estables en biomedicina. Espectrometría a de masas

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1 Aplicación n de isótopos estables en biomedicina. Espectrometría a de masas Mª José Fernández ndez Suárez R2 Bioquímica clínica

2 Índice Espectrómetros de masas Partes de un espectrómetro de masas. Qué es un isótopo? Tipos de isótopos Espectrometría a de masas de relación n isotópica (IRMS) Aplicaciones generales del análisis isotópico por MS. Aplicaciones clínicas.

3 Espectrómetro de masas: Ejemplo elemental

4 Esquema de un espectrómetro de masas IONIZACIÓN ACELERACIÓN SEPARACIÓN DETECCIÓN ENTRADA

5 Espectrómetro de masas Aceleración Detección Entrada Ionización Separación

6 Entrada de la muestra al equipo Muestra gaseosa CG Presión <10-6 mbar Espectrómetro masas Volatización directa ablación por láser HPLC Muestra líquida Muestra sólida

7 Espectrómetro de masas Aceleración Detección Entrada Ionización Separación

8 Ionización n por impacto electrónico (EI) ABC + e - ABC + Filamentos: Tungsteno. Renio. Iridio Toriado. Hexaboruro de lantano. AB + + C AC + + B BC + + A A + + B B + + A A + + C C + + A B + + C C + + B Patrón de fragmentación

9 Espectrómetro de masas Aceleración Detección Entrada Ionización Separación

10 Espectro de masas CH 3 CH 2 CH 2 CH 2 CH 3 CH 3 CH 2 CH 2 + CH 3 CH 2 CH 2 CH 2 CH 3 +

11 Resumiendo La espectrometría de masas es una técnica muy poderosa que permite cuantificar, identificar y da información estructural acerca de componentes desconocidos. Para ello: Crea iones en fase gaseosa. Separa esos iones en base a su relación m/z Mide la cantidad de iones de cada relación m/z

12 Análisis Isotópico por espectrometría a de masas Qué es un isótopo?

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16 Medida de Relaciones Isotópicas FRACCIONAMIENTO ISOTOPICO 40% 30% 20% 10% 50% 40% 30% 50% (% del átomo pesado) Isótopos pesados Isótopos ligeros Transporte Condensación Evaporación

17 APLICACIONES HIDROLOGÍA A Y METEOROLOGÍA - acuíferos subterráneos - formación n de glaciares - movimiento de nubes y precipitaciones GEOLOGÍA A Y PALEOCLIMATOLOGÍA - tipo o edad del petróleo - yacimientos de sulfuro metálico - rocas ígneas y metamórficas AGRICULTURA Y ALIMENTACIÓN - fijación n de nitrógeno en plantas - fertilizantes - dieta de humanos y animales MEDIO AMBIENTE - contaminación n por residuos urbanos y de granjas - filtración n de aguas de drenado portadoras de fertilizantes - procedencia del CO2 en el efecto invernadero

18 Isótopos estables 18 O HIDROLOGÍA. 2 H 18 Valores similares Recarga frecuente del acuífero Valores muy diferentes Agua muy vieja. El clima muy diferente en el momento de la recarga. Agua de un lago, enriquecido por evaporación. Agua de montaña, empobrecida por la altitud.

19 Isótopos estables 13 C Alimentación. n. 13 Plantas C3: Producen un mayor empobrecimiento en C13. Maíz, caña de azúcar. Plantas C4: Mayor contenido de 13 C. Patata y remolacha

20 Isótopos estables Déficit de amilasa CO CO 2 (C 13 C 6 H C O H 5 ) 5 10 n O 5 ) n ( 13 CO 2 13 CO 2 Amilasa CO 2 13 CO 2 C 12 6 HC 12 5 HO C O 6 Ciclo Krebs ATP ATP CO 2 13 CO 2 CÉLULA

21 Isótopos estables Déficit de amilasa CO 2 (C 13 C 6 H C O H 5 ) 5 10 n O 5 ) n CO 2 ( 13 Amilasa CO 2 C 6 H 12 O 6 Ciclo Krebs ATP + CO 2 CÉLULA

22 Aplicaciones Clínicas Agua corporal total H 2 18 O Gasto energético 2 H 2 18 O Metabolismo Oxidativo -Carbohidratos 13 C - glucosa - Ácidos grasos 13 C - palmítico; 13 C - octanoico - Aminoácidos 13 C - leucina; 13 C - valina; 2 H 5 - fenilalanina - Metabolismo mitocondrial ácido 13 C - cetoisocaproico - Actividad del citocromo P C - eritromicina ; 13 C - aminopirina

23 Aplicaciones Clínicas Metabolismo Sintético - Gluconeogénesis 2,3-13 C - alanina; 13 C - glicerol -Proteínas 13 C - leucina; 2 H 5 - fenilalanina - Ácidos Grasos ácido- 13 C - linoleico - Metabolismo de Lipoproteínas 13 C - leucina - Fenilcetonuria 2 H 5 - fenilalanina - Déficit de Lactasa 13 C - lactosa Patología Digestiva (test del aliento) - Déficit de lipasa intestinal 13 C - trioctanoína; 13 C - triglicérido mixto - Déficit de amilasa 13 C - almidón - Infección por H. pylori 13 C - urea - Vaciamiento gástrico 13 C - octanoato; 13 C - acetato; 13 C - glicina - Sobrecrecimiento bacteriano 13 C - glicocólico -Malabsorción 13 C - glucosa - Masa funcional hepática 13 C - aminopirina; 13 C - galactosa

24 Gracias por vuestra atención!

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