CRITERIOS DE ACEPTACIÓN Y RECHAZO DE MUESTRAS APLICABLES AL LABORATORIO DE BIOLOGÍA MOLECULAR
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- Cristián Campos Toledo
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1 ELABORADO POR: SECRETARIA DE SALUD REVISADO POR: APROBADO POR: QBP. MAXIMINA CRUZ NOLASCO QUÌMICO ANALISTA MCB. CITLALLI TORNEZ BENITEZ JEFA DE LABORATORIO QBP. MARIO A. ALARCÒN ROMERO JEFE DE DEPARTAMENTO CLAVE: BM-P-002 REVISIÓN N 3 SUSTITUYE A REVISIÓN N 2 EMISIÓN: EXPIRACIÓN: PÁGINA 1 DE 14 CRITERIOS DE ACEPTACIÓN Y RECHAZO DE MUESTRAS APLICABLES AL LABORATORIO DE DRA. ELIZABETH GODOY GALEANA DIRECTOR ACAPULCO, GRO. MARZO DEL 2017
2 1.- OBJETIVO Establecer los criterios de aceptación y rechazo de muestras que son analizadas en el Laboratorio de Biología Molecular. 2.- ALCANCE El presente documento es aplicable para el personal de la Coordinación de Recepción de Muestras, del área operativa de Vigilancia Epidemiológica de la Secretaría de Salud del Instituto Mexicano del Seguro Social (IMSS), el Instituto de Seguridad y Servicios Sociales de los Trabajadores de Estado (ISSSTE), de la Secretaría de Marina (SEMAR), de la Secretaría de la Defensa Nacional (SEDENA) y el personal responsable de Atención Primaria a la Salud. 3.- DEFINICIÓNES Influenza: La influenza es una infección causada por el virus de la influenza; existen tres tipos de virus de influenza: A, B y C, epidemiológicamente el más importante es el grupo A. Los virus tipo A se clasifican en subtipos en función de las diferentes combinaciones de dos proteínas de la superficie del virus que son la Hemaglutinina y Neuraminidasa (H y N respectivamente). Dengue: El dengue es una enfermedad febril, transmitida por el mosco hembra hematófaga del género Aedes aegypti, la enfermedad es de curso auto-limitado, incapacitante y con riesgo de complicaciones letales, la cual se puede presentar de manera benigna conocida como Fiebre por Dengue (FD) y de manera grave conocida como Fiebre Hemorrágica por Dengue (FHD). Chukungunya: El virus Chikungunya (CHIKV) pertenece a la familia Togaviridae del genero Alfavirus y fue aislado por primera vez en Bangkok, Tailandia en 1958 y es considerado como un arbovirus, ya que es transmitido al humano y otros primates a través de la picadura de mosquitos infectados pertenecientes a las especies Aedes, particularmente A. albopictus y A. aegypti. Sarampión: es una enfermedad infecciosa, producida por un virus, llamado Morbillivirus, que pertenece a la familia de los paramixovirus. Cuando una persona "pasa" un ataque de sarampión queda inmunizada para toda la vida; sin embargo, es importante prevenir esta infección puesto que puede tener secuelas graves. EFE: Enfermedad Febril Exantemática Virus del Papiloma Humano (VPH): Microorganismos pertenecientes a la familia de los papovavirus, infectan la piel y las mucosas pudiendo producir tumores epiteliales benigno o malignos, su asociación con distintas lesiones y su potencial oncogénico. Captura de híbridos: Prueba biomolecular, basada en la amplificación de la señal de híbridos en solución, invitro, para detectar blancos de DNA o RNA. Muestras Especiales: Cualquier muestra que no cumpla con los criterios de aceptación (Defunciones, Muestras de Brotes, Muestras Internas, etc.,). Vigilancia epidemiológica: Es el estudio permanente y dinámico del estado de salud en la población y tiene como propósito presentar opciones para la toma de decisiones. Desde el punto de vista operativo incluye la recopilación, el procesamiento y el análisis de los daños y riesgos en salud. Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica (SINAVE): Corresponde a la Dirección General Adjunta de Epidemiología (DGAE) coordinar la elaboración de las normas y procedimientos para la vigilancia epidemiológica correspondiente. El SINAVE capta, registra y analiza datos de morbilidad, mortalidad y daños, así como riesgos a la salud, en este caso, específicamente para dengue a través del Sistema Único de Información para la Vigilancia Epidemiológica (SUIVE). SUSTITUYE A REVISIÓN N.2 EXPIRACIÓN: PÁGINA 2 DE 14
3 4.- DOCUMENTOS APLICABLES Lineamientos para la Vigilancia Epidemiológica de Influenza por Laboratorio Lineamientos para la Vigilancia Epidemiológica de Dengue por Laboratorio Lineamientos para la Vigilancia de la Enfermedad Febril Exantemática por Laboratorio Lineamientos para la Vigilancia Epidemiológica y Diagnóstico por Laboratorio de Fiebre Chikungunya Manual de Procedimientos Estandarizados para la Vigilancia Epidemiológica de la Influenza Lineamientos Estandarizados para la Vigilancia Epidemiológica y Diagnóstico por laboratorio de infección por virus Zika Criterios de aceptación y rechazo aplicables al laboratorio de Virología (VI-P-001). 5.- RESPONSABILIDADES 5.1 Coordinador de Recepción de Muestras Aplicar los criterios de aceptación y rechazo de las muestras que se reciban. Generar el formato de rechazo definitivo de las muestras que no cumplen con los criterios de aceptación. Difundir a los usuarios externos los criterios de aceptación y rechazo, así como notificar los cambios que se generen en los mismos. Capacitar en coordinación con los jefes de laboratorio a los usuarios externos, en la aplicación de los criterios de aceptación y rechazo. Solicitar las actualizaciones tres meses antes a la expiración de los criterios de aceptación y rechazo, a la unidad de gestión de la calidad. 5.2 Jefe de Departamento Revisar los criterios de aceptación y rechazo de las muestras aplicables en el laboratorio. 5.3 Jefe de laboratorio. Supervisar la correcta aplicación de los criterios de aceptación o rechazo de muestras. Realizar las observaciones sobre las muestras especiales en el informe de resultados. Revisar y actualizar los criterios de aceptación y rechazo de las muestras, cuando así se requiera. Notificar por escrito a las áreas involucradas, los cambios que se realicen al procedimiento. Generar el formato de rechazo definitivo de las muestras que no cumplieron con los criterios de aceptación. Difundir los criterios de aceptación y rechazo de muestras a los usuarios internos del Laboratorio Estatal de Salud Pública. Capacitar al personal encargado de la recepción de muestras para garantizar el cumplimiento de los criterios. 5.4 Químicos analistas. Aplicar los criterios de aceptación y rechazo de las muestras recibidas para su diagnóstico. Rechazar las muestras que no cumplan con los criterios establecidos. 6.- DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD 6.1 Diagnóstico Molecular de Influenza Tipo de muestras: En los casos de ETI e IRAG se tomará muestra de Exudado Faríngeo, Nasofaríngeo o Lavado Bronquioalveolar dentro de las primeras 72 horas de iniciados los síntomas en pacientes ambulatorios; y hasta de 7 días para pacientes graves. SUSTITUYE A REVISIÓN N.2 EXPIRACIÓN: PÁGINA 3 DE 14
4 Si el paciente está intubado, en los primeros 7 días después de iniciados los síntomas se tomará Lavado Bronquioalveolar, no menos de 2.5 ml. Recuperar especímenes de pulmón en caso de defunción en la que se haya dictaminado como causa la neumonía aguda con sospecha de influenza, aproximadamente 2.0 cm del parénquima pulmonar visiblemente afectado, aun después de 7 días de iniciados los síntomas. Estos especímenes pueden ser Biopsia de tejido fresco, la cual se coloca en el medio de transporte viral Definiciones operacionales de Influenza. Enfermedad tipo influenza (ETI). Persona de cualquier edad que presente fiebre mayor o igual a 38 C, tos y cefalea, acompañadas de uno o más de los siguientes signos o síntomas: rinorrea, coriza, artralgias, mialgias, postración, odinofagia, dolor torácico, dolor abdominal, congestión nasal. En menores de cinco años de edad se considera como un signo cardinal la irritabilidad, en sustitución de la cefalea. En mayores de 65 años no se requerirá la fiebre como síntoma cardinal. Infección respiratoria aguda grave (IRAG). Persona de cualquier edad que presente dificultad al respirar, acompañada de fiebre mayor o igual a 38 C y tos, con uno o más de los siguientes síntomas: ataque al estado general, dolor torácico y polipnea, o Síndrome de Insuficiencia Respiratoria Aguda (SIRA). Defunción por neumonía grave con sospecha de influenza. Toda defunción por infección respiratoria aguda grave. Definiciones de caso sospechoso de influenza: Se considera caso sospechoso de influenza a todo aquel que cumpla los criterios de ETI o IRAG, o a cualquiera cuya muerte se asocie con ETI o IRAG Criterios de aceptación de las muestras: Cuando cumplan con la definición operacional de ETI, IRAG o defunción por neumonía grave con sospecha de influenza. Que estén registradas en la plataforma única de influenza. Colocadas en medio de transporte viral con volumen mínimo de 2.5 ml y perfectamente etiquetadas. Tomadas con hisopo estéril con punta de rayón o dacrón y mango de plástico o alambre flexible, según sea el caso. Tomadas dentro de las primeras 72 horas de iniciados los síntomas en pacientes ambulatorios y hasta de 7 días para pacientes graves. En caso de defunción se aceptará biopsia de parénquima pulmonar (2.0 cm) aun después de 7 días de iniciados los síntomas. Enviadas a una temperatura de 4 a 8 C. Se recibirán Muestras Especiales, siempre y cuando se hagan las observaciones correspondientes de la calidad de la muestra en el Informe de Resultados. Enviar la muestra inmediatamente al LESP para su proceso y evitar mantenerla por más de 5 días en áreas locales y hasta 7 días en áreas foráneas Criterios de rechazo de las muestras: Cuando no cumplan con la definición operacional de ETI o IRAG. Sin registro en la plataforma única. Muestras derramadas. Muestras colocadas en medio de transporte viral con volumen insuficiente, es decir, menos de 2.5 ml. Muestra colocadas en solución salina y que tengan más de 24 horas de tomada la muestra. Muestras que excedan los 5 días de tránsito en áreas locales y 7 días en áreas foráneas. Muestras no etiquetadas. Que no hayan sido enviadas a una temperatura de 4 a 8 C. SUSTITUYE A REVISIÓN N.2 EXPIRACIÓN: PÁGINA 4 DE 14
5 Tomadas con hisopo de algodón y mango de madera o hisopos de alginato. Muestra sin hisopo. Nota: las muestras que ingresen sin el formato SINAVE y no se encuentren registradas en la plataforma de Influenza tendrán un lapso de 24 horas para registrarlas (rechazo temporal), de no ser así serán rechazadas definitivamente. 6.2 Diagnóstico Molecular de Serotipos Dengue Tipo de muestra. Para el diagnóstico de dengue por laboratorio es necesario contar con 1 ml de suero del paciente o pool de moscos Definiciones operacionales de Dengue. Caso probable de Dengue no Grave (DNG): Toda persona de cualquier edad que resida o proceda, en los 14 días previos al inicio de signos y síntomas, de una región donde exista transmisión de la enfermedad y que presente fiebre y dos o más de los siguientes signos y síntomas: o Nauseas, vómitos, exantema o Mialgias, artralgias, o Cefalea, dolor retro-ocular o Petequias o prueba de torniquete positiva o Leucopenia Caso probable de Dengue con signos de alarma: todo caso probable que además de cumplir con cuadro de DNG presente uno o más de los siguientes signos de alarma: o Dolor abdominal intenso y continúo. o Vómito persistente y o incoersible. o Acumulación de líquidos. o Sangrado de mucosas. o Letargo o irritabilidad. o Hipotensión postural (Lipotimia). o Hepatomegalia mayor de 2 cm. o Aumento progresivo de hematocrito. o Disminución progresiva de plaquetas. o Disminución progresiva de la hemoglobina. o Caso probable de Dengue Grave: Todo caso probable de Dengue que presente uno o más de las siguientes hallazgos: o Choque debido a extravasación grave de plasma evidenciado por taquicardia, extremidades frías y llenado capilar igual o mayor a tres segundos, pulso débil o indetectable presión diferencial convergente 20mm, hipotensión arterial en fase tardía, acumulación de líquidos que conlleve a insuficiencia respiratoria. o Sangrado grave, (hematemesis, melena, metrorragia o sangrado de SNC). o Compromiso de órganos graves tales como: daño hepático importante, afección renal, SNC, corazón u otros órganos Criterios de aceptación de las muestras aplicables al Laboratorio de Virología: Se aceptarán las muestras que cumplan con los criterios de aceptación y rechazo de muestras del Laboratorio de Virología para el diagnóstico de Dengue (ver VI-P-001). Muestras positivas a la proteína NS1 (se recibirán en un máximo de 24 horas una vez reportado el resultado en plataforma de vectores). SUSTITUYE A REVISIÓN N.2 EXPIRACIÓN: PÁGINA 5 DE 14
6 De acuerdo al algoritmo de Dengue se aceptarán el 100% de muestras Hemorrágicas y sólo el 10% de muestras Clásicas. Muestras con 1 ml de suero en tubos Eppendorf o tubos de rosca, debidamente rotulado con los siguientes datos: clave interna, iniciales del paciente y fecha. Las muestras deberán venir acompañadas con el formato de Recepción de muestras para la vigilancia virológica del virus Dengue BM-F-15. Muestras registradas en la plataforma única de Dengue (SINAVE). Recibir las muestras respetando la red fría (4-8 o C) Criterios de rechazo de muestras: Se rechazarán las muestras que no estén registradas en la plataforma SINAVE. Muestras que no vengan acompañadas del formato BM-F-015. Muestras con un volumen menor a 1 ml. Muestras que no vengan tubos Eppendorf y que no estén debidamente rotuladas. Muestras que vengan en tubos de 13 X 100 o 16 X 150 ml de vidrio o plástico. 6.3 Diagnóstico Molecular de Chikungunya Tipo de muestra. Para el diagnóstico de dengue por laboratorio es necesario contar con 1.5 ml de suero del paciente o pool de moscos Definiciones Operacionales Caso probable de Fiebre Chikungunya: Toda persona que presente cuadro febril agudo más la presencia de poliartrálgias severas (incapacitantes) o artritis de comienzo agudo y que se identifique alguna asociación epidemiológica* Criterios de aceptación. Muestras tomadas dentro de los 5 días de evolución. Muestras con 1.5 ml de Suero debidamente rotulada. Debe cumplir con definición operacional de caso sospechoso. Deben estar acompañadas por copia del estudio epidemiológico. Muestras transportadas de 4 a 8 C Criterios de rechazo definitivo: Muestra en cantidad insuficiente (menos de 1.5 ml). Muestra derramada, contaminada, lipémica o con hemólisis. Incumplimiento de red fría. Tubo contenedor sin identificación. No se recibirán muestras en tubos de vidrio o vacutainer. Muestras sin Estudio Epidemiológico. Formatos con registro incompleto. Demora en el tiempo establecido para envío de muestras al laboratorio estatal (24 horas desde la toma hasta la recepción en el LESP). SUSTITUYE A REVISIÓN N.2 EXPIRACIÓN: PÁGINA 6 DE 14
7 6.4 Diagnóstico molecular de ZIKA Tipo de muestras: Muestras para ser tomadas en fase aguda: Suero: Para el diagnóstico por laboratorio es necesario contar con 1 ml de suero del paciente o pool de moscos (tomar muestra dentro de los primeros 5 días del inicio de los síntomas). Muestras para seguimiento en casos de microcefalia (madre y neonato): Leche materna: El volumen requerido debe ser de 1mL (madre). Saliva: El volumen requerido debe ser de 1mL (madre y neonato). Orina: Volumen requerido de 10 a 25 ml (madre y neonato). Sangre completa*: Aproximadamente 10 ml para obtener 4-5 ml de suero, en tubo de polipropileno con tapón rojo (tipo vacutainer con gel separador), enviar en estricta red fría (2-8 C). No enviar dos tubos del mismo paciente. *Nota: Las muestras de sangre completa no se procesaran en el laboratorio, serán enviadas al InDRE con la leyenda de Tránsito y Resguardo dicha muestra debe estar acompañada con el formato de estudios de caso: defectos del tubo neural y creneo-faciales, además del formato de vectores. El envío es con atención a la Dra. Leyla Carillo y estas a su vez será remitida para ser procesada al Hospital de Perinatología para el seguimiento de casos (sujeto a nuevas indicaciones). Muestras para seguimiento a casos de SGB (Síndrome de Guillain-Barré). Orina: Para los casos que tengan máximo de 17 días entre la fecha de inicio de cuadro clínico compatibles con Zika y el inicio de la parálisis (Síndrome de Guillain-Barré). Las muestras de orina deben ser tratadas inmediatamente de ser recibidas en el laboratorio. Saliva: El volumen requerido debe ser de 1mL en los casos que tengan máximo de 17 días entre la fecha de inicio de cuadro clínico compatibles con Zika y el inicio de la parálisis (Síndrome de Guillain-Barré). Tejidos (Post Mortem). Recibir aproximadamente 3 cm³ de hígado, bazo, riñón, ganglios y pulmón y conservar en solución salina hasta la llegada al laboratorio (24 horas máximo) Definiciones Operacionales Caso Probable de Infección por Virus Zika: Toda persona que presente exantema (generalmente maculopapular y pruriginoso) y al menos uno o más de los siguientes signos y síntomas: fiebre, cefalea, conjuntivitis (no purulenta/hiperemia), mialgias, artralgias, edema periarticular, prurito y dolor retroocular y que se identifique asociación epidemiológica*. Asociación epidemiológica*. Presencia del vector Aedes aegypti o Aedes albopictus, o Antecedente de visita o residencia en áreas de transmisión en las dos semanas previas al inicio del cuadro clínico, o existencia de casos confirmados en la localidad.tenga antecedentes de contacto sexual sin protección en las 2 semanas previas a la aparición de los síntomas, con una persona que en las 8 semanas previas al contacto sexual tenga antecedentes de residencia o viaje a un área con transmisión local ZIKV o con presencia de vectores. SUSTITUYE A REVISIÓN N.2 EXPIRACIÓN: PÁGINA 7 DE 14
8 Caso probable de Enfermedad por el Virus del Zika en mujeres embarazadas: Toda mujer embarazada que presente dos o más de los siguientes signos y síntomas: fiebre, exantema, conjuntivitis (no purulenta), cefalea, mialgias, artralgias o dolor retroocular, y que se indique alguna asociación epidemiológica*. Caso probable de PFA: toda persona que presente parálisis o paresia flásida aguda (con tono muscular disminuido o abolido), que se instala en no más de cinco días, o bien, enfermedad paralítica en una persona en la que se sospeche poliomelitis. Caso probable de Síndrome de Guillain-Barré asociado a la infección por virus del Zika: Todo caso de PFA que en los 21 días previos al inicio de la parálisis haya cumplido definición de caso probable de infección por virus Zika Criterios de aceptación. Debe cumplir con definición operacional de caso probable para enfermedad por el ZIKV, deben ser enviadas al LESP tomando en cuenta los requisitos de aceptación para evitar un rechazo definitivo tomando en cuenta las siguientes especificaciones. Todas las muestras deberán venir acompañadas con el formato de vectores. Deben estar contenidas en un contenedor primario (viales tipo Eppendorf de 1.5 ml, crioviales de 2.0 ml, frascos de plástico para envío de tejidos o vasos encerados para envío de grupo de moscos) debidamente identificado, contenedor secundario y terciario. Deben cumplir estrictamente con la definición operacional de caso probable (no aplica para muestras de vigilancia entomo-virológica). Volumen de suero mínimo 1.5 ml, debidamente identificado. Acompañadas con original del estudio epidemiológico de enfermedades transmitidas por vector, debidamente rellenado. (las muestras para la vigilancia entomo-virológica deberán ser enviadas con los datos indicados en los tipos de muestras). Muestras de saliva y leche materna con un volumen de 1 ml. Enviadas en estricta red fría (2-8 C), es importante mencionar que dentro del recipiente terciario (hielera) tiene que contener suficientes refrigerantes. Para ser procesadas por medio de la técnica Molecular PCR tiempo real en el LESP, debe tomarse la muestra (Suero) dentro de los primeros 5 días de inicio de síntomas (días de evolución) Criterios de rechazo definitivo: Muestra en cantidad insuficiente (menos de 2.0 ml para los LESP) Muestra derramada, contaminada, lipémica o con hemólisis. Incumplimiento de red fría. Tubo contenedor sin identificación. Sin Estudio Epidemiológico. Formatos con registro incompleto o ilegible. Demora en el tiempo establecido para envío de muestras (días de transito) al laboratorio estatal que son 5 días naturales. En el caso de situaciones como productos de la concepción, abortos o mortinatos, el criterio de rechazo quedará exento y esta condición deberá ser informada al laboratorio correspondiente de la recpción. SUSTITUYE A REVISIÓN N.2 EXPIRACIÓN: PÁGINA 8 DE 14
9 6.5 Diagnóstico Molecular de Enfermedad Febril Exantemática (EFE) Tipo de muestras. Suero: Para el diagnóstico EFE enviar el suero de 0-35 días de evolución, de 2.5 ml, no lipémico y no contaminado en un tubo con tapón de rosca. Con información completa (fecha inicio del exantema, fecha de toma de la muestra, sintomatología y fecha de vacunación). Exudado faríngeo: Para diagnóstico de EFE tomar la muestra durante los 5 días inmediatos a la aparición del exantema. Orina: Para el diagnóstico de EFE tomar la primera muestra de la mañana entre el día 0 y 5 después de la aparición del exantema. Líquido cefalorraquídeo (LCR). Para el diagnóstico de sarampión y rubéola, enviar el LCR con el formato epidemiológico debidamente completado con fecha de inicio de síntomas, fecha de toma y sintomatología; en un tubo con tapón de rosca. Transportar en condiciones de refrigeración (4-8 C). Nota: En el Laboratorio de Biología Molecular sólo se recibirán las muestras de Orina y Exudado Faríngeo, la muestra de Suero se procesará en el Laboratorio de Virología Definiciones operacionales de EFE. Definición operacional de caso de Sarampión. Caso probable: Persona de cualquier edad que presente fiebre, exantema maculopapular sin importar la duración del mismo y uno o más de los siguientes signos y síntomas: tos, coriza y/o conjuntivitis. Definición operacional de caso de Síndrome de Rubéola Congénita (SRC) Caso sospechoso: Lactante de un año en quien se sospecha de SRC debido a que se detecta: Una o más anormalidades: patología ocular congénita (de tipo catarata, disminución de la visión, nistagmos, estrabismo, microoftalmos, glaucoma), defectos cardiacos congénitos, púrpura o hipoacusia; y/o b. Historia de infección por rubéola (confirmada o sospechosa) de la madre durante el embarazo Criterios de aceptación de muestras Se aceptaran las muestras que cumplan con la definición operacional de caso. Muestras con 2.5 ml de medio de transporte viral en un tubo con tapón de rosca (Exudado Faríngeo). Enviar el total de la orina recolectada en la mañana y enviar en condiciones de refrigeración (4-8 C) y el tiempo de llegada al laboratorio no debe exceder de 24 horas después de haber tomado la muestra. (Orina). Muestras debidamente rotuladas con el nombre y apellido del paciente. Tomadas con hisopo estéril con punta de rayón o dacrón y mango de plástico o alambre flexible, según sea el caso. Muestras acompañadas del formato de envío de muestra completado con fecha de inicio del exantema, fecha de toma, sintomatología y fecha de vacunación. Enviar las muestras al LESP a 4-8 C en un lapso no mayor a 24 horas después de la toma de la misma Criterios de rechazo de muestras. Muestras tomadas después de los 5 días posteriores a la aparición de exantema. Muestras derramadas. Muestras que presenten datos incorrectos entre la muestra y formato de envío. muestras de orina con sedimento (contaminadas). SUSTITUYE A REVISIÓN N.2 EXPIRACIÓN: PÁGINA 9 DE 14
10 6.6 Diagnóstico Molecular de Leptospira Tipo de muestra: Sangre: de 1 a 2 ml de sangre total con cualquier anticoagulante excepto heparina Biopsias: tomar 3cm de hígado, pulmón, cerebro, piel, etc., en medio solución salina o medio de Hanks. Orina: primera orina de la mañana. Suero: 1 ml transportado en red fría (4-8ºC) Criterios de Aceptación: Muestras tomadas dentro de las 4 semanas de haber iniciado los síntomas. Muestras acompañadas con el formato epidemiológico. Muestras debidamente rotuladas. Muestras transportadas en red fría. Muestras acompañadas con el formato epidemiológico. Enviar las muestras al LESP a 4-8 C en un lapso no mayor a 24 horas después de la toma de la misma Criterios de Rechazo: Muestras con heparina. Muestras que no estén acompañadas por el formato epidemiológico. Muestras mal rotulas. Muestras con volumen insuficiente. Muestras contaminadas. Muestras derramadas. 6.7 Diagnóstico Molecular de Bordetella Definiciones operativas Caso sospechoso de tos ferina: persona de cualquier edad con tos, sin importar los días de duración y con asociación con otros casos probables o confirmados. Esta definición se utiliza para la búsqueda activa de casos adicionales ante la presencia de casos probables, confirmados o atípicos, portadores, defunciones y en brotes. Caso probable de tos ferina: persona de cualquier edad, con tos de 14 o más días de evolución y dos o más de las siguientes características; tos paroxística, en accesos, espasmódica o estridor laríngeo inspiratorio y uno o más de los siguientes datos; tos cianosante, hemorragia (conjuntival, petequias, epistaxis), leucocitosis con predominio de linfocitos; o historia de contacto con casos similares en las últimas 2 a 4 semanas previas al inicio del padecimiento. Nota: En esta definición se incluyen a los menores de 3 meses que pueden manifestar sólo episodios de apnea o cianosis con o sin tos. Portador asintomático de Bordetella pertussis: toda persona sin signos o síntomas de enfermedad respiratoria a quien se tomó muestras por tener asociación epidemiológica con un caso probable o confirmado y cuyos resultados de cultivo o PCR son positivos a Bordetella pertussis Tipo de muestras. El exudado nasofaríngeo (ExNF) es la muestra de elección para el estudio de casos probables y sospechosos de Tos ferina, así como de sus contactos para la búsqueda de Bordetella en portadores asintomáticos; debido a que esta bacteria se adhiere a los cilios del epitelio del tracto respiratorio superior en el hombre. SUSTITUYE A REVISIÓN N.2 EXPIRACIÓN: PÁGINA 10 DE 14
11 Aspirado nasofaríngeo (ANF) Para esta toma se utiliza un kit de aspiración que contiene una jeringa de 3.0 ml con solución salina estéril y una sonda. Exudado nasofaríngeo (ExNF) es la muestra de elección para el estudio de casos probables y sospechosos de Tos ferina, así como de sus contactos para la búsqueda de Bordetella en portadores asintomáticos; debido a que esta bacteria se adhiere a los cilios del epitelio del tracto respiratorio superior en el hombre Criterios de Aceptación: Las muestras deben ser tomadas durante el episodio agudo (semana 1 y 3) de la enfermedad a fin de tener la mayor posibilidad de aislamiento del agente etiológico y previo al tratamiento con antibióticos. Las muestras destinadas para PCR deben depositarse en medio de transporte de solución salina con Cefalexina y transportarse en red fría. El tiempo de transporte no debe exceder más de 3 días. Las muestras debe ser tomada con hisopo de rayón o dacrón, nunca de alginato de calcio. Cada tubo de muestra debe ser perfectamente etiquetado con los datos de la solicitud del estudio. Para aspirado recolectar aproximadamente 2.0 ml para ANF Criterios de Rechazo: Muestras contaminadas. Muestras con volumen insuficiente (3.0 ml para ANF y 2.0 ml para ANF). Muestras sin formato epidemiológico. Muestras tomadas con hisopo de alginato de calcio (ExNF). Muestras que no son transportadas en red fría. 6.8 Diagnóstico molecular de Rickettsia Definiciones operativas: Caso sospechoso de Rickettsiosis: Toda persona que proceda de áreas donde se identifiquen los vectores (piojos, pulgas o garrapatas), animales que los porten o donde haya sido confirmada la ocurrencia de la enfermedad y que además presente fiebre acompañada de cualquiera de los siguientes signos o síntomas: mialgias, artralgias, escalofrío, dolor retrocular, astenia, adinamia, postración; en las personas que puedan referirla se añadirá la presencia de cefalea. Caso probable de Rickettsiosis: Todo caso sospechoso que adicionalmente presente alguno de los siguientes: lesiones sospechosas de picadura, exantema máculo-papular, petequias o sangrado a cualquier nivel, alteraciones respiratorias (rinitis, rinorrea, faringitis, tos, dolor o ardor de garganta), alteraciones neurológicas (fotofobia, convulsiones, alteraciones en el examen citoquímico de LCR compatibles con infección bacteriana, incoordinación, alucinaciones, parálisis, rigidez), alteraciones gastrointestinales (anorexia, nauseas, dolor abdominal tipo cólico, diarrea, vómitos), alteraciones hepáticas (ictericia, aumento de las bilirrubinas por encima del estándar y/o hipoalbuminemia, y/o elevación de las transaminasas), alteraciones hematológicas; plaquetopenia <100,000/mm3, bandemia absoluta >500/mm3, aumento de los tiempos de coagulación, anemia, hiponatremia <135 meq/l, elevación de DHL >350 UI/L y acidosis metabólica y/o respiratoria Tipo de muestra: Sangre total: centrifugar la sangre a 5000 revoluciones por 10 minutos ó 2000 g (recuperar la fase leucocitaria color blanca 400 µl) y para sangre hemolizada se trabaja directo utilizando 400 µl. Biopsias: muestras con 3cm en solución salina transportada dentro de las primeras 24 horas posteriores a la toma y respetando la red fría (de 4 a 8 C). SUSTITUYE A REVISIÓN N.2 EXPIRACIÓN: PÁGINA 11 DE 14
12 Líquido cefalorraquídeo (LCR): de 200 a 400 µl. Orina: primera orina de la mañana Criterios de Aceptación: Las muestras con 2 µl deben ser tomadas durante los primeros 7 días de la enfermedad. Las muestras destinadas para PCR deben transportarse en red fría. El tiempo de transporte no debe exceder más de 3 días. Cada tubo de muestra debe ser perfectamente etiquetado con los datos de la solicitud del estudio Criterios de Rechazo: Muestras contaminadas. Muestras con volumen insuficiente. Muestras sin formato epidemiológico. Muestras que no son transportadas en red fría. 6.9 Diagnóstico molecular para determinar la toxigenicidad de Vibrio cholerae y Vibrio parahaemolyticus en muestras de alimentos derivadas de la pesca (área sanitaria) Tipo de muestra: cepa pura Criterios de aceptación. Muestras de cepas puras. Muestras acompañadas con formato sanitario. Muestras transportadas en medios de conservación base de agar sangre o soya tripticaseína en pico de flauta). Muestras transportadas a temperatura ambiente Criterios de rechazo. Muestras deshidratadas. Muestras en tubo roto. Muestras con datos ilegibles. Muestras con diferente medio. Muestras transportadas en caja Diagnóstico molecular para determinar la toxigenicidad de Vibrio cholerae y Vibrio parahaemolyticus en muestras de hisopos rectales (área epidemiológica) Tipo de muestra: cepa pura Criterios de aceptación. Muestras de cepas puras. Muestras acompañadas con formato epidemiológico. Muestras transportadas en medios de conservación base de agar sangre o soya tripticaseína en pico de flauta). Muestras transportadas a temperatura ambiente Criterios de rechazo. Muestras deshidratadas. SUSTITUYE A REVISIÓN N.2 EXPIRACIÓN: PÁGINA 12 DE 14
13 Muestras en tubo roto. Muestras con datos ilegibles. Muestras con diferente medio. Muestras transportadas en caja Diagnóstico molecular del Virus del Papiloma Humano (VPH) de alto riesgo Tipo de Muestras. Raspado endo-exocervical Criterios de aceptación para las muestras cervicales. Las muestras deben llegar al área de recepción de muestras del LESP el día programado según la calendarización para envió de muestras de raspado cervical para captura de híbridos proporcionada por la jefa de laboratorio. Las muestras deben traer su formato, papelería correspondiente, oficio de envío de muestras y hojas nominales del SICAM (Sistema de información de cáncer en la mujer). Las muestras no deben exceder una semana a partir de la fecha de toma de muestra y deben llegar al laboratorio almacenadas en condiciones de temperatura ambiente. Después de la segunda semana de la toma las muestras deben mantenerse y transportarse al LESP respetando la red fría (2 a 8 C). Las muestras deben llegar en gradillas (plastico de Sure Path ) ordenadas partiendo de la esquina superior de izquierda a derecha. Deben estar capturadas de acuerdo a las hojas nominales del SICAM y Excel. Deben estar ordenadas de acuerdo a las hojas nominales del SICAM y Excel, de igual forma los formatos o encuestas correspondientes. Cada paquete de muestras debe traer por separado su papelería o formatos correspondientes, estar debidamente etiquetados en carpetas o bolsas de plástico para poder identificar a que gradilla o hielera de muestras corresponde la papelería (esto con el propósito de evitar el contacto con las muestras y una posible contaminación). El tubo debe contener el medio de transporte y sin cepillo. Las muestras deberán estar etiquetadas con el código de barras de forma vertical, de izquierda a derecha, permitiendo observar la existencia del medio de transporte.( colocar correctamente cuidando de no tapar el espacio para observar la muestra) Criterios de rechazo para las muestras cervicales. Muestra con coágulos de sangre. Muestras con flujo. Muestras que estén desordenadas en las gradillas. Muestras derramadas. Muestras que tengan papel parafilm, cinta adhesiva o cualquier tipo de cinta alrededor de la tapa. Encuestas con letras ilegibles. Muestras que no contengan el medio de transporte. Muestras que no coincidan los datos del formato (nombre y apellidos del paciente) con lista nominal del SICAM y lista de Excel. Muestras que lleguen almacenadas junto con la papelería o formatos. Muestras que presenten incidencias y estas no sean solucionadas dentro los 8 días posteriores a la notificación de las incidencias. SUSTITUYE A REVISIÓN N.2 EXPIRACIÓN: PÁGINA 13 DE 14
14 Muestras con etiquetas de códigos de barras pegadas al tubo de manera horizontal, código de barras incompleto, código de barras ilegible. Muestras con códigos de barras de años anteriores. 7.- DIAGRAMA DE FLUJO O ALGORITMO Ingreso de la muestra al LESP (Recepción de Muestras) Se genera Rechazo en SIGECOM por Recepción de Muestras NO Aplicar los criterios de Aceptación y Rechazo de Muestras SI Si cumple se acepta la muestra Se le asigna registro en SIGECOM Se genera Rechazo en Plataforma SINAVE por Biología Molecular Ingreso de la muestra al Laboratorio de Biología Molecular Se genera Rechazo en SIGECOM por el laboratorio de Biología Molecular NO Revisar si la muestra cumple con los criterios de Aceptación y Rechazo SI Se asigna prueba en SIGECOM 8.- ANEXOS 8.1 CONTROL DE CAMBIOS GC-F-038 SUSTITUYE A REVISIÓN N.2 EXPIRACIÓN: PÁGINA 14 DE 14
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