INTRODUCCION AL CUIDADO Y USO DE COLUMNAS 1-4 Selección del tubo y conectores correctos Instalación de columnas.

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1 Guía para la protección de columnas Indice INDICE INTRODUCCION AL CUIDADO Y USO DE COLUMNAS 1-4 Selección del tubo y conectores correctos Instalación de columnas. PARTE I COLUMNAS A BASE DE SILICAS 4-6 Parámetros de las corridas Consideraciones sobre la fase móvil Consideraciones sobre la fase estacionaria Presión de regreso y flujo Aumento/disminución del flujo Guardado de la columna Procedimiento de limpieza de la columna PARTE II COLUMNAS REZEX A BASE DE POLIMEROS 7-11 Parámetros de las corridas Consideraciones sobre la fase móvil Procedimiento de limpieza Tabla de especificaciones y parámetros de operación TABLA DE MISCIBILIDAD DE SOLVENTES PARTE III COLUMNAS QUIRALES CHIREX (cairex) 12 Parámetros de las corridas Consideraciones sobre la fase móvil PARTE IV COLUMNAS BIOSEP-SEC-S 12 Parámetros de las corridas Consideraciones sobre la fase móvil Procedimiento de limpieza Guardado de las columnas PARTE V - COLUMNAS BIOSEP DEAE-P 12 Parámetros de las corridas Consideraciones sobre la fase móvil Procedimiento de limpieza Guardado de las columnas PARTE VI COLUMNAS POLYSEP-GFC-P 13 Parámetros de las corridas Consideraciones sobre la fase móvil Procedimiento de limpieza Guardado de las columnas PARTE VII COLUMNAS PHENOGEL GPC 13, 16-1 Consideraciones sobre las muestras Guardado de las columnas Consideraciones sobre el cambio de solventes Carta de compatibilidad de solventes PARTE VIII -COLUMNAS POLYMERX RP 18 Especificaciones Parámetros de las corridas Consideraciones sobre la fase móvil Procedimiento de limpieza Guardado de las columnas PARTE IX PROTECCION DE COLUMNAS PARA HPLC Y PRUEBAS 18 DE FUNCIONAMIENTO Filtros para jeringas Phenex 18 Guía de selección de filtros de memnbrana 19 Sistema de protección con cartuchos SecurityGuard 20 Equipo de prueba para sistemas de HPLC 23 Estándares para verificación del funcionamiento de columnas PARTE X- EXTRACCION POR FASE SOLIDA EFS (SPE) 26 PARTE XI- ACCESORIOS PARA HPLC 27 GARANTIA PHENOMENEX 28 TABLA PARA REGISTRO DEL FUNCIONAMIENTO DE LA COLUMNA 29

2 INTRODUCCION Todas las columnas Phenomenex son productos de precision que siendo delicados presentan un funcionamiento, reproducibilidad, y tiempo de vida excelente si se les da el cuidado apropiado. La información y las recomendaciones contenidas en este manual están diseñadas para guiarle en el cuidado y uso de sus columnas., aunque esas recomendaciones no deben considerarse absolutas. Siga por favor las instrucciones para maximizar las propiedades y el tiempo de vida de la columna. En caso de tener alguna duda contacte a su Representante de Phenomenex o a su distribuidor AL RECIBIR LA COLUMNA Verifique que es la columna que usted ordeno Chequée que la columna no presenta algun daño físico que pudiera haber ocurrido durante el envío. Pruebe la columna inmediatamente para verificar su funcionamiento y calidad. Todas las columnas se envían en el solvente de prueba a menos que se especifique lo contrario. Cada columna de HPLC fabricada por Phenomenex se empaca y se prueba en forma individual para asegurar la mas alta calidad. Todas las columnas se envían con su cromatograma y su hoja de especificaciones que indica el número de serie, la identidad, las condiciones y los parametros de operación en que se probó. El tiempo de garantía comienza al recibir la columna. Por eso la verificación es muy importante cuando la columna va a almacenarse. Pruebe la columna usando la mismas condiciones que se indicant en el cromatograma de prueba. Utilice las fórmulas indicadas en la figura 1 para determiner la asimetría de picos y la eficiencia. El buen funcionamiento cromatográfico depende del sistema completo y no solo de la columna. Las columnas son probadas por Control de calidad usando condiciones óptimas para minimizar los efectos extracolumna, Muchas de las variaciones en sus resultados conmparados a los datos de las pruebas de Phenomenex, se deben a esos efectos extra-columna que vienen del diseño de su sistema, por ejemplo, el inyector, la celda de flujo, el tubo y las conexiones etc. Si tiene alguna duda sobre sus resultados o sobre la calidad de su columna o si hay signos de que su columna está dañada, POR FAVOR CONTACTE DE INMEDIATO A SU DISTRIBUIDOR LOCAL O A PHENOMENEX Figure 1 Formulae for calculating efficiency and peak asymmetry 1

3 SELECCIONANDO EL TUBO Y LOS CONECTORES CORRECTOS. El tubo y los conectores en un sistema de HPLC contribuyen al volumen muerto (Dead Volume). Si no es minimizado el volumen muerto puede dar lugar a un engrosamiento de la banda y una degradación del pico. Siga por favor las siguientes sugerencias para mantener el volumen muerto alm mínimo y asegurar el funcionamiento óptimo de su columna. TUBING La selección del material del tubo debe basarse en su restividad química, aplicación y consideraciones del sistema de HPLC (flujo, presión, etc.) Ver tablas 1-3 Tabla 1 TUBING DIAMETER High Pressure Tubing: 1 /16 OD x ID Inlet/Outlet Low Pressure Tubing: 1 /16 OD x ID 1 /8 OD x ID TUBING COMPATIBILITY Tabla 2 Stainless Steel AVOID high concentrations (Type 316) of acids or halogenated salts PEEK (biocompatible) Titanium (biocompatible) AVOID 100 % THF, chlorinated solvents, high concentrations of acids Compatible with nearly all chemicals Tabla 3 TUBING APPLICATIONS Tubing ID Column IDs Typical Flow Rates (Inch) (mm) (ml/min) (Fused Silica) (Stainless Steel)

4 CONECTORES Todas las columnas Phenomenex tienen conectores hembra invertidos (de tipo interno) con tipo de rosca El tipo de conector puede quedarie a cualquier tubo de 1/16 in. Pulg. de diametro interno (Ver la página 2 para consideraciones del tubo). Se usa una tuerca macho de tipo de rosca y una ferula ó una tuerca de polímero * de apretar con los dedos para ensamblar el tubo con el conector. (Ver figura 2) Figura 2 32 threads per inch No. 10 or diameter Ferrule Polymeric Fingertight Male Nut 1 /16 OD Tubing (0.010 ID) Male Nut Threaded Male Nut and Ferrule Seating depth of the nib is the critical dimension 1 /4 OD Standard Analytical (250 x 4.6mm ID) Female / Inverted (internal) Column End-fitting Consideraciones de Instalación Figura 3 La forma de la ferula puede variar entre fabricantes.para las columnas Phenomenex puede usar ferulas Phenomenex o Valco MUY IMPORTANTE El largo del tubo después de la ferula es crítico p a r a l a s c o l u m n a s Phenomenex (Fig. 2) es de Pulg. (2 mm) el tubo tiene que asentarse completamente dentro del conector de la columna. El no hacer lo anterior dará comoresultado tener una pequeña cámara de mezclado al principio ó al final de la columna según sea el caso. Y esto llevará a una degradación de la cromatografía. * Los conectores de ajustar con los dedos a basede polímeros Son muy fáciles de usar, vienen en una sola pieza y no requieren herramientas para ensamblarlos, además facilmente pueden acomodarse a la forma del conector de la columna. 3

5 INSTALACION DE LA COLUMNA ES ALTAMENTE RECOMENDABLE LEER ESTA GUIA DE CONSIDERACIONES ESPECIFICAS PARA COLUMNAS ANTES DE PROCEDER A SU INSTALACION (PARTE I a VII). Purgue varias veces la bomba y la linea del HPLC con fase móvil filtrada y desgasificada (sin búfer). Asegurese Que no hay burbujas de aire en el sistema. Conecte la columna al inyector siguiendo la dirección de flujo indicada en la etiqueta de la columna, deje la salida de la columna sin conectar Ponga la bomba a un flujo de 0.1 ml/min. (ó a un flujo menor) é incremente el flujo hasta alcanzar el normal de operación a los 5 minutos. Pare el flujo cuando observe un flujo libre de solvente a la salida de la columna, seque la terminal y conécte al detector. Acondicione la columna pasando de 10 a 30 volúmenes de columna de fase móvil a flujo normal.. Para las columnas que pueden ser usadas bajo condiciones de fase normal ó reversa (-CN ó -NH2) purgue la columna con volúmenes de THF como solvente intermedio cuando se cambia de fase reversa a fase normal ó viceversa PARTE I COLUMNAS A BASE DE SILICA PARAMETROS DE CORRIDA Mantenga las presión abajo de 3500 PSI (245 Bar) a menos que se especifique otra cosa en la parte II a VIII. Evite cambios drásticos en la presión Si la presión observada es demasiado alta monte la columna al revés y haga pasar solvente (NO haga esto con columnas de otros fabricantes) Use un regulador de presión en caso de haber problema con gases en la celda del detector. Recuerde que la temperatura maxima de operación es de 60 ºC para todas las columnas Phenomenex a base de sílica CONSIDERACIONES SOBRE LA FASE MOVIL Mantenga el ph entre 2.0 y 8.0 Use columnas de pre-saturación y guarda columnas Degas and filter all mobile phases prior to use Asegurese que los solventes son miscibles. Las trazas y las impurezas pueden dañar dramáticamente las columnas para HPLC. Cuando cambie a una fase móvil diferente asegúrese que los solventes ó búferes son miscibles (Ver tabla 10). Usando solventes que no sean miscibles con el solvente de la columna puede dañar permanentemente la columna. Verifique siempre la solubilidad de la muestra y de ser posible use la fase móvil como diluyente (solvente de la muestra). Stationary Phase Considerations Mantenga el ph entre 2.0 y 8.0 Use columnas de pre-saturación y guarda columnas Degas and filter all mobile phases prior to use Evite las cetonas y aldehidos cuando use columnas amino. Las columnas a base de silica son muy sensibles al ph. Cuando el ph está por debajo de 2.0 los grupos funcionales modificando la silica se hidrolizan y a ph mayors a 8.0 la silica puede disolverse. Si el ph de la fase móvil esta cerca de 2.0 ó de 8.0 use una columna de pre-saturación. 4 Pregunte a Phenomenex sobre columnas que trabajan con rangos de ph más amplios.

6 PRESION Y FLUJO Para optimizar la vida de la columna, el flujo deberá ajustarse para mantener la presión por debajo de 3500 PSI (254 Bar). Tabla 4 Tamaño de Díametro Flujo Típico Presión típica (psi) partícula µm Interno(mm) (ml/min) 150mm* 250mm* *longitud de la columna Las columnas pueden ser operadas a cualquier flujo que sea consistente con las limitaciones de presión que se describen en la tabla anterior. El flujo debe optimizarse para obtener la major eficiencia con su muestra ESCALANDO ARRIBA/ESCALANDO ABAJO Ajustando el flujo para columnas con diferentes díametros internos es muy sencillo. Para mantener los tiempos de retención constantes, el flujo y la capacidad de carga tiene que ajustarse de acuerdo al díametro interno de la columna. Si asumimos que la longitud de la columna es la misma, tenemos: (radio de la columnab) 2 X = factor de escala = (radio de la columna A) 2 Para una columna con un díametro interno de 4.6, los factores de escalamiento son aproximadamente: Tabla 5 Díametro Interno Factor de escalamiento 1.0 mm 0.05 x 2.0 mm 0.2 x 3.2 mm 0.5 x 10.0 mm 5 x 21.2 mm 21 x Los solventes orgánicos libres de agua para columnas para columnas para HPLC (por ejemplo: fase normal, quirales, GPC) pueden Generar electricidad estática y deben ser aterradas apropiadamente para evitar una descarga eléctrica potencialmente peligrosa. GUARDANDO LA COLUMNA Column storage conditions affect column lifetime Never store columns with buffers Lave la columna con 5 volúmenes de fase móvil SIN búfer para remover las sales y/o búfers Stoage Conditions for Silica-Based HPLC Columns: Tipo de columna Fase reversa: C18, C12, C8, C4, C2, C1, Phenyl Fase Normal: Silica, CN, NH 2, PAC, Diol Alumina Intercambio iónico: DEAE, CM, SAX, SCX Exclusión por tamaño: Diol Tabla 6 Solvente para guardarla 65 % Acetronitrilo/ 35 % Agua Isopropanol ó hexano Metanol * 0.05 % NaN 3 en agua ó en 10% de methanol *Lave la columna con 50 ml. de agua grado HPLC antes de usar el solvente para guardarla 5

7 PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA DE LAS COLUMNAS Las condiciones siguientes son para columnas Phenomenex a base de sílica, con la excepción de las columnas quirales. (Ver Parte III): Antes de iniciar el proceso de limpieza asegúrese que el solvente en su columna es miscible con el solvente recomendado para dicha limpieza. El flujo debe ser del 20 al 50 % del flujo típico. Para estimar el volumen de la columna utilice la ecuación siguiente: V= r 2 L V = volúmen de la ml r = radio de la columna en cm L =longitud de la columna en cm SILICA SIN MODIFICAR Lave con 10 volúmenes de cada uno de: Hexano Cloruro de metileno Isopropanol Procedimiento para remover el agua: Cloruro de metileno Fase móvil Lave la columna con 30 ml de 2,2 dimetoxi-propano al 2.5 % y ácido acético glacial al 2.5 % en hexano. FASE NORMAL (CN, NH 2, Diol, PAC) Lave con 10 volúmenes de columna de cada uno de: Cloroformo Cloruro de metileno Isopropanol Fase móvil Excepción: Luna amino en fase reversa. FASE REVERSA (C18, C12, C8, C4, C5, C2, C1, Phenyl, CN, NH 2 ) Lave con 10 volúmenes de columna de cada uno de: 95 % de agua/5 % de 95 % acetonitrilo/5 % agua acetonitrilo (para remover Fase móvil los búfers) THF FASE REVERSA PROTEINAS/PEPTIDOS (C18, C12, C8, C5, C4, Phenyl) Rinse with 20 column volumes of mobile phase with buffer removed. Run gradient (2x): A) 0.1 % TFA en agua B) 0.1 % TFA en acetonitrilo/isopropanol (1:2) B de 25 a 100 % por 30 min. Equilibrar con 10 volúmenes de columna de fase móvil. No guarde la columna en TFA (ácido trifluoracético) INTERCAMBIO IONICO (SAX, SCX, NH 2, DEAE, CM) Lave con 10 volúmenes de columna de cada uno de: 500 mm de Búfer de fosfato a ph 7 10 % Acido acético (acuoso) 5 volúmenes de columna de agua 10 volúmenes de columna de Búfer de fosfato a ph 7 5 volúmenes de agua 10 volúmenes de metanol 10 volúmenes de agua Para remover Proteínas. Siga el procedimiento anterior con esta excepción: Substituya 10 volúmenes de columna de metanol con 10 volúmenes de Urea 5 M ó Tiocianato de guanidina. GFC/SEC (BioSep SEC*) *Ver parte IV para más detalles Lave con 5 volúmenes de Búfer de fosfato 0.1 M a ph3.0. Para proteínas retenidas fuertemente use el siguiente gradiente: De 100 % de agua a 100 % de acetontrilo a 100 % de agua por 60 minutos, ó lave con 5 volúmenes de columna de SDS (Dodecil sulfato de sodio ó Lauril sulfato de sodio) ó Isocianato de guanadina 6M ó 10 % de DMSO (Sulfóxido de metilo). 6

8 PART II - REZEX COLUMNAS A BASE DE POLIMEROS PARAMETROS DE LA CORRIDA Las columnas deben utilizarse a temperatures elevadas (60 a 85 ºC) excepto Rezex ROA en la mayoría de las aplicaciones. La presión de la columna para 8 % de material ligado no debe exceeder 600 PSI y para 4 % de material ligado 300 PSI. Limpie y corra la columna al revés con agua grado HPLC. Importante: Nunca exceda la presión maxima, esto causará daño irreversible a la columna.. CONSIDERACIONES SOBRE LA FASE MOVIL. Filtre y desgasifique toda fase móvil. No exceda 10 % de methanol, isopropanol, etanol. Guarde las columnas en agua grado HPLC Rezex utilize una resina de poliestireno sulfonado la cual es fuertemente resistente al ataque químico. De cualquier forma este material es muy sensible a la presión por lo que debe ser tratado con mucho cuidado. AL INICIO Encienda el calentador de columnas de 60 a 85 ºC y comience a pasar la fase móvil a un flujo de 0.1 ml/min. Asegúrese que la presión se mantiene abajo de 350 PSI para 8 % de material ligado y abajo de 200 PSI para 4 % de material ligado. Cuando la temperature alcance las condiciones de trabajo, aumente el flujo al nivel especificado. (Ver parámetros de operación para Rezex). APAGADO Durante la noche: Disminuya el flujo a 0.1 ml/min. Deje el sistema encendido y continúe calentando A largo plazo: Guarde las columnas en 100 % de agua. Apague la bomba y permita que se enfríe el sistema. Coloque los tapones de protección bien apretados en la columna PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA Antes de utilizar cualquier procedimiento de limpieza que se describe en las tables de las páginas 9 y 11, trate primero de limpiar su columna Rezex como se indica a continuación. Remueva el guarda columna y monte la columna al revés de la dirección de flujo indicado en la columna. Haga pasar 100 % de agua grado HPLC a traves de la columna según la siguiente tabla> TABLA 7 Columna Rezex Flujo (ml/min) Temp. ( C) RPM, RCM, RHM RCU RSO and RNO RNM and RAM ROA 0.6 Ambient Corra la columna bajo esas condiciones por un mínimo de 12 horas. Cuando complete el procedimiento de limpieza, regrese la columna a la dirección de flujo original y acondiciónela para análisis Si este procedimiento no es efectivo para limpiar la columna, proceda al que se indica en las páginas 8 a 11. 7

9 PART II - REZEX POLYMER-BASED COLUMNS SPECIFICATIONS AND OPERATING PARAMETERS Table 8 RCM Monosaccharide RSO Oligosaccharide RNO Oligosaccharide RNM Carbohydrate RAM Carbohydrate Part Number 00H-0130-K0 00P-0133-N0 00P-0137-N0 00H-0136-K0 00H-0131-K0 Ionic Form Calcium Silver Sodium Sodium Silver Standard Dimensions 300 x 7.8 mm 200 x 10 mm 200 x 10 mm 300 x 7.8 mm 300 x 7.8 mm Matrix Sulfonated Styrene Divinyl Benzene Cross Linking 8 % 4 % 4 % 8 % 8 % Particle Size (µm) Min. Efficiency (p/m) based on last peak 35,000 N/A N/A 30,000 35,000 Typical Pressure Max Flow Rate) Max. Pressure Max Flow Rate) Max. Flow Rate (ml/min)* Max. Temperature ( C) Typical Mobile Phase Water Water Water Water Water ph Range Neutral Neutral Neutral Neutral Neutral Guard Column Part No. 03B-0130-K0 03R-0133-N0 03R-0137-N0 03B-0136-K0 03B-0131-K0 * Make sure the maximum pressure is not exceeded 8 See p. 7 for general care and usage of Rezex columns.

10 COLUMNS FOR carbohdrate and organic acid analysis Table 8 (continued) RCM Monosaccharide RSO Oligosaccharide RNO Oligosaccharide RNM Carbohydrate RAM Carbohydrate Cleaning, Regeneration and Storage Organic Modifiers (Max) 10 % Methanol, IPA, EtOH, Acetonitrile 5 % Silver Nitrate 5 % Sodium Salts 5 % Sodium Salts 2 % Silver Nitrate Inorganic Modifiers (Max) 5 % CaS0 4, Ca(N0 3 ) 2, CaCl2 Avoid >10 % Methanol, Acids, >5 % Methanol, Acids, >10 % Methanol, Acids, >10 % Methanol, Acids, >5 % Methanol, Acids, Bases, Non-Calcium Salts Bases, Non-Silver Bases, Non-Sodium Bases, Non-Sodium Bases, Non-Silver or Metal Ions Salts/Metal Ions Salts/Metal Ions Salts/Metal Ions Salts/Metal Ions Cleaning Solvent 100 % Water 100 % Water 100 % Water 100 % Water 100 % Water Flow Rate(mL/min) Temperature ( C) Duration (hrs) Regeneration Solvent 0.1 M Ca(N0 3 ) M Ag N M NaN M NaN M Ag N0 3 Flow Rate (ml/min) Temperature ( C) Duration (hrs) Ship/Storage Solvent Water Water Water Water Water See p. 7 for general care and usage of Rezex columns. 9

11 PART II - REZEX POLYMER-BASEd COLUMNS SPECIFICATIONS AND OPERATING PARAMETERS Table 9 RPM Monosacárido RHM Monosacárido ROA Acido orgánico RFQ Acido rápido RCU Alcoholes del azúcar Número de catálogo 00H-0135-K0 00H-0132-K0 00H-0138-K0 00D-0223-K0 00G-0130-D0 Forma iónica Plomo Hidrógeno Hidrógeno Hidrógeno Calcio Dimensiones 300 x 7.8 mm 300 x 7.8 mm 300 x 7.8 mm 100 x 7.8 mm 250 x 4.0 mm Matrix Divinil estiren benceno sulfonado Cadenas de enlace 8 % 8 % 8 % 8 % 8% Tamaño de partícula (µm) Eficiencia mín. p/m basado en el último pico 35,000 35,000 50,000 (ácido acético) 30,000 12,000 Presión típica flujo máximo) Presión máxima máx flujo) Flujo máximo (ml/min.)* Temperatura máxima ºC Fase móvil típica Agua Agua 0.005N H 2 S N H 2 S0 4 Agua ph Neutro Neutro Neutro Número de catálogo del guarda columna 03B-0135-K0 03B-0132-K0 03B-0138-K0 03B-0223-K0 03A-0130-D0 * Make sure the maximum pressure is not exceeded 10 See p. 7 for general care and usage of Rezex columns.

12 COLUMNS FOR carbohydrate and organic acid analysis Tabla 9 (continúa) RPM Monosacárido RHM Monosacárido ROA Acido orgánico FQ Acido rápido RCU Alcoholes del azúcar Cleaning, Regeneration and Storage Modificadores orgánicos (máx) Hasta 10 % de Metanol, alcohol isoprópilico, etanol, aceto nitrilo Modificadores inorgánicos (máx) Nitrato de plomo al 5 % HN0 3, H 3 P0 4 al 5 % HN0 3, H 3 P0 4 al 5 % HN0 3, H 3 P0 4 al 5 % CaS0 4, Ca(N0 3 ) 2, CaCl2 al 5 % Evitar metanol >10 %, ácidos metanol >10 %, ácidos metanol >10 %, ácidos metanol >10 %, ácidos metanol >10 %, ácidos Bases, sales sin plomo Bases, sales, iones Bases, sales, iones Bases, sales, iones Bases, sales, iones iones metálicos metálicos metálicos, ph > 3. metálicos, ph > 3. metálicos Solvente para limpieza 100 % agua 100 % agua 100 % agua 100 % agua 100 % agua Flujo (ml/min.) Temperatura ºC Ambiente Ambiente 85 Duración (hrs.) Solvente de regeneración 0.1 M Pb(N0 3 ) M H 2 S M H 2 S M H 2 S M Ca (N0 3 ) 2 Flujo ml/min Temperatura ºC Ambiente Ambiente 85 Duración (hrs.) Solvente para guardar/enviar Agua Agua 0.005N H 2 S N H 2 S0 4 Agua See p. 7 for general care and usage of Rezex columns. 11

13 12 PARTE III - COLUMNAS QUIRALES CHIREX PARAMETROS DE LA CORRIDA La temperatura no debe exceder 50 ºC La presión de la columna no debe exceder 3000 PSI Mantenga el flujo entre 0.5 y 2.0 ml/min para columnas con diámetro interno de 4.6 m CONSIDERACIONES DE LA FASE MOVIL Tenga una columna para trabajar solo en fase normal ó reversa Mantenga el ph en un rango de 2.5 a 7.5 Use solo solventes grado HPLC Use solamente reactivos y químicos de la más alta pureza. Siempre desgasifique y filtre la fase móvil antes de usarla Asegúrese que los solventes son miscibles La mayoría de las columnas quirales CHIREX usan la fase estacionaria Tipo I ó tipo cepillo (CSPI). Los sistemas de fase normal normalmente proporcionan major selectividad que los sistemas de fase reversa. VEA LA INFORMACION ACERCA DE COLUMNAS ESPECIFICAS CHIREX (esta información se incluye con cada columna) PARTE IV COLUMNAS BIOSEP-SEC-S PARAMETROS DE LA CORRIDA El flujo máximo es una función de la presión La presión de la columna NO debe exceder 1000 PSI La temperatura maxima es 50 ºC para Acero Inoxidable (SS) y temperatura ambiente para PEEK CONSIDERACIONES SOBRE LA FASE MOVIL Rango de ph 2.5 a 7.5 Modificador orgánico máximo: hasta un 100 % acetonitrilo Comience con 100 % acetonitrilo por 50 minutos ó hasta 90 % de methanol ó 10 % DMSO (Sulfóxido de metilo) ó 500 mm de B-mercaptoetanol Concentración maxima de sal: 0.5 M PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA Remoción general de proteínas: lave con 30 ml de NaH2PO4 0.1 M a un ph 3.0 Remoción de proteínas hidrofóbicas: use gradiente de acetonitrilo Proteínas fuertemente adsorbidas: lave con 30 ml. de SDS al 0.5 % ó Tiocianato de guanidina ó 10 % DMSO. PARA GUARDAR LA COLUMNA Durante la noche: pase la fase móvil a 0.2 ml/min Guardado prolongado: use 0.05 % de Azido de sodio (Na3N) en agua ó 10 % methanol en agua. PARTE V COLUMNAS BIOSEP DEAE- P PARAMETROS DE LA CORRIDA La presión de la columna no debe exceeder 285 PSI No exceda de 50 ºC CONSIDERACIONES SOBRE LA FASE MOVIL Rango de ph 2 y 12 Concentración máxima de sal 1 M Capacidad del modificador orgánico: <15 % soluble en agua. PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA NaOH 0.1 M a 0.2 ml/min durante 1 hora. Re-equilibrar y probar de nuevo. Repita de ser necesario. PARA GUARDAR LA COLUMNA Para guardarla por la noche, corra con búfer a un flujo de 0.2 ml/min ó menos. Para un tiempo prolongado guarde la columna en 10 % de metanol.

14 PARTE VI - COLUMNAS PolySep-GFC-p PARAMETROS DE LA CORRIDA La presión de la columna no debe exceeder 650 PSI No exceda los 60 ºC CONSIDERACIONES SOBRE LA FASE MOVIL Rango de ph entre 3 y 12 Máxima concentración de sal 0.5 M Capacidad del modificador orgánico: FASE POLYSEP Linear Metanol 20 % 95 % 70 % 70 % 70 % 70 % 70 % Acetronitrilo 20 % 70 % 70 % 70 % 70 % 70 % 70 % PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA SDS (Lauril sulfato de sodio) al 0.5 % ó Tiocianato de guanidina 6 M. Todas las columnas Polysep excepto las Polysep 1000 deben ser limpiadas tambien con 50 % de acetonitrilo. Asegúrese que la presión máxima no exceda 650 PSI durante la limpieza PARA GUARDAR LAS COLUMNAS Para guardarlas durante la noche, corra con búfer a un flujo bajo (0.2 ml/min ó menos). Para guardarlas durante mucho tiempo. Use 0.5 % de NaN3 (Azido de sodio) ó methanol al 10 %. PARTE VII - COLUMNAS PHENOGEL GPC ESPECIFICACIONES Matrix: Tamaño de partícula: 5, 10, 20 µm Porosidades: Presión típica: Presión máxima: Temperatura máxima: Eficiencia minima* Flujos Típicos Conectores Copolímero de estireno-di-vinilbenceno 50 a A, y base mezclada 5 um: 300 psi, 10 um: 200 psi 650 psi 140 ºC (205 ºC límite máximo) 5 µm: 45,000 platos/metro** 10 µm: 35,000 platos/metro** 4.6 mm ID: 0.35 ml/min 7.8 mm ID: 1.0 ml/min 21.2 mm ID: 7.0 ml/min Compatibles con Valco *probados con THF ** para columnas de 300 mm x 7.8 mm de DI (diámetro interno) CONSIDERACIONES SOBRE LAS MUESTRAS Filtre las muestras siempre, para evitar que los particulados contaminantes tapen (bloqueen) la columna de GPC. Es altamente recommendable el uso de un guarda columna para prolongar la vida de su columna analítica ó preparative. Para resultados óptimos use la tabla de abajo para determinar la concentración y los volúmenes de inyección de las muestras. Tabla 11 Peso Molecular Concentración (p/v) Volúmen máximo de <50 K 0.5 % 100 µl K 0.25 % 100 µl K 0.05 % 100 µl >3000 K 0.01% 20 µl continue on p.16 13

15 SOLVENT MISCIBILITY TABLE Table 10. Solvent Polarity Chart Relative Polarity NONPOLAR Compound Representative Formula Group Solvent Compounds R - H Alkanes Petroleum ethers, ligroin, hexanes Ar - H Aromatics Toluene, benzene R - O - R Ethers Diethyl ether R - X Alkyl halides Tetrachloromethane, chloroform R - COOR Esters Ethyl acetate R - CO - R Aldehydes and ketones Acetone, methyl ethyl ketone (MEK) R - NH2 Amines Pyridine, triethylamine R - OH Alcohols Methanol, ethanol, Increasing Polarity POLAR isopropanol, butanol R - COHN2 Amides Dimethylformamide Ethanoic acid R - COOH Carboxylic acids H - OH Water Water Polarity Refractive UV (nm) Boiling Viscosity Solubility in Solvent Index 20 C 1 AU Point ( C) (cpoise) Water (% w/w) Acetic Acid Acetone Acetonitrile Benzene Butyl Acetate n-butanol Carbon tetrachloride Chloroform Cyclohexane ,2-Dichloroethane Dichloromethane Dimethylformamide Dimethyl sulfoxide , Dioxane Ethyl Acetate Ethanol di-ethyl Ether Heptane

16 Hexane Methanol Methyl-t-Butyl Ether Methyl Ethyl Ketone Pentane n-propanol iso-propanol di-iso-propyl Ether Tetrahydrofuran Toluene Trichloroethylene Water Xylene & Miscible Immiscible* *Immiscible means that in some proportions two phases will be produced. SYNONYM TABLE 1 Ethylene Chloride 2 Methylene Chloride 3 Methyl Sulfoxide 4 tert-butyl Methyl Ether 5 2-Butanone 6 2-Propanol Xylene Water Trichloroethylene Toluene Tetrahydrofuran di-iso-propyl Ether iso-propanol 6 n-propanol Pentane Methyl Ethyl Ketone 5 Methyl-t-Butyl Ether 4 Methanol Hexane Heptane di-ethyl Ether Ethyl Acetate Ethanol Dioxane Dimethyl Sulfoxide 3 Dimethylformamide Dichloromethane 2 1,2-Dichloroethane 1 Cyclohexane Chloroform Carbon tetrachloride n-butanol Butyl Acetate Benzene Acetonitrile Acetone Acetic Acid 15

17 GUARDANDO LA COLUMNA Solventes como THF (unicamente elthf estabilizado), cloroformo, cloruro de metileno y tolueno se usan comunmente para guarder las columnas. Asegúresere de seguir las instrucciones para cambiar de solventes si usa otro que no sea THF.(ver páginas 16 y17). Deben usarse aquellos solventes que se mantienen líquidos a temperatura ambiente y que no son oxidantes. TENGA EL CUIDADO DE MANTENER LOS TAPONES PLASTICOS REMOVIBLES DE LOS CONECTORES BIEN APRETADOS CUANDO NO ESTE USANDO LA COLUMNA, ASI EVITARA EVAPORACION DE LOS SOLVENTES, ESTA ES LA FUENTE MAS COMUN DE FALLA EN LAS COLUMNAS. CONSIDERACIONES AL CAMBIAR SOLVEN- TES PARA COLUMNAS DE GPC (CROMATO- GRAFIA DE GEL PERMEABLE) NO ACUOSA. Las columnas Phenogel son resistentes y compatibles con muchos solventes. De cualquier forma diferentes solventes producen diferentes características de absorción (Tabla12). El Cambio a un solvente inapropiado puede dar como resultado que la columna quede inservible. Por esto recomendamos que tenga columnas especificas para los diferentes tipos de solventes. Si necesita cambiar los solventes, es MUY IMPORTANTE considerer lo siguiente: 1. Reducir el flujho a 0.2 ml/min 2. La presión NUNCA debe exceeder 650 psi 3. Comprobar en un matraz que el solvente es miscible ó buscar la miscibilidad en la tabla de las paginas antes de hacer cualquier cambio. 4. Comparar las características de absorción de los solventes: el anterior comparado con el Nuevo y use la guía siguiente Si el solvente anterior (1) y el solvente Nuevo (2) están en la misma categoría de absorción (Tabla12) comprobar la miscibilidad del solvente y proceda al cambio. Si el solvente (1) y el solvente (2) pertenecen a categories sucesivas (Tabla 12) de acuerdo a las flechas en la Tabla 12, verifique la miscibilidad y despues proceda a cambiar el solvente. Si los solventes (1) y (2) no pertenecen a la misma categoría, primero cambie a un solvente intermedio como se indica en las flechas de la Tabla 12. Tabla 12 A % de Absorción Tolueno TCB THF p-xileno Chloroformo Ciclopentano Benceno Piridina o-diclorobenceno B- 60 % de Absorción Eter etílico Ciclopentano Cloruro de metileno Acetato de etilo Metil, etil cetona C 50 % de Absorción Acetona Dimetil acetamida m-cresol N-Methyl Pyrrolidone o-clorofenol DMSO Dimetil formamida Dioxano 16 D- 30 % de Absorción Acetonitrilo Freon 113 Alcohol n-butílico Ciclohexano HFIP Metanol n-hexano Isopropanol

18 SOLVENT COMPATIBILITY CHART FOR PHENOGEL GPC COLUMNS Tabla 13 PHENOGEL PORE SIZE Suggested Mobile Phase Solvent 50 Å 100 Å 500 Å 10 3 Å 10 4 Å 10 5 Å 10 6 Å Linear & Mixed Temperature Operating Acetone Y Y Y Y Y Y Y Y Benzene Y Y Y Y Y Y Y Y Carbon Tetrachloride Y Y Y Y Y Y Y Y Chloroform Y Y Y Y Y Y Y Y 30 % HFIP/chloroform Y Y Y Y Y Y Y Y Diethyl Ether Y Y Y Y Y Y Y Y Dimethylacetamide (DMAC) Y* Y Y Y Y Y Y Y 60 C Dimethylformamide (DMF) Y* Y Y Y Y Y Y Y 60 C Dioxane Y Y Y Y Y Y Y Y DMSO Y* Y Y Y Y Y Y Y 60 C Ethyl Acetate Y Y Y Y Y Y Y Y Hexafluoroisopropanol (HFIP) Y Y Y Y Y Y Y Y *Not recommended on 5 µm 50 Å columns. N = Not Compatible Y = Compatible PHENOGEL PORE SIZE Suggested Linear Operating Mobile Phase Solvent 50Å 100Å 500Å 10 3 Å 10 4 Å 10 5 Å 10 6 Å & Mixed Temperature Hexane Y Y Y Y Y Y Y Y m-cresol Y* Y Y Y Y Y Y Y 100 C Methyl Ethyl Ketone Y Y Y Y Y Y Y Y Methylene Chloride Y Y Y Y Y Y Y Y o-chlorophenol Y* Y Y Y Y Y Y Y 100 C o-dichlorobenzene Y* Y Y Y Y Y Y Y 135 C Quinolin Y* Y Y Y Y Y Y Y 60 C Tetrahydrofuran Y Y Y Y Y Y Y Y Toluene Y Y Y Y Y Y Y Y Trichlorobenzene Y* Y Y Y Y Y Y Y 135 C Water N N N N N N N N Xylene Y Y Y Y Y Y Y Y 17

19 18 PARTE VIII - COLUMNAS POLIMERX RP ESPECIFICACIONES Matrix: Poliestiren-divinilbenceno (PSDVB) Tamaño de particular: 3, 5, 7, 10 µm Tamaño de poro 100 Å PARAMETROS DE LA CORRIDA Temperatura maxima: 60 ºC Presión maxima: 5000 psi CONSIDERACIONES SOBRE LA FASE MOVIL Rango del ph 0-14 Evitar búfer de >0.5N PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA 100 % de agua a 100 % de Acetonitrilo. Repita 3 veces PARA GUARDAR LA COLUMNA 75:25 Acetontrilo/agua PARTE IX - PRUEBA DE PROTECCION Y COMPORTAMIENTO DE LA COLUMNA PARA HPLC. Prolongue la vida de su columna Reduzca el desgaste del sistema Ahorre tiempo y dinero FILTROS PHENEX PARA JERINGAS Aumentan el tiempo de vida de la columna (ahorre dinero) Aseguran resultados mas precisos Eliminan micropartículas dañinas Los particulados pueden dañar el costoso equipo, válvulas, columnas y bombas. Pueden también conducir a resultados analíticos erroneos. Es muy importante hacer un prefiltrado de las muestras antes del analísis para prevenir que los frits y la columna se bloqueen y se tapen, que se desgasten los sellos (juntas), y que la presión resulte anormalmente alta. Volúmen de la muestra ó de la fase móvil.(ml) Membrana del filtro (díametro, mm TABLA 14 Ordering information continued on next page Volúmen retenido (µl) despues de purga con aire Formato < 1 4 Filtro para jeringa < 20 1 to Filtro para jeringa < to Filtro para jeringa < 140 > Disco de membrana > Disco de membrana Información para ordenar Número de catálogo Cubierta Tamaño de poro (µm) Membrana Phenex Housing* 30 mm de díametro (Caja de 100) AF Acetato de celulosa MA AF Nylon PP AF Nylon PP AF PTFE PP AF PTFE PP AF PES PP AF PVDF PP 30 mm de díametro (Caja de 500) AF Nylon PP AF PTFE PP

20 Número de catálogo Cubierta 30 mm de díametro (Caja de 100)) AF Nylon PP AF Nylon PP AF PTFE PP AF PTFE PP 17 mm de díametro (Caja de 500) AF Nylon PP 4 mm de díametro (Caja de 100) AF Polypropileno PP AF Nylon PP AF Nylon PP AF PTFE PP AF PTFE PP *MA = Acrílico modificado, PP = Polipropileno, PVDF = Difluoruro de Polivinildeno, PTFE = Tetrafluoroetileno PES = Polietersulfona (1) Los filtros para jeringas (jeringuillas) no están esterilizadas. Los filtros con cubierta u membranas de nylon ó de teflón pueden ponerse en el autoclave. Los filtros con cubierta acrílica ó aquellos de 4 mm con cubierta de polipropileno NO deben ponerse en el autoclave. (2) Si desea adquirir grandes cantidades con ahorros importantes contacte a su representante ó a su distribuidor Phenomenex. GUIA DE SELECCION DE FILTROS DE MEMBRANA Tipo de membrana Acetato de Celulosa Aplicacion: Muy baja retención de protieínas. Con prefiltros de cristal, es una membrana excelente para filtración de medios de cultivo de tejidos,filtración y clarificación de muestras biológicas en general. No es resistente a la mayoría de los solventes Tipo de membrana Polipropileno (PP) Aplicacion: Las membranas de polipropileno hidrofóbicos son buenas para filtrar prácticamente todas las muestras de HPLC y de GC. La membrana es muy resistente a los solventes y puede resistir los productos químicos más agresivos. Es altamente recondable para filtrar muestras acuosas. La fijación baja en proteínas da recuperaciones muy altas (92 %) comparando con las membranes de nylon (69 %). Los HPLC con detectores de UV demuestran que estas membranas han sido optimizadas para asegurar un mínimo de extraibles y picos falsos. Tipo de membrana: Nylon Aplicacion: Para filtración de muestras y solventes en general, el nylon tiene caracteríticas hidrofílicas intrínsicas por lo que trabaja bien con todas las muesttras acuosas al igual que con aquellas a base de solventes. El nylon es excelente en la preparación de solventes y muestras para HPLC ó GC. Tipo de membrana Poliéter sulfonas y Difluoruro de polivinideno (PVDF) Aplicacion:: Both membranes exhibit very low protein binding. Both can be used for general biological sample filtration and sterilization. Polyvinylidene Difluoride (PVDF) is especially useful in HPLC sample preparation and is highly resistant to most solvents. Polysulfone has very limited resistance to solvents and is generally used for aqueousbased biological samples. Both membranes exhibit good flow rate characteristics. Tipo de membrana Tamaño de poro (µm) Membrana Phenex Housing* Polytetrafluoroetileno PTFE (Teflón). Aplicacion: Una membrana intrínsicamente hidrofóbica que resulta muy apropiada para la filtración de muestras y solventes de base orgánica tanto acídicos como básicos. Ampliamente usado para cromatografía y para clarificación de muestras no acuosas aunque esta membrana es hidrofóbica puede hacerse hidrofílica humedeciendo la membrana con alcohol y lavando después con agua deionizada. 19

21 SISTEMA DE GUARDA CARTUCHO SecurityGuard proporciona un magnifico balance entre la conveniencia de protejer la columna y el costo de la protección. Si usted ha usado otro sistema de protección ó los guarda columnas convencionales, quedará muy agradablemente sorprendido cuando vea lo práctico y efectivo que resulta SecurityGuard. Este avanzado sistema con diseño patentado ofrece algunas carateristicas únicas no disponibles hasta hace poco tiempo CONVENIENCIA Limpio Sucio Saber cuando remplazar su guarda no es más una incognita, la caracteristicas de SecurityGuard le permite inspeccionar visualmente el cartucho para decidir cuando debe cambiarlo. PROTECCION ADICIONAL SecurityGuard offers the option of stacking two cartridges in the same holder, using the simple stacking ring provided. Extra length provides extra protection. When the first cartridge becomes exhausted, contaminants are retained by the second cartridge. VERSATILIDAD La conexión del guarda cartucho se ajusta convenientemente con los dedos para conectarse prácticamente a cualquier marca columna. Como puede un guarda cartucho conectarse directamente y al mismo tiempo su conexión ser universal cuando las conexiones tienes diferentes caracteristicas? La respuesta es que el largo de la punta de acero inoxidable del guarda cartucho se ajusta automáticamente a la profundidad del conector de la columna. La conexión de ajuste con los dedos de SecurityGuard puede soportar presiones de hasta 5000 psi y es completamente inerte y biocompatible. PRECISION Los cartuchos pueden usarse practicamente en cualquier columna con fase similar sin afectar: la eficiencia, tiempos retención, ó presión. Hay una selección de 26 fases diferentes incluyendo cartuchos para cualquier aplicación, para aplicaciones farmaceúticas, para proteínas y polipeptidos, para exclusión acuosa de tamaño, carbohidratos y aplicaciones con ácidos orgánicos. Las fases de Security Guard pueden usarse con columnas conteniendo empaques con tamaño de partícula de 3, 3.5, 4, 5,10 um ó de un tamaño de partícula mayor. INFORMACION PARA ORDENAR Juego de ensamble analítico Nº de Catálogo. Descripción KJ Juego de Guarda Cartucho Unidad ea El juego incluye: 1 guarda cartucho, 3 férulas de PEEK, 2 anillos de ensamble, 2 terminales macho de PEEK de ajustar con los Funda para cartuchos semi preparativos y preparativos de 10.0 y 21.0 mm Nº de Catálogo Descripción AJ Funda para cartuchos de 10.0 mm de DI AJ Funda para cartuchos de 21.0 mm de DI Semi-Preparative 20 Unidad Preparative ea ea

22 Sí el diámetro interno (DI) de su columna para HPLC es de: Use cartuchos de (mm): 4.0 x x x x 21.2 Cartuchos- Uso general / farmaceútico Descripción Estabilidad Dimensiones Nº de catálogo del material a ph L x ID(mm) Unidad AJ C18 (ODS, octadeci) x2.0 10/pq AJ C18 (ODS, octadeci) x3.0 10/pq AJ C18 (ODS, octadeci) x10 3/pq AJ C18 (ODS, octadeci) x21 cada uno AJ C12 (dodecil) x2.0 10/pq AJ C12 (dodecil) x3.0 10/pq AJ C12 (dodecil) x10 3/pq AJ C12 (dodecil) x21 cada uno AJ C8 (octal, MOS) x2.0 10/pq AJ C8 (octal, MOS) x3.0 10/pq AJ C8 (octal, MOS) x10 3/pq AJ C8 (octal, MOS) x21 cada uno AJ C5 (pentil) x2.0 10/pq AJ C5 (pentil) x3.0 10/pq AJ C5 (pentil) x10 3/pq AJ C1 (TMS) 2-9 4x2.0 10/pq AJ C1 (TMS) 2-9 4x3.0 10/pq AJ C1 (TMS) x10 3/pq AJ Silica 4x2.0 10/pq AJ Silica 4x3.0 10/pq AJ Silica 10x10 3/pq AJ Silica 15x21 cada uno AJ NH 2 (amino, aminopropil) 4x2.0 10/pq AJ NH 2 (amino, aminopropil) 4x3.0 10/pq AJ NH 2 (amino, aminopropil) 10x10 3/pq AJ NH 2 (amino, aminopropil) 15x21 cada uno AJ CN (ciano, cianopropil) 4x2.0 10/pq AJ CN (ciano, cianopropil) 4x3.0 10/pq AJ CN (ciano, cianopropil) 10x10 3/pq AJ Phenyl (fenil, fenil hexil) 4x2.0 10/pq AJ Phenyl (fenil, fenil hexil) 4x3.0 10/pq AJ Phenyl (fenil, fenil hexil) 10x10 3/pq AJ Phenyl (fenil, fenil hexil) 15x21 cada uno AJ SCX (SA, Intercambio catiónico fuerte) 4x2.0 10/pq AJ SCX (SA, Intercambio catiónico fuerte) 4x3.0 10/pq AJ SCX (SA, Intercambio catiónico fuerte) 10x10 3/pq AJ SAX (SA, Intercambio catiónico fuerte) 4x2.0 10/pq AJ SAX (SA, Intercambio catiónico fuerte) 4x3.0 10/pq AJ SAX (SA, Intercambio catiónico fuerte) 10x10 3/pq AJ RP-1(polímero de fase reversa) 4x2.0 10/pq AJ RP-1(polímero de fase reversa) 4x3.0 10/pq AJ RP-1(polímero de fase reversa) 10x10 3/pq AJ Polar-RP (fenil éter enlazados) 4x2.0 10/pq AJ Polar-RP (fenil éter enlazados) 4x3.0 10/pq AJ Polar-RP (fenil éter enlazados) 10x10 3/pq AJ Polar-RP (fenil éter enlazados) 15x21 cada uno AJ Fusion-RP (Inserto polar de C18) 4x2.0 10/pq AJ Fusion-RP (Inserto polar de C18) 4x3.0 10/pq AJ Fusion-RP (Inserto polar de C18) 10x10 3/pq AJ Fusion-RP (Inserto polar de C18) 15x21 cada uno AJ AQ C18 (C 18 Polar endcapped) 4x2.0 10/pq AJ AQ C18 (C 18 Polar endcapped) 4x3.0 10/pq AJ AQ C18 (C 18 Polar endcapped) 10x10 3/pq AJ AQ C18 (C 18 Polar endcapped) 15x21 cada uno AJ Gemini C18 (tecnología gemela C18) 4x2.0 10/pq AJ Gemini C18 (tecnología gemela C18) 4x3.0 10/pq AJ Gemini C18 (tecnología gemela C18) 10x10 3/pq AJ Gemini C18 (tecnología gemela C18) 15x21 cada uno 21

23 Cartuchos de fase reversa para proteínas y polipéptidos. Para usarse con todas las columnas a base de sílica para la separación de proteínas y péptidos como Jupiter (Phenomenex); Vydac 218TP, 214TP (Grace Vydac); Synchropack 300A C18, C4 (Eprogen, Inc.); Nucleosil 300A C18, C4; Hypersil 300A, y todas las otras columnas de poros grandes (widepore) ó marcas con poros de 300 A. Descripción Estabilidad Dimensiones Nº de catálogo del material a ph L x ID(mm) Unidad AJ Widepore C18 (ODS) x2.0 10/pq AJ Widepore C18 (ODS) x3.0 10/pq AJ Widepore C18 (ODS) x10 3/pq AJ Widepore C18 (ODS) x 21 cada uno AJ Widepore C5 (pentil) x2.0 10/pq AJ Widepore C5 (pentil) x3.0 10/pq AJ Widepore C5 (pentil) x10 cada uno AJ Widepore C4 (butil) x2.0 10/pq AJ Widepore C4 (butil) x3.0 10/pq AJ Widepore C4 (butil) x10 3/pq AJ Widepore C4 (butil) x 21 cada uno Cartuchos para Cromatografía de Filtración de Gel (GFC) base de sílica. Para usarse con todas las columnas a base de sílica para columnas GFC como columnas BioSep (Phenomenex); TSK SW, SWXL (Tosoh); Zorbax GF-series; Bio-Sil (Bio-Rad). Descripción Estabilidad Dimensiones Nº de catálogo del material a ph L x ID(mm) Unidad AJ GFC x3.0 10/pq AJ GFC x10 3/pq AJ GFC x3.0 10/pq AJ GFC x10 3/pq AJ GFC x3.0 10/pq AJ GFC x10 3/pq Cartuchos para carbohidratos y ácidos orgánicos Para análisis de ácidos orgánicos como Rezex (Phenomenex); Aminex (Bio-Rad); Interaction, Sugar-Pak (Waters). Descripción Estabilidad Dimensiones Nº de catálogo del material a ph L x ID(mm) Unidad AJ Carbo-H x3.0 8/pq AJ Carbo-Ag + * Neutral 4x3.0 8/pq AJ Carbo-Pb +2 Neutral 4x3.0 8/pq AJ Carbo-Ca +2 Neutral 4x3.0 8/pq *Para uso con columnas para sacáridos y oligosacáridos en forma de Ag+ form Repuestos Nº de catálogo Descripción Unidad AJ Férulas de PEEK 3/pq AJ Anillos de ensamble 2/pq AQ Tuerca macho de PEEK (biocompatible) 10/pq AJ Llaves para el Security Guard 2/pq AQ Acoplador Prep.de acero inoxidable (SS) con conectores 1 /16 Pulg. DE x Pulg. DI x 50 mm L cada uno AQ O-Rings PREP (de fluorocarbono) 1 Pulg. DE x 7 /8 Pulg. DI x 1 /16 Pulg. CS 2/pq 22

24 Equipo de prueba para el sistema de HPLC Diagnostica problemas de hardware rápida y fácilmente. Evita reparaciones costosas e inecesarias. Verificación sencilla de los sistemas de HPLC usando una columna estándar C18. Verifica el correcto funcionamiento de las conexiones y de la instalación del sistema. Aisla rápidamente los problemas de desarrollo de métodos. Reduce los tiempos de paro del instrument Cada equipo de prueba contiene lo siguiente: 1. Columna Phenomenex de 5 um C18 50 X 4.6 mm 2. Cinco viales con mezcla para prueba isocrática. 3. Cinco viales con mezcla de prueba de gradiente. Información para ordenar Nº de catálogo Descripción Unidad CH Equipo de prueba para sistema de cada uno HPLC de fase reversa, que incluye columna C18 y mezclas para prueba isocrática y de gradiente. CH Mezcla de prueba isocrática 5/pq CH Mezcla de prueba de gradiente 5/pq Estándares de referencia para el comportamiento de la columna Una forma muy conveniente de comprobar el comportamiento de la columna Facil de usar y a precio asequible. Phenomenex ofrece una linea completa de estándares que pueden ser de gran utilidad en la evaluación del comportamiento de las columnas. Recomendamos usar estos estándares de verificación al recibir sus columnas y y periódicamente durante la vida de ellas. Las condiciones de chequeo están localizadas en la caja de la columna. FASE NORMAL Nº de Catálogo AL (Para Si, NH 2, NO 2, alumina, y PAC) Contiene: Meta-xyleno, nitrobenceno FASE REVERSA 1 Nº de Catálogo AL (Para C1, C18, CN y fenil) Contiene: Uracil, benzamida, benzofenona, benceno Bifenilo FASE REVERSA 2 Nº de Catálogo AL Para Prodigy (C8), ODS (2), ODS (3); Luna C5, C8, C18, CN, Fenil-Hexil; Jupiter, C4, C5, C18, Proteo; Columbus C8, C18; Aqua, Synergy, PhenoSphere NEXT C8, C18; Contiene: Uracil, acetofenona, benceno, toluene, naftaleno (Favor de referirse a los datos de pruebas específicas de Control de Calidad para Jupiter y Luna). 23

25 Estándares de referencia para el comportamiento de la columna (continúa) MEZCLA 1 DE CARBOHIDRATOS Nº de Catálogo AL (Para Rezex RNM, RAM y otras columnas para el análisis de carbohidratos) Contiene: Hidrato de maltotriosa, maltosa y ribitol. MEZCLA 2 DE CARBOHIDRATOS Nº de Catálogo AL (Para Rezex RPM y otras columnas para el análisis de carbohidratos) Contiene: Melicitosa, glucosa, fructosa, ribitol MEZCLA 3 DE CARBOHIDRATOS Nº de Catálogo AL (Para Rezex RCM y otras columnas para el análisis de carbohidratos) Contiene: Melicitosa, manosa, maltosa, fructose, glucose, ribitol. ESTANDAR DE OLIGOSACARIDOS Nº de Catálogo AL (Para Rezex RSO y otras columnas para el análisis de oligosacáridos) Contiene: Sirope ligero de maíz ESTANDAR PARA ACIDOS ORGANICOS Nº de Catálogo AL (Para Rezex ROA y otras columnas para el análisis de ácidos orgánicos) Unidades: Contiene: INTERCAMBIO CATIONICO 2 ml Acido oxálico, ácido sucínico, ácido cítrico, ácido fórmico, Ácido tartárico (Para SCX*, SA*, CM*) Contiene: Uracil, cistosina SCX intercambio catiónico fuerte SA ácido fuerte CM carboximetil Nº de Catálogo AL INTERCAMBIO ANIONICO (Para SAX*, SB*, DEAE*PEI*) Contiene: Uridine, UMP SB base fuerte DEAE etil dietilamina PEI Uridina, UMP Nº de Catálogo AL *SEC 1 ACUOSA Nº de Catálogo AL (Para Biosep SEC-S y otras columnas SEC para proteínas) Unidades: en seco, reconstituida a 2 ml Contiene: gamma-globulina bovina triglobulina humana ovalbumina mioglobina uridina 24 (reconstitute with 1 ml of 100 mm Phosphate buffer ph=6.8) SEC = cromatografía de exclusión por tamaño

26 Estándares de referencia para el comportamiento de la columna (continúa *SEC 1 ACUOSA NSEC 2 ACUOSA Nº de Catálogo AL (Para Polysep *GFC-P y otras columnas para análisis acuo-soluble) Contiene: etilenglicol GFC-P = cromatografía de filtración de gel GFC-P = cromatografía de filtración de gel. STAR ION A300 Nº de Catálogo AL Contiene: Conc. (mg/ml) Fluoruros 5 Nitratos 20 Cloruros 10 Fosfatos 30 Nitritos 20 Sulfatos 20 Bromuros POLYMERX RP-1 Nº de Catálogo AL Contiene: Conc. (mg/ml) Cistosina 40 Uracil 40 Uridina 1000 MEZCLA Nº 1 PARA QUIRALES Nº de Catálogo AL Aplicable a las columnas Chirex siguientes: 3001, 3005 Contiene: 1. S-(+)-2,2,2-trifluoro-1-(9-antril) etanol CAS [ ] 2. R-(-)-2,2,2-trifluoro-1-(9-antril) etanol CAS [ ] MEZCLA Nº 2 PARA QUIRALES Nº de Catálogo AL Aplicable a las columnas Chirex siguientes: 3010,3011,3012 Contiene: N-dansil-DL-valina (sal de ciclohexilamonio) CAS[ ] MEZCLA Nº 3 PARA QUIRALES Nº de Catálogo AL Aplicable a las columnas Chirex siguientes: 3014, 3017, 3018, 3019, 3020, 3022 Contiene: 1. (R)-(-)-N-(3,5-dinitrobenzoil)- - metilbencilamina CAS [ ] 2. (S)-(-)-N-(3,5-dinitrobenzoil)- metilbencilamina CAS[ ] MEZCLA Nº 4 PARA QUIRALES Nº de Catálogo AL Aplicable a las columnas Chirex de fase 3126 Contiene: DL-ácido aspártico CAS [ ] 25

27 PARTE X EXTRACCION POR FASE SOLIDA (SPE ó EFS) Aumente el tiempo de vida de la columna y del instrumento, inyectando muestras que han sido purificadas con Strata. STRATA - sorbentes tradicionales. Tubos y platos de 96. Flujo óptimo Reproducibilidad de lote a lote Amplio rango de selección Fases disponibles: C18-E, C18-U, C18-M, C18-T, C8, fenil, SDB-L, CN, Si-1, WCX, FI-PR, NH2, SAX, SCX. STRATA sorbentes poliméricos. Tubos y platos de 96. Resistentes al deacondicionamiento Bajos volúmenes de elución Alta capacidad de analitos Strata X Para limpieza simplificada de compuestos polares y no polares. Strata X-C Para extracción selective de compuestos básicos. STRATA Sorbentes rapidos Fases polares ó no polares Distribución de particulas limitada Puede usarse en escala directa Los tubos Strata Giga están disponibles en formatos de 12,20,60 y 150 ml. Sepra Bulk disponible desde gramos hasta kilogramos STRATA Cartuchos en linea Extracción y concentración rápida Análisis de inyección directa Puede ser automatizada fácilmente FLOW Strata -X para compuestos polares Strata C18 para compuestos no polares Strata C8 para compuestos de polaridad intermedia 26

28 PARTE Xi ACCESORIOS PARA HPLC CALENTADOR THERMASPHERE TS-130 PARA UNA SOLA COLUMNA Compacto, de bajo costo controla con mucha precision temperatures de 25 a 90 ºC Mejora la repoducibilidad y los resultados de cromatografía Reduce los errors de identificación de los analitos Mejora la linea base y el comportamiento del detector Mejora la eficiencia del pico y la cuantificación del analito Mejora el cumplimiento de los límites de aceptación de la separación dentro del laboratorio Y entre un laboratorio y otro INFORMACION PARA ORDENAR ThermaSphere TS-130 Nº de catálogo Descripción EH Calentador de columnas ThermaSphere TS ºC, 95 a 265 VAC, 50/60 Hz EH Soporte para calentador de columnas de HPLC ThermaSphere TS-130. Para más accesorios disponibles, vea el catálogo de Phenomenex. ACCESORIOS Regulador de presión Productos biocompatibles no metálicos Conectores y difusores Productos para filtración Férulas, septas, liners, sellos dorados para CG Inyectores y espirales para inyector Artículos para el manejo de fase móvil Juegos y estandares de polímeros para calibración Sellos para rotores, y estatores Recipiente para solventes y botellas para reactivos Consumibles para SPE, tubos y platos multiples Válvulas de cambio Jeringas Herramientas Tubo, conectores, frits y unions Válvulas Viales, tapas y septas EQUIPO Enfriador-Calentador de columnas Calentador de columnas Selector de columnas Desgasificadores Procesadores de fluidos Medidores de flujo para CG Recicladores Controladores de temperature Para ordenar y para información adicional, contacte a su Consultor Técnico 27