ANÁLISIS CUANTITATIVOS
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- Hugo Campos Montes
- hace 5 años
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1 ANÁLISIS CUANTITATIVOS
2 ANÁLISIS CUALITATIVO vs. CUANTITATIVO 1. CUALITATIVO - qué está presente? Cromatografía - compare t R 's Espectroscopía - MS, IR, UV 2. CUANTITATIVO - Cuánto está presente? Altura de pico Área de pico
3 ANÁLISIS CUALITATIVO Teofilina Teobromina 1. Estándar Cafeína "X" 2. Desconocido t R(teofilina) = t R( X ), entonces, se sugiere que X es teofilina. Para confirmación positiva, se debe emplear LC-MS
4
5 EXACTITUD-META ANALÍTICA Error absoluto: Diferencia entre valor medido y el valor verdadero. Error relativo (%) : (Error / Valor Verdadero) x 100 = % Error Ejemplo: Peso verdadero 50.0 g Peso medido 48.0 g Error absoluto 2.0 g % Error ( 2 / 50 ) x 100 = 4 %
6 PRECISIÓN 1. Mide reproducibilidad 2. Depende de la técnica y el técnico
7
8 MEDIDA DE LA PRECISIÓN: DESVIACIÓN ESTÁNDAR S.D.= σ = ( x x) n 1 Desviación estándar relativa = RSD = S.D. x Analista X Analista Y Estadística 10.6 Estadística 9.0 n = n = X = X = s = s = 0.48 RSD = 15.8% RSD = 4.8%
9 COMPONENTES DE EXACTITUD CALIBRACIÓN + PRECISIÓN = EXACTITUD 1. Esencial calibración con estándares 2. Precisión (reproducibilidad) necesaria para un procedimiento analítico exacto
10 PROCESO CUANTITATIVO 1. Muestreo 4. Integración 2. Preparación de la muestra 5. Cálculos 3. Cromatografía
11 moler disolver filtrar concentrar extraer diluir derivatizar
12 MUESTREO 1. Objetivo tomar una pequeña muestra representativa de una población grande 2. Problemas Contaminación La muestra no es representativa
13 HGR/
14 HGR/
15 PREPARACIÓN DE MUESTRA 1. Se parte de la definición de un problema analítico 2. Establecimiento de un protocolo de trabajo 3. Muestreo 4. Se lleva a cabo el protocolo con muestras reales (interferencias) 5. Problemas Pérdida de muestra Contaminación
16 CONVERSIÓN DIGITAL ALTURA DE PICO B C D A h h h
17 INTEGRACIÓN ÁREA DE PICO Area Más difícil que medir altura de pico, pero está menos influenciado por cambios en la temperatura de la columna o el flujo.
18 INTEGRADOR DIGITAL ELECTRÓNICO DETECTOR A / D CONVERTIDOR MICROPROCESADOR IMPRESORA sjhd kahd kjhd kjhd kjhd kjhsd kjhsd kjhs kjhs dkjhs dkjhs dkjhs dkjhs dkjhs dkjhs dkjhs dkjhs aljd lkjsd lkjsd lkjsd lkjs dljad ljadlj sljd aljd lkjsd iou fijgf oujfjd iuzdshda, adh fiehkjhd audddehfjsiu dsj.jfldu oejalkjd lkjs dlkj djs REGISTRADOR CINTA
19 SISTEMAS DE DATOS INTEGRADOR. Fácil de usar. Precio moderado COMPUTADORA. Flexible/poderosa. Más caras
20 CÁLCULOS: NORMALIZACIÓN DE ÁREA SIMPLE Área = 150 B A 300 C Cálculos wgt %A = Area A Total Area 100 = = 14.3% 2. Procedimiento usualmente no válido Asume que todos los picos responden igual Asume que la suma de áreas es el 100% de la muestra
21 CÁLCULOS: FACTOR DE RESPUESTA Peso = 10 µg 10 µg 10 µg Área = Los factores de respuesta difieren
22 CÁLCULOS DEL FACTOR DE RESPUESTA
23 CÁLCULOS: NORMALIZACIÓN CON CORRECCIÓN DE ÁREA Area RF Corrected Area A B C wgt %A = (10/30) x 100 = 33.3%
24 CÁLCULOS: ESTÁNDAR EXTERNO Área Desconocido Peso (µg) 1. Desarrolla una curva de calibración con estándares, y compara con el desconocido 2. Requiere de una inyección reproducible 3. Es más empleado en LC que en GC
25 SELECCIÓN DEL ESTÁNDAR INTERNO Muestra sola Muestra + ISTD Requisitos: 1. Estándar puro 2 Picos bien resueltos 3. Nunca presente en la muestra 4. En el mismo nivel de concentración
26 EI = EST. INTERNO A = ANALITO CÁLCULOS: ESTÁNDAR INTERNO (1) Área A / Área IS Muestra 3 Muestra 2 Muestra 1 Peso A / Peso IS 1. Prepare e inyecte muestras de estándar interno y del analito de interés. 2. Prepare una curva de calibración de los datos cromatográficos, graficando la relación de áreas contra la relación de pesos de analito y estándar interno.
27 CÁLCULOS: ESTÁNDAR INTERNO (2) Área A / Área IS Desconocido X Peso A / Peso IS 1. Añada con precisión el IS a la muestra desconocida 2. Cromatografíe la mezcla 3. Calcule la relación de áreas 4. Determine la relación de pesos de la curva de calibración 5. Encuentre el peso del analito
28 EJEMPLO
29 Limites de detección y cuantificación Instrumental. Pesticidas Organoclorados. A Organoclorado/ A EI BHC 1.6,...,12ppm p,p-ddt 1.08,...,8.1ppm Mirex 2.28,...,17.1ppm Metoxicloro 1.16,...,8ppm Endrin 2.64,...,19.8ppm Aldrin 2.08,...,15.6ppm Endosulfan 4.48,...,33.6ppm Dieldrin 3.24,..., 24.3ppm Organoclorado/ EI SCAN A Organoclorado/ A EI 3.4 Endosulfan 4.48,...,33.6ppm 3.2 BHC 1.6,...,12ppm 3.0 Mirex 2.28,...,17.1ppm 2.8 Metoxicloro 1.16,...,8.7ppm 2.6 p,p-ddt 1.08,...,8.1ppm 2.4 Endrin 2.64,...,19.8ppm 2.2 Dieldrin 3.24,...,24.3ppm 2.0 Aldrin 2.08,...,15.6ppm 1.8 Heptacloro 2.08,...,15.6ppm Organoclorado/ EI SIM
30 Limites de detección y cuantificación Instrumental. Pesticidas Organofosforados A organofosforado/ A EI Etion 2.08,...,15.6ppm Malation2.24,...,16.8ppm Co-Ral 3.3,...,9.9ppm Paration 2.24,...,16.8ppm Disulfoton 2.08,...,15.6ppm DDVP2.6,...,19.8ppm Zolone 1.64,...,12.3ppm Organofosforado/ EI SCAN Area Organofosforado/ A EI Organofosforado/EI SIM Malation ppm DDVP ppm Disulfoton ppm Metil paration ppm Paration ppm Etion ppm Zolone ppm Co-Ral ppm
31 Porcentaje de recobro (%) de los pesticidas. Pesticida SCAN SIM DDVP NR Metomilo Carbofuran BHC Disulfoton Mparation NR Heptacloro NR Carbarilo Aldrin Malation Paration Endosulfan Dieldrin Endrin Etion DDT Metoxicloro Zolone NR Mirex NR Co-Ral
32 Determinación e identificación de pesticidas en fresas. Procedencia de la muestras Pesticidas identificados Concentración SCAN(ppm) Concentración SIM (ppm) Lote 1; Mercado Xochimilco, origen: desconocido Lote 2; Mercado Xochimilco Origen, desconocido Lote 3; Mercado Xochimilco, origen: desconocido Lote 4; Mercado Xochimilco, origen: desconocido. - o,p-diclorobenzofenona (dicofol). - Captan. - Triclosan - Endosulfan - Etion - DDT -Metoxicloro -Captan - Malation -Zolone -Malation -DDT -Zolone -Metoxicloro -Etion D NC NC NC
33 Procedencia de las muestras Pesticidas identificados Concentración SCAN(ppb) Concentración SIM (ppb) Lote 5; Mercado Xochimilco, origen: - Dimetoato Desconocido. Lote 6; Central de Abastos, origen: -Etion Irapuato Gto. Lote 7; Central de abastos, origen, -Etion Edo. De México Lote 8; Central de abastos, origen, Zitacuaro Michoacán - Etion - DDD (DDT) Lote 9; Central de abastos, -Etion origen, Baja California Lote 10; Central de abastos, origen, Baja California - Etion - DDD (DDT) Lote 11; Central de abastos, origen, Zamora, Michoacán -Carbofuran -Metil Paration -Malation -Paration -p,p- Diclorobenzofenona (Dicofol). -Dieldrin -Endrin -Endosulfan y Endosulfan sulfato -DDD (DDT) NC NC NC Etion - Rospan Lote 12; Central de abastos, origen, Camalú Baja California -Etion -DDD (DDT) Lote 13; Central de abastos, origen, Irapuato -Etion -DDD (DDT) Lote 14; Central de abastos, -Etion 0.070
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