIO SEPTIEMBRE MUESTREOS NOVIEMBRE PREVALENCIA % CARACOL fasciola hepatica 46

61 4.2 DISCUSIÓN La distribución de la Fasciola hepatica durante este estudio se presentó en 4 de las 12 veredas del municipio (Don lope, Aposentos, Pantano y Táquira), a su vez que el hospedero intermediario, debido a que los predios de estas veredas presentaban condiciones inadecuadas de manejo como fuente y suministro de agua. Los resultados cropológicos obtenidos determinaron que la Fasciola hepatica tuvo una prevalencia por animal baja en los meses de marzo y mayo y una prevalencia alta en septiembre debido a que coincide con la época de lluvias. Según Meléndez y Col, 1983, el período prepatente de la Fasciola hepatica es aproximadamente dos meses, deduciendo que los bovinos ingirieron las metacercarias dos meses antes (julio), lo cual coincide con el incremento de la población del hospedero intermediario (Caracol Lymnaea) y consecuentemente al haber mayor número de caracoles, mayores serán las posibilidades de multiplicación y diseminación de las formas evolutivas de Fasciola hepatica. Estas zonas del municipio presentan suelos arcillosos que tienen la capacidad de retener agua y humedad. Esta cualidad de retención de humedad está presente en suelos ricos en materia orgánica, necesaria para el hábitat del hospedero intermediario como lo afirma Morales y Pino, Según Dwight, 2004 reporta que cualquier depresión en la topografía puede retener agua durante cierto tiempo sirviendo como fuente de infección. Los resultados evidencian que la topografía de las veredas donde se presentó la mayor prevalencia presentaban estas características. 47

62 Antonio Atias, 1984 reporta que la Fasciola hepatica requiere temperaturas de 10 a 30º C para el desarrollo de huevos y así poder seguir con el ciclo coincidiendo con la temperatura promedio de la región analizada. En este estudio, la prevalencia por animal fue de 8,3 % y de 5,6 % por predio, teniendo en cuenta que no existen otros estudios de Fasciola hepatica en este municipio. En otras regiones de Colombia el ICA reporta una prevalencia del 25% al igual que el estudio realizado en el Departamento de Nariño por Marín y Martínez, A nivel Latinoamericano la prevalencia de esta enfermedad es del 96.5% en México, Perú 95,5%, Bolivia 16,59% y Cuba con 95,3%, representando grandes pérdidas económicas descrita por Becerra, En cuanto a los moluscos recolectados por la técnica del metro cuadrado, las especies encontradas fueron Lymnaea cousini y physa acuta. Se encontraron específicamente en orillas de abrevaderos, zonas pantanosas formadas alrededor de las fuentes de agua suministrada e incluso en las albercas, coincidiendo con lo afirmado por Dwight, 2004, quien considera estas zonas como áreas de cría de caracoles. Un recuento de los moluscos durante el estudio, presenta un menor número en el mes de marzo (64 moluscos) y un número mayor en el mes de julio con (102 moluscos). Según Meléndez y Col, 1983, en la época de lluvia se presenta mayor población de caracoles a diferencia de la época de sequía. Según Cordero del Campillo, 1999 y Romero, 1994, para la presencia del hospedero intermediario (Caracol Lymnaea) es necesario una temperatura >de 10º C. Durante este estudio el municipio de Simijaca presentó un temperatura >de 10º C lo que permite un hábitat adecuado para el hospedero. 48

63 En Colombia se han encontrado especies del Género Lymnaea dependiendo de la región; Lymnaea ubaquensis de la Laguna de Ubaque en el departamento de Cundinamarca; Lymnaea bogotensis en la Sabana de Bogotá y Lymnaea columella extensamente distribuido en los departamentos de Antioquia, Cundinamarca, Meta, Nariño, Valle Cauca y Tolima. (Salazar L. y Col. 2006). En este estudio la especie reportada fue Lymnaea cousini, la cual no ha sido descrita en esta zona. Los resultados evidencian a la fuente de agua (Acueducto y Nacedero) y el suministro (Tanque y Directo) como factores de riesgo reales lo cual podría explicarse por la contaminación en el almacenamiento temporal del agua. De igual forma el rebosamiento de los recipientes ocasiona formación de áreas pantanosas facilitando las condiciones adecuadas para la presencia del hospedero intermediario (Caracol Lymnaea). Según Meléndez, Roy y Col afirman que la ecología de los Lymaneas sp. y la posibilidad de una subsecuente aparición de la Fasciola hepatica se puede presentar, en este estudio se encontró que los predios positivos a Fasciola hepatica, también resultaron positivos al caracol Lymnaea lo que permite deducir que para que se presente la enfermedad es necesario la presencia de animales infestados por el parásito y la presencia del hospedero intermediario. La Asistencia Técnica brindada a los ganaderos se basa principalmente en la atención que ofrece la alcaldía por medio de la UMATA, la cual se encontró en la mayoría de predios y positivos a la enfermedad de este estudio. Esta atención es solo utilizada por el productor en casos espontáneos donde sus animales están afectados por alguna enfermedad, pero en un alto número de predios no hay ningún tipo de asistencia veterinaria lo cual puede con llevar a que el productor 49

64 tenga poco conocimiento de enfermedades que afectan a su explotación como lo es la Fasciola hepatica. En cuanto al manejo que la UMATA ofrece a nivel de desparasitación, solo es en forma general basándose en síntomas que presenta el animal como diarrea, disminución de peso o producción. Por este motivo es importante la realización de estudios que permitan reconocer las enfermedades parasitarias que afectan a los animales del municipio y sus condiciones de presentación para poder tener un conocimiento verdadero. 50

65 5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES. Para conocer la dinámica de una parasitosis como la ocasionada por la Fasciola hepatica, es necesario realizar un estudio durante un tiempo prudencial que permita tener información de eventos o variables que puedan afectar la presencia de la enfermedad y de esta forma obtener datos confiables para tomar decisiones y tener un estudio actualizado sobre esta enfermedad. La epidemiología de la Fasciolasis está íntimamente ligada a los factores climáticos, a las características de los potreros y al manejo del predio. Aunque en el municipio de Simijaca no se ha realizado ningún estudio sobre esta enfermedad, este trabajo aporta una información básica fundamental que permite establecer una imagen aproximada de la situación de la Fasciola hepatica en la región. Se pudo comprobar la presencia de la enfermedad por medio de la identificación de los huevos de la Fasciola hepatica en materia fecal y a su vez la presencia de hospedero intermediario (Caracol Lymnaea) necesario para el ciclo biológico de este parásito. Los resultados presentados en este trabajo demostraron que la Distomatosis bovina estuvo presente en el municipio de Simijaca Cundinamarca durante el tiempo de estudio, alcanzando una prevalencia por predio del 5.6% y por animal del 8.33%. Por otra parte el estudio señala que la distribución geográfica de la enfermedad se detectó en las veredas Aposentos, Don Lope, Táquira y Pantano. Aunque las otras veredas no estan excentas de que se pueda presentar la enfermedad ya que 51

66 el municipio posee las condiciones ambientales, geográficas y cuenta con una población en riesgo. Estudios epidemiológicos realizados en esta región (Valle de Ubaté) se enfocan al estudio de parásitos gastrointestinales, hepáticos y pulmonares en conjunto; esto permite desconocimiento de la enfermedad en una zona específica, impidiendo el reconocimiento de la fasciolasis bovina y la implementación de medidas estratégicas para su control y prevención. Debido a la falta de información que tiene los productores acerca de la enfermedad, sus factores predisponentes, causas y presencia del hospedero intermediario limitan la implementación de medidas encaminadas a la prevención y control de esta. La fuente y el suministro de agua se consideraron como factores de riesgo para la presencia del hospedero intermediario por la falta de tratamiento y contaminación del agua, mal drenaje de zonas pantanosas, falta de limpieza constante de los medios artificiales y naturales para el suministro del agua. Aunque la asistencia técnica prestada por la UMATA es la de elección por los productores, no es suficiente para solucionar los problemas que aquejan la sanidad animal debido a la falta de información sobre las enfermedades parasitarias y programas de prevención y control de estas. Teniendo en cuenta el manejo que dan los productores a las excretas esparciéndolas directamente a las praderas sin darle el tratamiento adecuado para eliminar los huevos de Fasciola hepatica se puede considerar como un factor de riesgo para la diseminación de la enfermedad. 52

67 Uno de los métodos más utilizados para el diagnóstico de la enfermedad es la confirmación de huevos en la materia fecal por laboratorio, es poco conocido por los propietarios, se basan en el síntoma característico como lo es el edema submandibular (Coto), esto conlleva a un inadecuado uso de los antiparasitarios. Debido a la falta de conocimiento de la enfermedad por parte de productor este solo toma conciencia de realizar un tratamiento en sus animales cuando comienza a tener grandes pérdidas económicas como lo es la disminución de producción, disminución de peso. También como el municipio de Simijaca tiene actividad primaria la lechería es importante ya que esta se ve afectada pero puede ser imperceptible por el productor. En cuanto a las recomendaciones se debe iniciar la concientización del productor de los problemas que ocasiona la Fasciola hepatica para que ellos puedan implementar medidas de prevención y control. En el manejo del agua se recomienda realizar una buena limpieza de los medios de suministro de agua, un tratamiento adecuado y la realización de un buen drenaje en las zonas pantanosas presentes en el predio. Es necesario realizar un diagnostico definitivo mediante pruebas de laboratorio a los predios donde se sospeche la presencia de Fasciola hepatica y después de ser confirmado implementar un método de control antiparasitario eficaz. Para el tratamiento adecuado de las excretas es recomendable almacenarlas y encalarlas por dos meses antes de ser utilizadas como abono en las praderas para garantizar la inactivación de cualquier material biológico en este caso los huevos de Fasciola hepatica. 53

68 Se recomienda la implementación de charlas a los productores que les informen sobre las medidas de control y prevención de esta enfermedad. 54

69 BIBLIOGRAFÍA ATIAS, Antonio. Parasitología Veterinaria. 2 ed p BARCHERT, Alfred. Parasitología veterinaria p BECERRA W.M, Araque M. Prevalencia de Fasciola hepatica en bovinos sacrificados en el matadero de Pamplona, procedentes de tres departamentos de Colombia.1998:8p. BECERRA ROZO, Margarita. Consideraciones sobre estrategias sostenibles para el control de Fasciola hepatica en Latinoamérica. En: Revista Colombiana de ciencias pecuarias. Vol. 14, No.1(2001); p BENAVIDES, E. Diseño de planes racionales de control de parásitos internos de los rumiantes con base en los resultados de investigaciones sobre su dinámica poblacional. En: Corpoica. Vol 2 (1996). BLOOD, D.C; RADOSTITS, O.M; GAY, C.C y HINCHCLIFF, K.W. Medicina Veterinaria. 6 ed. Editorial Interamericana, p CAMARGO, Maryluz. CAMACHO, María. Prevalencia de la Fasciola hepatica en la zona cálida de los municipios de Cúcuta, Villa del Rosario y Puerto Santander. Bogotá, Tesis de Grado. UDCA. CASTILLO, Yasmín y HERNÁNDEZ, Sara. Prevalencia serológica de Artritis Encefalitis Caprina (AEC) en los municipios del Rosal y Subachoque (Cundinamarca) mediante la técnica de Inmunodifusión en Agar Gel. Bogotá, Tesis de Grado. Universidad de la Salle. CORDERO DEL CAMPILLO M. Parasitología veterinaria, p CROSSLEY SANZ, James. Fasciolasis Bovina. En: Normando Colombiano. Bogotá. Vol. 8 (dic. 1987). DWIGHT, Bowman. RANDY, Carl. Parasitologia para veterinarios ed. p HENDRIX, Charles. Diagnostico Parasitológico veterinario p

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71 URQUHART, G.M, ARMOUR J, DUNCAN JC, DUNN A.M. Parasitología veterinaria p VÁZQUEZ, Francisco. Control y Prevención de Fasciolasis bovina en los municipios de Duitama, Paipa, Sotaquirá y Tuta (Boyacá).Bogotá: Tesis Universidad de la Salle, VELÁSQUEZ, L. Synonymy between Lymnaea bogotensis Pilsbry, 1935 and Lymnaea cousini Jousseaume, 1887 (Gastropoda: Lymnaeidae). En: Mem Inst Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Vol. 101 (7): , November THRUSFIELD, Michael. Epidemiología Veterinaria p

72 ESTUDIO DE PREVALENCIA DE LA Fasciola hepatica Y Caracol Lymnaea spp. EN PREDIOS DEL MUNICIPIO DE SIMIJACA CUNDINAMARCA ADRIANA MARCELA CABRA ÁNGEL CLAUDIA CONSUELO HERRERA HUÉRFANO UNIVERSIDAD DE LA SALLE FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA BOGOTÁ, D.C. 2007

73 ESTUDIO DE PREVALENCIA DE LA Fasciola hepatica Y Caracol Lymnaea spp. EN PREDIOS DEL MUNICIPIO DE SIMIJACA CUNDINAMARCA ADRIANA MARCELA CABRA ÁNGEL. Código CLAUDIA CONSUELO HERRERA HUÉRFANO. Código Trabajo de grado presentado como requisito parcial para optar al título de Médico Veterinario Director JOSÉ FERNÁNDEZ MANRIQUE Médico Veterinario Universidad de la Salle Docente de Epidemiología y Salud Pública UNIVERSIDAD DE LA SALLE FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA BOGOTÁ, D.C 2007

74 DIRECTIVOS RECTOR Hno. Fabio Gallego Arias VICERRECTOR ACADÉMICO Hno. Carlos Gabriel Gómez Restrepo VICERRECTOR DE PROMOCIÓN Y DESARROLLO HUMANO Hno. Edgar Figueroa Abrajím VICERRECTOR ADMINISTRATIVO Dr. Mauricio Fernández Fernández DECANO DE LA FACULTAD Dr. Pedro Pablo Martínez Méndez SECRETARIO ACADÉMICO Dra. María Teresa Uribe Mallarino DIRECTOR CLÍNICA VETERINARIA Dr. Humberto Vásquez Romero

75 Nota de aceptación: Director. Dr. José Fernández Manrique. Jurado Dr. César Díaz Rojas Jurado Dr. Dildo Márquez Lara Secretaria Académica. Dra. María Teresa Uribe Mallarino. Bogotá, 21 de marzo de 2007

76 COMPROMISO El presente trabajo de investigación no contiene ideas que de una u otra forma, sean contrarias a la Iglesia Católica, en cuanto a su doctrina, dogma y moral. Las ideas aquí expuestas por los graduandos no son responsabilidad ni del director del proyecto de investigación, ni de los jurados o la Universidad de La Salle.

77 DEDICATORIA A Dios por haberme brindado la posibilidad de cumplir esta meta tan importante de mi vida. A mis padres Myriam Cecilia y Roberto que a través de la vida siempre han depositado su confianza en mí, guiándome para ser cada día una mejor persona teniendo en cuenta los valores impartidos por ellos como la lealtad, la honestidad y la responsabilidad en todos mis actos. A mi familia por sus consejos. A mis amigos que con su voz de aliento en los momentos difíciles hicieron realidad este sueño. Adriana Marcela Cabra Ángel A Dios por darme la vida y por concederme todas las condiciones físicas e intelectuales. A mis padres José y Georgina por todo el esfuerzo que hicieron para permitirme estudiar a pesar de todas las adversidades. A mis hermanos por estar siempre conmigo y a mi esposo por brindarme su amor, apoyo y consejos durante todo este tiempo. Claudia Consuelo Herrera Huérfano

78 AGRADECIMIENTOS Al Dr. José Fernández Manrique por su tiempo y orientación durante todo el proceso del trabajo de grado. A la alcaldía municipal de Simijaca Cundinamarca por su colaboración en la parte práctica de este proyecto. A los ganaderos del municipio de Simijaca Cundinamarca, quienes con buena voluntad nos permitieron utilizar sus predios para la toma de muestras del proyecto. A los señores Luís Ávila y Alberto Molina por su servicio en la toma de las muestras. A la Universidad de La Salle por permitirnos utilizar sus instalaciones y equipos para el desarrollo del proyecto. A don Aquilino y la Señora Yolanda por todos los servicios prestados. A los Doctores César Díaz Rojas y Dildo Márquez Lara por el tiempo dedicado para la revisión y aprobación de este proyecto. Al Dr. Danilo Parra Gil por su orientación durante el desarrollo del trabajo. A la Dra. Luz Helena Velásquez Directora del centro de Malacología de la Universidad de Antioquia (Medellín) por su orientación y capacitación en técnicas malacológicas.

79 TABLA DE CONTENIDO Pág. RESUMEN....1 ABSTRACT.. 3 INTRODUCCIÓN MARCO TEÓRICO Fasciola hepatica Morfología CICLO EVOLUTIVO HOSPEDERO INTERMEDIARIO Taxonomía EPIDEMIOLOGÍA Hábitat Temperatura Humedad y precipitación PATOGENIA MANIFESTACIONES CLÍNICAS Fasciolasis aguda Fasciolasis crónica DIAGNÓSTICO Diagnóstico parasitológico CONTROL Y PREVENCIÓN Medidas preventivas y manejo del animal MATERIALES Y MÉTODOS LOCALIZACIÓN CONDICIONES CLIMÁTICAS Precipitación...20

80 3.2.2 Temperatura Humedad POBLACIÓN Y MUESTRA FUENTE DE DATOS VARIABLES MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS MÉTODOS PROCEDIMIENTOS Reconocimiento del hospedero Área de estudio y técnica malacológica Identificación de huevos de Fasciola hepatica RESULTADOS Y DISCUSIÓN RESULTADOS Caracterización de predios Resultados Fasciola hepatica Resultados hospedero intermediario Comparación de presencia de Fasciola hepatica y Caracol Lymnaea cousini DISCUSIÓN CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES BIBLIOGRAFÍA ANEXOS

81 LISTA DE TABLAS Pág. Tabla1. Animales a muestrear según población total por predio.22 Tabla 2. Número de predios por vereda y población observada...22 Tabla 3. Prevalencia de predios positivos a Fasciola hepatica, vereda Aposentos 39 Tabla 4. Prevalencia de predios positivos a Fasciola hepatica, vereda DonLope...39 Tabla 5. Prevalencia de predios positivos a Fasciola hepatica, vereda Pantano Tabla 6. Prevalencia de predios positivos a Fasciola hepatica, vereda Táquira.40 Tabla 7. Prevalencia de Fasciola hepatica de predios positivos, muestreos Tabla 8. Prevalencia de Fasciola hepatica por animal, muestreos Tabla 9. Prevalencia de predios positivos a Caracol Lymnaea, vereda Aposentos...42

82 Tabla 10. Prevalencia de predios positivos a Caracol Lymnaea, vereda Don Lope. 42 Tabla 11. Prevalencia de predios positivos a Caracol Lymnaea, vereda Pantano 43 Tabla 12. Prevalencia de predios positivos a Caracol Lymnaea, vereda Táquira.43 Tabla 13. Prevalencia de caracol Lymnaea cousini de predios positivos muestreos

83 LISTA DE FIGURAS Pág. Figura 1. Ciclo biológico de la Fasciola hepatica Figura 2. Veredas del municipio de Simijaca.19 Figura 3. Claves taxonómicas para reconocimiento del Caracol Lymnaea 28 Figura 4. Materiales para recolección del caracol..28 Figura 5. Lavado de la muestra...29 Figura 6. Identificación de las especies encontradas y cuantificación...29 Figura 7. Comparación de los caracoles hallados...30 Figura 8. Caracol común...30 Figura 9. Caracol Lymnaea...31 Figura 10. Hallazgo de muestra positiva..32

84 LISTA DE GRÁFICOS Gráfico 1. Fuente de Agua en los predios muestreados municipio de Pág. Simijaca Cundinamarca.34 Gráfico 2. Suministro de Agua en los predios muestreados municipio de Simijaca Cundinamarca.35 Gráfico 3. Topografía del Predio en los predios muestreados municipio Simijaca Cundinamarca. 36 Gráfico 4. Plan de Desparasitación en los predios muestreados municipio de Simijaca Gráfico 5. Prevalencia de Fasciola hepática por animal Gráfico 6. Predios positivos y negativos al muestreo de Caracol Lymnaea.44 Gráfico 7. Población del Caracol Lymnaea cousini...44 Gráfico 8. Comparación de variables ambientales y presencia de Caracol Lymnaea.45 Gráfico 9. Comparación de presencia de Fasciola hepatica y caracol cousini....46

85 RESUMEN La infección de los rumiantes domésticos por Fasciola hepatica ocasiona pérdidas económicas significativas representadas en reducción de la ganancia de peso, decomiso de hígados a nivel de matadero, baja producción de leche, lana e incluso la muerte. El hospedero intermediario de la Fasciola hepatica es un caracol del género Lymnaea sp. caracterizado por ser muy resistente a las condiciones medioambientales; en épocas de lluvia desarrolla su potencial reproductivo el cual disminuye en períodos de sequía. Teniendo en cuenta la problemática que causa la Fasciola hepatica en el municipio de Simijaca Cundinamarca representada en la presentación de animales con los signos y síntomas característicos de esta parasitosis y los constantes decomisos de hígados que se realizan en el matadero, se realizó este estudio que permitió establecer los parámetros epidemiológicos de esta enfermedad. El presente estudio se llevó a cabo en el municipio de Simijaca Cundinamarca, en un período de 1 año con intervalo de muestreo de 2 meses; se seleccionaron 150 fincas de las 12 veredas del municipio con un promedio de 10 animales por finca para un total de 1500 animales; mediante el programa epidemiológico EPIINFO se calculó el tamaño de la muestra (306 animales por muestreo) y se analizaron los resultados obtenidos. Con la realización de este estudio se buscó conocer la prevalencia actual de la enfermedad y del hospedero intermediario en predios del municipio de Simijaca Cundinamarca, teniendo en cuenta variables ambientales como además de

86 factores predisponentes como fuente y manejo de agua, plan de desparasitación y manejo de excretas entre otras. Para el diagnóstico de esta parasitosis se hizo la recolección de materia fecal de los animales seleccionados para la confirmación de huevos de Fasciola hepatica por medio de la técnica de Dennis, al mismo tiempo se identificó el hábitat adecuado para la presencia del hospedero intermediario (Caracol Lymnaea), tomando una muestra para su identificación en base a claves taxonómicas.

87 ABSTRACT The domestic infection of the ruminant ones for Fasciola liverwort causes economic significant losses represented in reduction of the gain of weight, seizure of livers at slaughterhouse level, low production of milk, wool and even the death. The intermediary hospedero of Fasciola hepatica is a snail of the gender Lymnaea sp. characterized to be very resistant to the environmental conditions; in rain times it develops their reproductive potential which diminishes in periods of drought. Keeping in mind the problem that Fasciola hepatica causes in the municipality of Simijaca Cundinamarca being reflected in the presentation of animals with the signs and characteristic symptoms of this parasitosis and the constant seizures of livers that are carried out in the slaughterhouse, he/she was carried out this study that allowed to establish the epidemic parameters of this illness. The present study was carried out in the municipality of Simijaca Cundinamarca, in a 1 year-old period with interval of sampling of 2 months; 150 properties of the 12 sidewalks of the municipality were selected with an average of 10 animals by property for a total of 1500 animals; by means of the epidemic program EPIINFO the size of the sample (306 animals for sampling) was calculated and the obtained results were analyzed. With the accomplishment of this study one looked for to know the situation present epidemiologist the disease and the intermediary hospedero in estates of the municipality of Simijaca Cundinamarca, considering variable environmental as in addition to predisponentes factors as source and handling of water, plan of desparasitación and handling of you excrete among others.

88 For the diagnosis of this parasitosis the gathering of fecal matter of the animals was made selected for the confirmation of eggs of Fasciola hepatica liverwort by means of Dennis' Technique, at the same time the appropriate habitat was identified for the presence of the intermediary (Snail Lymnaea) hospedero, taking a sample for its identification based on key taxonomics.

89 INTRODUCCIÓN Las prácticas de manejo realizadas en una finca tienen como finalidad obtener el máximo rendimiento económico de los animales. Por este motivo es importante conocer cual es el efecto de las enfermedades parasitarias, aunque no causan gran mortalidad producen bajo nivel de producción en los animales. Por lo tanto el conocimiento de la epidemiología de una enfermedad parasitaria en un área determinada y el examen cuidadoso de los factores predisponentes con carácter regional es de gran utilidad para establecer medidas de prevención y control. Actualmente, el control parasitario se orienta a proteger el animal parasitado basándose en el uso de antihelmínticos y así proporcionar una defensa contra los efectos causados por la enfermedad. Sin embargo estas medidas de control no son suficientes para eliminar estas parasitosis ya que existen otras condiciones biológicas y ambientales que contribuyen con la presentación de la enfermedad como la presencia de los hospederos intermediarios y los hábitats necesarios para su desarrollo. La Fasciolasis bovina es una enfermedad parasitaria muy común en las ganaderías de clima frío, especialmente en las ganaderías de leche, ocasionando grandes pérdidas económicas como la disminución en la producción láctea, reducción de la ganancia de peso, decomiso de hígados a nivel de matadero y la muerte del animal. La Fasciola hepatica es un tremátodo aplanado que afecta principalmente a los bovinos pero también puede afectar a otras especies como ovinos, caprinos,

90 equinos e incluso el hombre. Para el desarrollo de esta enfermedad es de vital importancia la presencia del hospedero intermediario, caracol del género Lymnaea necesario para que se lleve a cabo el ciclo biológico de la Fasciola hepatica, quien a su vez es multiplicador de este parásito. Este caracol intermediario necesita para su desarrollo buenas condiciones de humedad, zonas de fácil estancamiento con escaso flujo de agua como zonas pantanosas, pequeñas charcas, orillas de arroyos y después de fuertes precipitaciones, las huellas de las pezuñas de los animales pueden proporcionarle hábitats temporales. Son muchas las especies de Lymnaea identificadas, se considera al Lymnaea bogotensis el principal hospedero intermediario en Colombia (Camargo y Camacho, 1999). Es pequeño de 8 a 15 mm de longitud, de concha cónica delgada, con 3 a 4 espiras bien marcadas y de color pardo. Para obtener un conocimiento real de las de las enfermedades parasitarias como la ocasionada por Fasciola hepatica con un ciclo evolutivo indirecto es necesario hacer un estudio sistemático durante un tiempo prudencial para conocer los factores ecológicos, parasitológicos y del hospedero intermediario que interviene en el ciclo biológico. Con la realización de este estudio se buscó conocer la prevalencia actual de la enfermedad y del hospedero intermediario en predios del municipio de Simijaca Cundinamarca, teniendo en cuenta variables ambientales y factores predisponentes como fuente y manejo de agua, plan de desparasitación y manejo de excretas entre otras. El conocimiento de la enfermedad por parte del ganadero es importante para desarrollar programas de control adecuado como el manejo de las fuentes agua

91 para evitar la reproducción de caracoles y medidas de prevención como un plan de desparasitación pero basándose en un diagnóstico de laboratorio.

92 2. MARCO TEÓRICO En Colombia, por estar en el trópico existen condiciones climáticas adecuadas y necesarias para el desarrollo y multiplicación de diferentes especies de parásitos obstaculizando el desarrollo ganadero, reduciendo la productividad, bajo rendimiento en la producción de leche y carne, aumentando la susceptibilidad a enfermedades infecciosas, disminuyendo la eficiencia de la conversión alimenticia, aumentando los costos de tratamientos y en caso de enfermedades zoonóticas una repercusión en la salud pública. La Fasciolasis bovina es una enfermedad parasitaria muy común en las ganaderías de clima frío, especialmente en las ganaderías de leche, ocasionando grandes pérdidas económicas como la disminución en la producción láctea, reducción de la ganancia de peso, decomiso de hígados a nivel de matadero y aún la muerte del animal. En una perspectiva histórica que sintetiza las pérdidas económicas ocasionadas por la Fasciola hepatica y su prevalencia se pueden referenciar en las diversas investigaciones que se han realizado en el país. Para los años la prevalencia de la enfermedad estaba calculada en un 25%. Trabajos posteriores del ICA indican que para algunas zonas de los departamentos de Boyacá, Nariño y Cundinamarca, la prevalencia del parásito a nivel de fincas está por encima del 80%. (Vázquez, 2005). Otro estudio efectuado en el Departamento de Nariño en el año 1977 evidenció que teniendo en cuenta la población bovina de clima frío en Colombia según el programa de parasitología del ICA, el 25% estaba infestado de Fasciola, afectando en algunos casos el 50-70% del hato, y aún el 100%, con una

93 mortalidad del 3.3%; por cada hembra adulta afectada con Distomatosis se pierden aproximadamente 840 litros de leche, 40 kg de carne y un hígado que pesa aproximadamente 6 Kilos. (Marín y Martínez, 1977). Posteriormente otro estudio del año 1984 mostró que la prevalencia de Fasciola hepatica era del 25%, con una disminución en la producción de leche en una vaca infestada del 16% menos con relación a su potencial productivo y una mortalidad del 3.3%. (Crossley, 1987). En Colombia las pérdidas anuales por la Fasciola hepatica son de $ millones de pesos (Benavides,1996); el decomiso de hígados es de 9.18% (Becerra, 2000). Como antecedente para la realización de este proyecto se tuvo en cuenta el alto número en el decomiso de hígados por Fasciola hepatica en el matadero de Simijaca Cundinamarca. El número total de hígados decomisados en el 2006 fue de 182 hígados. Se encontró que el mes de octubre fue el de mayor decomiso de hígados con un total de 35, y los meses con menor decomiso fue julio y agosto con solo 4 hígados decomisados, en el mes de noviembre no se encontró reporte de hígados decomisados 1. Por otra parte se reportaron las causas de decomiso de hígados donde sobresale que la mayor causa es por la Fasciola hepatica con un valor del 91 hígados que corresponde al 50%, la segunda causa mas importante es la presencia de tumores con 31 hígados decomisados (17%), la tercera causa fue cirrosis con un valor de 1 Colombia, Cundinamarca, Simijaca, UMATA.

94 24 hígados (13%) y la cuarta causa fueron las alteraciones físicas del hígado como cambio de color, estructura, etc., con un valor de 22 (12%) Fasciola hepatica La Fasciola hepatica es el tremátodo hepático del ganado bovino, ovino y de otros rumiantes. Es quizá el tremátodo más importante en medicina veterinaria desde el punto de vista económico debido a que produce destrucción hepática. (Hendrix, 1999) Morfología El parásito adulto mide de 18 a 50 mm de largo por 4 a 13 mm de ancho. Es un parásito hermafrodita aplanado en forma de hoja de simetría bilateral siendo su parte anterior más ancha que la posterior, la coloración en fresco es pardo grisáceo o gris cuando se conserva en formol, esta revestido por pequeñas espinas y posee dos ventosas muy próximas donde la ventral es más grande que la oral. Debajo de la ventosa ventral se abre el poro genital. (Romero, 1994). Los huevos de la Fasciola se caracterizan por su gran tamaño que varía de 130 a 150 micras de largo por 70 a 90 micras de ancho, son de forma ovalada, segmentados, operculados, teñidos por los pigmentos biliares en tonos amarillos hasta ligeramente pardos. Se deben diferenciar de los huevos de Paramphistomum spp., por su mayor tamaño no teñidos de amarillo, opérculo netamente visible y células embrionadas bien definidas. (Soulsby, 1987; Borchert, 1986). 2 Ibid., p. 8.

95 2.1.2 Ciclo Evolutivo Los parásitos adultos de la Fasciola hepatica habitan en los conductos biliares de los rumiantes y otros mamíferos. Cuando depositan los huevos son arrastrados hacia la luz del intestino con la bilis y posteriormente al exterior con las heces. Luego cuando caen al agua se desarrolla el primer estadio larvario llamado miracidio, el cual está cubierto de cilios y posee una papila cónica en su extremo anterior la cual permite perforar la piel del caracol (por cada miracidio que penetra el caracol, se producen de 500 a 600 cercarias). El miracidio estará totalmente desarrollado y listo para la eclosión después de 2 a 4 semanas en época de verano. Luego escapa de la envoltura del huevo y se va nadando en busca del hospedero intermediario (Caracol del género Lymnaea spp.), si no lo encuentra en un plazo de 24 horas el miracidio muere. Si el miracidio penetra el caracol pierde su envoltura de cilios y se dirige hacia las gónadas o la glándula digestiva donde se formará el segundo estadio larvario denominado esporocisto. (Dwight, 2004) Cada célula germinal se convierte en una esfera germinal y mediante un proceso de crecimiento y varias divisiones alcanza la fase de redias dando lugar en condiciones favorables a una segunda generación de redias la cual sigue evolucionando a un tercer estadio larvario conocido como cercaria. Las cercarias abandonan el caracol nadando en busca de las hojas de los pastos a las orillas de los vallados, estanques, charcos o los abrevaderos donde se enquistan y después de 3 días de maduración pierden la cola para transformarse en metacercaria, que es la fase infectante (Las metacercarias pueden permanecer viables hasta ocho meses si se mantienen en buenas condiciones de humedad). (Atias, 1984) Luego de ser ingerida por los animales continúa su desarrollo en el tubo digestivo donde disuelve su envoltura y queda libre su forma juvenil, atraviesa la pared

96 intestinal y 3 horas después se encuentra en la cavidad peritoneal. Permanece allí de 3 a 15 días, avanzando por el peritoneo hasta llegar a la cápsula de Glisson la que perfora para penetrar en el hígado. Migra a través del parénquima hepático y se localiza en los conductos biliares, cuando alcanza entre 60 a 70 días de edad está madura y comienza la ovoposición, los huevos salen a la materia fecal por la bilis para comenzar de nuevo el ciclo. (Parra, 1996; Becerra, 2000). Figura 1. Ciclo biológico de la Fasciola hepatica Fuente: DWIGHT, Bowman. Parasitología para veterinarios

97 2.1.3 Hospedero Intermediario Taxonomía Phylum: Clase: Sub-clase: Orden: Sub-orden: Familia: Género: Especie: Molluscos Gasterópodo Eythyneura Pulmonada Basommatophora Lymnaeidae Lymnaea L. cousini En Colombia se han encontrado otras especies del Género Lymnaea dependiendo de la región; Lymnaea ubaquensis de la Laguna de Ubaque en el departamento de Cundinamarca; Lymnaea bogotensis en la Sabana de Bogotá y Lymnaea columella extensamente distribuido en los departamentos de Antioquia, Cundinamarca, Meta, Nariño, Valle Cauca y Tolima. (Salazar L. y Col. 2006). En este estudio el hospedero intermediario de la Fasciola hepatica encontrado pertenece a la especie Lymnaea cousini 3. Es un caracol anfibio que en épocas de lluvia desarrolla todo su potencial reproductivo pero en las épocas de sequía se entierra profundamente y allí puede sobrevivir por varios meses. Mide de 8 a 15 mm de longitud y de 3 a 7 mm de ancho, la concha es cónica, puntiaguda y posee de 3 a 4 espiras bien marcadas. La abertura es grande, el lóbulo inferior está 3 VELÁSQUEZ, L. Synonymy between Lymnaea bogotensis Pilsbry, 1935 and Lymnaea cousini Jousseaume, 1887 (Gastropoda: Lymnaeidae), 2006.

98 ligado al cuerpo espiral y es de color blanquecino. El animal posee las aberturas pulmonar y genital sobre el lado derecho, los tentáculos son aplanados y triangulares en cuya base se encuentran los ojos. (Parra, 1996). La concha es habitualmente de color marrón oscuro, cuando se sujeta con la concha en vertical y la abertura frente al observador la longitud de esta última es aproximadamente la mitad de la del caracol, está situada en el lado derecho. (UrQuhart G, et al. 2001) Epidemiología La presencia de Fasciola hepatica depende de los factores que controlan la existencia de los hospederos intermediarios, como la existencia de hábitats adecuados y condiciones óptimas de humedad y temperatura Hábitat El hospedero intermediario necesita para su desarrollo zonas de fácil estancamiento con movimiento lento del agua como zonas pantanosas, pequeñas charcas, orillas de arroyos y después de fuertes precipitaciones, las huellas de las pezuñas de los animales pueden proporcionarle hábitats temporales al igual que las zonas con vegetación como musgo y junco entre otros. Aunque un ph del medio ligeramente ácido es óptimo, valores de ph excesivamente ácidos son perjudiciales. Ibid., p 12.

99 Temperatura Una temperatura ambiental media igual o superior a 10ºC es necesario tanto para la reproducción de los caracoles como para el desarrollo de la Fasciola hepatica dentro del caracol; ambos procesos se paralizan a 5ºC. Esta es también la temperatura mínima necesaria para el desarrollo y la eclosión de los huevos de Fasciola hepatica. Ibid., p Humedad y precipitación Las condiciones óptimas de humedad para la reproducción de los caracoles y el desarrollo de la Fasciola hepatica en su interior se producen cuando las precipitaciones superan a la evaporación y alcanzan niveles de saturación. Estas condiciones son también esenciales en el desarrollo de los huevos del parásito, para que los miracidios encuentren a los caracoles y la dispersión de las cercarias. Ibid., p Patogenia El poder patógeno de la Fasciola hepatica varía de acuerdo con algunos factores como el huésped ya que los ovinos son más susceptibles que los bovinos, cantidad de cercarias ingerida, si es una infestación o reinfestaciones. La patogenia tiene dos fases: la primera se produce durante la migración en el parénquima hepático y está asociada con las lesiones y hemorragias hepáticas. La segunda se produce cuando el parásito se localiza en los conductos biliares donde se presenta una actividad hematófaga de los tremátodos adultos y lesiones de la mucosa biliar producida por las espinas de su cutícula. (Romero, 1994).

100 2.1.6 Manifestaciones Clínicas Fasciolasis aguda La fasciolasis aguda ocurre cuando las metacercarias ingeridas invaden el hígado. Cuando las infestaciones son muy intensas el traumatismo provocado por los parásitos que perforan túneles por todo el hígado y la consecuente reacción inflamatoria provoca un cuadro clínico mortal, caracterizado por dolor abdominal y tendencia a la inmovilidad (Los signos clínicos aparecen 5 a 6 semanas después de la ingestión de metacercarias). En la necropsia la cavidad abdominal está llena de exudado hemorrágico y el hígado tiene consistencia friable, cubierto con depósitos de fibrina; se observan grandes cantidades de parásitos. (Dwight, 2004) Fasciolasis crónica Esta se desarrolla lentamente y esta asociada con la presencia de tremátodos adultos en los conductos biliares. Esta caracterizada por síntomas clínicos como pérdida gradual de peso, debilidad progresiva, anemia, hipoproteinemia con aparición de edemas subcutáneos especialmente en el espacio intermandibular y en el abdomen. Los tremátodos adultos causan colangitis, obstrucción biliar, destrucción del tejido hepático y fibrosis con calcificación. La hiperplasia de los conductos biliares se debe a la excreción por parte de la Fasciola hepatica de grandes cantidades de Prolina responsable en parte de la anemia. (Dwight, 2004; Blood D.C y Col. 1992).

101 2.1.7 Diagnóstico En los animales, el diagnóstico de la fasciolasis aguda se basa en la necropsia, mediante la observación de lesiones hepáticas características de la enfermedad y por la presencia del parásito. Durante la fase aguda, el diagnóstico se dificulta mediante el examen coprológico ya que durante esta fase no hay eliminación de huevos por la materia fecal. (Crossley, 1987). El diagnóstico de la fasciolasis crónica se fundamenta en el hallazgo de huevos en la materia fecal. En la necropsia se observan las fasciolas en el parénquima hepático, conductos biliares y en la vesícula biliar, además de las lesiones hepáticas características ocasionadas por el parásito en esta fase. Existen otros métodos para realizar el diagnóstico como la identificación de caracoles infectados a nivel de la finca, que le sirven de hospederos intermediarios a la Fasciola hepatica y el hallazgo de metacercarias en los pastos recogidos a orillas de los pantanos, los vallados o bebederos. (Parra, 1996). Los exámenes hematológicos también son de utilidad para estimar el nivel de enzimas plasmáticas liberadas como consecuencia de la lesión de las células hepáticas. Habitualmente se analizan dos enzimas. La glutamato deshidrogenasa (GLDH), esta es liberada cuando las células parenquimatosas están dañadas y se incrementa durante las primeras semanas post-infección. La gamma glutamil transpeptidasa (GGT) indica lesión en las células epiteliales que tapizan los conductos biliares y se incrementa especialmente una vez que las fasciolas alcanzan los conductos biliares, manteniendo niveles elevados durante un período de tiempo más prolongado. (UrQuhart G, et al. 2001).

102 Los tets serológicos como ELISA han sido de gran ayuda en el diagnóstico de la fasciolasis. Un aumento de la tasa de anticuerpos puede ser detectado dos semanas después de la infección pero no es válido para el diagnóstico hasta pasadas de 6 a 8 semanas. (Blood D.C y Col. 1992) Diagnóstico parasitológico La detección de huevos de Fasciola hepatica en las heces de los animales sospechosos es útil para diagnosticar la fasciolasis crónica, muchas veces caracterizada por una reducción en la productividad. El propósito es concentrar los huevos a partir de una muestra de heces mediante el método de sedimentación, el cual se basa en la mayor densidad de los huevos lo que permite concentrarlos en el sedimento tras repetidos lavados. La adición de un colorante de contraste al sedimento permite destacar los huevos. (Cordero del Campillo, 1999) Control Y Prevención El control de la Fasciola hepatica debe iniciarse con un diagnóstico preciso de la situación sanitaria de la finca para establecer las especies de animales parasitados, los lugares donde permanecen los caracoles infectados y la situación sanitaria de las fincas vecinas para determinar los lugares de donde pueden venir las cercarias por las corrientes de agua o con las aguas lluvias. Las bases para un programa de control eficaz son: la prevención del desarrollo de los caracoles que le sirven de hospederos intermediarios y que en último término son los diseminadores de la enfermedad y el control simultáneo de la Fasciola hepatica en los hospederos finales. (Parra, 1996).

103 Medidas preventivas y manejo del animal Evitar que el ganado entre a zonas infestadas de caracoles Evitar incorporar animales infestados procedentes de otras fincas, sin el debido examen coprológico. El agua utilizada para el riego de los potreros y para los bebederos, deben ser limpias y no proceder de sitios donde la materia fecal la contamine. La materia fecal que se utiliza como abono, debe recibir un tratamiento especial para no diseminar la enfermedad, almacenándola por dos meses y rociándola con cal para eliminar huevos y larvas. Evitar que la materia fecal infestada, llegue a extensiones de agua dulce, donde existan caracoles que le sirvan de huésped intermediario a la Fasciola hepatica. Los canales, zanjas, y surcos de desagüe, deberán conservarse constantemente limpios. Examinar los estanques y charcos intermitentes donde se crían los caracoles, ya que estas áreas son las más susceptibles de repoblarse. Cercar las áreas pantanosas a una distancia mayor de un metro y tratando con herbicidas la zona comprendida entre la orilla y la cerca, para evitar que los animales entren en contacto con los pastos contaminados. Cuando no se puedan drenar, rellenar, ni cercar los sitios en donde viven los caracoles entonces se procede a aplicar molusquicidas. (Parra, 1996; Crossley, 1987).

104 3. MATERIALES Y MÉTODOS 3.1 LOCALIZACIÓN El estudio de prevalencia de la Fasciola hepatica y el caracol Lymnaea spp., tuvo lugar en predios del municipio de Simijaca Cundinamarca. Está ubicado a 138 Km de la ciudad de Bogotá D.C, sobre la vía que conduce hacia Chiquinquirá (Boyacá), al extremo nor-occidental del departamento de Cundinamarca en la región de Ubaté: limitado al norte, oriente y occidente con el departamento de Boyacá y al sur con los municipios de Susa y Carmen de Carupa. Figura 2. Veredas del municipio de Simijaca VEREDA EL FICAL VEREDA HATO CHICO VEREDA EL JUNCAL VEREDA SAN JOSE VEREDA SALITRE VEREDA PEÑA BLANCA VEREDA CHURNICA VEREDA CENTRO VEREDA TAQUIRA VEREDA PANTANO VEREDA DON LOPE VEREDA APOSENTOS Fuente: Planeación municipal de Simijaca

105 3.2 CONDICIONES CLIMÁTICAS El clima es el elemento fundamental que incide sobre las características como tipo de suelo, vegetación y el uso que se haga de ellos Precipitación El municipio de Simijaca esta fuertemente determinado por la condición de valle (valle de Ubaté- Chiquinquirá), como cuenca de subsistencia rodeada por elevaciones que le dejan en una posición de sombra seca, con respecto a las corrientes de vientos húmedos provenientes de sureste y que ascienden por la vertiente oriental de la cordillera oriental depositando su humedad en este ascenso y pasando a la vertiente occidental débiles y secos. Las precipitaciones en las cuencas altas de los ríos de ubate y Suárez superiores a los 1000mm, en la cuenca del río Suárez, la precipitación fluctúa entre los 700 mm al sur de la cuenca y los 1500mm al norte, presentando un promedio de 850 mm. La distribución de lluvias es bimodal alternándose con pocos periodos secos entre los meses de junio, septiembre, diciembre y febrero y dos periodos húmedos entre los meses de marzo, mayo, octubre y noviembre. La precipitación promedio que oscila entre los periodos húmedos esta entre 100 y 150 mm y en los meses secos entre los 25 y los 75 mm, con un promedio anual medio de 822,2 mm, anual máximo de 2275,0 mm y mínimo anual de 172,5. (Ver anexo A) Temperatura En el municipio de Simijaca que se ubica en zona de clima frío oscila entre los 10 y 18 ºC con un promedio medio anual de 14.2 C, máximo anual de 16.7 C y

106 mínimo anual de 12.0 C (Ver anexo A). Las alturas oscilan entre 2000 y 3200 m.s.n.m. debido a este proceso también son comunes las heladas definidas como la ocurrencia de temperaturas iguales o menores a 0 ºC entre 1.5 y 2 sobre el nivel del suelo y que también determina como la temperatura mínima a partir de la cual los tejidos de las plantas comienzan a sufrir daño Humedad Tiene relación directa con la precipitación. A nivel espacial se presentan los valores más altos en las zonas de mayor pluviosidad y menores en las zonas mas secas. La humedad anual en la región es del 79% y su variación espacial y temporal va del 67 % al 90%, con un promedio medio anual de 67%, máximo anual del 80% y mínimo anual del 58% (Ver anexo A). 3.3 POBLACIÓN Y MUESTRA La población objeto de estudio fueron las doce veredas del municipio de Simijaca, a su vez estuvo conformada por 150 predios de dichas veredas y el número de animales fue seleccionado al azar de acuerdo a la población total del predio. (Tabla 2) El tamaño de la muestra se determinó mediante el programa EPIINFO teniendo como población total 1500 animales en los predios a evaluar, con un nivel de confianza del 95%, una proporción estimada del 50 % de bovinos infectados y un margen de error de 5%; el tamaño de la muestra fue de 306 animales a muestrear (Ver anexo B).

107 El muestreo por finca fue ponderado al número de animales así: X= Np*n N Np: tamaño del predio (numero de animales por predio) n : tamaño de la muestra( 306) N: tamaño de la población (1500 animales) (Martín S, y Col. 1997) Tabla 1. Animales a muestrear según población total por predio. Número de animales total/predio Número de animales a muestrear Mayor a Tabla 2. Número de predios por vereda y población observada NÚMERO DE PREDIOS NÚMERO DE ANIMALES VEREDA DON LOPE APOSENTOS TAQUIRA PANTANO JUNCAL 3 38 FICAL HATO CHICO CENTRO SALITRE CHURNICA PEÑA BLANCA 6 40 SAN JOSE 4 17 TOTAL

108 3.4 FUENTE DE DATOS La información recolectada es de carácter primario, donde inicialmente se realizó una encuesta a los propietarios o administradores de las diferentes explotaciones. Se tuvieron en cuenta distintas variables demográficas, antecedentes del manejo de los animales y de la finca como fuente y sumunistro de agua, manejo sanitario de los animales como plan de vacunación y desparasitación. (Ver anexo C). Luego de confirmar los predios disponibles de cada vereda, en la segunda visita y primer muestreo se inició con la realización de la encuesta epidemiológica del animal donde se reportaron aspectos como identificación del animal (nombre o número), raza, edad, plan de desparasitación, producto utilizado y fecha de la última desparasitación, síntomas como disminución de peso, diarrea, edema submandibular y disminución de la producción pero teniendo en cuenta que podrían ser causadas por la Fasciola hepatica u otra enfermedad. (Ver anexo D). En los 5 muestreos posteriores también se realizó la encuesta epidemiológica del animal, ya que los animales eran escogidos al azar. Adicionalmente en todos los muestreos realizados, se diligenciaba un formato para llevar control de la presencia de caracoles; en este formato se registraba el medio donde se encontraba el caracol, su presencia y la especie hallada. (Ver anexo E). 3.5 VARIABLES Para la realización de este proyecto se tuvieron en cuenta las variables ambientales: temperatura, humedad y precipitación, además de las variables de la finca como topografía del predio, tipo de pastoreo, fuente y suministro de agua

109 para el ganado, pasto presente en la finca, asistencia técnica, tipo de ordeño, sistema de reproducción, manejo de excretas y sanidad animal (Ver Anexo F). 3.6 MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS Métodos El tipo de estudio es Longitudinal Descriptivo. Los resultados obtenidos del muestreo se representaron por medio de gráficas y tablas para su interpretación. Se comenzó con la visita inicial a las diferentes fincas del municipio donde se informó en que consistía el proyecto, que ventajas traería al productor y la importancia de realizar el estudio de la Distomatosis bovina. Posteriormente se llevaron a cabo dos etapas, las cuales se hicieron en cada muestreo durante un año con intervalo de 2 meses; la primera fue el reconocimiento y confirmación de la presencia del hospedero intermediario (Caracol Lymnaea spp.) en la explotación, y la segunda etapa fue la recolección de una muestra de materia fecal del animal para su procesamiento en el laboratorio y determinar la presencia de los huevos del parásito. Se elaboró una base de datos general, conformada por los diversos formatos, la observación directa y las entrevistas. Se evaluó la presencia del caracol Lymnaea spp., en los predios seleccionados y se determinó cuales de estos fueron positivos, confirmando la presencia del caracol por medio de claves taxonómicas. Posteriormente se evaluó la relación existente entre la presencia del Caracol Lymnaea spp. y la presencia de Fasciola hepatica en el municipio.

110 Para la confirmación de la Fasciola hepatica en los animales muestreados por medio de un examen coproparasitológico se llevó a cabo la técnica de Dennis para determinar la presencia de los huevos de este parásito. Finalmente se hizo la base de datos de las fincas examinadas y sus variables en el programa EPIINFO para determinar la asociación de estas con respecto a los resultados en los predios tanto para Fasciola hepatica como hospedero intermediario, teniendo en cuenta los valores de Chi cuadrado (X²), Odds Ratio (OR), Riesgo Relativo (RR) y Probabilidad (p). La Prueba de Chi cuadrado es una prueba de frecuencias que compara la frecuencia observada en un grupo de población contra la frecuencia teórica o esperada de la misma población. Valor de p o probabilidad: probabilidad de que un riesgo determinado ocurra. Cuando p es menor que (< 0,05) es estadísticamente significativa y cuando p es mayor que (> 0,05) no es estadísticamente significativa. (Osorno, 1998). El Riesgo Relativo (RR) es la medida usual de asociación entre la característica y la enfermedad, es decir mide la proporción de animales enfermos expuestos sobre la proporción de animales no expuestos a un riesgo determinado. Cuando un Riesgo Relativo es mayor de 1 se considera que existe una asociación positiva, si es menor de 1 sugiere una asociación negativa teniendo un efecto protector frente a la enfermedad. (Thrusfield, 1990; Osorno, 1998). Los Intervalos de Confianza son los límites dentro de los cuales se puede esperar que se encuentre un parámetro determinado; cuando el límite inferior es mayor a 1

111 es un riesgo real, por el contrario si es menor que 1 es un riesgo no real. (Castillo y Hernández, 2004). Odds Ratio (OR) es llamado en español Razón de Productos Cruzados, constituye otra forma diferente al Riesgo Relativo (RR) de cuantificar la asociación entre dos variables dicotómicas y puede ser utilizada en algunos estudios. Cuando el valor de OR es igual a 1 no hay asociación entre la presencia del factor y el evento, el valor de OR mayor que 1 se presenta si la asociación es positiva y si el valor de OR de menor de 1 la asociación es negativa. (Martín S, y Col. 1997) La prevalencia se refiere la cantidad de enfermedad presente en una población conocida durante un período de tiempo determinado, sin distinguir los casos nuevos de los antiguos. (Thrusfield, 1990). Nº de animales que presentan la enfermedad en un período de tiempo P= x 100 Nº de individuos en riesgo de la población en el mismo período de tiempo Se realizó el cálculo de la prevalencia (P) de la Fasciola hepatica en cada uno de los muestreos bimensuales para cada vereda y la prevalencia anual para el municipio.

112 Procedimientos Reconocimiento del hospedero Área de estudio y técnica malacológica. Los miembros de la familia Lymnaeidae se pueden reconocer fácilmente por ser habitantes de agua dulce, con concha cónica y puntiaguda, tiene giros enrollados en espiral, siempre en forma dextrógiro, o sea la abertura se encuentra a la derecha. Son hermafroditas, con hábitos anfibios, bien en las márgenes húmedas de la vegetación acuática y sobre el lodo del fondo acuático. El caracol se alimenta de detritos vegetales y materia orgánica; su hábitat permanente son lagos, lagunas, ríos tranquilos y áreas pantanosas. (Hickman C, y Col. 1986). En el muestreo de campo se llevó a cabo la visualización del área adecuada para la presencia del hospedero como zonas pantanosas, orillas de vallados, zanjas, bebederos, etc. Posteriormente se seleccionaban 1 metro cuadrado de tierra en las zonas húmedas, con pala de mango se tomaba una muestra del lugar seleccionado o agua en el caso de albercas o tanques; luego se lavaba la muestra, y posteriormente se orientaba el caracol con el vértice dirigido hacia el norte; de esta manera se podía determinar la posición de la abertura frente al observador (lado derecho: genero Lymnaea y hacia la izquierda Physa acuta o caracoles comunes). Luego se realizaba la cuantificación de caracoles encontrados en el predio. Por último se diligenciaba el formato registrando el medio donde se encontraba (natural o artificial), movimiento del agua y las especies encontradas.

113 Figura 3. Claves taxonómicas para reconocimiento del Caracol Lymnaea Giros en espiral Vértice dirigido hacia el norte Concha cónica, puntiaguda color marrón oscuro Abertura a la derecha (Dextrógiro) Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera. Figura 4. Materiales para recolección del caracol Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera

114 Figura 5. Lavado de la muestra Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera. Figura 6. Identificación de las especies encontradas y cuantificación Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera.

115 Figura 7. Comparación de los caracoles hallados Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera Figura 8. Caracol común (Physa acuta)

116 Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera Figura 9. Caracol Lymnaea Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera Identificación de huevos de Fasciola hepatica. Se tomó una muestra de materia fecal directamente del animal vía rectal con la ayuda de una manga de palpar, la cual iba previamente marcada con un número asignado que permitía saber a que animal correspondía cada muestra y este número se registraba en el formato de muestreo junto a los demás datos del animal, de la finca y la vereda de procedencia. Posteriormente estas muestras se refrigeraban con hielo en neveras de icopor donde se almacenaban para luego llevarlas al laboratorio y ser procesadas. En el momento del procesamiento en el laboratorio, el número de la manga se registraba en el formato utilizado en el laboratorio, el número del tubo que le correspondía y el resultado (positivo o negativo). (Ver anexo G).

117 Figura 10. Hallazgo de muestra positiva. Fuente: Marcela Cabra y Claudia Herrera.

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